QUANTA Lite TM PR For In Vitro-diagnostikk CLIA-klassifisering: Høy kompleksitet

Transkript

1 QUANTA Lite TM PR For In Vitro-diagnostikk CLIA-klassifisering: Høy kompleksitet Anvendelsesområde QUANTA Lite TM PR-3 er en enzymkoblet immunsorbent analyse (ELISA) for semikvantitativ påvisning av IgG-antistoffer mot serine protease 3 (PR-3) i humant serum. Denne testen skal brukes sammen med andre kliniske resultater som støtte i fastsettelsen av bestemte autoimmune vaskulitter slik som Wegeners granulomatose. Sammendrag og forklaring av testen Anti-nøytrofil cytoplasmisk antistoff (ANCA) testen har revolusjonert diagnosen og behandlingen av forskjellige autoimmune formidlede vaskulitter. 1-4 panca og canca autoantistoffene har vist seg å være nyttige klinisk og vitenskapelig interessante for påvisning av sykdommer slik som Wegeners granulomatose (WG) og crescentic glomerulonefritt. Det er identifisert minst seks ANCA-antigener, men mange er fremdeles ikke identifisert. 1,5 Flesteparten av disse antigenene synes å være enzymer som holder sted i de primære nøytrofilgranulene. Disse enzymene inkluderer myeloperoksidase (MPO), serin protease 3 (PR-3), elastase, laktoferrin, katespin G og kationisk protein 57 (CAP-57). Tidligere oversiktsartikler har hevdet at 80-90% av canca-prøvene reagerer med PR-3. 1,3 Gjeldende prosent er avhengig av pasientpopulasjonen som undersøkes og kvaliteten på ELISAprosedyren som brukes. Mange ELISA-metoder ble funnet å inneholde kontaminerende stoff i det rensede antigenet som brukes til å dekke faststoffasen og som dermed ga feilaktige positive prøver. Våre egne studier med veldig rene og spesifikke ELISA-metoder ligger innenfor området 50-60%. Flesteparten av ekspertene innenfor området autoimmune vaskulitter anbefaler fremdeles at IFA blir brukt for innledende screening. Oppfølgingstesting med spesifikt MPO og PR-3 ELISA-analyser av alle IFA positive prøver kan gi tilleggsinformasjon. I et nylig studium med 277 pasienter med WG og 1657 kontrollpasienter, ble spesifisiteten til anti-pr-3 antistoffer for WG fastslått til å være 98%. PR-3 var funnet hos 93% av pasientene med generell aktiv sykdom, hos 60% av pasientene med regionalt aktiv sykdom og 40% hos pasienter hvor sykdommen var på tilbakegang. Det har blitt vist at autoantistoffer endrer parallell sykdomsaktivitet og hjelper til å skille tilbakefall av WG fra andre sykdommer som skjer i mellomtiden (som for eksempel infeksjoner). Disse sykdommene er alltid en fare for de som er under immunosuppressiv terapi. 6 Anti-MPO antistoffer er meget spesifikke for idiopatisk og vaskulitt assosiert crescentic glomerulonefritt og også for tradisjonell polyartrittis nodosa, Churg-Strauss syndromet og polyangitt overlapper syndromet uten renal innblanding Med hensyn til sensitivitet, ble verken MPO eller PR-3 antistoffer funnet i 77 til 100% av pasientene med idiopatisk og vaskulitt assosiert crescentic glomerulonefritt. Hos WG-pasienter ble anti-mpo antistoffer påvist bare en sjelden gang og generelt hos pasienter som var negative for PR-3 antistoffer. 7 Nivåer av MPOantistoffer er signifikant høyere under aktive faser av sykdommen sammenliknet med tilbakegangsfasene. 7 Derfor synes disse autoantistoffene å være markører for sykdomsaktivitet på samme måte som PR-3 antistoffer er det. MPO og PR-3 ELISA-metoder kan ikke erstatte standard IFA ved bruk av nøytrofil for påvisning av ANCA, da det er for mange andre spesifisiteter som er viktige. Dette er spesielt sant i tilfeller med atypisk eller inflammatorisk tarmsykdom (IBD) ANCA funnet hos pasienter med ulcerøs - 1 -

