BARB. Control Set DAT I PreciNeg DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciNeg DAT Clinical (2 x 10 ml)

Transkript

1 Ordreinformasjon Analyseinstrument(er) hvor cobas c kassetten kan brukes ONLINE DAT 200 analyser System ID Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/ Preciset DAT Plus I kalibratorer, CAL 1 6 (6 x 5 ml) Kode C.f.a.s. DAT Qualitative Plus (6 x 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical (3 x 5 ml) Kode Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT I PreciNeg DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciNeg DAT Clinical (2 x 10 ml) Norsk Systeminformasjon For cobas c 311/501 analyseinstrumenter: BA2QP: ACN 572: til kvalitativ analyse BA2SP: ACN 573: til semikvantitativ analyse BA2QC: ACN 788: til kvalitativ analyse, bruk C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical For cobas c 502 analyseinstrument: BA2QP: ACN 8572: til kvalitativ analyse BA2SP: ACN 8573: til semikvantitativ analyse BA2QC: ACN 8788: til kvalitativ analyse, bruk C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical Tilsiktet bruk () er en in vitro-diagnostisk analyse til kvalitativ og semikvantitativ påvisning av barbiturat i human urin på Roche/Hitachi cobas c systemer ved en cutoff på 200. Semikvantitative analyseresultater gjør det mulig for laboratoriene å inkludere analysen som en del av et kvalitetskontrollprogram. Semikvantitative metoder skal gi en riktig fortynning av prøver som skal bekreftes av en bekreftende metode som f.eks. gasskromatografi/massespektrometri (GC/MS). gir kun et foreløpig analyseresultat. Det skal brukes en alternativ mer spesifikk kjemisk metode for å få et bekreftet analyseresultat. GC/MS er den foretrukne bekreftende metoden. 1 Klinisk betraktning og profesjonell vurdering skal brukes ved alle analyseresultater av misbruksstoffer, særlig når det gjelder foreløpige positive resultater. Sammendrag Barbiturater, en klasse av stoffer avledet av barbitursyre (malonylurea), er beroligende hypnotika med en hemmende virkning på aktiviteten i sentralnervesystemet (SNS). 1,2,3,4,5,6 Som SNS depressive stoffer klassifiseres de etter varigheten av virkningen (ultrakort, kort, middellang og lang). Medisinsk har de tidligere vært brukt som sedativa for å minske følelsesmessig spenning, som sovemiddel, og ved visse typer epilepsi for å reduserer hyppigheten av anfall ved å forhøye anfallstersklen. For høye doser forårsaker nedsatt motorisk koordinasjon (utydelig tale, dårlig balanse), persepsjonsendringer (feilvurdering av situasjoner, overdreven ytelsesvurdering) og ekstrem eufori. Overdose kan medføre stupor, koma og død. Bruk av barbiturater kombinert med alkohol, opiater eller andre SNS depressive stoffer kan føre til dødelig additiv respirasjonsdepresjon. Selv om bruken som beroligende hypnotika mye er erstattet av benzodiazepiner, spiller barbiturater fremdeles en viktig rolle som anestetika og antiepileptika. Oralt inntak er mest vanlig, selv om barbiturater kan injiseres intravenøst eller intramuskulært. Etter inntak absorberes de raskt fra magen og videre til blodbanen. Fordelingen og konsentrasjonen i forskjellige vevstyper avhenger i høy grad av de forskjellige lipidoppløselige og proteinbindendekarakteristika til barbituratene. Fettdepoter og proteinrikt vev kumulerer høyest konsentrasjon. De fleste barbiturater metaboliseres i leveren via oksidasjon og konjugering, nitrogendealkylering, nitrogenhydroksylering og/eller avsvovling av thiobarbiturater. Omfanget av metabolismen i leveren avhenger av det gjeldende