Kundeservice: Ytterligere kontaktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på

Transkript

1 system Homocysteine no Homocysteine 1L71 B1L71N G3-9165/R08 Les markerte endringer Revidert juni 2013 Kundeservice: Ytterligere kontaktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på Dette pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr for in vitro-diagnostikk Lotnummer Utløpsdato Prøvekopper Septum Kontrollnummer Oppbevares ved 2 8 C Se pakningsvedlegg Serienummer Produsent Reagenslot Assay CD-ROM - WW (excluding US) - Addition F Analyse-CD - internasjonal versjon (unntatt USA) - tillegg F Kyvetter Ekstra skrukorker Globalt varenummer Produseres i Storbritannia Inneholder natriumazid. Ved kontakt med syrer utvikles meget giftig gass. Advarsel: Kan utløse en allergisk reaksjon CONTAINS: METHYLISOTHIAZOLONES Inneholder metylisotiazoloner Produseres for Abbott av Opplysningene gjelder kun for USA Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. 1

2 ADVARSEL: Prøver fra pasienter som behandles med legemidler som inneholder S adenosyl-metionin, kan vise falskt forhøyede homocystein nivåer. Prøver fra pasienter som tar metotreksat, karba mazepin, fenytoin, nitrogenoksidul, antikonvulsive legemidler eller 6 azauridintriacetat, kan ha forhøyede homocysteinnivåer på grunn av effekten disse midlene har på den metabolske banen. Se PROSEDYRENS BEGRENSNINGER i dette pakningsvedlegget. NAVN ARCHITECT Homocysteine BRUKSOMRÅDE ARCHITECT Homocysteine-analysen er en immunkjemisk kjemiluminescens mikro partikkelanalyse (CMIA) til kvantitativ bestemmelse av total L-homocystein i humant serum og plasma på ARCHITECT i System. Homocystein verdier kan være til hjelp i diagnostisering og behandling av pasienter som antas å ha hyperhomocysteinemi eller homocystinuri. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING Homocystein (HCY) er en tiolholdig aminosyre som dannes fra metionin ved transmetylering. Homocystein sendes ut i plasma hvor den sirkulerer, hovedsakelig i oksidert form, bundet til plasmaproteiner som et proteinhomocystein-blandet disulfid med albumin. 1-4 Det finnes mindre mengder av redusert homocystein og disulfidhomocysteinen (HCY-SS-HCY). Total homocystein (thcy) vil si den samlede mengden av alle homocysteinarter som blir funnet i serum og plasma (frie pluss proteinbundne). Homocystein metaboliseres til enten cystein eller metionin. I den vitamin B6-avhengige transsulfureringsreaksjonen skjer en varig katabolisering av homocystein til cystein. En stor andel av homocystein metyleres tilbake til metionin, hovedsakelig av den folat- og kobalaminavhengige enzymatiske metionin syntasen. Homocystein akkumuleres og utskilles i blodet når disse reaksjonene svekkes. 2,4 Svekket homocysteinmetabolisme gir hyperhomocysteinemi (økt homocysteinnivå i plasma og serum) eller homocystinuri (høye plasmanivåer fører til at homocystein skilles ut i urinen). Hyperhomocysteinemi forårsakes av ernærings messige og genetiske mangler. De fleste tilfeller av forhøyede homocystein nivåer (to tredjedeler) i befolkningen skyldes mangel på folinsyre, vitamin B6 og vitamin B12. 5 Kraftig forhøyede konsentrasjoner av total homocystein finnes hos personer med homocystinuri, en sjelden genetisk feil i de enzymene som er en del av homocysteinmetabolismen. Pasienter med homocystinuri er mentalt tilbakestående og har tidlig arteriosklerose og arteriell og venøs tromboembolisme. 1,6 Andre mindre alvorlige genetiske feil som fører til moderat forhøyede nivåer av total homocystein, finnes også. 7-9 Det er gjort studier av forholdet mellom forhøyede homocysteinkonsentrasjoner og kardiovaskulær sykdom (CVD) som viser at homocystein kan være en viktig markør for risikovurdering. Ved kjent koronararteriesykdom (CAD) er det vist at den er en sterk uavhengig markør av senere CAD-relatert død. 10 En studie som ble utført med 1933 eldre menn og kvinner fra Framingham Heart Study-kohorten, viste at det er en uavhengig forbindelse mellom forhøyede homocysteinnivåer og økt dødelighet, både generelt og som skyldes kardiovaskulær sykdom. 11 Hos pasienter med middels risiko er forhøyede homocysteinnivåer knyttet til kalsifikasjonen av koronararteriene. Forhøyede homocysteinnivåer hos disse pasientene er uavhengige av risikofaktorer for koronarsykdom (CHD). 12 En metaanalyse av 27 epidemiologiske studier, utført på flere enn 4000 pasienter, anslo at en økning på 5 µmol/l i total homocystein ga et risikoforhold for CAD på 1,6 (95 %-konfidensintervall [CI] 1,4 til 1,7) for menn og 1,8 (95 %-konfidensintervall 1,3 til 1,9) for kvinner. Risikoforholdet for cerebrovaskulær sykdom var 1,5 (95 %-konfidensintervall 1,3 til 1,9). En økning i total homocystein på 5 µmol/l er forbundet med den samme risikoen som en økning i kolesterol på 0,5 mmol/l (20 mg/dl). Perifer arterisk sykdom viste også en klar sammenheng. 