2 kolitt og skleroserende kolangitt. 4 MPO og PR-3 spesifikke ELISA-metoder kan gi et viktig bekreftende resultat for to av de viktigste antigenene som er identifisert. ELISA er også nyttig for tolkningen av vanskelige prøver med IFA slik som de som utviser flere antistoffer samtidig eller de med høy bakgrunnsfluorescens. ELISA-teknikken som er brukt i denne testen er sensitiv, spesifikk og objektiv. Den kan lett brukes til å teste både store og små antall prøver. Prosedyreprinsipper Renset PR-3-antigen er bundet til brønnene til en mikrotiterplate av polystyren under betingelsene som vil konservere antigenet i naturlig tilstand. Forhåndsfortynnede kontroller og fortynnet pasientserum blandes i separate brønner slik at tilstedeværende PR-3-antistoff bindes til det immobiliserte antigenet. Ubundet prøve vaskes vekk og et enzym-merket anti-human IgGkonjugat tilsettes hver brønn. En andre inkubasjon gjør det mulig for det enzym-merkede antihumane IgG-antistoffet å binde seg til pasientens antistoff som har festet seg på mikrobrønnene. Etter å ha vasket bort enzym-merket anti-humant IgG-antistoff som ikke har festet seg, måles gjenværende enzymaktivtet ved å tilsette et substrat og fargeutviklingen måles. Analysen kan avleses spektrofotometrisk ved å måle og sammenlikne fargeintensiteten som utvikles i pasientbrønnene med fargen i kontrollbrønnene. Reagenser 1. Mikrotiter ELISA-plate av polystyren dekket med renset PR-3-antigen (12-1 x 8 brønner), med holder i foliepakning inneholdende tørkemidler 2. ELISA negativ kontroll, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum uten humane antistoffer mot PR-3, forhåndsfortynnet, 1,2mL 3. PR-3 ELISA lav positiv, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum med ikke-humane antistoff mot PR-3, forhåndsfortynnet, 1,2 ml 4. PR-3 ELISA høy positiv, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum med antistoff mot PR-3, forhåndsfortynnet, 1,2 ml 5. HRP prøvediluent prøve, 1 ampulle rosafarget som inneholder fosfatbufret saltvann, Tween 20, proteinstabilisatorer og konserveringsmiddel, 50 ml 6. HRP vaskekonsentrat, 1 ampulle med 40x konsentrat rødfarget som inneholder fosfatbufret saltvann og Tween 20, 25 ml Se metodeavsnittet for veiledning om fortynning. 7. HRP IgG-konjugat, (geit), anti-humant IgG, 1 ampulle blåfarget som inneholder buffer, proteinstabilisatorer og konserveringsmiddel, 10 ml 8. TMB-kromogen, 1 ampulle som inneholder stabilisatorer, 10 ml 9. HRP stoppløsning, 0,344M svovelsyre, 1 ampulle fargeløs, 10 ml Advarsler 1. ADVARSEL: Dette produktet inneholder et kjemikalie (0,02% kloramfenikol) i prøvediluenten, kontrollene og konjugat antatt som kreftfremkallende i staten California. 2. Alt materiale fra menneskekilder brukt i preparatet til kontroller for dette produktet har blitt testet og funnet negativ for antistoff mot HIV, HBsAg og HCV av metoder klarert av det amerikanske helsetilsynet (FDA). Imidlertid kan ingen testmetode gi fullstendig sikkerhet om at HIV, HBV, HCV eller andre smittsomme agens er fraværende. Derfor skal PR-3 ELISA lav positiv, PR-3 ELISA høy positiv og ELISA negativ kontroll behandles på samme måte som potensielt smittefarlig materiale Natriumazid brukes som konserveringsmiddel. Natriumazid er en gift og kan være giftig ved svelging eller ved opptak gjennom huden eller via øynene. Natriumazid kan reagere med bly- eller kobberrør og danne potensielt eksplosive metallazider. Bruk rikelig med vann i vaskene, hvis de brukes for avfallshåndtering av reagenser, for å forhindre oppsamling av azider