secobarbital. F.eks. oksideres secobarbital i stor utstrekning til en rekke farmakologisk inaktive metabolitter, mens en relativ høy prosentdel av fenobarbital og barbital hovedsakelig utskilles uendret i urin. Barbituratene utskilles som en blanding av aktive stoffer og metabolitter, hvor forhold og konsentrasjon avhenger av det gjeldende barbiturat. Analyseprinsipp Analysen er basert på kinetisk interaksjon av mikropartikler i en løsning (KIMS) 7,8 målt ved endringer i lystransmissjonen. I en prøve uten misbruksstoffer binder de frie antistoffer seg til misbruksstoff mikropartikkelkonjugat som fører til dannelse av partikkelaggregater. I en prøve uten misbruksstoffer vil aggregatreaksjonen fortsette og absorbansen øke. I en urinprøve med det gjeldende misbruksstoff konkurrerer misbruksstoffet med det partikkelbundne stoffderivat om de frie antistoffene. Antistoffer som bindes til det stoffet som finnes i prøven, er ikke lengre tilgjengelig for dannelse av partikkelaggregater, og den etterfølgende dannelsen av partikkelkompleks hemmes. Når en prøve inneholder misbruksstoffer reduseres stigningen i absorbans i forhold til konsentrasjonen av misbruksstoff i prøven. Innholdet av misbruksstoff i en prøve bestemmes ved å sammenligne med den verdi som er funnet for en kjent cutoffkonsentrasjon av misbruksstoff. Reagenser - arbeidsløsninger R1 R2 R3 Buffer; 0.09 % natriumazid Secobarbital polyklonalt antistoff (sau); buffer; bovint serumalbumin; 0.09 % natriumazid Konjugert secobarbitalderivatmikropartikler; buffer; bovint serumalbumin, 0.09 % natriumazid R1 er i posisjon B, R2 er i posisjon C og R3 er i posisjon A. Forholdsregler og advarsler Til in vitro-diagnostisk bruk. Ta de vanlige forholdsregler som er nødvendig ved håndtering av alle laboratoriereagenser. Fjerning av alle avfallsmaterialer skal følge lokale retningslinjer. HMS-Datablad er tilgjengelig på forespørsel. Reagenshåndtering Klar til bruk Vend forsiktig reagensflasken flere ganger før bruk, for å sikre at reagenskomponentene er blandet. Oppbevaring og holdbarhet Holdbarhet ved 2 8 C: I bruk og avkjølt på instrumentet: Må ikke fryses. Se utløpsdatoen på etiketten på cobas c pack 8 uker Prøvetaking og -forberedelse Kun de nedenfor oppførte prøvematerialer er analysert og funnet akseptable. Urin: Urinprøver oppsamles i rene glass eller plastbeholdere. Friske urinprøver krever ikke spesiell håndtering eller forbehandling, men det er viktig å holde pipetterte prøver fri for bunnfall. Prøver bør ligge innenfor det normale fysiologiske ph-området på 5 8. Tilsetningsstoffer eller konserveringsmiddel er ikke nødvendige. Det anbefales å oppbevare urinprøver ved 2 8 C og analysere de innen 5 dager etter oppsamling. 9 Ved lengre oppbevaring anbefales frysing av prøvene. 1 / 5

2 Sentrifuger meget uklare prøver før analysering. Manipulering eller fortynning av prøven kan gi feilaktige resultater. Ved mistanke om manipulering skal det tas en ny prøve. Kontroll av prøvenes validitet er nødvendig for prøver tatt i henhold til Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 10 FORSIKTIG: Prøvefortynninger bør kun brukes for å tolke resultater med Calc.? og Samp.?