QUANTA Lite TM Thyroid T For In Vitro-diagnostikk CLIA-klassifisering: Høy kompleksitet

Transkript

1 QUANTA Lite TM Thyroid T For In Vitro-diagnostikk CLIA-klassifisering: Høy kompleksitet Anvendelsesområde QUANTA Lite TM Thyroid T er en enzymkoblet immunsorbent analyse (ELISA) for semikvantitativ påvisning av tyroglobulinantistoffer i humant serum. Forekomsten av antistoffer mot humant tyroglobulinantigen kan brukes sammen med kliniske resultater og andre laboratorietester for å hjelpe i diagnosen av Hashimotos tyroiditt. Sammendrag og forklaring av testen Tyroid-antistoffer i omløp har vært mye innblandet i etiologien av autoimmun tyriodsykdom og både tyroglobulin og mikrosomale antistoffer måles rutinemessig i klinisk praksis. 1,2 Serumantistoffer mot tyroid mikrosomale antigen(er) er ofte funnet hos pasienter med autoimmune tyroidsykdommer og forekomsten korrelerer godt med histologiske endringer ved Hashimotos tyroiditt. 3 Antistoffer mot tyroid mikrosomale antigener er positive hos 70-90% hos pasientene med kronisk tyroiditt. Disse antistoffene er også funnet hos 64% av pasientene med hypotyroidisme type 1, 50% med thyrotoxicose, 10% med et lite struma og 17% med tyroidtumorer. 4 Tyroglobulin-antistoffer er påvist ved høye titere, hovedsakelige i autoimmun tyroiditt og Graves sykdom. Serumantistoffer mot tyroglobulin/kolloid har blitt funnet hos 40-70% av pasienter med kronisk tyroiditt og i mindre prosenterandeler hos pasienter med thyrotoxicose og ikke-toksisk struma. 5,6 Tyroid-autoantistoffer har tradisjonelt blitt påvist ved hjelp av presipitasjonsreaksjoner 7, lateksbinding 8, hemagglutinasjon 9 og ved immunfluorescens. 10,11 I det siste er det blitt utviklet nyere ELISA-teknikker Disse ELISA-prosedyrene har blitt funnet mer sensitive enn både hemagglutinasjon og immunfluorescens og på samme tid er de mer objektive og ikke utsatt for forstyrrelser fra agglutinasjonsinhiberingsfaktorer 15 eller heterofile antistoffer. ELISA-teknikken som er brukt i denne testen er sensitiv, spesifikk og objektiv. Den kan lett brukes til å teste både store og små antall prøver. Prosedyreprinsipper Renset humant tyroglobulin antigen er bundet til brønnene til en mikrotiterplate av polystyren under betingelsene som vil konservere antigenet i naturlig tilstand. Forhåndsfortynnede kontroller og fortynnet pasientserum blandes i separate brønner slik at tilstedeværende tyroglobulin-antistoff bindes til det immobiliserte antigenet. Ubundet prøve vaskes vekk og et enzym-merket anti-human IgG-konjugat tilsettes hver brønn. En andre inkubasjon gjør det mulig for det enzym-merkede anti-humane IgG-antistoffet å binde seg til pasientens antistoff som har festet seg på mikrobrønnene. Etter å ha vasket bort enzym-merket anti-humant IgG-antistoff som ikke har festet seg, måles gjenværende enzymaktivtet ved å tilsette et substrat og fargeutviklingen måles. Analysen kan avleses spektrofotometrisk ved å måle og sammenlikne fargeintensiteten som utvikles i pasientbrønnene med fargen i kontrollbrønnene. Reagenser 1. Mikrotiter ELISA-plate av polystyren dekket med renset tyroglobulin-antigen (12-1 x 8 brønner), med holder i foliepakning inneholdende tørkemidler. 2. ELISA negativ kontroll, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum uten ikke-humane antistoffer mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL

2 3. Tyroid T ELISA lav positiv, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum med ikke-humane antistoff mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL. 4. Tyroid T ELISA høy positiv (Kalibrator A), 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum med antistoff mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL. 5. Tyroid T ELISA Kalibrator B, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum antistoff mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL. 6. Tyroid T ELISA Kalibrator C, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum antistoff mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL. 7. Tyroid T ELISA Kalibrator D, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum antistoff mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL. 8. Tyroid T ELISA Kalibrator E, 1 bufret ampulle som inneholder konserveringsmiddel og humant serum antistoff mot tyroglobulin, forhåndsfortynnet, 1,2mL. 9. HRP prøve prøvediluent, 1 ampulle rosafarget som inneholder fosfatbufret saltvann, Tween 20, proteinstabilisatorer og konserveringsmiddel, 50mL. 10. HRP vaskekonsentrat, 1 ampulle med 40x konsentrat rødfarget som inneholder fosfatbufret saltvann og Tween 20, 25mL. Se metodeavsnittet for veiledning om fortynning. 11. HRP IgG-konjugat, (goat), anti-humant IgG, 1 ampulle blåfarget som inneholder buffer, proteinstabilisatorer og konserveringsmiddel, 10mL. 12. TMB-kromogen, 1 ampulle som inneholder stabilisatorer, 10mL. 13. HRP stoppløsning, 0,344M svovelsyre, 1 ampulle fargeløs, 10mL. Advarsler 1. ADVARSEL: Dette produktet inneholder et kjemikalie (0,02% kloramfenikol) i prøvediluenten, kontrollene og konjugat antatt som kreftfremkallende i staten California. 2. Alt materiale fra menneskekilder brukt i preparatet til kontroller for dette produktet har blitt testet og funnet negativ for antistoff mot HIV, HBsAg og HCV av metoder klarert av det amerikanske helsetilsynet (FDA). Imidlertid kan ingen testmetode gi fullstendig sikkerhet om at HIV, HBV, HCV eller andre agens er fraværende. Derfor skal Tyroid T ELISA lav positiv, Tyroid T ELISA høy positiv, Tyroid T kalibrators og ELISA negativ kontroll behandles på samme måte som potensielt smittefarlig materiale Natriumazid brukes som konserveringsmiddel. Natriumazid er en gift og kan være giftig ved svelging eller ved opptak gjennom huden eller via øynene. Natriumazid kan reagere med bly- eller kobberrør og danne potensielt eksplosive metallazider. Bruk rikelig med vann i vaskene, hvis de brukes for avfallshåndtering av reagenser, for å forhindre oppsamling av azider. 4. HRP-konjugatet inneholder et fortynnet giftig/korrosivt kjemikalie som kan være giftig ved svelging av store mengder. Unngå hud- og øyenkontakt for å forhindre mulig kjemisk forbrenning. 5. TMB-kromogenet inneholder et kjemikalie som kan være skadelig ved inhalering, svelging eller opptak gjennom huden. Unngå inhalering, svelging eller hud- og øyenkontakt for å forhindre skader. 6. HRP-stoppløsningen inneholder en fortynnet svovelsyreoppløsning. Unngå eksponering av baser, metaller eller andre forbindelser som kan reagere med syrer. Svovelsyre er giftig og korrosiv og kan være giftig ved svelging. Unngå hud- og øyenkontakt for å forhindre mulig kjemisk forbrenning. 7. Bruk egnet personlig verneutstyr når du arbeider med reagensene som er levert. 8. Dersom du søler reagenser skal disse straks vaskes bort. Du skal være oppmerksom på alle kommunale, statlige og lokale miljøbestemmelser ved avfallsbehandling

3 Forholdsregler 1. Dette produktet brukes for in vitro-diagnostikk. 2. Utbytting av komponenter andre enn de som leveres med dette systemet kan føre til inkonsistente resultater. 3. Ufullstendig eller ineffektiv vasking og utilstrekkelig væskefjerning fra ELISAbrønnremsene vil forårsake dårlig presisjon og/eller høy bakgrunn. 4. Tilpassing av denne analysen for bruk sammen med, helt eller delvis, automatiske prøveprosessorer eller andre væskebehandlingsapparater, kan gi avvikende testresultater i forhold til de som utføres ved hjelp av manuell prosedyre. Det er hvert enkelt laboratoriums ansvar å stadfeste at deres automatiske prosedyre gir testresultater innenfor akseptable grenser. 5. En rekke faktorer påvirker analyseprestasjonene. Herunder inkluderes starttemperaturen til reagensene, lufttemperaturen, pipetteteknikkens nøyaktighet og reproduserbarhet, hvor grundig det er vasket og fjernet væske fra brønnen til ELISA-remsen, fotometeret som er brukt til å måle resultatene og inkubasjonstidenes varighet under analysen. Det er nødvendig med konsistens for å oppnå nøyaktige og reproduserbare resultater. 6. Det anbefales at man holder seg strengt innenfor rammene til protokollen. 7. Ufullstendig forsegling av glidelåsen til posen som inneholder mikrobrønnremsene og tørkemidlene vil resultere i degradasjon av antigen og dårlig presisjon. 8. Uakseptabelt lave sbsorbanser kan observeres etter to eller flere bruk fra én enkel flaske med HRP-konjugat over en tidsperiode. Det er viktig å følge alle anbefalte behandlingsprosedyrer for HRP-konjugatet for å forhindre at dette oppstår. 9. Kjemisk kontaminasjon av HRP-konjugatet kan forårsakes av ufullstendig rengjøring eller skylling av utstyr eller instrumenter. Avfall fra vanlige laboratoriekjemikalier slik som formalin, blekemiddel, etanol eller vaskemiddel vil forårsake degradasjon av HRPkonjugatet over tid. Skyll alt utstyret og alle instrumentene grundig etter bruk av kjemiske rengjørings- og desinfeksjonsmidler. Oppbevaringsbetingelser 1. Lagre alle reagensene i kitet ved 2-8 C. Ikke frys. Reagensene er stabile helt til de går ut på dato hvis de oppbevares og behandles på foreskriftsmessig vis. 2. Ubrukte antigen-dekkede mikrobrønnremser skal forsvarlig forsegles på ny i folieposen som inneholder tørkemidlene og oppbevares ved 2-8 C. 3. Fortynnet vaskebuffer er stabil i én uke ved 2-8 C. Innhenting av prøver Denne prosedyren skal utføres med en serumprøve. Tilsetting av azid eller andre konserveringsmidler til testprøvene kan påvirke resultatene negativt. Mikrobielt kontaminerte, varmebehandlede prøver eller prøver som inneholder synlige partikler skal ikke brukes. Sterkt hemolysert eller lipemisk serum eller prøver skal unngås. Etter innhenting skal serumet skilles fra blodklumpen. CLSI (NCCLS) dokument H18-A3 anbefaler følgende oppbevaringsbetingelser for prøver: 1) Ikke oppbevar prøver i romtemperatur lenger enn i 8 timer. 2) Hvis analysen ikke fullføres innen 8 timer, kjøl prøven ned til 2-8 C. 3) Hvis analysen ikke fullføres innen 48 timer, eller ved forsendelse av prøven, frys den ned til -20 C eller lavere. Nedfryste prøver må blandes godt etter tining og før testing

4 Prosedyre Leverte materialer 1 Tyroid T ELISA-mikrotiterplate (12-1 x 8 brønner), med holder 1 1,2mL forhåndsfortynnet ELISA negativ kontroll 1 1,2mL forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA lav positiv 1 1,2mL forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA høy positiv (Kalibrator A) 1 1,2mL forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator B 1 1,2mL forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator C 1 1,2mL forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator D 1 1,2mL forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator E 1 50mL HRP-prøvediluent 1 25mL HRP-vaskekonsentrat, 40x konsentrat 1 10mL HRP IgG-konjugat, (goat), anti-humant IgG 1 10mL TMB-kromogen 1 10mL HRP-stoppløsning, 0,334M svovelsyre Påkrevd tilleggsutstyr (ikke levert) Mikropipetter for å forsyne 5, 100, og 500µL Engangs mikropipettetips Testrør for pasientprøvefortynninger, 4mL volum Destillert eller deionisert vann 1L beholder for fortynnet HRP-vaskekonsentrat Mikrotiterplateleser som er i stand til å måle OD ved 450nm (og 620nm for dobbel bølgelengdeavlesninger) Metode Før du starter 1. Bring alle reagenser og prøver opp til romtemperatur (20-26 o C) og bland godt. 2. Fortynn HRP-vaskekonsentratet ut (1:40) ved å blande innholdet av HRPvaskekonsentratflasken med 975mL destillert eller deionisert vann. Hvis hele platen ikke skal kjøres i denne perioden, kan du forberede en mindre mengde ved å blande 2,0mL av konsentratet med 78mL destillert eller deionisert vann for hver 16 brønner som skal brukes. Den fortynnede bufferen er stabil i én uke ved 2-8 o C. 3. Gjør klar en oppløsning (1:101) for hver pasientprøve ved å blande 5µL fra prøven med 500µL av HRP-prøvediluent. Fortynnede prøver må brukes innen 8 timer etter klargjøring. IKKE FORTYNN Tyroid T ELISA lav positiv, Tyroid T ELISA høy positiv, Tyroid T Kalibrators og ELISA negativ kontroll. 4. Bestemmelse av forekomst eller fravær av Tyroid T ved hjelp av arbitrære enheter krever to brønner for hver av de tre kontrollene og én eller to brønner for hver pasientprøve. Det anbefales at prøvene kjøres i duplikat. 5. Hvis ønsket, kan resultatene utgis i semikvantifiserte WHO-enheter. For en fempunktsstandardkurve, bruk FORHÅNDSFORTYNNET tyroid T ELISA høy positiv (Kalibrator A) og kalibratorene fra B til E direkte fra ampullen. Fempunktsstandardkurven har følgende verdier: Punkt Tyroid T WHO Enheter A Forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Høy positiv (Kalibrator A) 1000,0 B Forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator B 500,0 C Forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator C 250,0 D Forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator D 125,0 E Forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA Kalibrator E 62,5

5 Analyseprosedyre 1. ALLE REAGENSER MÅ BRINGES OPP TIL ROMTEMPERATUR (20-26 C) FØR DU BEGYNNER ANALYSEN. Plasser påkrevd antall av mikrobrønner/remser i holderen. Legg straks tilbake remser som du ikke skal bruke tilbake i posen med tørkemidler og forsegl forsvarlig for å minimalisere eksponering for vanndamp. 2. Tilsett 100µL av forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA lav positiv, Tyroid T ELISA høy positiv, Tyroid T ELISA-kalibratorene fra B til E hvis ønsket, ELISA negativ kontroll og fortynnet pasientprøve til brønnene. Dekk brønnene og sørg for 30 minutters inkubasjon ved romtemperatur på en vannrett overflate. Inkubasjonstiden begynner etter at siste prøve tilsettes. 