3 4. HRP-konjugatet inneholder et fortynnet giftig/korrosivt kjemikalie som kan være giftig ved svelging av store mengder. Unngå hud- og øyenkontakt for å forhindre mulig kjemisk forbrenning. 5. TMB-kromogenet inneholder et kjemikalie som kan være skadelig ved inhalering, svelging eller opptak gjennom huden. Unngå inhalering, svelging eller hud- og øyenkontakt for å forhindre skader. 6. HRP-stoppløsningen inneholder en fortynnet svovelsyreoppløsning. Unngå eksponering av baser, metaller eller andre forbindelser som kan reagere med syrer. Svovelsyre er giftig og korrosiv og kan være giftig ved svelging. Unngå hud- og øyenkontakt for å forhindre mulig kjemisk forbrenning. 7. Bruk egnet personlig verneutstyr når du arbeider med reagensene som er levert. 8. Dersom du søler reagenser skal disse straks vaskes bort. Du skal være oppmerksom på alle kommunale, statlige og lokale miljøbestemmelser ved avfallsbehandling. Forholdsregler 1. Dette produktet brukes for in vitro-diagnostikk. 2. Utbytting av komponenter andre enn de som leveres med dette systemet kan føre til inkonsistente resultater. 3. Ufullstendig eller ineffektiv vasking og utilstrekkelig væskefjerning fra ELISAbrønnremsene vil forårsake dårlig presisjon og/eller høy bakgrunn. 4. Tilpassing av denne analysen for bruk sammen med, helt eller delvis, automatiske prøveprosessorer eller andre væskebehandlingsapparater, kan gi avvikende testresultater i forhold til de som utføres ved hjelp av manuell prosedyre. Det er hvert enkelt laboratoriums ansvar å stadfeste at deres automatiske prosedyre gir testresultater innenfor akseptable grenser. 5. En rekke faktorer påvirker analyseprestasjonene. Herunder inkluderes starttemperaturen til reagensene, lufttemperaturen, pipetteteknikkens nøyaktighet og reproduserbarhet, hvor grundig det er vasket og fjernet væske fra brønnen til ELISA-remsen, fotometeret som er brukt til å måle resultatene og inkubasjonstidenes varighet under analysen. Det er nødvendig med konsistens konsistens for å oppnå nøyaktige og reproduserbare resultater. 6. Det anbefales at man holder seg strengt innenfor rammene til protokollen. 7. Ufullstendig forsegling av glidelåsen til posen som inneholder mikrobrønnremsene og tørkemidlene vil resultere i degradasjon av antigen og dårlig presisjon. 8. Uakseptabelt lave sbsorbanser kan observeres etter to eller flere bruk fra én enkel flaske med HRP-konjugat over en tidsperiode. Det er viktig å følge alle anbefalte behandlingsprosedyrer for HRP-konjugatet for å forhindre at dette oppstår. 9. Kjemisk kontaminasjon av HRP-konjugatet kan forårsakes av ufullstendig rengjøring eller skylling av utstyr eller instrumenter. Avfall fra vanlige laboratoriekjemikalier slik som formalin, blekemiddel, etanol eller vaskemiddel vil forårsake degradasjon av HRPkonjugatet over tid. Skyll alt utstyret og alle instrumentene grundig etter bruk av kjemiske rengjørings- og desinfeksjonsmidler. Oppbevaringsbetingelser 1. Lagre alle reagensene i kitet ved 2-8 C. Ikke frys. Reagensene er stabile helt til de går ut på dato hvis de oppbevares og behandles på foreskriftsmessig vis. 2. Ubrukte antigen-dekkede mikrobrønnremser skal forsvarlig forsegles på ny i folieposen som inneholder tørkemidlene og oppbevares ved 2-8 C. 3. Fortynnet vaskebuffer er stabil i én uke ved 2-8 C