13 Pasienter med kronisk nyresykdom opplever større sykelighet og dødelighet på grunn av arteriosklerotisk CVD. En forhøyet konsentrasjon av total homocystein observeres ofte i blodet til disse pasientene. Selv om de kanskje mangler noen av vitaminene som medvirker i homocysteinmetabolismen, skyldes de forhøyede nivåene av total homocystein hovedsakelig nyrenes svekkede evne til å fjerne homocystein fra blodet. 14,15 Det er blitt hevdet at forhøyet homocysteinnivå er en modifiserbar, uavhengig risikofaktor for CAD, slag og dyp venetrombose. 16 Studier har også påvist at forhøyet homocysteinnivå er en sterk, uavhengig risikofaktor for å utvikle ulike former av demens, blant annet Alzheimers. I en studie som ble gjort med 1092 personer fra Framingham-studien, ga homocysteinnivåer i plasma > 14 µmol/l dobbelt så høy risiko for Alzheimers. 17 En studie har vist at gravide kvinner har lavere nivå av total homo cystein i plasma sammenlignet med kvinner som ikke er gravide (gjennomsnittlig total homocystein er omtrent 5 6 µmol/l, verdier > 10 µmol/l forekommer sjelden). Økt total homocystein er forbundet med økt risiko for komplikasjoner i svangerskapet (preeklampsi, gjentatte tidlige svanger skapsavbrudd, for tidlig fødsel, lav fødselsvekt, placentainfarkt eller at placenta løsner). Hyperhomocysteinemi hos mor er forbundet med fødsels skader som nevralrørsdefekter, leppe/gane-spalte, klumpfot og Downs syndrom. 18 ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT Homocysteine-analysen er en ett-trinns immunkjemisk analyse for kvantitativ bestemmelse av total L-homocystein i humant serum eller plasma med bruk av CMIA-teknologi med fleksible analyseprotokoller som kalles Chemiflex. Bunden eller dimerisert homocystein (oksidert form) blir av ditiotreitol (DTT) redusert til fri homocystein, som deretter omdannes til S-adenosylhomocystein (SAH) av den rekombinante enzymatiske S-adenosylhomocysteinhydrolasen (rsahhase) når det finnes for mye adenosin. SAH konkurrerer så med akridinmerket S adenosylcystein om partikkelbundet monoklonalt antistoff. Etter at vask og magnetisk separasjon er utført, tilsettes pretriggerløsning og triggerløsning til reaksjonsblandingen, og kjemiluminescensen som oppstår, måles som relative lysenheter (RLU). Det er et indirekte forhold mellom mengden av homocystein i prøven og mengden av RLU målt av optikken i ARCHITECT i System. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologien finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. REAGENSER Reagenspakke, 100 tester MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land til bruk på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt Abbott kundeservice. ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit (1L71) 1 eller 4 flasker (à 6,5 ml) mikropartikler belagt med anti-s-adenosyl-l-homocystein (mus, monoklonal) i Bis-Trisbuffer med overflateaktive stoffer. Minimumskonsentrasjon: 0,1 % tørrstoff. Konserveringsmidler: natriumazid og andre antimikrobielle midler. 1 eller 4 flasker (à 8,8 ml) S-adenosyl-L-cystein (SAC) akridinmerket konjugat i citratbuffer med overflateaktive stoffer og protein stabilisator (bovin). Minimumskonsentrasjon: 1 ng/ml. Konserverings middel: ProClin eller 4 flasker (à 8,6 ml) rekombinant S-adenosyl-Lhomocysteinhydrolase (SAHHase) i en buffer av 4-(2-hydroksietyl) piperazin-1-propan sulfonsyre (EPPS). Konserveringsmiddel: natriumazid. 1 eller 4 flasker (à 21,5 ml) ditiotreitol (DTT) i citratbuffer. Fortynningsløsning ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (nr. 7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. 2

3 VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk. Instruksjonene i pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig og at alt materiale som inneholder eller kan inneholde smittefarlige komponenter, håndteres i overensstemmelse med gjeldende sikkerhetsforskrifter for biologisk materiale Konjugatet inneholder metylisotiazoloner, en bestanddel av ProClin, og er ifølge EU-direktivene som kommer til anvendelse, klassifisert som: irriterende (Xi). Dette er gjeldende risiko- og sikkerhetssetninger (R- og S-setninger). R43 Kan gi allergi ved hudkontakt. S24 Unngå hudkontakt. S35 Produktet og emballasjen skal uskadeliggjøres på en sikker måte S37 S46 Bruk egnede vernehansker. Ved svelging, kontakt lege omgående og vis denne beholderen eller etiketten. Dette produktet inneholder natriumazid. En detaljert oversikt finnes under REAGENSER. Ved kontakt med syrer utvikles meget giftig