-alarmer eller ved estimering av konsentrasjonen til bruk ved GC/MS. Resultater av fortynnede prøver er ikke egnet som pasientverdier. Hvis det brukes fortynningsprosedyrer, skal de valideres. Medfølgende materialer Vennligst se avsnittet "Reagenser - arbeidsløsninger" med hensyn til reagenser. Nødvendige (men ikke medfølgende) materialer Se avsnittet "Ordreinformasjon" Alminnelig laboratorieutstyr Analyse For en optimal ytelse av analysen skal anvisningene for det aktuelle analyseinstrument følges. Vennligst se den aktuelle brukermanualen for instrumentspesifikke analyseinstruksjoner. Ytelse av applikasjoner som ikke er validert av Roche kan ikke garanteres og må defineres av brukeren. Applikasjon til urin Annuller Automatic Rerun (automatisk reanalysering) for disse applikasjonene i menyen Utility, skjermbildet Application, knappen Range. cobas c 311 analysedefinisjon Analysetype Bølgelengde (sekundær/ primær) Semikvantitativ Kvalitativ 10 / / /505 nm /505 nm Reaksjonsretning Stigende Stigende Enhet mabs Avpipettering av reagens R1 59 µl R2 59 µl R3 52 µl Diluent (H 2 O) Prøvemengder Prøve Prøvefortynning Prøve Diluent (NaCl) Normal 2.5 µl Redusert 2.5 µl Forøket 2.5 µl cobas c 501/502 analysedefinisjon Analysetype Bølgelengde (sekundær/ primær) Semikvantitativ Kvalitativ 10 / / /505 nm /505 nm Reaksjonsretning Stigende Stigende Enhet mabs Avpipettering av reagens R1 59 µl R2 59 µl R3 52 µl Diluent (H 2 O) Prøvemengder Prøve Prøvefortynning Prøve Diluent (NaCl) Normal 2.5 µl Redusert 2.5 µl Forøket 2.5 µl Kalibrering Kalibratorer Kalibrering K Faktor Reaksjonstid/målepunkter Reaksjonstid/målepunkter Kalibreringsmetode Kalibreringsintervall Semikvantitativ applikasjon S1 4: Preciset DAT Plus I kalibratorer, (CAL 1 4) 0, 100, 200, 400 Kvalitativ applikasjon S1: C.f.a.s. DAT Qualitative Plus, C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical eller Preciset DAT Plus I kalibrator, CAL Stoffkonsentrasjonene i kalibratorene er verifisert med GC/MS. Tast inn K Faktor som for den kvalitative applikasjon i menyen Calibration, skjermbildet Status, vinduet Calibration Result. Semikvantitativ applikasjon Result Calculation Mode (RCM) a Kvalitativ applikasjon Lineær Full kalibrering (semikvantitativ) eller blankkalibrering (kvalitativ) - etter skifte av reagenslot - som påkrevet ifølge kvalitetskontrollprosedyrene a) Se avsnittet resultater. Sporbarhet: Denne metode er standardisert opp mot en primær referansemetode (GC/MS). Kvalitetskontroll Bruk det kontrollmaterialet som er oppført i avsnittet "Ordreinformasjon", til kvalitetskontroll. I tillegg kan andre egnede kontrollmaterialer brukes. Kontrollintervallene og -grensene bør tilpasses hvert enkelt laboratoriums individuelle krav. Oppnådde kontrollverdier skal ligge innenfor definerte grenser. Hvert laboratorium bør innføre korrigerende tiltak dersom verdier faller utenfor de definerte grensene. Stoffkonsentrasjonene i Control Set DAT I og Clinical er verifisert med GC/MS. Følg gjeldende offentlige forskrifter og lokale retningslinjer for kvalitetskontroll. Resultater Til den kvalitative analysen brukes cutoff-kalibratoren som referanse for å skille mellom foreløpige positive og negative prøver. Prøver med en positiv eller 0 absorbansverdi betraktes som foreløpige positive. Foreløpige 2 / 5

3 positive prøver flagges med >Test. Prøver med en negativ absorbansverdi betraktes som negative. Negative prøver markeres med et minustegn. Semikvantifisering av foreløpige positive resultater bør bare brukes av laboratoriene til å bestemme en egnet fortynning av prøver til bekreftelse ved hjelp av en bekreftende metode som f.eks. GC/MS. Laboratoriet kan også fastsette kvalitetskontrollprosedyrer og vurdere kontrollfunksjonen. Til den semikvantitative analysen fremstiller analyseinstrumentet en kalibreringskurve ut fra absorbansmålinger av standardene ved hjelp av en 4-parameters logit log fit-funksjon (RCM). Logit log funksjonen trekker en jevn linje gjennom målepunktene. Analyseinstrumentet bruker absorbansmålingene av prøvene til å beregne konsentrasjonen av misbruksstoff eller metabolitt ved å interpolere logit log fit-funksjonen. VIKTIG: Hvis det kommer et resultat med Calc.? eller Samp.?