4 Innhenting av prøver Denne prosedyren skal utføres med en serumprøve. Tilsetting av azid eller andre konserveringsmidler til testprøvene kan påvirke resultatene. Mikrobielt kontaminerte, varmebehandlede prøver eller prøver som inneholder synlige partikler skal ikke brukes. Sterkt hemolysert eller lipemisk serum eller prøver skal unngås. Etter innhenting skal serumet skilles fra blodklumpen. CLSI (NCCLS) dokument H18-A3 anbefaler følgende oppbevaringsbetingelser for prøver: 1) Ikke oppbevar prøver i romtemperatur lenger enn i 8 timer. 2) Hvis analysen ikke fullføres innen 8 timer, kjøl prøven ned til 2-8 C. 3) Hvis analysen ikke fullføres innen 48 timer, eller ved forsendelse av prøven, frys den ned til -20 C eller lavere. Nedfryste prøver må blandes godt etter tining og før testing. Prosedyre Leverte materialer 1 PR-3 ELISA-mikrotiterplate (12-1 x 8 brønner), med holder 1 1,2mL forhåndsfortynnet ELISA negativ kontroll 1 1,2mL forhåndsfortynnet PR-3 ELISA lav positiv 1 1,2mL forhåndsfortynnet PR-3 ELISA høy positiv 1 50mL HRP-prøvediluent 1 25mL HRP-vaskekonsentrat, 40x konsentrat 1 10mL HRP IgG-konjugat, (geit), anti-humant IgG 1 10mL TMB-kromogen 1 10mL HRP-stoppløsning, 0,334M svovelsyre Påkrevd tilleggsutstyr (ikke levert) Mikropipetter for å forsyne 5, 100, og 500µL Engangs mikropipettetips Testrør for pasientprøvefortynninger, 4mL volum Destillert eller deionisert vann 1L beholder for fortynnet HRP-vaskekonsentrat Mikrotiterplateleser som er i stand til å måle OD ved 450nm (og 620nm for dobbel bølgelengdeavlesninger) Metode Før du starter 1. Bring alle reagenser og prøver opp til romtemperatur (20-26 o C) og bland godt. 2. Fortynn HRP-vaskekonsentratet ut (1:40) ved å blande innholdet av HRPvaskekonsentratflasken med 975mL destillert eller deionisert vann. Hvis hele platen ikke skal kjøres i denne perioden, kan du forberede en mindre mengde ved å blande 2,0mL av konsentratet med 78mL destillert eller deionisert vann for hver 16 brønner som skal brukes. Den fortynnede bufferen er stabil i én uke ved 2-8 o C. 3. Gjør klar en oppløsning (1:101) for hver pasientprøve ved å blande 5µL fra prøven med 500µL av HRP-prøvediluent. Fortynnede prøver må brukes innen 8 timer etter klargjøring. IKKE FORTYNN PR-3 ELISA lav positiv, PR-3 ELISA høy positiv og ELISA negativ kontroll. 4. Bestemmelse av forekomst eller fravær av PR-3 ved hjelp av arbitrære enheter krever to brønner for hver av de tre kontrollene og én eller to brønner for hver pasientprøve. Det anbefales at prøvene kjøres i duplikat

5 Analyseprosedyre 1. ALLE REAGENSER MÅ BRINGES TIL ROMTEMPERATUR (20-26 C) FØR DU BEGYNNER ANALYSEN. Plasser påkrevd antall av mikrobrønner/remser i holderen. Legg straks tilbake remser som du ikke skal bruke tilbake i posen med tørkemidler og forsegl forsvarlig for å minimalisere eksponering for vanndamp. 2. Tilsett 100µL av forhåndsfortynnet PR-3 ELISA lav positiv, PR-3 ELISA høy positiv, ELISA negativ kontroll og de fortynnede pasientprøvene til brønnene. Dekk brønnene og sørg for 30 minutters inkubasjon ved romtemperatur på en vannrett overflate. Inkubasjonstiden begynner etter at siste prøve tilsettes. 3. Vasketrinn: Aspirer innholdet av hver brønn grundig. Tilsett µL av fortynnet HRP-vaskebuffer til alle brønnene og deretter aspirer. Gjenta denne sekvensen to ganger til (totalt tre vasker). Inverter platen og bank på absorberende materiale for å fjerne resterende væske etter siste vask. Det er viktig å tømme hver brønn fullstendig etter hvert vasketrinn. Du opprettholder den samme sekvensen for aspirasjon som den som ble brukt for prøvetilsetning. 4. Tilsett 100μL av HRP-IgG-konjugatet til hver brønn. Konjugatet skal fjernes fra flaskene under standard aseptiske forhold og gode laboratorieteknikker. Bare fjern den koblingsmengden fra flasken som er nødvendig for analysen. DU SKAL ALDRI RETURNERE UBRUKT KONJUGAT TIL FLASKEN FOR Å UNNGÅ POTENSIELL MIKROBIELL OG/ELLER KJEMISK KONTAMINERING. Som i trinn 2, sørg for 30 minutters inkubasjon av brønnene. 5. Vasketrinn: Gjenta trinn Tilsett 100µL av TMB-kromogenet til hver brønn og sørg for 30 minutters inkubasjon i mørke ved romtemperatur. 7. Tilsett 100µL av HRP-stoppløsningen til hver brønn. Du opprettholder den samme sekvensen og timing ved tilsetting av HRP-stoppløsning som den som ble brukt for TMBkromogenet. Bank forsiktig på platen med en finger for å blande brønnene grundig. 8. Avles absorbans (OD) fra hver brønn ved 450nm innen én time etter å ha stoppet reaksjonen. Hvis du ønsker bikromatiske målinger, kan du bruke 620nm som referansebølgelengde. Kvalitetskontroll 1. PR-3 ELISA lav positiv, PR-3 ELISA høy positiv og ELISA negativ kontroll skal kjøres med hvert oppsetti for å sikre at alle reagenser og prosedyrer fungerer som de skal. 2. Merk at da PR-3 ELISA lav positiv, PR-3 ELISA høy positiv og ELISA negativ kontroll er forhåndsfortynnet, kontrollerer de ikke for prosedyremessige metoder tilknyttet fortynning av prøver. 3. Tilleggskontroller kan utføres i henhold til veiledninger eller krav fra lokale, statlige og/eller kommunale myndigheter eller akkrediterte organisasjoner. Egnet tilleggskontrollsera kan forberedes ved å aliquotere innsamlede humane serumprøver og oppbevaring ved < -20 C. 4. Alle kriteriene oppgitt nedenfor må oppfylles for å betrakte testresultatene som gyldige. Hvis noen av disse kravene ikke oppfylles, skal testen betraktes som ugyldig og analysen må gjentas. a. Absorbansen av forhåndsfortynnet PR-3 ELISA høy positiv må være høyere enn absorbansen til forhåndsfortynnet PR-3 ELISA lav positiv, og denne må være høyere enn absorbansen til forhåndsfortynnet ELISA negativ kontroll. b. Forhåndsfortynnet PR-3 ELISA høy positiv må ha en høyere absorbans enn 1,0, mens absorbansen til forhåndsfortynnet ELISA negativ kontroll ikke kan være over 0,

6 c. Absorbansen til PR-3 ELISA lav positiv må være mer enn doble av ELISA negativ kontroll eller over 0,25. d. ELISA negativ kontroll og PR-3 ELISA høy positiv er ment for å kontrollere for substansiell reagensfeiling. PR-3 ELISA høy positiv vil ikke sikre presisjon ved analysens cut-off. e. Bruker henvises til CLSI (NCCLS) dokument C24-A3 for videre veiledning for egnet kvalitetskontrollpraksis. Beregning av resultater OD-middelverdien for hvert sett av duplikater bestemmes først. Reaksjonen for hver prøve kan deretter beregnes ved å dele prøvens OD-middelverdi med OD-middelverdien for PR-3 ELISA lav positiv. Resultatet multipliseres med antall tildelte PR-3 ELISA lav positiv enheter som står oppgitt på etiketten. Prøve OD Prøveresultat = x PR-3 ELISA lav positiv (enheter) PR-3 ELISA lav positiv OD (enheter) Reaksjon er relatert til antistoffmengde fremstilt på ikke-lineært vis. Selv om økninger og minskinger av pasientens antistoffkonsentrasjoner vil gjenspeiles i form av tilsvarende stigning eller fall i reaksjon, er endringen ikke proporsjonal (dvs. en fordobling av antistoffkonsentrasjon vil ikke fordoble reaksjonen). Hvis det påkreves en nøyaktigere kvantifisering av pasientens antistoff, skal serielle fortynninger av pasientprøven kjøres og den siste fortynningen som måles positiv i analysen, skal rapporteres som pasientens antistofftiter. Tolkning av resultater ELISA-analysen er meget følsom for teknikk og er i stand til å påvise selv små forskjeller i pasientpopulasjonen. Verdiene som vises nedenfor er bare foreslåtte verdier. Hvert laboratorium bør etablere eget referanseområde basert på egne teknikker, kontroller, utstyr og pasientpopulasjoner i henhold til deres etablerte prosedyrer. Prøven kan da klassifiseres som negativ, svakt positiv, moderat positiv eller sterkt positiv i henhold til tabellen nedenfor. Enheter Negative <20 Svakt positiv Moderat positiv til Sterkt positiv >30 1. Et positivt resultat indikerer forekomst av PR-3-antistoffer og antyder muligheten av bestemte autoimmune vaskulitter slik som Wegeners granulomatose. 2. Et negativt resultat indikerer ingen forekomst av PR-3-antistoff eller nivåer under analysens cut-off. 3. Det foreslås at resultatene som rapporteres av laboratoriet skal inneholde uttalelsen: Følgende resultater ble fremstilt med INOVA QUANTA Lite TM PR-3 ELISA. PR-3-verdier fremstilt med forskjellige fabrikanters analysemetoder kan ikke brukes om hverandre. Størrelsen av rapportert IgG-nivåer kan ikke korreleres til et endepunkttiter

7 Prosedyrebegrensninger 1. Forekomsten av immunkomplekser eller andre immunglobulinaggregater i pasientprøven kan forårsake et forhøyet nivå av ikke-spesifikk binding og produsere feilaktige positive analyseresultater. 2. Resultatene til denne analysen skal brukes sammen med kliniske resultater og andre serologiske tester, inkludert ANCA med indirekte immunfluorescens. 3. Resultatene til denne analysen er ikke et diagnostisk bevis av forekomst eller fravær av sykdom. Immunsuppressiv terapi skal ikke innledes basert bare på positive resultater. 4. Prestasjonsegenskapene til analysen har ikke blitt etablert for annet prøvemateriale enn serum. Forventede verdier Evnen til QUANTA Lite TM PR-3 ELISA til å påvise PR-3-antistoffer ble evaluert ved sammenlikning av en kommersielt-testen tilgjengelig. Resultatene av ELISA-testen ble bestemt i henhold til fabrikantens vedlagte veiledning. Normalområde 100 tilfeldige normalprøver ble kjørt. Alle var under grensen på 20 enheter cut-off for PR-3. Gjennomsnittlig at PR-3 resultater var 1,4 enheter med den høyeste reaktive prøven med en verdi på 4 enheter. PR-3-autoantistoffer i forskjellige sykdomsgrupper Gruppe Antall Antall positive (%) Normale (0) Ikke-ANCA nyresykdommer 66 3 (4,5) Wegeners (canca pos.) (100) Crescentic Glomerulonefritt 45 0 (0) (panca positive) Alle de 100 normalprøvene var negative og 43 canca positive Wegeners-pasiente pasientene var positive. Ingen av de 45 panca positive prøver ble oppdaget som PR-3 positive. Tre pasienter av totalt 66 fra former den «ikke-anca nyreskdomsgruppen» gruppe, som ble oppdaget som positive. Denne sistnevnte gruppen med 66 prøver inkluderte pasienter med anti-glomerulus basalmembran (GBM) sykdom, lupus glomerulonefritt, trombotisk mikroangiopati, IgA nefropati og immunkomplekssykdommer. Relativ sensitivitet og spesifisitet Prøver fra gruppene nevnt ovenfor med Wegners sykdom og crescentic glomerulonefritt, normalprøvene og de 66 prøvene i gruppen for ikke-anca sykdommer ble testet av både QUANTA Lite PR-3 IgG-settet og av en annen ELISA-referansetest som bruker polyvalent konjugat. Resultatene vises under. INOVA * Relativ sensitivitet 37,5% Referanse Relativ spesifisitet 99,3% Relativ effektivitet 82,5% * Flesteparten av disse prøvene var fra gruppen ikke-anca nyresykdommer

8 Presisjon og reproduserbarhet Presisjonen og reproduserbarheten til analysen ble målt ved å kjøre seks duplikater hver av en negative, svakt, sterkt og positiv prøve i seks separate analyser. Gjennomsnitts til den sterkt positive var 100,1 detsvakt positiv var 25 og det negative var 18,75. Standardavviket og variasjonskoeffisienten for hver prøve oppsummeres nedenfor. Negative Sterkt positiv Svakt positiv SD CV SD CV SD CV Samlet 0,81 4,3% 8,90 8,9% 0,80 3,2% Innen serien 0,60 3,2% 2,01 2,0% 0,83 3,3% Mellom serier 0,79 4,2% 9,40 9,4% 0,57 2,3% Referanser 1. Goeken JA: Antineutrophil cytoplasmic antibody - a useful serological marker for vasculitis. J Clin Immunol 11: , Specks U, et al.: Anticytoplasmic autoantibodies in the diagnosis and follow-up of Wegener s granulomatosis. May Clin Proc 64:28-36, van der Woude FJ, et al.: Autoantibodies against neutrophils and monocytes: tools for diagnosis and marker of disease activity in Wegener s granulomatosis. Lancet , Cohen-Tervaert JW, et al.: Association between active Wegener s granulomatosis and anticytoplasmic antibodies. Arch Intern Med 149: , Cambridge, et al,: Antineutrophil antibodies in inflammatory bowel disease: prevalence and diagnostic role. Gut 33: , Nolle B, et al.: Anticytoplasmic autoantibodies: their immunodiagnostic value in Wegener s granulomatosis. Ann Int Med 111:28-40, Cohen-Tervaert JW, et al.: Association of autoantibodies to myeloperoxidase with different forms of vasculitis. Arthritis and Rheumatism 33(8): , Cohen-Tervaert JW, et al.: Autoantibodies against myeloid lysosomal enzymes in crescentic glomerulonephritis. Kidney Int 37: , Falk RJ and Jenette JC: Anti neutrophil cytoplasmic autoantibodies with specificity for myeloperoxidase in patients with systemic vasculitis and idiopathic necrotizing and crescentic glomerulonephritis. N Engl J Med 318: , Cohen-Tervaert JW, et al.: Detection of autoantibodies against myeloid lysosomal enzymes: a useful adjunct to classification of patients with biopsy proven necrotizing arteritis. Am J Med 91:59-66, Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories: Centers for Disease Control/National Institutes of Health, Fifth Edition, Fabrikkert av: Technical Service NOR November 2007 INOVA Diagnostics, Inc. Rev Old Grove Road San Diego, CA United States of America Autorisert representant i EU: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D St. Ingbert, Germany Tel.: Fax.: