Ytterligere produktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Symbolforklaring

Transkript

1 B12 system no B12 7K /R06 B7K61N Les markerte endringer Revidert august 2010 Ytterligere produktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Dette pakningsvedlegget må leses nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr for in vitro-diagnostikk Lotnummer Utløpsdato Oppbevares ved 2 8 C Lav, medium, høy kontroll (L, M, H) Analyse-CD Kyvetter Prøvekopper Ekstra skrukorker Reagenslot Se pakningsvedlegg Kalibrator A F Serienummer Septum Produsent Advarsel: Reproduksjonsskadelig Advarsel: Kan utløse en allergisk reaksjon Inneholder natriumazid. Ved kontakt med syre utvikles meget giftig gass. Advarsel: Sterk irriterende Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. 1

2 NAVN ARCHITECT B12 BRUKSOMRÅDE ARCHITECT B12-analysen er en kjemiluminescensmikropartikkel-intrinsisk faktor-analyse for kvantitativ påvisning av vitamin B12 i humant serum og plasma på ARCHITECT i System. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING Vitamin B12 (B12), tilhørende korrinfamilien, er kofaktor i omdannelsen av metylmalonyl-koenzym-a til suksinyl-koenzym-a. B12 er også kofaktor i omdannelsen av homocystein til metionin, er involvert i dannelsen av myelin og er, sammen med folat, nødvendig ved DNA-syntese. 1,2 B12 absorberes fra maten etter binding til et protein som er kalt intrinsisk faktor og som produseres i magesekken. Årsaker til vitamin B12-mangel kan deles inn i tre klasser: ernæringsmangel, malabsorpsjons syndromer og andre gastrointestinale årsaker. B12-mangel kan føre til megaloblastisk anemi (MA), nerveskade og degenerering av ryggmargen. Selv en lav grad av B12-mangel skader myelinlaget som omgir og beskytter nervene, og dette kan føre til perifer nevropati. Nerveskade som skyldes B12 mangel kan bli permanent svekkende dersom den underliggende årsaken ikke behandles. Personer med intrinsisk faktor-defekter som ikke får behandling, utvikler etter hvert megaloblastisk anemi som har betegnelsen perniciøs anemi (PA). 2 Sammenhengen mellom mengden av B12 og MA er ikke alltid tydelig i og med at enkelte pasienter med MA har normale nivåer av B12. På den annen side er mange personer med B12-mangel ikke plaget av MA. Til tross for dette kompliserende faktum lider pasienter med MA (f.eks. forhøyet middelcellevolumer) vanligvis av B12- eller folatmangel. 2,3 Prevalensen av B12-mangel i den generelle populasjonen er ukjent, men øker med alderen. I én studie 4 viste laboratorieundersøkelser at 15 % av alle voksne over 65 år lider av B12-mangel. B12-konsentrasjoner i serum som er lavere enn forventet normalområde, kan indikere at B12-nivået i kroppens lager er i ferd med å reduseres. Men B12-verdier i nederste del av normalområdet garanterer ikke at B12-nivået er akseptabelt. Symptomatiske pasienter bør utredes videre med testing av holotranskobalamin, 5 homocystein og metylmalonsyre. 6,7 Det finnes en rekke tilstander som er forbundet med lave nivåer av B12 i serum, inkludert jernmangel, slutten av (normalt) svangerskap, vegetarisme, delvis gastrektomi/skade i tarm, cøliaki, bruk av p-piller, parasitter, dårlig fungerende pankreas, behandlet epilepsi og høy alder. 2,8-10,11 Lidelser forbundet med høyere nivåer av B12 i serum inkluderer nyresvikt, leversykdom og myeloproliferative sykdommer. 