-alarm, skal Reaction Monitor data for prøven kontrolleres og sammenliknes med Reaction Monitor data for den høyeste kalibrator. Den mest sannsynlige årsak er en høy konsentrasjon av analytt i prøven. I dette tilfellet vil absorbansverdien for prøven være mindre enn absorbansverdien for den høyeste kalibrator. Lag en passende fortynning av prøven med 0 kalibratoren og reanalyser prøven. En normal misbruksstoffri urin kan brukes i stedet for 0 -kalibratoren, hvis urinen og prosedyren er validert av laboratoriet. For å sikre at prøven ikke er fortynnet for mye, skal resultatet for den fortynnede prøven før multiplikasjon med fortynningsfaktoren være minst det halve av cutoff-verdien for analytten. Hvis resultatet for den fortynnede prøven ligger under halvdelen av cutoffverdien for analytten, skal prøven reanalyseres med en mindre fortynning. En fortynning med et resultat tett på cutoff for analytten gir den mest nøyaktige verdi. For å beregne konsentrasjonen av den foreløpige positive prøven skal resultatet multipliseres med fortynningsfaktoren. Fortynninger bør kun brukes for å tolke resultater med Calc.? eller Samp.?-alarmer eller ved estimering av konsentrasjonen til bruk ved GC/MS. Ved rapportering av resultater vær oppmerksom på at det er forskjellige faktorer som påvirker urinanalyseresultater f.eks. væskeinntak og andre biologiske faktorer. Som for alle sensitive analyser av misbruksstoffer på automatiserte kliniskkjemiske analyseinstrumenter er det en risiko for carry over fra en prøve med ekstrem høy konsentrasjon til en normal (negativ) prøve som kommer umiddelbart etter. Alle foreløpige positive resultater skal bekreftes med en annen metode. Begrensninger - interferens 11 Se avsnittet "Spesifikk ytelsesevne" i dette dokumentet for opplysninger om stoffer som er testet med denne analysen. Andre stoffer og/eller faktorer kan interferere med analysen og gi feilaktige resultater (f.eks. tekniske eller prosedyremessige feil). Et positivt resultat indikerer tilstedeværelse av barbiturat og/eller dens metabolitter i urin. Det avspeiler ikke graden av intoksikasjon. Interfererende stoffer ble tilsatt stoffri urin i den nedenfor oppførte konsentrasjon. Disse prøvene ble deretter beriket med en secobarbitalstamløsning til 200. Prøvene ble testet i tredobbelt bestemmelse (n = 3) på et Roche/Hitachi cobas c 501 analyseinstrument. Medianen av % gjenfinning ble beregnet og er oppført under. Substans Analysert konsentrasjon % Barbiturater gjenfinning Aceton 1 % 97 Askorbinsyre 1.5 % 93 Bilirubin 0.25 mg/ml 98 Kreatinin 5 mg/ml 100 Etanol 1 % 100 Glukose 2 % 100 Hemoglobin 7.5 g/l 101 Humant albumin 0.5 % 99 Oksalsyre 2 mg/ml 104 Natriumklorid 0.5 M 105 Natriumklorid 1 M 110 Urea 6 % 103 Til diagnostiske formål skal resultatene alltid sees i sammenheng med pasientens anamnese, kliniske undersøkelser og andre resultater. NØDVENDIG HANDLING Spesielle vaskeprogrammer: Bruk av spesielle vaskesyklus anbefales når visse analysekombinasjoner utføres på Roche/Hitachi cobas c systemene. Seneste versjon med oversikt over analyser med risiko for carry over er oppført i metodearkene i NaOHD/SMS/Multiclean/SCCS eller NaOHD/SMS/SmpCln1+2/SCCS. For ytterligere veiledning vises til brukermanualen. cobas c 502 analyseinstrument: Alle spesielle vaskeprogrammeringer som er nødvendig for å unngå carry over, er tilgjengelig