Kundeservice: Ytterligere informasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på Kontrollnummer.

Transkript

1 system Anti-CCP no Anti-CCP 1P65 B1P65N G3-2880/R03 Les markerte endringer Revidert desember 2012 Kundeservice: Ytterligere informasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på Instruksjonene i pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr for in vitro-diagnostikk Lotnummer Serienummer Globalt varenummer Utløpsdato Tilstrekkelig for Oppbevares ved 2 8 C Se pakningsvedlegg Produsent Kontrollnummer Analyse-CD Kyvetter Prøvekopper Septum Ekstra skrukorker Reagenslot Inneholder natriumazid. Ved kontakt med syrer utvikles meget giftig gass. Produseres i Storbritannia Opplysningene gjelder kun for USA Produseres for Abbott av Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. 1

2 NAVN ARCHITECT Anti-CCP BRUKSOMRÅDE ARCHITECT Anti-CCP-analysen er en immunkjemisk kjemiluminescensmikropartikkelanalyse (CMIA) for semikvantitativ bestemmelse av autoantistoffer i IgG-klassen som er spesifikke for syklisk citrullinert peptid (CCP) i humant serum eller plasma på ARCHITECT i System. Påvisning av anti-ccp-antistoff brukes som en hjelp til å diagnostisere revmatoid artritt (RA) og bør brukes sammen med annen klinisk informasjon. Autoantistoffnivået er én parameter i diagnostiseringsprosessen som omfatter både kliniske og laboratoriebaserte vurderinger. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING Revmatoid artritt (RA) er en vanlig, systemisk autoimmun sykdom som rammer 0,5 1 % av befolkningen. Den kjennetegnes ved kronisk betennelse i synovium, som vanligvis fører til progressiv ødeleggelse av leddene og i de fleste tilfeller et handikap og redusert livskvalitet. 1 Det har i de senere årene blitt vist at aggressiv behandling på et tidlig stadium har størst potensial for å gi effekt. 2,3 Serum fra RA-pasienter inneholder flere forskjellige antistoffer rettet mot selv-antigener. Den best kjente av disse autoantistoffene er revmatoid faktor-antistoff (RF-antistoff) som er rettet mot IgG-molekylenes konstante domene. At det er RF til stede er et av kriteriene til American College of Rheumatology (ACR) for klassifiseringen av RA. 4 Selv om RF-testen har god sensitivitet for RA, er den ikke svært spesifikk for sykdommen siden den også kan påvises i serumet til pasienter med andre revmatiske eller inflammatoriske sykdommer og til og med også i en betydelig del av den friske (eldre) befolkningen. 5 Det har i flere år vært anerkjent at antistoff mot anti-perinukleær faktor (APF) og anti-keratin (AKA) er svært spesifikke for RA. Senere er det blitt rapportert at begge disse antistoffene reagerte med naturlig filaggrin, og de omtales nå som anti-filaggrin-antistoff (AFA). 6,7,8 I det siste er det blitt vist at alle disse antistoffene er rettet mot epitoper som inneholder citrullin. 9 Citrullin er en ikke-standard aminosyre siden den ikke blir satt sammen til proteiner under proteinsyntesen. Den kan imidlertid bli generert etter translasjon via modifisering av argininrester av enzymet peptidylarginin deiminase (PAD). 10 I 1998 rapporterte Schellekens og hans kolleger at lineære peptider som inneholder citrullin (CP) er svært spesifikke for RA-antistoff (96 %) i en ELISA-basert analyse. 11 Senere arbeid har vist at sykliske varianter av disse peptidene, som kalles sykliske citrullinerte peptider (CCP), er like spesifikke for RA, men med en høyere sensitivitet enn lineære peptider. 12 For å gjøre CCP-testen enda mer sensitiv ble flere dedikerte samlinger med peptider som inneholdt citrullin, analysert med RA-sera, og det ble oppdaget et nytt sett med peptider (CCP2) som ga en overlegen ytelse sammenlignet med CCP1-testen. 13 I løpet av de siste årene er det gjort mange uavhengige studier som bekrefter den diagnostiske ytelsen til CCP2-testen. 14,15 I 2007 utga European League against Rheumatism (EULAR) retningslinjer for diagnostisering av tidlig RA, og måling av antistoff mot anti-ccp ble tatt med som en serologimarkør. 16 ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT Anti-CCP-analysen er en totrinns immunkjemisk analyse med en automatisert prøveforbehandling for den semikvantitative bestemmelsen av autoantistoffer i IgG-klassen som er spesifikke for syklisk citrullinert peptid (CCP) i humant serum eller plasma ved hjelp av CMIA-teknologi med fleksible analyseprotokoller som kalles Chemiflex. I det første trinnet prefortynnes prøven med vaskebuffer. Prefortynnet prøvemateriale, CCP-belagte paramagnetiske mikropartikler og prøvefortynning blandes. Anti-CCP-antistoff i prøven bindes til de CCP-belagte mikropartiklene. Etter vasking tilsettes i trinn to et antihumant akridinmerket IgG-konjugat. Etter enda en vaskesyklus tilsettes en pretrigger- og en triggerløsning til reaksjonsblandingen. Kjemiluminescensreaksjonen som oppstår, måles i relative lysenheter (RLU). Mengden av anti-ccpantistoff i prøven og mengden av RLU målt av det optiske systemet i ARCHITECT i System, er direkte proporsjonale. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi finnes i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, kapittel 3. REAGENSER Reagenspakke, 100/500 tester MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land eller til bruk på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt Abbott kundeservice. ARCHITECT Anti-CCP Reagent Kit (1P65) 1 flaske (6,5 ml / 26,5 ml) CCP-belagte mikropartikler i fosfatbuffer med overflateaktivt stoff og protein stabilisator (bovin). Minimumskonsentrasjon: 0,05 % tørrstoff. Konserveringsmiddel: natriumazid. 1 flaske (5,8 ml / 25,8 ml) anti-humant IgG fra mus: akridinmerket konjugat i MES-buffer med overflateaktivt stoff og protein stabilisator (bovin). Minimumskonsentrasjon: 10 ng/ml. Konserverings midler: Nipasept og Sarafloxacin. 1 flaske (9,8 ml / 50,0 ml) fosfatbuffer med overflate aktivt stoff og proteinstabilisator (bovin). Konserveringsmiddel: natriumazid. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk. Dette pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyse resultatenes pålitelighet garanteres. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig, og at alt materiale som inneholder eller kan inneholde smittefarlige stoffer, håndteres i overensstemmelse med gjeldende sikkerhetsforskrifter for biologisk materiale Dette produktet inneholder natriumazid. En detaljert oversikt finnes under REAGENSER. Ved kontakt med syrer utvikles meget giftig gass. Produktet og emballasjen skal uskadeliggjøres på en sikker måte. Sikkerhetsdatablader er tilgjengelige på eller kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Informasjon om sikker uskadeliggjøring av natriumazid og en detaljert beskrivelse av forholdsregler ved betjening av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 8. Forholdsregler ved bruk Reagenspakker må ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme pakke eller fra forskjellige reagenspakker. Før ARCHITECT Anti-CCP-reagenspakken plasseres i systemet første gang skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som har bunnfalt under transport. Informasjon om blanding av mikropartikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering av reagenser og for å sikre reagensenes holdbarhet. Hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når et septum settes på en åpen reagensflaske. Etter at septumet er satt på reagensflasken, må ikke flasken vendes. Det kan føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette er vanligvis tørkede salter, som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved betjening av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 7. 2

3 Oppbevaring ARCHITECT Anti-CCP-reagenspakken skal oppbevares ved 2 8 C i loddrett stilling og kan brukes straks den er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT Anti-CCP-reagenspakken kan oppbevares i ARCHITECT i System i maksimum 30 dager. Etter 30 dager skal reagens pakken kastes. Informasjon om styring av reagens holdbarhet i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Reagensene kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT i System. Hvis reagenser tas ut av systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ny skrukork) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i de opprinnelige eskene for å sikre at de står loddrett. Hvis flasken med mikro partikler ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Når reagenser er tatt ut av systemet, må det startes en reagensskanning for å oppdatere systemets holdbarhetstidsmåler. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Hvis en kontrollverdi ligger utenfor det angitte området, kan det tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige, og prøvene skal analyseres på nytt. Rekalibrering av analysen kan være nødvendig. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT Anti-CCP-analysen skal brukes på ARCHITECT i System. ARCHITECT Anti-CCP-analysefilen må installeres på ARCHITECT i System fra en ARCHITECT i System Assay CD-ROM før analysen tas i bruk. Ytterligere informasjon om installering av analysefiler og om visning og endring av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Ytterligere informasjon om systemprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet. Standard benevning for ARCHITECT Anti-CCP-analysen er U/ml. PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Typer prøvemateriale Prøvetakingsglassene på listen nedenfor er godkjent for bruk med ARCHITECT Anti-CCP-analysen. Andre prøvetakingsglass er ikke testet med denne analysen. Humant serum og serumseparatorglass Humant plasma tatt i: plasmaseparatorglass med litiumheparin kalium-edta Plasmaprøver fra ulike typer antikoagulerende glass skal ikke brukes om hverandre ved overvåking av anti-ccp. Flytende antikoagulanter kan ha en fortynnende virkning som gir lavere konsentrasjoner i enkelte pasientprøver. System kan ikke verifisere hvilket prøvemateriale som benyttes. Det er operatørens ansvar å kontrollere at det benyttes riktig type prøvemateriale til ARCHITECT Anti-CCP-analysen. Tilstanden til prøvematerialet Ikke bruk prøvemateriale i følgende tilstander: varmeinaktivert sammenslått kraftig hemolysert åpenbar mikrobiell kontaminering post mortem-prøver eller andre kroppsvæsker enn humant serum eller plasma For at resultatene skal bli nøyaktige, bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer og andre utfellinger. Serum prøver fra pasienter som får antikoagulant behandling eller trombolytisk behandling, kan inneholde fibrin på grunn av ufullstendig koagulering. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver slik at krysskontaminering unngås. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser. Kontroller at det ikke er bobler i prøvene, slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analysering. Bruk en ny rørepinne til hver prøve, slik at krysskontaminering unngås. Forberedelse til analysering Følg glassprodusentens bruksanvisning for serum- og plasmaprøvetakingsglass. Gravitasjonsseparasjon er ikke tilstrekkelig for klargjøring av prøver. Tint prøvemateriale blandes grundig enten ved lav hastighet på en prøveblander eller ved at det vendes 10 ganger. Se på prøvematerialet og kontroller at det er tilstrekkelig blandet. Hvis lagdeling eller stratifisering forekommer, blandes prøvene ytterligere til de er homogene. For å oppnå optimale resultater skal prøvematerialet overføres til et sentrifugeglass og sentrifugeres ved relativ sentrifugalkraft (RCF) i 10 minutter hvis det inneholder fibrin, røde blodlegemer eller andre utfellinger det krever gjentatt testing det har vært frosset og tint Sentrifugerte prøver som har et lipidlag på toppen, skal overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Pass på at bare den klare delen av prøven overføres og ikke det lipemiske materialet. Overfør den klare delen av prøven til en prøvekopp eller et sekundærglass for testing. Oppbevaring Prøver kan oppbevares uten å avpipetteres fra koagelet, røde blodlegemer eller separatorgelen i opptil 22 timer ved romtemperatur (studie utført ved 30 C) opptil 7 dager ved 2 8 C Hvis analysering ikke utføres innen 22 timer for prøver som oppbevares ved romtemperatur eller innen 7 dager for prøver som oppbevares ved 2 8 C, må serum eller plasma separeres fra koagel, røde blodlegemer eller separatorgel og oppbevares ved -20 C eller kaldere. Materialet bør ikke fryses/tines mer enn 3 ganger. Forsendelse Det anbefales at prøver separeres fra koagelet, røde blodlegemer eller separatorgelen før de sendes. Ved forsendelse skal prøvene pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale regler for transport av kliniske prøver og smittefarlige komponenter. Prøvemateriale kan sendes på vanlig is eller tørris. Det bør ikke avvikes fra tidsbegrensningene for oppbevaring som er angitt over. 3

4 PROSEDYRE Reagenspakken inneholder 1P65 ARCHITECT Anti-CCP Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System ARCHITECT Anti-CCP-fil, som kan hentes fra: System e-assay CD-ROM som ligger på 1P38 ARCHITECT i System - WW (excluding US) - Addition F, versjon 2.0 eller nyere (til bruk med ARCHITECT i2000 eller i2000 SR Systems) 1P39 ARCHITECT i System - US - Addition F, versjon 2.0 eller nyere (til bruk med ARCHITECT i2000 eller i2000 SR Systems) 1P60 ARCHITECT i 1000 SR System - US Special Edition, versjon 6.0 eller nyere 1P61 ARCHITECT i 1000 SR System - WW (excluding US) - Special Edition, versjon 5.01 eller nyere 1P65-01 ARCHITECT Anti-CCP Calibrators 1P65-10 ARCHITECT Anti-CCP Controls Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Analyseprosedyre Før ARCHITECT Anti-CCP-reagenspakken plasseres i systemet første gang skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikro partikler som har lagt seg på bunnen. Etter at mikro partiklene er plassert i systemet første gang, er ikke videre blanding nødvendig. Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Se på flasken og kontroller at mikropartiklene er resuspendert. Hvis det fremdeles sitter fast mikropartikler på bunnen av flasken, må flasken vendes til mikropartiklene er helt resuspendert. Hvis mikropartiklene ikke er resuspendert, MÅ IKKE REAGENSET BRUKES. Kontakt Abbott kundeservice. Når mikropartiklene er resuspendert, settes et septum på flasken. Informasjon om plassering av septum på flasker finnes under Forholdsregler ved bruk i dette pakningsvedlegget. Plasser ARCHITECT Anti-CCP-reagenspakken i ARCHITECT i System. Kontroller at alle nødvendige reagenser er på plass. Kontroller at det er septum på alle reagensflaskene. Bestill kalibrering om nødvendig. Informasjon om bestilling av kalibrering finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. Bestill testene. Hvis versjon 5.0 eller nyere av ARCHITECT-programvaren benyttes, se informasjon om bestilling av pasientprøver og kontroller i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Hvis det benyttes en eldre versjon av ARCHITECTsystemprogramvaren enn 5.0, bestilles pasientprøver og kontroller som beskrevet nedenfor: Informasjon om bestilling av pasientprøver og den positive kontrollen finnes i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, kapittel 5. Bestill den negative kontrollen som en pasientprøve og ikke som en kontroll. Kontroller manuelt at den negative kontrollen er gyldig hver gang den analyseres. Fordi kontrollen utføres som en pasientprøve, vil ikke resultatet bli merket av ARCHITECT i System hvis det ligger utenfor det godkjente kontroll området. Informasjon om feilsøking av kontrollverdier som ligger utenfor kontrollområdet, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillingslisterapporten (Orderlist report). Det kan maksimalt tas 10 replikater fra samme prøvekopp. For at effekten av fordamping skal være minst mulig, må det kontrolleres at prøvekoppen inneholder nok materiale før analyseringen utføres. Prioritert: 60 µl for den første ARCHITECT Anti-CCP-testen pluss 10 µl for hver ytterligere ARCHITECT Anti-CCP-test fra samme prøvekopp. 3 timer i systemet: 150 µl for den første ARCHITECT Anti CCPtesten pluss 10 µl for hver ytterligere ARCHITECT Anti-CCP-test fra samme prøvekopp. Kontroller at det er nok prøvemateriale i primær- og sekundærglassene. Klargjør kalibratorene og kontrollene. ARCHITECT Anti-CCP-kalibratorer og -kontroller skal klargjøres som beskrevet i pakningsvedleggene. Anbefalt mengde for ARCHITECT Anti-CCP-kalibratorer og kontroller oppnås ved at flaskene holdes loddrett og 4 dråper av hver kalibrator og kontroll has i de respektive prøvekoppene. Sett inn prøvene. Informasjon om plassering av prøver finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Trykk på RUN. Ytterligere informasjon om betjeningsprinsipper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. For å sikre optimal yteevne er det viktig å følge rutinene for vedlikehold som er beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, følges disse prosedyrene. Fortynningsprosedyrer Pasientprøver med anti-ccp-verdier over 200,0 U/ml merkes med koden >200.0 U/mL. For å kvantitere konsentrasjonen av disse prøvene utføres enten automatisert eller manuell fortynning. Automatisert fortynningsprosedyre Hvis den automatiserte fortynningsprosedyren brukes, fortynner systemet prøven i forholdet 1:6 og beregner automatisk prøve konsentrasjonene før fortynning og rapporterer resultatet. Manuell fortynningsprosedyre Anbefalt fortynning for ARCHITECT Anti-CCP-analysen er 1:10. Tilsett 50 µl pasientprøve til 450 µl av ARCHITECT Anti-CCP Negative Control. Operatøren må taste inn fortynningsfaktoren på pasientprøve- eller kontrollbestillingsskjermbildet. Systemet bruker denne fortynningsfaktoren til automatisk utregning av prøvekonsentrasjonen før fortynning. Dette er resultatet som