3. Vasketrinn: Aspirer innholdet av hver brønn grundig. Tilsett µL av fortynnet HRP-vaskebuffer til alle brønnene og deretter aspirer. Gjenta denne sekvensen to ganger til (totalt tre vasker). Inverter platen og bank på absorberende materiale for å fjerne resterende væske etter siste vask. Det er viktig å tømme hver brønn fullstendig etter hvert vasketrinn. Du opprettholder den samme sekvensen for aspirasjon som den som ble brukt for prøvetilsetning. 4. Tilsett 100μl av HRP-IgG-konjugatet til hver brønn. Konjugatet skal fjernes fra flaskene under standard aseptiske forhold og gode laboratorieteknikker. Bare fjern den koblingsmengden fra flasken som er nødvendig for analysen. DU SKAL ALDRI RETURNERE UBRUKT KONJUGAT TIL FLASKEN FOR Å UNNGÅ POTENSIELL MIKROBIELL OG/ELLER KJEMISK KONTAMINERING. Som i trinn 2, sørg for 30 minutters inkubasjon av brønnene. 5. Vasketrinn: Gjenta trinn Tilsett 100µL av TMB-kromogenet til hver brønn og sørg for 30 minutters inkubasjon i mørke ved romtemperatur. 7. Tilsett 100µL av HRP-stoppløsningen til hver brønn. Du opprettholder den samme sekvensen og timing ved tilsetting av HRP-stoppløsning som den som ble brukt for TMBkromogenet. Bank forsiktig på platen med en finger for å blande brønnene grundig. 8. Avles absorbans (OD) fra hver brønn ved 450nm innen én time etter å ha stoppet reaksjonen. Hvis du ønsker bikromatiske målinger, kan du bruke 620nm som referansebølgelengde. Kvalitetskontroll 1. Tyroid T ELISA lav positiv, Tyroid T ELISA høy positiv og ELISA negativ kontroll skal kjøres med hvert oppsetti for å sikre at alle reagenser og prosedyrer fungerer som de skal. 2. Merk at da Tyroid T ELISA lav positiv, Tyroid T ELISA høy positiv og ELISA negativ kontroll er forhåndsfortynnet, kontrollerer de ikke for prosedyremessige metoder tilknyttet fortynning av prøver. 3. Tilleggskontroller kan utføres i henhold til veiledninger eller krav fra lokale, statlige og/eller kommunale myndigheter eller akkrediterte organisasjoner. Egnet tilleggskontrollsera kan forberedes ved å aliquotere innsamlede humane serumprøver og oppbevaring ved < -20 C. 4. Alle kriteriene oppgitt nedenfor må oppfylles for å betrakte testresultatene som gyldige. Hvis noen av disse kravene ikke oppfylles, skal testen betraktes som ugyldig og analysen må gjentas. a. Absorbansen av forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA høy positiv må være høyere enn absorbansen til forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA lav positiv, og denne må være høyere enn absorbansen til forhåndsfortynnet ELISA negativ kontroll

6 b. Forhåndsfortynnet Tyroid T ELISA høy positiv må ha en høyere absorbans enn 0,8 mens absorbansen til forhåndsfortynnet ELISA negativ kontroll ikke kan være over 0,2. c. Absorbansen til Tyroid T ELISA lav positiv må være mer enn doble av ELISA negativ kontroll eller over 0,25. d. ELISA negativ kontroll og Tyroid T ELISA høy positiv er ment for å kontrollere for substansiell reagensfeiling. Tyroid T ELISA høy positiv vil ikke sikre presisjon ved analysens cut-off. e. Bruker henvises til CLSI (NCCLS) dokument C24-A3 for videre veiledning for egnet kvalitetskontrollpraksis. Beregning av resultater OD-middelverdien for hvert sett av duplikater bestemmes først. Reaksjonen for hver prøve kan deretter beregnes ved å dele prøvens OD-middelverdi med OD-middelverdien for Tyroid T ELISA lav positiv. Resultatet multipliseres med antall tildelte Tyroid T ELISA lav positive enheter som står på etiketten. Prøve OD Prøveresultat = x Tyroid T ELISA lav positiv (enheter) Tyroid T ELISA lav positiv OD (enheter) Reaksjon