HALOGENERTE ORGANISKE FORBINDELSER PIGGVAR.

Transkript

1 "Bruk av kjøevann ti oppdrett av piggvar" HALOGENERTE ORGANISKE FORBINDELSER PIGGVAR. FRA FORSØKSKAR MED SJØVANN KLORERT VED HJELP AV ELEKTROLYSE OG DEKLORERT MED NATRIUMBISULFITT RAPPORT Nr. 3 Anayse av piggvar fra Statoi, s gasstermina på Kårstø av Karsten H. Pamork og Svein Wihemsen Fiskeridirektoratets Havforskningsinstitutt Nordnesparken 2, N-5024 Bergen November 1988

2 Begrenset di stri bus j on Dato:. 28. November 1988 Rapport/Notat Nr. BKO 88 O 5 HRUFORSKHIHGSIHSTITUTTET Nordnesparken 2, Postboks 1870, Nordnes, N-5024 Bergen. Teefon: Rapportens titte: HALOGENERTE ORGAN SKE FORB NDELSER PIGGVAR FRA FORSØK MED SJØVANN KLORERT VED HJELP AV ELEKTROL VSE OG F orfahere/saksbehandere K. H. P a mork og S. Yihe ms en DEKLORERT MED NATRI UMBISULFITT. RAPPORT Nr. 3 Avdeing: Bioogisk og Kjemisk Oseanografi Prosjekt Nr.: BKO 8805 under Oppdragsgiver ref.: /P Avdeing for Akvakutur Ansvarig: Karsten H. P a mork Sammendrag: Prøver samet inn 15 oktober 1988 er anaysert med hensyn p8 haogenerte forbindeser. Det er foretatt anayser av korert sjøvann og isoert ca. 20 haogenerte forbindeser. Etter dekoreri ng med natri umbisufitt har det g8tt piggvar i forsøks- og kontro kar. Prøver av ever og muske er anaysert ved hje p av gasskromatografi og gasskromatografi /massespektrometri. Resutatet av denne undersøkesen er at det er isoert tre komponenter, men bare en av disse er i s8 stor konsentrasjon at det er muig 8 identifisere den. dette er gjort, det er bromoform, CHBr3. M8i ng av akkumuering og e i mi ne ring av denne forbindesen i fisk m8 være neste steg i prosjektet. Giftigheten av stoffet m8 ogs8 fasts8es. Forsøket startet 18. mai Stikkord: Akvakutur, Piggvar, Kjøevann Kjemisk anayse av organohaogener Sendt ti: Forskningssjef Grim Berge, Bibioteket Forskningssjef Snorre Tiseth, T. Keppe Direktør O. Nakken,. Rønnestad,. Huse.

3 1 Innedning. Under et møte i apri d.å. be det agt paner for videre arbeid i prosjektet: "Bruk av kjøevann ti oppdrett av piggvar" ved Gassterminaen på Kårstø. Første prøveinnsaming av sjøvann etter eektroyse be foretatt 18. og 19. mai. Den 15. oktober 1988 be det tatt prøver av muske og ever fra fisk i kontrokar og forsøkskar på Kårstø. Disse prøvene skue også benyttes ti organoeptisk anayse (smaksprøve). Denne rapporten beskriver prøvetagning, anayse og forsøk på identifisering av haogenerte organiske forbindeser i forsøksfisken. Prøvetagning. Det be tatt fem ever og fem muskeprøver av piggvar fra kontrokar (K 1 5 ) og forsøkskar (F 1. 5), Denne fisken skue også benyttes ti organoeptisk anayse på Sentraaboratoriet. Prøve opparbeidese. Leverprøvene (ca. 2.5 gr.) be homogenisert med 20 m. pentan innehodende 1 O % dikormetan v.h.a. en Utra Turrax. Etter at de faste partikene var sunket ti bunns, be 8 m. pentan-ekstrakt vasket med 2 m. konsentrert svovesyre for å fjerne fettet. Pentanfasen be inndampet og øst i 100 ~1. hexan. Muskeprøvene (ca.1 O g.) be tisatt 20 g. vannfri natriumsufat og 50 m. pentan innehodende 1 O % dikormetan.det hee be homogenisert v.h.a. en hurtigmixer og behandet videre som beskrevet for everprøvene. "Bruk av kjøevann ti oppdrett av piggvar"