rapporteres. Informasjon om bestilling av fortynninger finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 5. Kalibrering En ARCHITECT Anti-CCP-kalibrering utføres ved at kalibrator A, B, C, D, E og F testes i replikater på to. Én prøve av hver ARCHITECT Anti-CCP-kontroll må testes for å evaluere analyse kalibreringen. Kontroller at analysens kontrollverdier ligger innenfor konsentrasjonsområdene som er angitt i pakningsvedlegget for kontrollen. Kalibratorene bør legges inn som prioriterte prøver. Kalibreringsområde: 0,0 200,0 U/ml. Når en ARCHITECT Anti-CCP-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten videre kalibrering med mindre: det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer kontrollene ligger utenfor angitt område Ytterligere informasjon om hvordan en kalibrering utføres finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. 4

5 PROSEDYRER FOR KVALITETSKONTROLL Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT Anti-CCP-analysen er at én prøve av alle kontrollene testes 1 gang daglig. Hvis kvalitetskontrollprosedyrene for laboratoriet krever hyppigere bruk av kontroller for å verifisere testresultatene, følges disse prosedyrene. Ytterligere kontroller kan analyseres hvis det er nødvendig for å overholde lokale og nasjonale regelverk eller akkrediteringskrav og laboratoriets rutiner for kvalitetskontroll. Kontrollverdiene for ARCHITECT CCP må ligge innenfor de godkjente områdene som er angitt i pakningsvedlegget for kontrollene. Hvis en kontroll ligger utenfor angitt område, er de tilhørende testresultatene ugyldige, og prøvene må analyseres på nytt. Rekalibrering kan være nødvendig. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Ytterligere informasjon om fremgangsmåten for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, vedlegg B. ARCHITECT Anti-CCP-analysen tilhører metodegruppe 1. ARCHITECT Anti-CCP-kalibratorer kan brukes i stedet for MasterCheck som beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, vedlegg B. RESULTATER Beregning ARCHITECT Anti-CCP-analysen bruker en 4-parameters logistisk datareduksjonsmetode med kurvetilpasning (4PLC, Y-vektet) for å generere en kalibreringskurve. Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Måleområde Måleområdet til ARCHITECT Anti-CCP-analysen er 0,5 U/ml til 200,0 U/ml. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER For å stille en diagnose bør ARCHITECT Anti-CCP-resultatene brukes i sammenheng med andre kliniske data, f.eks. symptomer, medisinsk historikk osv. Hvis ARCHITECT Anti-CCP-resultatene ikke stemmer med den kliniske utredningen, anbefales ytterligere testing for å få bekreftet resultatet. Verdien for anti-ccp ved juvenil artritt er ikke blitt bestemt. Det kan hende at fortynning ikke vil skje lineært i alle prøver på grunn av heterogeniteten til autoantistoffenes fysiokjemiske egenskaper. ARCHITECT Anti-CCP-resultater og metoder for anti-ccpbestemmelse fra andre produsenter må ikke brukes om hverandre. Plasmaprøver fra ulike typer antikoagulerende glass skal ikke brukes om hverandre ved overvåking av anti-ccp. Prøver fra pasienter som har fått preparater av monoklonale antistoffer fra mus for å stille en diagnose eller som et ledd i behandlingen, kan inneholde humane anti-museantistoffer (HAMA). 21,22 Prøver som inneholder HAMA, kan gi feilaktige verdier når de analyseres med reagenser som for eksempel ARCHITECT Anti-CCP som bruker mono klonale antistoffer fra mus. 21 Heterofile antistoffer i humane prøver kan reagere med reagensimmunglobuliner, noe som interfererer med immunkjemiske in vitroanalyser. 23 Pasienter som jevnlig eksponeres for dyr eller animalske serumprodukter, kan være utsatt for slik interferens, og feilaktige verdier vil kunne observeres. Det kan være nødvendig med mer informasjon for å stille diagnose. Informasjon om prøvematerialets begrensninger finnes under PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING i dette pakningsvedlegget. FORVENTEDE VERDIER I en representativ studie ble serumprøver fra 199 asymptomatiske og tilsynelatende friske menn (n = 126) og kvinner (n = 73) i alderen 19 til 67 år analysert med ARCHITECT Anti-CCP-analysen. Det ble ikke observert noen forskjeller som hadde med kjønn eller alder å gjøre. Prøve verdiene varierte fra < 0,5 U/ml til 2,5 U/ml. Det ble bestemt en cutoff-verdi på 5,0 U/ml. Det innebærer at resultater 5,0 U/ml anses som positive, og resultater < 5,0 U/ml anses som negative.