via cobas link. De er det ikke nødvendig å taste inn manuelt. Ved behov skal spesielle vaske/carry over program implementeres før det rapporteres resultater på denne analysen. Referanseintervaller Kvalitativ analyse Resultater med denne analyse skiller kun mellom foreløpige positive ( 200 ) og negative prøver. Mengden av stoff i en foreløpig positiv prøve kan ikke beregnes. Semikvantitative analyse Resultater med denne analyse gir kun omtrentlige kumulative konsentrasjoner av stoffet og metabolitter av dette (se avsnittet "Analytisk spesifisitet"). Spesifikk ytelsesevne Representativ ytelsesevne på et Roche/Hitachi instrument er oppført nedenfor. Resultatene kan variere fra laboratorium til laboratorium. Presisjon Presisjon er fastsatt ifølge en intern protokoll ved å kjøre en serie av kalibrator og kontroller (repeterbarhet n = 20, intermediær presisjon n = 100). Følgende resultater ble oppnådd på et Roche/Hitachi cobas c 501 analyseinstrument: Semikvantitativ presisjon Repeterbarhet Middel SD Nivå Nivå Nivå Intermediær presisjon Middel SD Nivå Nivå Nivå Kvalitativ presisjon Cutoff (200) Antall analysert Korrekte resultater Konfidensnivå 0.75x > 95 % negativt resultat 1.25x > 95 % positivt resultat Nedre deteksjonsgrense for analysen 5.1 Den nedre deteksjonsgrensen representerer den lavest målbare konsentrasjonen som kan skilles fra null. Den beregnes som den verdien som ligger 2 standardavvik over den laveste standard (standard SD, repeterbarhet, n = 21). Nøyaktighet 100 urinprøver fra et klinisk laboratorium hvor de ble screenet negative for et panel av stoffer, ble evaluert med analysen. 100 % av disse normale urinprøvene var negative ved en cutoff på prøver fra et klinisk laboratorium hvor de ble screenet foreløpig positive med en kommersiell tilgjengelig immunologisk analyse og etterfølgende bekreftet med GC/MS, ble evaluert med analysen. 100 % av disse prøvene var positive ved en cutoff på 200. I tillegg ble 10 prøver fortynnet til en barbituratkonsentrasjon på ca % av cutoffkonsentrasjonen og 10 prøver ble fortynnet til en barbituratkonsentrasjon på CV % CV % 3 / 5

4 ca % av cutoff-konsentrasjonen. Data fra nøyaktighetsstudiene over som lå i området omkring cutoff, ble sammenlignet med data fra de fortynnede positive urinprøver. Følgende resultater ble oppnådd med analysen på et Roche/Hitachi 917 analyseinstrument sammenliknet med GC/MS-verdier. klinisk korrelasjon (cutoff = 200 ) Negative prøver GC/MS-verdier () Nær cutoff > 7500 Roche/Hitachi analyseinstrument Ytterligere kliniske prøver ble evaluert med denne analysen på et Roche/Hitachi cobas c 501 analyseinstrument og et Roche/Hitachi 917 analyseinstrument. 100 urinprøver fra et klinisk laboratorium hvor de ble screenet negative for et panel av stoffer, ble evaluert med analysen. 100 % av disse normale urinprøvene var negative. Dette samsvarer med resultatene fra Roche/Hitachi 917 analyseinstrumentet. 55 urinprøver fra et klinisk laboratorium hvor de ble screenet foreløpig positive med en kommersiell tilgjengelig immunologisk analyse og etterfølgende bekreftet med GC/MS, ble evaluert med analysen. 