8,12 ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT B12-analysen er en totrinnsanalyse med automatisert prøveforbehandling for å bestemmelse forekomst av B12 i humant serum og plasma med CMIA-teknologi (immunkjemisk kjemi luminescensmikropartikkelanalyse) med fleksible analyseprotokoller kalt Chemiflex. Prøve og forbehandlingsreagens 1, forbehandlingsreagens 2 og forbehandlings reagens 3 blandes. En bestemt mengde av forbehandlet prøve materiale aspireres og overføres til en ny kyvette. Den for behandlede prøven, fortynningsløsningen og paramagnetiske mikropartikler belagt med intrinsisk faktor blandes. B12 som finnes i prøvematerialet bindes til mikro partiklene belagt med intrinsisk faktor. Etter vasking tilsettes i trinn to akridinmerket B12-konjugat. Deretter tilsettes reaksjons blandingen pre triggerløsning og triggerløsning. Kjemi luminescens reaksjonen som oppstår, måles i relative lysenheter (RLU). Mengden av B12 i prøven og mengden av RLU målt av optikken i ARCHITECT i System er omvendt proporsjonale. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. REAGENSER Reagenspakke, 100 tester / 500 tester MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land eller til bruk på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt Abbott kundeservice. ARCHITECT B12 Reagent Kit (7K61) 1 flaske (6,6 ml per flaske med 100 tester / 27,0 ml per flaske med 500 tester) mikropartikler belagt med intrinsisk faktor (gris) i boratbuffer med proteinstabilisatorer (bovine). Minimumskonsentrasjon: 0,1 % tørrstoff. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. 1 flaske (5,9 ml per flaske med 100 tester / 26,3 ml per flaske med 500 tester) akridinmerket B12-konjugat i MES-buffer. Minimumskonsentrasjon: 0,7 ng/ml. Konserveringsmiddel: ProClin. 1 flaske (10,0 ml per flaske med 100 tester / 51,0 ml per flaske med 500 tester) B12 fortynningsløsning som inneholder boratbuffer med EDTA. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. 1 flaske (27,0 ml per flaske med 100 tester / 50,4 ml per flaske med 500 tester) B12 forbehandlingsreagens 1 som inneholder 1,0 N natrium hydroksid med 0,005 % kaliumcyanid. 1 flaske (5,5 ml per flaske med 100 tester / 25,9 ml per flaske med 500 tester) B12 forbehandlingsreagens 2 som inneholder alfamonotioglyserol og EDTA. 1 flaske (5,5 ml per flaske med 100 tester / 25,9 ml per flaske med 500 tester) B12 forbehandlingsreagens 3 som inneholder kobinamiddicyanid i boratbuffer med proteinstabilisatorer (avian). Konserveringsmiddel: natriumazid. Fortynningsløsning ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk Instruksjonene i pakningsvedlegget må følges. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig, og at alt materiale som inneholder eller kan inneholde smittefarlige stoffer, håndteres i overensstemmelse med gjeldende sikkerhetsforskrifter for biologisk materiale Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for disse komponentene: Mikropartikler Fortynningsløsning Forbehandlingsreagens 3 ADVARSEL: H361 P201 P202 P281 P308+P313 Inneholder natriumborat. Mistenkes for å kunne skade forplantningsevnen eller gi fosterskader. Innhent særskilt instruks før bruk. Skal ikke håndteres før alle advarsler er lest og oppfattet. Bruk påkrevd personlig verneutstyr. Ved eksponering eller mistanke om eksponering: Søk legehjelp. Oppbevaring P405 Oppbevares innelåst. 2

3 Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for denne komponenten: Forbehandlingsreagens 2 ADVARSEL: H315 H319 H303 H313 P264 P280 P305+P351 +P338 P337+P313 P302+P352 P332+P313 P362 P312 Inneholder monotioglyserol. Irriterer huden. Gir alvorlig øyeirritasjon. Kan være farlig ved svelging. Kan være farlig ved hudkontakt. Vask hendene grundig etter bruk. Benytt vernehansker/verneklær/ vernebriller. VED KONTAKT MED ØYNENE: Skyll forsiktig med vann i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser dersom dette enkelt lar seg gjøre. Fortsett skyllingen. Ved vedvarende øyeirritasjon: Søk legehjelp. VED HUDKONTAKT: Vask med mye såpe og vann. Ved hudirritasjon: Søk legehjelp. Tilsølte klær må fjernes og vaskes før de brukes på nytt. Kontakt et GIFTINFORMASJONS SENTER eller lege ved ubehag. Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for denne komponenten: Konjugat ADVARSEL: H317 P261 P272 P280 Inneholder metylisotiazoloner. Kan utløse en allergisk hudreaksjon. Unngå innånding av tåke/damp/ aerosoler. Tilsølte arbeidsklær må ikke fjernes fra arbeidsplassen. Benytt vernehansker/verneklær/ vernebriller. P302+P352 VED HUDKONTAKT: Vask med mye såpe og vann. P333+P313 Ved hudirritasjon eller utslett: Søk legehjelp. P363 Tilsølte klær må vaskes før de brukes på nytt. Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for denne komponenten: Forbehandlingsreagens 1 FARE: H314 H290 P234 P260 P264 P280 Inneholder natriumhydroksid. Gir alvorlige etseskader på hud og øyne. Kan være etsende for metaller. Oppbevares bare i originalbeholder. Ikke innånd tåke/damp/aerosoler. Vask hendene grundig etter bruk. Benytt vernehansker/verneklær/ vernebriller/ansiktsskjerm. P301+P330 VED SVELGING: Skyll munnen. IKKE +P331 framkall brekning. P304+P340 VED INNÅNDING: Flytt personen til frisk luft og sørg for at vedkommende hviler i en stilling som letter åndedrettet. P305+P351 VED KONTAKT MED ØYNENE: Skyll +P338 forsiktig med vann i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser dersom dette enkelt lar seg gjøre. Fortsett skyllingen. P303+P361 VED HUDKONTAKT (eller håret): +P353 Tilsølte klær må fjernes straks. Skyll/ dusj huden med vann. P363 Tilsølte klær må vaskes før de brukes på nytt. P310 Kontakt umiddelbart et GIFT INFORMASJONS SENTER eller lege. P390 Absorber spill for å hindre materiell skade. Oppbevaring P405 Oppbevares innelåst. P406 Oppbevares i korrosjonsbestandig beholder med korrosjonsbestandig indre belegg. Forbehandlingsreagens 3 inneholder natriumazid. Ved kontakt med syre utvikles meget giftig gass. Produktet og emballasjen skal uskadeliggjøres på en Informasjon om sikker uskadeliggjøring av natriumazid og en detaljert beskrivelse av forholdsregler ved betjening av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 8. Forholdsregler ved bruk Reagenspakker må ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme pakke eller fra forskjellige reagenspakker. Før ARCHITECT B12-reagenspakken plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha lagt seg på bunnen. Informasjon om blanding av mikropartikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering og for å sikre reagensenes holdbarhet. Hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Hvis B12 forbehandlingsreagens 1 utsettes for langvarig kontakt med luft, kan yteevnen nedsettes. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når et septum settes på en åpen reagensflaske. Etter at et septum er satt på en åpen reagensflaske, må ikke flasken vendes. Det vil føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette er vanligvis tørkede salter, som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved betjening av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 7. 3

4 Oppbevaring ARCHITECT B12-reagenspakken skal oppbevares ved 2 8 C i loddrett stilling og kan brukes umiddelbart etter at den er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT B12-reagenspakken kan oppbevares i ARCHITECT i System i maksimum 30 dager. Etter 30 dager skal reagenspakken kastes. Informasjon om styring av reagensholdbarhet i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Reagensene kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT i System. Hvis reagenser tas ut av systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ny skrukork) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i de opprinnelige eskene for å sikre at de står loddrett. Hvis flasken med mikropartikler ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Informasjon om hvordan reagenser tas ut av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Hvis en kontrollverdi ligger utenfor det angitte området, kan det tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige og prøvene må analyseres på nytt. Rekalibrering av analysen kan være nødvendig. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT B12-analysefilen må installeres på ARCHITECT i System fra en ARCHITECT i System analyse-cd før analysen tas i bruk. Ytterligere informasjon om installering av analysefilen, samt om visning og endring av analyseparametrene finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Ytterligere informasjon om systemprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet. Standard benevning for ARCHITECT B12-analysen er pg/ml. En alternativ benevning, pmol/l, kan velges for resultatrapporter ved å endre analyseparameteren "Result concentration units til "pmol/l". Systemet bruker omregningsfaktoren 0,7378. PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Følgende prøveglasstyper er godkjent for bruk med ARCHITECT B12- analysen. Glass Plast Serum Serum Serumseparator Litiumheparinplasmaseparator Natriumheparin Dikalium-EDTA ARCHITECT i System kan ikke verifisere hvilket prøvemateriale som benyttes. Det er brukerens ansvar å kontrollere at det riktige prøvematerialet brukes til ARCHITECT B12-analysen. Tilstanden til prøvematerialet Ikke bruk prøvemateriale i følgende tilstander: varmeinaktivert sammenslått hemolysert åpenbar mikrobiell kontaminering Analysen er ikke validert for bruk av kroppsvæsker bortsett fra humant serum eller plasma. For at resultatene skal bli nøyaktige, bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer og andre utfellinger. Serumprøver fra pasienter som får antikoagulantbehandling eller trombolytisk behandling, kan inneholde fibrin på grunn av ufullstending koagulering. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver slik at krysskontaminering unngås. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipette spisser. Kontroller at det ikke er bobler i prøvene, slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analysering. Bruk en ny rørepinne til hver prøve, slik at krysskontaminering unngås. Forberedelse til analysering Følg bruksanvisningen fra produsenten av serum- og plasmaprøvetakings glass. Gravitasjonsseparasjon er ikke tilstrekkelig for klargjøring av prøver. Tint prøvemateriale blandes grundig enten ved lav hastighet på en prøveblander eller ved at det vendes 10 ganger. Se på prøvematerialet og kontroller at det er tilstrekkelig blandet. Hvis lagdeling eller stratifisering forekommer, blandes prøvene ytterligere til de er homogene. For å oppnå optimale resultater skal prøvematerialet overføres til et sentrifugeglass og sentrifugeres ved > relativ sentrifugalkraft (RCF) i 10 minutter hvis det inneholder fibrin, røde blodlegemer eller andre utfellinger det har vært frosset og tint Sentrifugerte prøver som har et lipidlag på toppen, skal overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Pass på at bare den klarnede delen av prøven overføres og ikke det lipemiske materialet. Overfør den klarnede delen av prøven til en prøvekopp eller et sekundærglass for testing. Oppbevaring Prøver kan oppbevares uten å avpipetteres fra koagelet, røde blodlegemer eller separatorgelen i opptil 3 dager i romtemperatur opptil 7 dager ved 2 8 C Hvis analysering ikke utføres innen 3 dager for prøver som oppbevares ved romtemperatur eller innen 7 dager for prøver som oppbevares ved 2 8 C, må serum eller plasma separeres fra koagel, røde blodlegemer eller separatorgel og oppbevares ved -20 C eller kaldere. Materialet bør ikke fryses/tines mer enn 3 ganger. Forsendelse Det anbefales at prøver separeres fra koagelet, røde blodlegemer eller separatorgelen før de sendes. Ved forsendelse skal prøver pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale forskrifter for transport av kliniske prøver og smittefarlig materiale. Prøvene kan sendes fryst (tørris) ved -20 C eller kaldere. Det må ikke avvikes fra tidsbegrensningene for oppbevaring som er angitt over. PROSEDYRE Reagenspakken inneholder 7K61 ARCHITECT B12 Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System 7K61-01 ARCHITECT B12 Calibrators 7K61-10 ARCHITECT B12 Controls 7D82-50 ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent Pipetter eller pipettespisser (valgfritt). Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. 4