gass. Produktet og emballasjen skal uskadeliggjøres på en sikker måte. Sikkerhetsdatablader er tilgjengelige på eller kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Ytterligere opplysninger om forholdsregler ved bruk av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 8. Forholdsregler ved bruk Ikke bruk reagenspakker etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme pakke eller fra forskjellige reagenspakker. Før ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes slik at mikro partiklene resuspenderes. Instruksjoner for blanding av mikro partikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering av reagenser og for å sikre reagensenes holdbarhet. Hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når septum settes på en åpen reagensflaske. Når et septum er satt på reagensflasken, må ikke flasken vendes. Hvis flasken vendes, kan reagens lekke ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette er vanligvis tørkede salter, som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved betjening av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 7. Oppbevaring ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit skal oppbevares ved 2 8 C i loddrett stilling og kan brukes straks den er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit kan oppbevares i ARCHITECT i System i maksimalt 30 dager. Etter 30 dager skal reagenspakken kastes. Det kan være nødvendig å rekalibrere for å sikre maksimal holdbarhet for reagenser i systemet. Informasjon om styring av reagensholdbarhet i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Reagensene kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT i System. Hvis reagensene tas ut av systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ny skrukork) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i de opprinnelige eskene for å sikre at de står loddrett. Hvis flasken med mikropartikler ikke står loddrett (med septum) når den oppbevares kjølig utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Når reagensene tas ut fra systemet, må det startes en reagensskanning for å oppdatere systemets holdbarhetstidsmåler. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Hvis en kontrollverdi ligger utenfor det angitte konsentrasjonsområdet, kan det tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige, og prøvene skal analyseres på nytt. Rekalibrering kan være påkrevd. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT Homocysteine-analysefilen må installeres på ARCHITECT i System fra ARCHITECT i System Assay CD-ROM Addition F før analysen tas i bruk. Ytterligere informasjon om installering av analysefilen og om visning og endring av analyseparametrene finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametrene finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Nærmere beskrivelse av systemprosedyrene finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet. Standard benevning for ARCHITECT Homocysteine-analysen er μmol/l. En alternativ benevning, µg/ml, kan velges for resultatrapportering ved å endre analyseparameteren Result concentration units til µg/ml. Systemet bruker omregningsfaktoren 0,1352. Konsentrasjon i μg/ml = konsentrasjon i μmol/l x 0,1352 PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Typer prøvemateriale Prøvetakingsglassene på listen nedenfor er verifisert for bruk med ARCHITECT Homocysteine-analysen. Andre prøvetakingsglass er ikke testet med denne analysen. Humant serum og serumseparatorglass Humant plasma tatt i: litiumheparin kalium EDTA Flytende antikoagulanter kan ha en fortynnende virkning som gir lavere konsentrasjoner i enkelte pasientprøver. System kan ikke verifisere hvilken type prøvemateriale som benyttes. Det er brukerens ansvar å kontrollere at det benyttes riktig type prøvemateriale til ARCHITECT Homocysteine-analysen. Tilstanden til prøvematerialet Ikke bruk prøvemateriale i følgende tilstander: varmeinaktivert kraftig hemolysert åpenbar mikrobiell kontaminering post mortem-prøver og alle andre kroppsvæsker For at resultatene skal bli nøyaktige, bør serum- og plasmaprøver være uten fibrin, røde blodlegemer og utfellinger. Serumprøver fra pasienter i antikoagulantbehahandling eller trombolyttisk behandling kan inneholde fibrin på grunn av ufullstending koagulering. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver slik at krysskontaminering unngås. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser. Kontroller at det ikke er bobler i prøvene, slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analysering. Bruk en ny rørepinne til hver prøve slik at krysskontaminering unngås. 3

4 Forberedelse til analysering For å minimere økningen i homocysteinkonsentrasjon på grunn av syntese med røde blodlegemer, skal alle prøver (serum og plasma) oppbevares på is etter at det er tatt og før de analyseres. Oppbevaring på is kan føre til at serumet koagulerer saktere og at serumvolumet reduseres. 23 MERK: Prøvemateriale som ikke settes på is umiddelbart, kan få en økning i konsentrasjonen på %. 24 Følg glassprodusentens bruksanvisning for serum- og plasmaprøvetakingsglass. Gravitasjonsseparasjon er ikke tilstrekkelig for klargjøring av prøver. Bland tint prøvemateriale grundig ved lav hastighet på en prøveblander eller ved å vende det 10 ganger. Kontroller prøvematerialet visuelt. Hvis lagdeling eller stratifisering forekommer, fortsett å blande til prøvene er homogene. For å sikre riktige resultater må prøvematerialet overføres til et sentrifugeglass og sentrifugeres før analysering hvis det inneholder fibrin, røde blodlegemer eller andre utfellinger det krever gjentatt testing det har vært frosset og tint Klargjort prøvemateriale overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass for testing. Sentrifugert prøvemateriale med et lipidlag på toppen skal overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Sørg for at bare den klare delen av prøven overføres, og ikke det lipemiske materialet. Oppbevaring Alt prøvemateriale må settes på is umiddelbart etter at prøven er tatt. Hvis det vil gå mer enn seks timer før analysering 23, fjernes plasma eller serum fra koagelet, røde blodlegemer eller separatorgel. Prøver kan oppbevares i opptil 14 dager i kjøleskap ved 2 8 C før de blir testet. Hvis det vil gå mer enn 14 dager før analysering, skal prøvene oppbevares i frossen tilstand ved -20 C eller kaldere i opptil ett år. Serum- eller plasmaprøver som hadde vært nedfrosset i ett år, viste ingen forskjeller i ytelse. 18 Unngå å fryse/tine prøvene mer enn 3 ganger. Forsendelse Det anbefales at prøver separeres fra koagelet, røde blodlegemer eller separatorgelen før de sendes. Ved forsendelse skal prøver pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale forskrifter for transport av kliniske prøver og smittefarlig materiale. Prøvemateriale kan sendes på vanlig is eller tørris. Det må ikke avvikes fra disse oppbevaringsreglene. PROSEDYRE Reagenspakken inneholder 1L71 ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System Architect Homocysteine-analysefilen, som kan hentes fra System e-assay CD-ROM, som ligger på eller 1P38 ARCHITECT i System Assay CD-ROM - WW (excluding US) - Addition F 1P39 ARCHITECT i System Assay CD-ROM - US - Addition F 1L71-01 ARCHITECT Homocysteine Calibrators 1L71-10 ARCHITECT Homocysteine Controls 7D82-50 ARCHITECT i Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) Informasjon om nødvendig utstyr til bruk ved vedlikeholdsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Analyseprosedyre Før ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes slik at mikropartiklene resuspenderes. Etter at mikropartiklene er plassert i systemet første gang, er ikke videre blanding nødvendig. Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Kontroller at mikropartiklene er resuspendert i flasken. Hvis det fremdeles sitter fast mikropartikler i bunnen av flasken, må flasken vendes til mikropartiklene er helt resuspendert. Hvis mikropartiklene ikke er resuspendert, MÅ IKKE REAGENSET BRUKES. Kontakt Abbott kundeservice. Når mikropartiklene er resuspendert, settes et septum på flasken. Instruksjoner for plassering av septa på flasker finnes under Forholdsregler ved bruk i dette pakningsvedlegget. Plasser ARCHITECT Homocysteine Reagent Kit i ARCHITECT i System. Kontroller at alle nødvendige reagenser er på plass. Kontroller at alle reagensflasker er utstyrt med septum. Bestill kalibrering om nødvendig. Informasjon om bestilling av kalibrering finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. Bestill testene. Informasjon om bestilling av pasientprøver og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillingsutskriften (Orderlist report). Det kan maksimalt tas 10 replikater fra samme prøvekopp. For å redusere effekten av fordampning må det kontrolleres at prøvekoppen inneholder nok materiale, før testen analyseres. Prioritert: 78 μl for den første ARCHITECT Homocysteine-testen pluss 28 μl for hver påfølgende ARCHITECT Homocysteine-test fra samme prøvekopp. 3 timer i systemet: 150 μl for den første ARCHITECT Homocysteine-testen pluss 28 μl for hver påfølgende ARCHITECT Homocysteine-test fra samme prøvekopp. Det bør alltid kontrolleres at det er nok prøvemateriale i primærog sekundærglassene. Klargjør kalibratorene og kontrollene. ARCHITECT Homocysteine-kalibratorer og -kontroller skal klargjøres i henhold til pakningsvedleggene. Anbefalt mengde for ARCHITECT Homocysteine-kalibratorer og kontroller oppnås ved at flaskene holdes loddrett og 5 dråper av hver kalibrator eller kontroll has i de respektive prøvekoppene. Sett inn prøvene. Informasjon om plassering av prøver finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Trykk på RUN. Ytterligere informasjon om betjeningsprinsipper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. For å sikre optimal yteevne er det viktig å følge rutinene for vedlikehold som er beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, følges disse prosedyrene. Fortynningsprosedyrer Prøver med en homocysteinverdi som overstiger 50,00 μmol/l merkes med koden >50.00 og kan fortynnes med den automatiske fortynningsprotokollen eller den manuelle fortynningsprosedyren. Automatisert fortynningsprosedyre Hvis den automatiserte fortynningsprosedyren brukes, fortynner systemet prøven i forholdet 1:10 og beregner automatisk prøvekonsentrasjonene før fortynning og rapporterer resultatet. 4

5 Manuell fortynningsprosedyre Den anbefalte fortynningen for ARCHITECT Homocysteine-analysen er 1:10. Tilsett 20 μl av pasientprøven til 180 μl av ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Brukeren må oppgi fortynningsfaktoren i pasient- eller kontrollbestillingsskjermbildet. Systemet bruker denne fortynnings faktoren til automatisk utregning av prøvekonsentrasjonen før fortynning. Dette er resultatet som rapporteres. Ytterligere informasjon om bestilling av fortynninger finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Kalibrering En ARCHITECT Homocysteine-kalibrering utføres ved at kalibrator A, B, C, D, E og F testes i replikater på to. En enkelt prøve av hver homocystein kontroll må testes for å evaluere analysekalibreringen. Kontroller at analysens kontrollverdier ligger innenfor konsentrasjonsområdene som er angitt i pakningsvedlegget for kontrollen. Kalibratorer bør behandles som prioriterte prøver. Kalibreringsområde: 0,0 50,0 μmol/l. Når en ARCHITECT Homocysteine-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten ytterligere kalibrering med mindre: det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer kontrollene ligger utenfor angitt område Ytterligere informasjon om hvordan en kalibrering utføres finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. PROSEDYRER FOR KVALITETSKONTROLL Det anbefalte kontrollkravet til ARCHITECT Homocysteine-analysen er at én enkelt prøve av hver kontroll testes 1 gang daglig. Laboratoriet bør følge interne eller statlige kvalitetskontrollprosedyrer som kan kreve hyppigere bruk av kontroller for å verifisere testresultatene. Kontrollverdiene for ARCHITECT Homocysteine må ligge innenfor de godkjente verdiene som er angitt i pakningsvedlegget for kontrollene. Hvis en kontroll ligger utenfor angitt område, vil de relaterte testresultatene være ugyldige og må testes på nytt. Rekalibrering kan være nødvendig. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Informasjon om fremgangsmåte for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, vedlegg B. ARCHITECT Homocysteine-analysen tilhører metodegruppe 1. ARCHITECT Homocysteine-kalibratorer kan brukes i stedet for MasterCheck som beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, vedlegg B. RESULTATER Beregning ARCHITECT Homocysteine-analysen bruker en 4-parameters logistisk data reduksjonsmetode med kurvetilpasning (4PLC, Y-vektet) for å generere en kalibreringskurve. Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Måleområde Måleområdet til ARCHITECT Homocysteine-analysen er 1,00 μmol/l til 50,00 μmol/l. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER Hvis ARCHITECT Homocysteine-resultatene ikke stemmer med den kliniske utredningen, anbefales det å utføre supplerende testing for å bekrefte resultatet. Disse legemidlene kan gi forhøyede homocysteinnivåer: metotreksat, karbamazepin, fenytoin, nitrogenoksidul, antikonvulsive midler og 6-azauridintriacetat. Virkemåten til disse legemidlene påvirker ulike deler av den metabolske banen til homocystein. 23,25 S-adenosyl-metionin er et antidepressiv med omtrent samme molekylform som S-adenosyl-homocystein. Dette legemidlet kan interferere med ARCHITECT Homocysteine-analysen. Prøver fra pasienter som har fått preparater med musemonoklonale antistoffer for diagnostisering eller behandling, kan inneholde humane anti-museantistoffer (HAMA). 26,27 Prøver som inneholder HAMA, kan gi feilaktige verdier når de analyseres med metoder som for eksempel ARCHITECT Homocysteine som bruker musemonoklonale antistoffer. 26 Heterofile antistoffer i humane prøver kan reagere med reagensimmunglobuliner og interferere med immunkjemiske in vitro-analyser. 28 Pasienter som rutinemessig eksponeres for dyr eller for animalske serumprodukter, kan være utsatt for slik interferens, og unormale verdier vil kunne observeres. Mer informasjon kan være nødvendig for å stille diagnose. Informasjon om prøvematerialets begrensninger finnes under PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING i dette pakningsvedlegget. FORVENTEDE VERDIER Humane EDTA-plasmaprøver fra 300 tilsynelatende friske personer ble evaluert med ARCHITECT Homocysteine-analysen. Området som utgjør de forventede verdiene, bestemmes av de sentrale 95 % av observasjonene. Fordelingen vises i tabellen nedenfor.* Persentil Median 2,5 % 97,5 % Kjønn n (μmol/l) (μmol/l) (μmol/l) Mann 150 9,05 5,46 16,20 Kvinne 150 7,61 4,44 13,56 Samlet 300 8,14 5,08 15,39 disse dataene. Det anbefales at det enkelte laboratorium fastsetter sitt eget område for forventede verdier, som kan være unikt for populasjonen det betjener, avhengig av faktorer som geografi, pasienter, kosthold og miljø. SPESIFIKKE EGENSKAPER Presisjon ARCHITECT Homocysteine-analysen skal ha en analysepresisjon på 10 % total CV. Det ble utført en studie med veiledning fra EP5-A2-protokollen fra Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, tidligere NCCLS). 29 Tre ARCHITECT Homocysteine-kontroller og 5 paneler med humant plasma ble analysert med 2 reagensloter i replikater på 2 til 2 forskjellige tidspunkter på dagen i 20 dager på 2 instrumenter. Hver testdag ble det generert en ny kalibreringskurve for hver reagenslot. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Rea- Gjennomsnitt Instru- gens- Innen-serie Totalt Prøve ment lot n (μmol/l) SD % CV SD % CV Lav ,40 0,26 3,5 0,43 5,9 kontroll ,58 0,18 2,4 0,25 3,3 Medium ,21 0,26 2,0 0,64 4,8 kontroll ,37 0,24 1,8 0,41 3,0 Høy ,77 0,63 2,3 1,09 4,1 kontroll ,73 0,47 1,8 0,73 2,9 Panel ,78 0,19 4,0 0,30 6, ,71 0,13 2,8 0,18 3,8 Panel ,03 0,22 2,0 0,48 4, ,89 0,13 1,2 0,23 2,1 Panel ,60 0,43 2,4 0,77 4, ,29 0,27 1,6 0,46 2,6 Panle ,40 0,79 2,2 1,19 3, ,83 0,71 2,0 0,87 2,5 Panel ,84 0,71 1,7 1,35 3, ,46 0,68 1,6 1,12 2,7 * Representative data. Resultatene i de ulike laboratoriene kan avvike fra disse dataene. 5

6 Fortynning ARCHITECT Homocysteine-analysen skal ha en gjennomsnittlig gjenfinning på 100 ± 15 % av det forventede resultatet for fortynnede prøver. Det ble utført en studie på fortynning ved at EDTA-plasmaprøver med høy homocysteinkonsentrasjon ble fortynnet med ARCHITECT Wash Buffer. Konsentrasjonen av homocystein ble bestemt for hver fortynnet prøve med ARCHITECT Homocysteine-analysen, og gjenfinningsprosenten ble beregnet for disse resultatene. Et subset av fortynningene som ble utført for hver prøve i denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor. Gjennomsnittlig gjenfinning for hele fortynningssettet for hver prøve er henholdsvis 103,9 %, 106,2 % og 104,1 % for prøve 1, 2 og 3 og er vist nedenfor.* Prøve-ID Forventet verdi (μmol/l) Gjennomsnittlig observert verdi (μmol/l) Fortynningsfaktor 1 Ufortynnet 41,97 41, :1,25 33,58 34,11 101,6 1:2 20,99 21,77 103,7 1:5 8,39 9,07 108,1 1:10 4,20 4,62 110,0 2 Ufortynnet 44,23 44, :1,25 35,38 36,31 102,6 1:2 22,11 22,81 103,1 1:5 8,85 9,98 112,8 1:10 4,42 5,15 116,5 3 Ufortynnet 45,79 45, :1,25 36,63 36,55 99,8 1:2 22,90 23,56 102,9 1:5 9,16 10,35 113,1 1:10 4,58 4,94 107,8 % gjenfinning a a gjennomsnittlig observert verdi (μmol/l) % gjenfinning = x 100 gjennomsnittlig forventet verdi (μmol/l) disse dataene. Verifisering av automatisk fortynning Gjennfinning ble evaluert for den automatiske 1:10-fortynningsmetoden i ARCHITECT Homocysteine-analysen sammenlignet med den manuelle 1:10-fortynnningsmetoden ved hjelp av tre humane EDTA-plasmaprøver med homocysteinnivåer som var høyere enn ARCHITECT Homocysteine Calibrator F (50,0 μmol/l). To replikater av hver av de automatisk fortynnede og de manuelt fortynnede prøvene ble analysert på ett instrument ved hjelp av ARCHITECT Homocysteine-analysen. Resultatene for prosentvis gjenfinning er oppsummert i tabellen nedenfor.* Prøve-ID Gjennomsnittlig verdi ved automatisk fortynning (μmol/l) Gjennomsnittlig verdi ved manuell fortynning (μmol/l) % gjenfinning a 1 40,19 44,06 91,2 2 41,10 44,85 91,6 3 40,56 44,46 91,2 a % gjenfinning = gjennomsnittlig verdi ved automatisk fortynning (μmol/l) gjennomsnittlig verdi ved manuell fortynning (μmol/l) x 100 * Representative data. Resultatene i de ulike laboratoriene kan avvike fra disse dataene. Sensitivitet Sensitivitet defineres som deteksjonsgrensen (LoD). ARCHITECT Homocysteine-analysen skal ha en deteksjonsgrense på 1,0 μmol/l. Blankgrensen (LoB) og deteksjonsgrensen til ARCHITECT Homocysteineanalysen ble bestemt basert på veiledning fra EP17-A-protokollen 30 fra CLSI ved hjelp av proporsjoner falskt positive (α) på under 5 % og falskt negative (β) på under 5 %. Disse bestemmelsene ble gjort ved å bruke én blank (120 replikater) og 5 lave homocysteinprøver (40 replikater av hver). Blankgrensen = 0,30 μmol/l og deteksjonsgrensen = 0,64 μmol/l.* disse dataene. Spesifisitet Spesifisiteten til ARCHITECT Homocysteine-analysen ble bestemt ved å studere kryssreaktiviteten til forbindelser med en kjemisk struktur som gjør at de kan interferere med ARCHITECT Homocysteine-analysen, og forbindelser som kan gi interferens hvis de brukes samtidig. Det ble utført en studie for ARCHITECT Homocysteine-analysen basert på veiledning fra EP7-A2-protokollen 31 fra CLSI. Analysens spesifisitet ble bestemt ved å berike løsninger av de følgende forbindelsene til humane EDTAplasmaprøver med homocysteinverdier fra 4,83 μmol/l til 43,70 μmol/l. Gjennomsnittlig prosentvis kryssreaktivitet ved de angitte nivåene for hver forbindelse er oppsummert i tabellen nedenfor.* Testet forbindelse Konsentrasjon (mm) Gjennomsnittlig % kryssreaktivitet a S-adenosyl-L-metionin 0,5 11,78 b L-cystein 100 0,01 L-cystationin 0,5 0,30 Adenosin 5,0 0,72 Glutation 100 0,003 DL-homocysteintiolakton 0,25 3,22 observert testkonsentrasjon (μmol/l) - a kontrollkonsentrasjon (μmol/l) % kryssreaktivitet = x 100 kryssreaktantkonsentrasjon (μmol/l) b Se PROSEDYRENS BEGRENSNINGER i dette pakningsvedlegget. disse dataene. Interferens Den potensielle interferensen i ARCHITECT Homocysteine-analysen fra følgende forbindelser skal ha en gjennomsnittlig gjenfinning på 100 ± 10 % av den forventede homocysteinkonsentrasjonen på de angitte nivåene. Det ble utført studier for ARCHITECT Homocysteine-analysen basert på veiledning fra EP7-A2-protokollen 31 fra CLSI. EDTA-plasmaprøver med homocystein nivåer i hele analyseområdet på 1,00 til 50,00 μmol/l ble supplert med følgende potensielt interfererende forbindelser. Gjennomsnittlig gjenfinning observert i EDTA-plasmaprøvene i disse studiene varierte fra 94,4 % til 104,5 %.* Potensielt interfererende komponent Konsentrasjon Bilirubin 20 mg/dl Hemoglobin 1000 mg/dl Lav protein 3 g/dl Høy protein 12 g/dl Triglyserider 6000 mg/dl Heparin 1 U/ml disse dataene. Metodesammenligning ARCHITECT Homocysteine-analysen skal ha en slope på 1,0 ± 0,1 og en korrelasjonskoeffisient (r) på 0,90 for plasmaprøver sammenlignet med AxSYM Homocysteine. Det ble utført en korrelasjonsstudie basert på veiledning fra EP9-A2- protokollen 32 fra CLSI på 456 EDTA-plasmaprøver for å sammenligne ARCHITECT Homocysteine-analysen med AxSYM Homocysteineanalysen. Data fra denne studien ble analysert med Passing-Bablok a regresjonsmetoden og er oppsummert i tabellen og grafen nedenfor.* ARCHITECT Homocysteine sammenlignet med AxSYM Homocysteine Antall observasjoner Slope (95 % CI) Intercept (95 % CI) Korrelasjonskoeffisient 456 0,98 (0,97 til 1,00) -0,74 (-0,99 til -0,54) 0,98 (0,98 til 0,99) Prøveområde (ARCHITECT): 3,18 µmol/l til 49,39 µmol/l Prøveområde (AxSYM): 3,70 µmol/l til 49,94 µmol/l a En lineær regresjonsmetode som ikke tar spesielle hensyn til fordeling av prøveresultater og målefeil. 33 6

7 ARCHITECT Homocysteine (μmol/l) (µmol/l) ARCHITECT ARCHITECT Homocysteine Homocysteine sammenlignet vs. med AxSYM Homocysteine AxSYM AxSYM Homocysteine (µmol/l) (μmol/l) * Representative data. Variabler som ulik prøvestørrelse og prøvepopulasjon kan ha innvirkning på analysekorrelasjonene. Derfor kan resultatene i de ulike laboratoriene avvike fra disse dataene. En biasanalyse av ARCHITECT Homocysteine sammenlignet med AxSYM Homocysteine ble utført på de samme 456 prøvene som ble brukt til metodesammenligning, i området fra 3,70 til 49,94 µmol/l. De representative dataene nedenfor er ment å vært til hjelp for å forstå forskjellen mellom de to analysene. Gjennomsnittlig prosentvis bias som ble funnet av ARCHITECT sammenlignet med AxSYM i denne studien, var -5,94 %. 95 %-konfidensintervallet for denne gjennomsnittlige prosentvise biasen er -6,77 % til -5,12 %. Resultatene fra studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* % Bias bias ARCHITECT Homocysteine %% Bias bias totil AxSYM Homocysteine AxSYM Homocysteine (µmol/l) (μmol/l) * Representative data. Resultatene i de ulike laboratoriene kan avvike fra disse dataene. REFERANSELISTE 1. Malinow MR. Plasma homocyst(e)ine and arterial occlusive diseases: A mini-review. Clin Chem 1995;41(1): Ueland PM. Homocysteine species as components of plasma redox thiol status. Clin Chem 1995;41(3): Perry IJ, Refsum H, Morris RW, et al. Prospective study of serum total homocysteine concentration and risk of stroke in middle-aged British men. The Lancet 1995;346: Finkelstein JD. Methionine metabolism in mammals. J Nutr Biochem 1990;1: Kaul S, Zaheh AA, Shah PK. Homocysteine hypothesis for atherothrombotic cardiovascular disease. JACC 2006;48(5): Mudd SH, Levy HL, Skovby F. Disorders of Transsulfuration. In: Scriver CR, Beaudet AL, Sly WS, et al., editors. The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease. New York: McGraw-Hill, 1995: Clarke R, Daly L, Robinson K, et al. Hyperhomocysteinemia: an independent risk factor for vascular disease. N Engl J Med 1991;324(17): Deloughery TG, Evans A, Sadeghi A, et al. Common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase. Correlation with homocysteine metabolism and late-onset vascular disease. Circulation 1996;94(12): Schmitz C, Lindpaintner K, Verhoef P, et al. Genetic polymorphism of methylenetetrahydrofolate reductase and myocardial infarction. Circulation 1996;94(8): Lee KWJ, Hill JS, Walley KR, et al. Relative value of multiple plasma biomarkers as risk factors for coronary artery disease and death in an angiography cohort. CMAJ 2006;174(4): Bostom AG, Silbershatz H, Rosenberg IH, et al. Nonfasting plasma total homocysteine levels and all-cause and cardiovascular disease mortality in elderly Framingham men and women. Arch Intern Med 1999;159: Kullo IJ, Li G, Bielak LF, et al. Association of plasma homocysteine with coronary artery calcification in different categories of coronary heart disease risk. Mayo Clin Proc 2006;81(2): Boushey CJ, Beresford SAA, Omenn GS, et al. A quantitative assessment of plasma homocysteine as a risk factor for vascular disease. JAMA 1995;274(13): Guttormsen AB, Svarstad E, Ueland PM, et al. Elimination of homocysteine from plasma in subjects with endstage renal failure. Irish J Med Sci 1995;164 (Suppl. 15): Bostom AG, Lathrop L. Hyperhomocysteinemia in end-stage renal disease: Prevalence, etiology, and potential relationship to arteriosclerotic outcomes. Kidney Int 1997;52: Wang X, Qin X, Demirtas H, et al. Efficacy of folic acid supplementation in stroke prevention: a meta-analysis. The Lancet 2007;369: Seshardi S, Beiser A, Selhub J, et al. Plasma homocysteine as a risk factor for dementia and Alzheimer s disease. N Engl J Med 2002;346(7): Refsum H, Smith AD, Ueland PM, et al. Facts and recommendations about total homocysteine determinations: and expert opinion. Clin Chem 2004;50(1): US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 20. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December, World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. Geneva: World Health Organization, Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Ueland PM, Refsum H, Stabler SP, et al. Total homocysteine in plasma or serum: methods and clinical applications. Clin Chem 1993;39(9): Ueland PM, Refsum H. Plasma homocysteine, a risk factor for vascular disease: Plasma levels in health, disease, and drug therapy. J Lab Clin Med 1989;114(5) Hermès S; Douki W; Omezzine A; et al. Hyperhomocysteinemia in patients taking anticonvulsants: Effects of C677T MTHFR, A2756G MS, and 8441NS68 CBS Polymorphisms [abstract]. Abstract presented at: Euro Medlab 2007; June 3-7, 2007; Amsterdam, Netherlands. Abstract M Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, et al. Sandwich -type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal antibodies for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34(2): Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45: Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: A problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34(1): National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline Second Edition. NCCLS document EP5-A2. Wayne, PA: NCCLS, National Committee for Clinical Laboratory Standards. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. NCCLS document EP17-A. Wayne, PA:NCCLS, Clinical and Laboratory Standards Institute. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline Second Edition. CLSI document EP7-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute,

8 32. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline-Second Edition. NCCLS document EP9-A2. Wayne, PA: NCCLS, Passing H, Bablok W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J Clin Chem Clin Biochem 1983;21(11): ARCHITECT, AxSYM, Chemiflex og MasterCheck er varemerker for Abbott Laboratories i forskjellige jurisdiksjoner. ProClin tilhører den respektive eieren. ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany Produseres av Axis-Shield Diagnostics Ltd., Dundee, UK for Abbott Distribueres av Abbott Laboratories Abbott Park, IL USA og ABBOTT Wiesbaden, Germany Juni , 2013 Abbott Laboratories 8