* fra disse dataene. Det anbefales at det enkelte laboratoriet fastsetter sitt eget område for forventede verdier, som kan være unikt for populasjonen det betjener, avhengig av faktorer som geografi, pasienter, kosthold og miljø. SPESIFIKKE EGENSKAPER Presisjon ARCHITECT Anti-CCP-analysen skal ha en analyseimpresisjon på < 10 % total CV. Det ble utført en studie basert på veiledning fra EP5-A2-dokumentet fra National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). 24 Sju prøver bestående av den positive ARCHITECT Anti-CCP-kontrollen, Fire paneler med humant plasma og to humane plasmaprøver ble analysert på to instrumenter i replikater på to til to forskjellige tidspunkter per dag i 20 dager (n = 80 for hver prøve). Det ble brukt to reagensloter og én kalibrering for hver kombinasjon av instrument/reagenslot. Data fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Prøve Positiv kontroll Panel 1 Panel 2 Panel 3 Panel 4 Prøve 1 Prøve 2 Reagenslot Instrument Gjennomsnitt Innen-serie Totalt n (U/ml) SD % CV SD % CV ,5 0,73 3,0 0,81 3, ,7 0,68 2,6 0,74 2, ,9 0,30 2,7 0,61 5, ,3 0,26 2,3 0,58 5, ,6 0,63 2,2 1,95 6, ,3 0,60 2,0 1,68 5, ,7 1,40 2,1 4,03 6, ,7 1,92 2,6 4,85 6, ,3 6,36 4,7 8,11 6, ,1 5,02 3,3 11,82 7, ,8 0,07 2,6 0,11 4, ,7 0,07 2,4 0,11 4, ,4 6,67 3,7 9,69 5, ,3 7,20 3,7 12,14 6,2 Sensitivitet Sensitivitet defineres som deteksjonsgrensen (LoD). ARCHITECT Anti- CCP-analysen skal ha en deteksjonsgrense (LoD) på 0,5 U/ml. Deteksjonsgrensen (LoD) og blankgrensen (LoB) til ARCHITECT Anti CCPanalysen ble bestemt basert på veiledning fra NCCLS-dokumentet EP17 A 25 ved hjelp av proporsjoner av falskt positive (α) på under 5 % og falskt negative (β) på under 5 %. Disse bestemmelsene ble gjort ved å bruke én blank (60 replikater) og 5 lave anti-ccp-prøver (20 replikater av hver). Blankgrensen = 0,02 U/ml og deteksjonsgrensen = 0,11 U/ml.* Hook-effekt Hook-effekten (high dose hook) er et fenomen som fører til at prøver med svært høyt nivå kan gi resultater som viser at de er innenfor analysens dynamiske område. Det ble ikke observert noen hook-effekt for ARCHITECT Anti-CCP-analysen ved analysering av en prøve som inneholdt omtrent 2000 U/ml anti-ccp-antistoff.* 5

6 Linearitet ARCHITECT Anti-CCP-analysen skal være lineær i hele måleområdet på 0,5 til 200,0 U/ml. Basert på en studie som ble utført med veiledning fra NCCLS-dokumentet EP6-A, 26 viste ARCHITECT Anti-CCP-analysen linearitet fra 0,5 til 200,0 U/ml.* Konsentrasjonsområde (U/ml) 0,1 257,4 Slope (95 % CI) 0,98 (0,95 til 1,01) Intercept (95 % CI) r 2-1,85 (-6,19 til 2,48) 0,9985 Verifisering av automatisk fortynning Den automatiske fortynningsmetoden til ARCHITECT Anti-CCP skal ha en gjennomsnittlig differanse på ± 10 % sammenlignet med den manuelle fortynnings metoden når den brukes til prøver med verdier > 50,0 U/ml. ARCHITECT Anti-CCP-analysen ble vurdert med automatisk 1:6 fortynning sammenlignet med manuell 1:10-fortynning ved hjelp av 12 humane serum prøver med anti-ccp-nivåer i området fra 58,7 til 785,0 U/ml. Fem replikater av hver av de automatisk fortynnede og de manuelt fortynnede prøvene ble analysert på ett instrument ved hjelp av ARCHITECT Anti CCPanalysen. Gjennomsnittlig prosentvis differanse for alle prøvene var 2,6 %. Resultatene for prosentvis differanse er oppsummert i tabellen nedenfor.* Gjennomsnittlig verdi ved automatisk fortynning x fortynningsfaktor på 6 (U/ml) Gjennomsnittlig verdi ved manuell fortynning x fortynningsfaktor på 10 (U/ml) % differanse a Prøve 1 456,4 453,0 0, ,1 482,7 4, ,8 743,8 7, ,6 785,0-6, ,2 209,9 4, ,0 187,9 2, ,9 207,0 3, ,8 194,6 1,1 9 65,3 61,4 6, ,1 69,2 1, ,0 69,0 4, ,2 165,2 1,2 a % differanse = [gjennomsnittlig verdi ved automatisk fortynning x 6 (U/ml) - gjennomsnittlig verdi ved manuell fortynning x 10 (U/ml)] gjennomsnittlig verdi ved manuell fortynning x 100 x 10 (U/ml) Interferens ARCHITECT Anti-CCP-analysen skal ha et maksimum avvik i anti CCPkonsentrasjon fra følgende potensielt interfererende forbindelser innenfor: ± 15 % for anti-ccp-konsentrasjoner > 10,0 U/ml ± 10 % for anti-ccp-konsentrasjoner 5,0 U/ml til 10,0 U/ml ± 0,5 U/ml for anti-ccp-konsentrasjoner < 5,0 U/ml Det ble utført en studie basert på veiledning fra EP7 A2-dokumentet 27 fra Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) for ARCHITECT Anti-CCP-analysen. Serumprøver med anti-ccp-nivåer i hele området til analysen på 0,5 U/ml til 200,0 U/ml ble tilsatt de potensielt interfererende forbindelsene i tabellen nedenfor. Det største avviket i anti-ccpkonsentrasjon som ble observert i serumprøver i denne studien varierte mellom: -7,6 % til 0,8 % for anti-ccp-konsentrasjoner > 10,0 U/ml -1,0 % til 7,5 % for anti-ccp-konsentrasjoner 5,0 U/ml til 10,0 U/ml -0,3 U/ml til 0,2 U/ml for anti-ccp-konsentrasjoner < 5,0 U/ml* Ingen interferens funnet opp til Potensielt interfererende komponent følgende konsentrasjoner Bilirubin 20 mg/dl Hemoglobin 800 mg/dl Totalprotein 12 g/dl Triglyserider 3000 mg/dl Revmatoid faktor 200 IU/ml Røde blodlegemer 0,4 % Kryssreaktivitet Potensiell kryssreaktivitet for CCP-antigenet som brukes i ARCHITECT Anti-CPP-analysen med andre antistoffer ble kontrollert ved at analysen ble evaluert med 20 prøver som var positive for ulike andre antistoffer og negative for CCP-antistoffer. Følgende autoantistoffer (1 4 prøver av hver) ble testet i analysen: SSA, SSB, Sm, RNP, ds-dna, Jo-1, Scl-70, Ribo-P, TPO, ANA og AMA. Studien viste ingen betydelig kryssreaktivitet for CCP-antigenet med noen av de andre autoantistoffene. Matrikssammenligning av glasstype Prøvetakingsglassene på listen nedenfor er godkjent for bruk med ARCHITECT Anti-CCP-analysen. serum, serumseparator, litiumheparinplasmaseparator og kalium- EDTA. Sammenlignet med kontrollglasstypen (serum) viste glasstypene som ble vurdert for prøver med anti-ccp-verdier < 5,0 U/ml, en gjennomsnittlig differanse på mindre enn 0,5 U/ml, og glasstypene som ble vurdert for prøver med anti-ccp-verdier på mellom 5,3 og 178,8 U/ml, viste i gjennomsnitt en differanse på mindre enn 10 %. Tabellen nedenfor viser hvordan differansene fordelte seg og de prosentvise differansene per glasstype.* Fordeling av absolutte differanser < 0,5 U/ml for prøver med anti-ccpverdier Glasstype < 5,0 U/ml Serumseparator 100 % (19/19) Kalium-EDTA 100 % (19/19) Litiumheparinplasmaseparator 100 % (19/19) Fordeling av absolutte prosentvise differanser for prøver med anti-ccp-verdier 5,3 til 178,8 U/ml < 10 % 76 % (19/25) 72 % (18/25) 80 % (20/25) 10 % til 20 % > 20 % 16 % (4/25) 24 % (6/25) 16 % (4/25) 8 % (2/25) 4 % (1/25) 4 % (1/25) 6

7 Klinisk sensitivitet og spesifisitet Den kliniske sensitiviteten ble bestemt for 496 personer med bekreftet RA, og klinisk spesifisitet ble bestemt for 499 prøver fra personer uten RA (299 fra pasienter med andre revmatiske eller ikke-revmatiske sykdommer og 200 fra asymptomatiske tilsynelatende friske personer). Med en cutoff-verdi på 5,0 U/ml ble sensitiviteten beregnet til å være 70,6 % med en spesifisitet på 98,2 %. Resultatene er oppsummert i tabellene nedenfor.* ARCHITECT Totalt Anti-CCP-positive Prøvekategori n n % sensitivitet Bekreftet RA a ,6 a RA-pasienter ble klassifisert etter ACR-kriteriene. 4 ARCHITECT Prøvekategori Totalt n Anti-CCP-positive n % spesifisitet Ikke-RA-prøver til sammen ,2 Prøver fra friske asymptomatiske ikke-ra-pasienter ,5 Prøver fra pasienter med ikke RA-sykdom a ,3 a Ikke-RA-sykdommene er ankyloserende spondylitt, autoimmun tyreoiditt / Hashimotos struma, Crohns sykdom, dermatomyositt, Epstein-Barr-virus, Lyme-sykdom, osteoartritt, polymyalgia rheumatica, polymyositt, arthritis psoriatica, reaktiv artritt / Reiters sykdom, skleroderma, Sjøgrens syndrom, systemisk lupus erythematosus og colitis ulcerosa. Metodesammenligning ARCHITECT Anti-CCP-analysen skal ha et samsvar på 95 % for RA- og ikke-ra-prøver sammenlignet med AxSYM Anti CCP-analysen. RA- og ikke-ra-prøvene som er beskrevet under Klinisk sensitivitet og spesifisitet ble brukt til å sammenligne ARCHITECT Anti-CCP-analysen med AxSYM Anti-CCP-analysen. 5,0 U/ml ble brukt som cutoff-verdi for AxSYM Anti CCP-analysen, som angitt i paknings vedlegget fra produsenten. Når cutoff-verdien 5,0 U/ml ble brukt for ARCHITECT Anti CCP-analysen, ble samsvaret beregnet til å være 99,3 %. Resultatene er oppsummert i tabellene nedenfor.* Det ble utført en ROC-analyse (ROC = Receiver Operator Characteristic) ved hjelp av resultatene fra de to analysene som er angitt over. AUC (area under the curve) for ARCHITECT Anti-CCP-analysen var 0,873 (95 % konfidensintervall: 0,849 0,897) og 0,872 (95 % konfidensintervall: 0,848 0,896) for AxSYM Anti-CCP-analysen, hvilket indikerer at den kliniske differensieringen til begge analysene er sammenlignbar. ROCanalysekurven er vist nedenfor.* 1 0,9 0,8 0,7 Sensitivitet (sant positive) 0,6 0,5 0,4 Ingen forskjell Architect AxSYM 0,3 0,2 0, ,2 0,4 0,6 0, Spesifisitet (falskt positive) n = 995 ARCHITECT Anti-CCP AxSYM Anti-CCP Positiv Negativ Positiv Negativ Totalt n % positivt samsvar (95 % CI a ) % negativt samsvar (95 % CI a ) % samsvar totalt (95 % CI a ) Ikke-RA (66,4 100) 100 (99,2 100) 100 (99,3 100) RA ,9 (97,1 99,7) 97,9 (94,1 99,6) 98,6 (97,1 99,4) Alle prøver ,9 (97,2 99,7) 99,5 (98,6 99,9) 99,3 (98,6 99,7) a CI = Konfidensintervall 7

8 REFERANSELISTE 1. Feldmann M, Brennan FM, Maini RN. Rheumatoid arthritis. Cell 1996;85: Landewé RB. The benefits of early treatment in rheumatoid arthritis: confounding by indication, and the issue of timing. Arthritis Rheum 2003;48(1): Lard LR, Visser H, Speyer I, et al. Early versus delayed treatment in patients with recent-onset rheumatoid arthritis: comparison of two cohorts who received different treatment strategies. Am J Med 2001;111: Arnett FC, Edworthy SM, Bloch DA, et al. The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum 1988;31(3): van Venrooij WJ, Hazes JM, Visser H. Anticitrullinated protein/ peptide antibody and its role in the diagnosis and prognosis of early rheumatoid arthritis. Neth J Med 2002;60(10): Nienhuis RL, Mandema E, Smids C. A new serum factor in patients with rheumatoid arthritis. The antiperinuclear factor. Ann Rheum Dis 1964;23: Young BJ, Mallya RK, Leslie RD, et al. Anti-keratin antibodies in rheumatoid arthritis. Br Med J 1979;2: Hoet RM, Boerbooms AM, Arends M, et al. Antiperinuclear factor, a marker autoantibody for rheumatoid arthritis: colocalisation of the perinuclear factor and profilaggrin. Ann Rheum Dis 1991;50: Sebbag M, Simon M, Vincent C, et al. The antiperinuclear factor and the so-called antikeratin antibodies are the same rheumatoid arthritisspecific autoantibodies. J Clin Invest 1995;95: Vossenaar ER, Zendman AJ, van Venrooij WJ, et al. PAD, a growing family of citrullinating enzymes: genes, features and involvement in disease. BioEssays 2003;25: Schellekens GA, de Jong BA, van den Hoogen FH, et al. Citrulline is an essential constituent of antigenic determinants recognized by rheumatoid arthritis-specific autoantibodies. J Clin Invest 1998;101(1): Schellekens GA, Visser H, de Jong BA, et al. The diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide. Arthritis Rheum 2000;43(1): Vossenaar ER, van Venrooij WJ. Anti-CCP antibodies, a highly specific marker for (early) rheumatoid arthritis. Clin Applied Immunol Rev 2004;4: Pruijn GJ, Vossenaar ER, Drijfhout JW, et al. Anti-CCP antibody detection facilitates early diagnosis and prognosis of rheumatoid arthritis. Current Rheumatology Reviews 2005;1(1): Nishimura K, Sugiyama D, Kogata Y, et al. Meta-analysis: diagnostic accuracy of anti-cyclic citrullinated peptide antibody and rheumatoid factor for rheumatoid arthritis. Ann Intern Med 2007;146(11): Combe B, Landewe R, Lukas C, et al. EULAR recommendations for the management of early arthritis: report of a task force of the European Standing Committee for International Clinical Studies Including Therapeutics (ESCISIT). Ann Rheum Dis 2007;66: US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne Pathogens. 18. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd. ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline- Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, et al. Sandwich type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal antibodies for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34(2): Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45: Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34(1): National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline-Second Edition. NCCLS document EP5-A2. Wayne, PA: NCCLS, National Committee for Clinical Laboratory Standards. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. NCCLS document EP17-A. Wayne, PA: NCCLS, National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline. NCCLS document EP6-A. Wayne, PA: NCCLS, Clinical and Laboratory Standards Institute. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP7-A2. Wayne, PA: CLSI, ARCHITECT og AXSYM er varemerker for Abbott Laboratories i ulike jurisdiksjoner. Alle varemerker tilhører de respektive eierne. ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany Produseres av Axis-Shield Diagnostics Ltd, Dundee, UK for Abbott Distribueres i USA av Abbott Laboratories Abbott Park, IL USA Desember , 2012 Abbott Laboratories 8