5 Analyseprosedyre Før ARCHITECT B12-reagenspakken plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha lagt seg på bunnen. Etter at mikropartiklene er plassert i systemet første gang, er ikke videre blanding nødvendig. Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Se på flasken og kontroller at mikropartiklene er resuspendert. Hvis det fremdeles er mikropartikler på bunnen av flasken, skal flasken vendes flere ganger til mikropartiklene er fullstendig resuspendert. Når mikropartiklene er resuspendert, skrus lokket av og kastes. Bruk rene hansker, og ta et septum ut av posen. Sett septumet forsiktig på flaskeåpningen. Hvis mikropartiklene ikke er resuspendert, MÅ IKKE REAGENSET BRUKES. Kontakt Abbott kundeservice. Sett ARCHITECT B12-reagenspakken i ARCHITECT i System. Kontroller at alle nødvendige reagenser er på plass. Kontroller at det er septum på alle reagensflaskene. Mer informasjon om hvordan reagensene skal plasseres i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Bestill kalibrering om nødvendig. Informasjon om bestilling av kalibrering finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. Bestill testene. Informasjon om bestilling av pasientprøver, kalibratorer og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillingsutskriften (Orderlist Report). Det kan maksimalt tas 10 replikater fra samme prøvekopp. For at effekten av fordamping skal være minst mulig, må det kontrolleres at prøvekoppen inneholder nok materiale før analysen utføres. Prioritert: 87 µl for den første B12-testen pluss 37 µl for hver ekstra B12-test fra samme prøvekopp 3 timer i systemet: 150 µl for den første B12-testen pluss 37 µl for hver ekstra B12-test fra samme prøvekopp > 3 timer i systemet: erstatt med en fersk prøve (pasientprøver, kontroller og kalibratorer). Kontroller at det er nok prøvemateriale i primær- og sekundærglassene. Klargjør kalibratorene og kontrollene. Bland ARCHITECT B12 Calibrators og Controls ved å vende dem forsiktig før bruk. For å oppnå anbefalt mengde for ARCHITECT B12 Calibrators og Controls, bør flaskene holdes loddrett og 3 dråper av hver kalibrator eller 3 dråper av hver kontroll dispenseres i de respektive prøvekoppene. Sett inn prøvene Informasjon om hvordan prøvene settes inn i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5 Trykk på RUN. For å sikre optimal yteevne er det viktig å følge rutinene for vedlikehold slik de er beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, følges disse prosedyrene. Fortynningsprosedyrer Prøver med en B12-verdi over 2000 pg/ml (1476 pmol/l) merkes med koden >2000 når enheten pg/ml brukes ( >1476 når enheten pmol/l brukes) og kan fortynnes enten med automatisk fortynningsprotokoll eller manuell fortynningsprosedyre. Hvis automatisert fortynningsprotokoll benyttes, utfører systemet en 1:3-fortynning. Systemet vil bruke fortynningsfaktoren til automatisk utregning av prøvekonsentrasjonen før fortynning. Dette er resultatet som rapporteres. Manuelle fortynninger utføres på følgende måte: Anbefalt fortynning for B12 er 1:4. For en 1:4-fortynning tilsettes 100 µl av pasientprøven til 300 µl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Anbefalt fortynning for prøvemateriale som gjentatte ganger (2 ganger eller mer) gir feilen "3350 Unable to process testaspiration error for (Sample Pipetter) at (RV 24)", er 1:2. For en 1:2-fortynning tilsettes 100 µl av pasientprøven til 100 µl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Operatøren må skrive inn fortynningsfaktoren i pasientprøve- eller kontroll bestillingsskjermbildet. Systemet bruker denne fortynningsfaktoren til automatisk utregning av prøve konsentrasjonen før fortynning. Dette er resultatet som rapporteres. Resultatet før utregning med fortynningsfaktoren må være større enn 83 pg/ml (61 pmoi/l). Ytterligere informasjon om bestilling av fortynninger finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Kalibrering En ARCHITECT B12-kalibrering utføres ved å teste kalibrator A til F i duplikat. Kalibratorene bør legges inn som prioriterte prøver. Kalibreringsområde: pg/ml ( pmol/l). Én prøve for hvert kontrollnivå må testes for å vurdere analysekalibreringen. Bestill kontroller som beskrevet over. Kontroller at analysens kontrollverdier ligger innenfor konsentrasjons områdene som er angitt i paknings vedlegget for kontrollen. Når en ARCHITECT B12-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten videre kalibrering med mindre: det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer kontrollene ligger utenfor angitt område PROSEDYRER FOR KVALITETSKONTROLL Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT B12-analysen er at én prøve av alle kontroller testes 1 gang daglig. Ytterligere kontroller kan analyseres hvis det er nødvendig for å overholde lokale og nasjonale regelverk eller akkrediteringskrav og laboratoriets rutiner for kvalitetskontroll. Kontrollverdiene må ligge innenfor de godkjente områdene som er angitt i paknings vedlegget for kontrollene. Hvis et kontrollresultat ligger utenfor det godkjente området, må alle prøver som er analysert etter siste godkjente kontrollresultat evalueres for å avgjøre om analyseresultatene kan ha blitt påvirket negativt. Analyseresultater som er negativt påvirket er ikke gyldige og må reanalyseres. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Ytterligere informasjon om fremgangsmåten for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, vedlegg B. ARCHITECT B12-analysen tilhører metodegruppe 1. 5

6 RESULTATER ARCHITECT B12-analysen bruker en 4-parameters logistisk datareduksjonsmetode (4PLC, Y-vektet) for å generere en kalibreringskurve. Alternativ benevning Standard benevning for ARCHITECT B12-analysen er pg/ml. Når den alternative benevningen, pmol/l, er valgt, bruker systemet omregningsfaktoren 0,7378. Omregningsformel: (konsentrasjon i pg/ml) x (0,7378) = pmol/l (konsentrasjon i pmol/l) / (0,7378) = pg/ml Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER For å stille en diagnose skal resultatene ses i sammenheng med andre data, f.eks. symptomer, resultater fra andre tester, kliniske inntrykk osv. Diagnosen B12-mangel kan ikke utelukkende baseres på B12- nivåene i serum eller plasma. Det anbefales å teste pasienter med hematologiske eller nevrologiske symptomer ytterligere for folinsyre, blokkerende antistoffer mot intrinsisk faktor, holotranskobalamin, 5 homocystein og/eller metylmalonsyre. 6,7 Hvis B12-resultatene ikke samsvarer med den kliniske utredningen, anbefales det å utføre supplerende testing for å bekrefte resultatet. Det er vist at hemolyse gir negativ interferens i denne B12-analysen. Hemolysert prøvemateriale bør ikke analyseres. Prøvemateriale som inneholder proteinkonsentrasjoner som er høyere enn normalt, kan gi 2 eller flere feilmeldinger av typen 3350 Unable to process test-aspiration error for (Sample Pipetter) at (RV 24) og skal kvantiteres ved hjelp av automatisert fortynningsprotokoll eller manuell fortynningsprosedyre (1:2). Heterofile antistoffer og revmatoid faktor (RF) i humant serum kan reagere med reagens immunglobuliner, noe som interfererer med immunkjemiske in vitro-analyser. 17 Pasienter som jevnlig eksponeres for dyr eller animalske serumprodukter, kan være utsatt for slik interferens, og unormale verdier vil kunne observeres. Det kan være nødvendig med mer informasjon for å stille diagnose. Analysen er utviklet for å teste humant blod og plasma. Prøver som analyseres i andre matrikser kan gi unøyaktige resultater. Informasjon om prøvematerialets begrensninger finnes under PRØVE- TAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING i dette pakningsvedlegget. FORVENTEDE VERDIER Normale B12-verdier Det anbefales at hvert laboratorium etablerer sitt eget område som kan være unikt for populasjonen det betjener, avhengig av faktorer relatert til geografi, pasient, kosthold eller miljø. En studie ble utført basert på veiledning fra CLSI-dokumentet C28 A2 (CLSI = Clinical and Laboratory Standards Institute). 18 Serumprøver fra 143 personer med normale resultater for middelcellevolum, homocystein og folat ble analysert for B12 med ARCHITECT B12- analysen. Konsentrasjonsområdet for B12 for denne populasjonen var 141 til > 1218 pg/ml (104 til > 899 pmol/l) med et gjennomsnitt på 407 pg/ml (300 pmol/l). De sentrale 95 % av prøve populasjonen er definert nedenfor: Forventet område pg/ml ( pmol/l) B12-mellomnivåer Nivåer over 300 eller 400 pg/ml (221 eller 295 pmol/l) knyttes sjeldent til henholdsvis hematologiske eller nevrologiske lidelser fremkalt av B12 mangel. Det anbefales videre testing for symptomatiske pasienter med B12-nivåer mellom 100 og 300 pg/ml (74 og 221 pmol/l) (hematologiske abnormaliteter) og mellom 100 og 400 pg/ml (74 og 295 pmol/l) (nevrologiske abnormaliteter). 6,7 SPESIFIKKE EGENSKAPER Analyseresultatene fra laboratoriene kan avvike fra dataene som presenteres i studiene nedenfor. Presisjon ARCHITECT B12-analysen skal ha en total CV på 11 % for konsentrasjoner innenfor området til lav, medium og høy kontroll. En 20 dagers presisjonsstudie ble utført for ARCHITECT B12-analysen basert på veiledning fra CLSI-dokumentet EP5-A2. 19 Testing ble utført ved Abbott Laboratories ved hjelp av 3 ARCHITECT B12-reagensloter, 2 kalibratorloter og 1 kontrollot av på 2 instrumenter. 4 kontrollnivåer og paneler ble analysert i replikater på 3, 2 ganger om dagen i 20 dager. Dataene er oppsummert i tabellen nedenfor. Presisjon innenfor laboratoriet Gjennomsnitt Innen-serie (totalt) Instrument Prøve n (pg/ml) SD %CV SD %CV 1 Serumpanel ,6 4,8 16,3 6,2 Lav kontroll ,8 5,6 16,7 6,8 Medium kontroll ,3 3,4 16,8 4,0 Høy kontroll ,0 4,0 38,9 4,4 2 Serumpanel ,6 4,7 13,3 5,4 Lav kontroll ,4 4,3 12,9 5,4 Medium kontroll ,3 3,3 15,5 3,8 Høy kontroll ,9 2,7 29,7 3,4 Nøyaktighet fra WHO Det ble utført en studie for å evaluere nøyaktigheten for ARCHITECT B12-analysen ved hjelp av B12 World Health Organization International Standard 03/178. Analysen viste et avvik på -3,6 % fra utgangsverdien på 480 pg/ml (354 pmol/l). Sensitivitet Sensitivitet er definert som blankgrensen (LoB), deteksjonsgrensen (LoD) og kvantiteringsgrensen (LoQ) for ARCHITECT B12-analysen. Analysen skal ha en deteksjonsgrense på 150 pg/ml ( 111 pmol/l). En studie basert på veiledning fra CLSI-dokumentet EP17-A20 ga en blankgrense på 83 pg/ml (61 pmol/l), deteksjonsgrense på 125 pg/ml (92 pmol/l) og kvantiteringsgrense på 125 pg/ml (92 pmol/l). Spesifisitet ARCHITECT B12-analysen skal ha en interferens (differanse) mindre enn analysens deteksjonsgrense for kobinamid, en B12-analog. Spesifisiteten til ARCHITECT B12-analysen ble bestemt ved å studere kryss reaksjonen med kobinamid. En human serumprøve på omtrent 230 pg/ml (168 pmol/l) ble tilsatt kobinamid ved 9000 pg/ml, og interferensen ble da 4 pg/ml (3 pmol/l). Interferens Ved konsentrasjonene vist nedenfor ga bilirubin (med og uten konjugat), totalprotein og triglyserider mindre enn 10 % interferens i ARCHITECT B12-analysen for lave prøver (konsentrasjonsområde: 150 pg/ml til 250 pg/ml (111 pmol/l til 184 pmol/l)) og høye prøver (konsentrasjonsområde: > 500 pg/ml (> 369 pmol/l)): Bilirubin < 25,1 mg/dl Totalprotein < 12 g/dl Triglyserider < 3325 mg/dl Hemolysert prøvemateriale bør ikke analyseres. Se PROSEDYRENS BEGRENSNINGER i dette pakningsvedlegget. 6

7 Nøyaktighet ved korrelasjon Det ble utført en studie basert på veiledning fra CLSI-dokumentet EP9 A serumprøver ble testet for bestemmelse av B12 ved hjelp av ARCHITECT B12-analysen og en kommersielt tilgjengelig diagnostisk analysepakke. Prøveanalyseringene vises i tabellen nedenfor.* Abbott ARCHITECT B12 sammenlignet med Abbott AxSYM B12 Korrelasjonskoeffisient Metode Antall prøver Intercept Slope Minste kvadraters 329-2,05 1,01 0,99 lineær regresjon Passing-Bablok ,96 0,95 0,99 lineær regresjon 22 I denne evauleringen var serumprøvene som ble testet med ARCHITECT B12-analysen i området fra 113 til 2769 pg/ml (83 til 2043 pmol/l) og fra 93,5 til 2655,8 pg/ml (69,1 til 1959,5 pmol/l) med den sammenlignbare analysen. * Representative data. Resultatene i de individuelle laboratoriene kan variere ut fra disse dataene. REFERANSELISTE 1. Lee DSC, Griffiths BW. Human Serum Vitamin B12 Assay Methods - A Review. Clin Biochem 1985; 18: Chararin I. Megaloblastic Anemia, Cobalamin and Folate. J Clin Pathol 1987; 40: Beuerlein FJ. Testing Strategies for Anemias. Lab Mgmnt 1988; Dec: Pennypacker LC, Allen RH, Kelly JP et al. High Prevalence of Cobalamin Deficiency in Elderly Outpatients. J Am Geriatr Soc 1992;40: Obeid R, Herrmann W. Holotranscobalamin in laboratory diagnosis of cobalamin deficiency compared to total cobalamin and methylmalonic acid. Clin Chem Lab Med 2007; 45(12): Klee GC. Cobalamin and Folate Evaluation: Measurement of Methylmalonic Acid and Homocysteine vs. Vitamin B12 and Folate. Clin Chem 46; 2000: Snow CF. Laboratory Diagnosis of Vitamin B12 and Folate Deficiency: A Guide for the Primary Care Physician. Arch Intern Med. 1999; 159: Beck WS. Biological and Medical Aspects of Vitamin B12. In: Dolphin D, editor. B12 Volume 2, Biochemistry and Medicine. New York: Wiley Interscience, Carethers M. Diagnosing Vitamin B12 Deficiency, A Common Geriatric Disorder. Geriatrics 1988; 43(3): Herbert V. Five Possible Causes of All Nutrient Deficiency: Illustrated by Deficiencies of Vitamin B12 and Folic Acid. Am J Clin Nutr 1973; 26: Dahele A, Ghosh S. Vitamin B12 Deficiency in Untreated Celiac Disease. Am J Gastroenterol. 2001; 96: Pratt JJ, Woldring MG. Radioassay of Vitamin B12 and Other Corrinoids. Methods Enzymol 1982; 84: US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 14. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; January World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34: Clinical and Laboratory Standards Institute. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinial Laboratory; Approved Guideline - Second Edition. CLSI Document C28-A2. Wayne, PA: CLSI, Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP5-A2. Wayne, PA: CLSI, Clinical and Laboratory Standards Institute. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation: Approved Guideline. CLSI Document EP17-A. Wayne, PA:, CLSI, Clinical and Laboratory Standards Institute. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline- Second Edition. CLSI document EP9-A2. Wayne, PA: CLSI, Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem Clin Biochem. 1983; 21: ARCHITECT, AxSYM og Chemiflex er varemerker for Abbott Laboratories i forskjellige jurisdiksjoner. ProClin tilhører den respektive eieren. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland Distribueres av Abbott Laboratories Abbott Park, IL USA og ABBOTT Wiesbaden, Germany August , 2010 Abbott Laboratories 7