er relatert til antistoffmengde fremstilt på ikke-lineært vis. Selv om økninger og minskinger av pasientens antistoffkonsentrasjoner vil gjenspeiles i form av tilsvarende stigning eller fall i reaksjon, er endringen ikke proporsjonal (dvs. en fordobling av antistoffkonsentrasjon vil ikke fordoble reaksjonen). Hvis det påkreves en nøyaktigere kvantifisering av pasientens antistoff, skal serielle fortynninger av pasientprøven kjøres og den siste fortynningen som måles positiv i analysen, skal rapporteres som pasientens antistofftiter. Bruk dobbellogaritmisk millimeterpapir og plott enhetene for hvert punkt (A-E) på standardkurven mot gjennomsnittlig absorbans for å uttrykke semikvantitative resultater i WHO-enheter. Bruk best kurvetilpasning. Bruk gjennomsnittlig absorbans og les av pasientprøvene på denne kurven for å få ut resultatene i WHO enheter. Alternativt kan du bruke lineærlogaritmiske datareduksjonsprogrammer. Tolkning av resultater ELISA-analysen er meget følsom for teknikk og er i stand til å påvise selv små forskjeller i pasientpopulasjonen. Verdiene som vises nedenfor er bare foreslåtte verdier. Hvert laboratorium bør etablere eget referanseområde basert på egne teknikker, kontroller, utstyr og pasientpopulasjoner i henhold til deres etablerte prosedyrer. Prøven kan da klassifiseres som negativ, svakt positiv, moderat positiv eller sterkt positiv i henhold til tabellen nedenfor. Enheter Negative <0,6 Svakt positiv 0,6 1,0 Moderat positiv Sterkt positiv >1,0 Laboratoriet må fastsette eget normalområde hvis WHO-enheter brukes

7 1. Et positivt resultat indikerer forekomst av tyroglobulin-antistoffer og antyder muligheten av Hashimotos tyroiditt. 2. Et negativt resultat indikerer ingen forekomst av tyroglobulin-antistoff eller nivåer under analysens cut-off. 3. Det foreslås at resultatene som rapporteres av laboratoriet skal inneholde uttalelsen: Følgende resultater ble fremstilt med INOVA QUANTA Lite TM Thyroid T ELISA. Tyroglobulin-verdier fremstilt med forskjellige fabrikanters analysemetoder kan ikke brukes om hverandre. Størrelsen av rapporterte IgG-nivåer kan ikke korreleres til et endepunkttiter. Prosedyrebegrensninger 1. Forekomsten av immunkomplekser eller andre immunglobulinaggregater i pasientprøven kan forårsake et forhøyet nivå av ikke-spesifikk binding og produsere feilaktige positive analyseresultater. 2. Ikke alle Hashimotos tyroiditt-pasienter er positive for tyroglobulin. 3. Resultatene til denne analysen bør brukes sammen med kliniske resultater og andre serologiske tester. 4. Prestasjonsegenskapene til analysen har ikke blitt etablert for annet prøvemateriale enn serum. Forventede verdier QUANTA Lite TM Thyroid T ELISAs evne til å påvise tyroglobulin-antistoffer ble evaluert ved sammenlikning med en kommersielt tilgjengelig hemagglutinasjonstest. Resultatene av hemagglutinasjonstesten ble bestemt i henhold til fabrikantens vedlagte veiledning. Normalområde 101 tilfeldige serumprøver ble valgt og testet med Tyroid T ELISA-analysen. Middelverdien til prøvepopulasjonen var 0,186 enheter med standardavvik på 0,087 enheter. Spredningsforholdet for populasjonen var 0,12 til 0,79. Dette forsøket indikerer at gjennomsnittsnormalprøven er 4,8 standardavvik under cut-off. Relativ sensitivitet og spesifisitet 50 prøver innsendt for tyroid-testing ble testet med både hemagglutinasjons- og ELISA-metoder for å bestemme analysens relative sensitivitet