100 % av prøvene var positive på både Roche/Hitachi cobas c 501 analyseinstrumtet og Roche/Hitachi 917 analyseinstumentet. korrelasjon (cutoff = 200 ) Roche/Hitachi 917 analyseinstrument + - cobas c analyseinstrument Analytisk spesifisitet Spesifisiteten av denne analyse for noen vanlige barbiturater og strukturelt liknende forbindelser ble bestemt ved å danne hemningskurver for hver av de nevnte forbindelser og bestemme den omtrentlige konsentrasjon av hver forbindelse som svarer til analysereaktiviteten av cutoff på 200 for secobarbital analysen. Følgende resultater ble oppnådd på et Roche/Hitachi 917 analyseinstrument. Forbindelse svarende til 200 Secobarbital Omtrentlig % kryssreaktivitet Syklopentobarbital Aprobarbital Butalbital Allobarbital Butabarbital Pentobarbital Amobarbital Fenobarbital p hydroksyfenobarbital Barbital ,3 Dimetylbarbitursyre > Metylfenobarbital > < 0.1 Barbitursyre > < 0.01 Heksobarbital > < 0.01 Difenylhydantoin > < 0.02 Glutetimid > < 0.04 Medikamentinterferens Følgende forbindelser ble forberedt i mindre porsjoner av normal human urinpool for å få en sluttkonsentrasjon på Ingen av disse forbindelsene ga verdier med analysen som var større enn % kryssreaktivitet. Acetaminofen Acetylsalisylsyre Aminopyrin Amitriptylin d amfetamin l amfetamin Ampicillin Askorbinsyre Aspartam Atropin Benzokain Benzoylecgonin (kokain metabolitt) Benzfetamin Kaffein Klorkalk Klordiazepoksid Klorokin Klorfeniramin Klorpromazin Kokain Kodein Desipramin Dekstrometorfan Dekstropropoksyfen Diazepam Difenhydramin Dopamin Doxepin Ecgonin Ecgoninmetylester d efedrin d,i efedrin I efedrin Efedrin Erytromycin Østriol Fenoprofen Furosemid Gentisinsyre Guaiacolglyseroleter Hydroklorotiazid p hydroksiamfetamin Ibuprofen Imipramin Isoproterenol Ketamin Lidokain LSD MDA MDMA Melanin Petidin Metadon d metamfetamin l metamfetamin Metakvalon Metylfenidat Metyprylon Morfin Nalokson Naltrekson Naproksen Niacinamid Noretindron I norpseudoefedrin Nortriptylin Oksazepam Penicillin G Fensyklidin ß fenetylamin Fenotiazin Fentermin Fenylbutazon d fenylpropanolamin d,i fenylpropanolamin Prokain Prometazin d pseudoefedrin I pseudoefedrin Quinidine Kinin Sulindak Tetrasyklin Δ 9 THC 9 karboksylsyre Tetrahydrozolin Trifluoperazin Trimipramin Tyramin Verapamil 4 / 5

5 Referanser 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Wesson DR, Smith DE. Barbiturates: Their Use, Misuse, and Abuse. New York, NY: Human Sciences Press Robinson AE, McDowall RD. The distribution of amylobarbitone, butobarbitone, pentobarbitone and quinalbarbitone and the hydroxylated metabolites in man. J Pharm Pharmacol 1979;31: Hardman JG, Limbird LE, Gilman A, eds. Goodman and Gilman s The Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th ed. New York, NY: McGraw Hill Pub Co Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications Barbiturates - A Medical Dictionary, Bibliography, and Annotated Research Guide to Internet Reference. San Diego, CA: ICON Group International Inc Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38: Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Hubster EC, et al. Enzyme immunoassay, kinetic microparticle immunoassay, radioimmunoassay, and fluorescence polarization immunoassay compared for drugs-ofabuse screening. Clin Chem 1993;39: Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27: Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: Data on file at Roche Diagnostics. Et punktum (punktum/stopp) brukes alltid i dette metodearket som desimalskilletegn for å skille mellom heltalls- og fraksjonsdelen av et desimaltall. Skilletegn for tusengrupper brukes ikke. Symboler Roche Diagnostics bruker følgende symboler og tegn i tillegg til de som er listet opp i ISO standarden Pakningsinnhold Volum etter rekonstitusjon eller blanding Vesentlige tilføyelser eller endringer er merket med en strek i margen. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribueres i USA av: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN US Customer Technical Support / 5