4 2 Kjemiske anayser. Prøvene be anaysert m.h.p. de haogenerte forbindeser som be påvist i vann tappet fra eektroyseanegget som beskrevet i Rapport nr 2 (se tab. ). Tabe. Forsag ti identifisering av forbindeser (etter bibioteksøk). korert sjøvann Topp nr. Navn Probabiity Moekyvekt Bromoform 4 1, 1-dikorocykopentan 6 1-bromo-2-korocykopentan 7 1-bromo-2-korocykopentan 8 1-bromo-2-korocykopentan 9 2,3-dikoro-2-metypropana 1 O 2,3-dikoro-2-metypropana 11 1-bromo-2-korocykopentan bromo-2-korocykopentan bromo-2-korocykopentan Prøvene be anaysert på gasskromatograf utstyrt med "eectron capture" detektor. Det be også foretatt anayse v.h.a. gasskromatograf/masses pek trometer ved negativ kjemisk ionisasjon (negativ i o ne dekteksjon). nstrumentbetingesene er beskrevet i tabe 11. Tabe 11. nstrumentbetingeser under GC/MS anaysen. Computer Massespektrometer Gasskromatograf Bære gass Koonne Ovn temp. prog. Ionisasjon 1 Sean range Ionisasjon 2 Sean range :HP-1 OOOE :HP-5987A :HP-5880A :Heium, 40 cm/sek. :Fus ed siica, SE-54, CB, 25 m x 0,32 mm, O, 17 11m :5 min. 40 oc - 6 C/min oc :Eiectron mpact, 70 ev : am u. :Chemica onisation, metan som reaksjonsgass. : amu. "Bruk av kjøevann ti oppdrett av piggvar"

5 a b =:==:::::=:::::::=-::=======~=========::::::::;:==:::::::.========--====:; Figur 1. ECO kromatogram av a) forsøksfisk og b) kontrofisk. a b Fie >SW60i i emu, KARSTO PIGGVAR F-3(1 Fie >SW601 KARSTO PIGGVAR F-3 (13) LE 8pk Ab i ~ ~ OJ ~ 400 ""' I. _.j J... ull o,-44-, IL ' ' ' di Fie >SW emu.8romoform 1 MG/ ML Fie >SW602 BROMOFORM 1 MG/ ML 8pk Ab ~.'.'.J ' 20000,11,/ o o -rr~ ~ '-- -- se an m1n. : i, 282 : ( 280 Sean 151 i 2.34 min / 280 i '! _j Figur 2. Kromatogram og massespektre, a) forsøksfisk og b) bromoform.

6 Tabe I. nstrumentbetingeser under GC anaysen. 4 Gasskromatograf EC-detektor Koonne Bæregass Ovn temp. prog. Injeksjon HP5880A Ni-63 Fused siica, SE-54, CB, 50 m x 0,32 mm, 017 m Nitrogen, 25 cm/sek. 5 min. 50 oc - 6 C/min C. Spitess, 2 I. RESULTATER. Kromatogrammene av forsøksfisk viser tre topper som kontrofisken ikke har (Fig. 1). Massespektra av disse toppene (negativ ion deteksjon) viser at toppene 1 og 2 innehoder brom. Topp 2 er angt den største toppen og den er sannsynigvis bromform, (CHBrs, kokepkt. 150 C, moekyvekt: 250). Identiteten av denne toppen be verifisert ved å anaysere ren bromoform under samme betingeser. Retensjonstidene og massespektra (eectron impact) viser god overensstemmese, så identiteten av toppen er ganske sikker, (Fig.2). De to andre Tabe IV, Konsentrasjon, i j.lg/g fett, av bromoform ever av piggvar. muske og Prøve nr. F -1 F-2 F-3 F-4 F-5 K- 1 K-2 K-3 K-4 K-5 Lever muske "Bruk av kjøevann ti oppdrett av piggvar"

7 toppene er tistede i så små mengder at identifisering ikke er muig. Konsentrasjonen av bromoform i fiskeprøvene er gitt i tabe IV. Anaysene ved hjep av GC/MS med negativ kjemisk ionisasjon (C) av ekstrakt av korert sjøvann ved naturig ph viste ca 20 komponenter. Dette kan da ikke være komponenter som akkumueres i vesentig grad i fiskemuske eer ever. Det som må gjøres nå, er å se hvor ang tid det tar før bromoform bir vasket ut eer nedbrudt i fiskemuske og i ever. 5