og spesifisitet. Av de 50 prøvene som ble testet, var 30 positive og 18 negative med begge metodene. En prøve var positiv med hemagglutinasjon, men negativ med ELISA. Den siste prøven var positiv ved bruk av ELISA, men negative i hemagglutinasjonsanalysen. Resultatet av Tyroid T ELISA-analysen er oppsummert i tabellen nedenfor. INOVA Relativ sensitivitet 96,8% OT Relativ spesifisitet 94,7% Relativ effektivitet 96,0% Presisjon og reproduserbarhet Presisjonen og reproduserbarheten til analysen ble målt ved å kjøre seks duplikater hver av en negativ, moderat positiv og sterk positiv prøve i fire separate analyser. Middelverdien til den sterkt positive prøven var 4,58, til den moderat positive prøven, 1,90 og negativ, 0,

8 Standardavviket og variasjonskoeffisienten for hver prøve oppsummeres nedenfor. Negative Sterk positiv Moderat positiv SD CV SD CV SD CV Samlet 0, % 0,257 5,6% 0,104 5,7% Innen serien 0,015 7,4% 0,069 1,5% 0,048 2,5% Mellom serier 0,014 7,3% 0,284 6,2% 0,114 6,0% Referanser 1. Davies TF and DeBernardo E. Thyroid autoantibodies and disease. In Autoimmune Endocrine Disease, Davies TF, ed., Wiley, New York, NY, 1983, p Wall JR and Kuroki T. Immunologic factors in thyroid disease. Medical Clinics of North America 69: 913, Hall R and Evered DC. Autoimmune thyroid disease: thyroiditis. In: Endocrinology, DeGroot LJ, et al., eds, Grune and Stratton, New York, NY, 1979, p Delespesse G, et al. Thyroid autoimmunity. In: Thyroiditis and Thyroid Function, Bastenie PA and Evans AM eds., Pergamon Press, Oxford, 1972, p Balfour BM, et al. Fluorescent antibody studies in human thyroiditis: autoantibodies to an antigen of the thyroid colloid distinct from thyroglobulin. Br J Exp Pathol 43:307, Tung KSK, et al. Antithyroid antibodies in juvenile lymphocytic thyroiditis. Am J Clin Pathol 61: 549, Doniach D and Roitt IM. Autoimmunity in Hashimoto's disease and its implications. J Clin Endocrinol Metab 17: 1293, Philip JR, et al. A latex particle precipitation test in the diagnosis of thyroid disease. J Clin Pathol 15: 148, Fulthorpe AJ, et al. A stable sheep cell preparation for detecting thyroglobulin auto-antibodies and its clinical applications. J Clin Pathol 14: 654, Holborrow J, et al. Cytoplasmic localization of complement-fixing auto-antigen in human thyroid epithelium. Br J Exp Pathol 40: 583, Doniach D. Thyroid autoimmune disease: symposium on thyroid gland. J Clin Pathol, 20: 385, Ohwovoriole AE, et al. Improved ELISA for thyroid microsomal auto-antibodies, comparison with hemagglutination and immunofluorescent techniques. Int Arch Allergy Appl Immun 86: 183, Hoshijima Y, et al. A sensitive enzyme immunoassay for anti-thyroglobulin antibody using Fab-horseradish peroxidase conjugate. J Immunl Methods 96: 121, Roman SH, et al. Enzyme-linked immunosorbent microassay and hemagglutination compared for detection of thyroglobulin and thyroid microsomal autoantibodies. Clin Chem 30: 246, Wilkin TJ, et al. A passive hemagglutination (TRC) inhibitorin thyrotoxic serum. J Clin Endocrinol 10: 507, Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories: Centers for Disease Control/National Institutes of Health, Fifth Edition, Fabrikkert av: Technical Service NOR October 2007 INOVA Diagnostics, Inc. Rev Old Grove Road San Diego, CA United States of America Autorisert representant i EU: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D St. Ingbert, Germany Tel.: Fax.: