DRI Amphetamines Assay

Transkript

1 Amphetamines Assay Kun Rx For in vitro-diagnostikk (3 x 18 ml) 0017 (100 ml Kit) 0018 (500 ml Kit) Tiltenkt bruk Amphetamines Assay er ment for kvalitativ eller semi-kvantitativ bestemmelse av amfetaminer i human urin. Analyseområdet er med grensenivåene ng/ ml. Analysen gir en enkel rask analytisk screeningprosedyre for å påvise amfetaminer i human urin. Analysen gir kun et foreløpig analytisk testresultat. Det må brukes en spesifikk, alternativ, kjemikaliebasert metode for å få et bekreftet analytisk resultat. Gasskromatrafi/ massespektrometri () er den foretrukne bekreftelsesmetoden. 1,2 Kliniske vurderinger faglig skjønn må legges til grunn for alle resultater av testing for misbruk av narkotiske stoffer, særlig når man benytter foreløpige positive resultater. Sammendrag forklaring av testen Amfetaminer er syntetiske derivater av efedrin. De vanligste amfetaminene inkluderer d-amfetamin, d-metamfetamin d,l-amfetamin. De stimulerer sentralnervesystemet. Amfetamin er det mest sympatomimetiske aminet. 3,4 Når amfetamin inntas, blir det enten raskt deaktivert i leveren eller utskilt uendret i urin. Andre efedrinderivater som metamfetamin kan metaboliseres skilles ut i urin som amfetamin. 5 Amphetamines Assay er en immunanalyse med homent enzym i væskeform, som er klar til bruk. 6 Analysen benytter spesifikke antistoffer som kan påvise amfetamin /eller metamfetamin i urin, med minimal kryssreaktivitet med ulike reseptfrie, strukturelt ikke-relaterte forbindelser. Analysen er basert på konkurranse mellom et stoff merket med glukose-6-fosfatdehydrenase (G6PDH) stoff fra urinprøven om et bestemt antall spesifikke steder som binder antistoffer. Hvis det ikke er fritt stoff i prøven, vil det spesifikke antistoffet binde stoffet merket med G6PDH, noe som gir redusert enzymaktivitet. Hvis det finnes fritt stoff i prøven, tar det frie stoffet opp stedene som binder antistoffer, noe som lar stoffet merket med G6PDH, reagere med substratet, dette resulterer i enzymaktivitet. Dette fenomenet skaper en direkte forbindelse mellom stoffkonsentrasjonen i urinen enzymaktiviteten. Enzymaktiviteten bestemmes med spektrofotometri ved 340 nm gjennom måling av enzymets evne til å omdanne nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD) til NADH. FARE: Forholdsregler advarsler 1. Denne testen er kun for in vitro-diagnostikk. Reagensene er skadelige hvis de svelges. 2. Reagensene som brukes i analysekomponentene, inneholder 0,09 % natriumazid, som kan reagere med bly- eller kobberrør danne potensielt eksplosive metallazider. Ved kasting av slike reagenser må du alltid skylle med en stor mengde vann for å hindre opphopning av azider. 3. Amphetamines Assay (100 ml) inneholder 0,5 % medikamentspesifikt antistoff 0,2 % bovint serumalbumin (BSA). 4. Ikke bruk reagenser etter utløpsdatoen. H317 Kan utløse en allergisk hudreaksjon. H334 Kan gi allergi eller astmasymptomer eller pustevansker ved innånding. Unngå innånding av tåke/damp. Tilsølte arbeidsklær må ikke fjernes fra arbeidsplassen. Benytt vernehansker/vernebriller/ansiktsskjerm. Ved utilstrekkelig ventilasjon skal åndedrettsvern benyttes. VED HUDKONTAKT: Vask med mye såpe vann. VED INNÅNDING: Hvis det blir tungt å puste, skal offeret bæres ut i frisk luft legges i en hvilestilling som gjør det komfortabelt å puste. Ved hudirritasjon eller utslett: Søk legehjelp. Ved symptomer i luftveiene: Kontakt et GIFTINFORMASJONSSENTER eller lege. Tilsølte klær må vaskes før de brukes på nytt. Innhold/ beholder skal kasseres i henhold til lokale/regionale/nasjonale/internasjonale bestemmelser. Reagenser Antistoff/substrat-reagens: Inneholder monoklonale anti-amfetamin-antistoffer, glukose-6-fosfat (G6P) nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD) i Tris-buffer med natriumazid som konserveringsmiddel. Enzymkonjugat-reagens. Inneholder amfetaminer merket med glukose-6-fosfat-dehydrenase (G6PDH) i Tris-buffer med natriumazid som konserveringsmiddel. Klargjøring oppbevaring av reagens Reagensene er klare til bruk. Det kreves ingen klargjøring av reagenser. Alle analysekomponentene er stabile til utløpsdatoen som er angitt på etiketten, forutsatt at de oppbevares ved 2 8 C. Ytterligere materialer som er nødvendig (men som ikke følger med): Beskrivelse av settet 1664 Negative Calibrator, 10 ml 1388 Negative Calibrator, 25 ml 1588 Multi-Drug Calibrator 1, 10 ml 1589 Multi-Drug Calibrator 1, 25 ml 1591 Multi-Drug Calibrator 2, 10 ml 1592 Multi-Drug Calibrator 2, 25 ml 1594 Multi-Drug Calibrator 3, 10 ml 1595 Multi-Drug Calibrator 3, 25 ml 1597 Multi-Drug Calibrator 4, 10 ml 1598 Multi-Drug Calibrator 4, 25 ml DOAT-2 MAS DOA Total Level 2, 6 x 18 ml DOAT-3 MAS DOA Total Level 3, 6 x 18 ml DOAT-4 MAS DOA Total Level 4, 6 x 18 ml DOAT-5 MAS DOA Total Level 5, 6 x 18 ml Innhenting håndtering av prøvemateriale Innhent urinprøver i beholdere av plast eller glass. Vær nøye med å bevare den kjemiske integriteten til urinprøven fra innhentingstidspunktet til analysen utføres. Prøver som oppbevares ved romtemperatur ikke gjennomgår en innledende test innen 7 dager 7 fra de ankommer laboratoriet, må plasseres i en sikker kjøleenhet ved 2 8 C i flere uker. 8 For lengre lagring før analyse eller for oppbevaring av prøven etter analyse kan urinprøver lagres ved 20 C. 9 Undersøkelser har vist at amfetaminanalytter i urin er stabile på ubestemt tid ved 20 C. 8 Laboratorier som følger de obligatoriske SAMHSA-retningslinjene, bør referere til SAMHSAkravene "Short-Term Refrigerated Storage" "Long-Term Storage". 10 For å beskytte integriteten til prøven må man ikke fremkalle skumdannelse unngå gjentatt frysing opptining. Hold pipetterte prøver frie for store rester. Det anbefales å sentrifugere ekstremt uklare prøver før analysering. Frosne prøver må tines opp blandes før analyse. Uttynning av urinprøven kan gi feilaktige resultater. Innhent en ny prøve ved mistanke om uttynning, send begge prøver til testing i laboratoriet. Alle urinprøver skal håndteres som om de er potensielt smittefarlige. Analyseprosedyre Analyseapparater som kan opprettholde en konstant temperatur, pipettere prøver, blande reagenser, måle enzymhastigheter ved 340 nm beregne reaksjonen nøyaktig, kan brukes til å utføre denne analysen. Se det analysatorspesifikke protokollarket, som inneholder parametre /eller ytterligere instruksjoner, før analysen utføres. Kvalitetskontroll kalibrering I henhold til god laboratoriepraksis bør det brukes kontrollprøver for å sikre tilfredsstillende analyseytelse. Bruk kontroller nær kalibratoren for å validere kalibreringen. Kontrollresultatene må være innenfor laboratoriets etablerte områder, som fastsatt i laboratoriets prosedyrer retningslinjer. Hvis resultatene faller utenfor de etablerte områdene, er analyseresultatene ugyldige. Alle påkrevde kvalitetskontroller skal utføres i med lokale, regionale /eller nasjonale bestemmelser godkjenningskrav. Hvert laboratorium bør etablere sine egne kalibrerings- kontrollrutiner. Kvalitativ analyse Bruk Multi-Drug Urine Calibrator 1 eller 2 for kvalitativ analyse av prøver. Calibrator 1 inneholder 500 d-metamfetamin, som brukes som en grensereferanse for å skille mellom positive negative prøver for en på 500. Calibrator 2 inneholder 1000 d-metamfetamin, som brukes som en grensereferanse for å skille mellom positive negative prøver for en på Semi-kvantitativ analyse Bruk alle kalibratorene for semi-kvantitativ analyse. Resultater forventede verdier Kvalitative resultater En prøve som viser en endring i absorbansverdi ( A) som er større enn eller lik verdien som er oppnådd med kalibratoren, vurderes som positiv. En prøve som viser en endring i absorbansverdi ( A) som er mindre enn eller lik verdien som er oppnådd med kalibratoren, vurderes som negativ.

2 Semi-kvantitative resultater Et omtrentlig anslag av stoffkonsentrasjon i prøven kan fås ved å kjøre en standardkurve med alle kalibratorer deretter kvantitere prøver fra standardkurven. Prøveresultater over den høye kalibratoren må tynnes ut med negativ urin testes på nytt. Med semi-kvantitering av positive resultater kan laboratorier fastslå en passende fortynning av prøven for bekreftelse ved hjelp av en bekreftelsesmetode som. Det gir så laboratoriet mulighet til å etablere prosedyrer for kvalitetskontroll vurdere kontrollresultater. Begrensninger 1. Et positivt resultat fra denne analysen angir bare forekomst av amfetamin eller metamfetamin, er ikke nødvendigvis med graden av fysioliske psykoliske virkninger. 2. Et positivt resultat av denne analysen må bekreftes av en annen, ikke-immunolisk metode, for eksempel GC TLC eller. 3. Testen er kun beregnet på bruk med human urin. 4. Det er mulig at andre stoffer /eller faktorer (f.eks. tekniske eller prosedyremessige) som ikke er oppført i spesifisitetstabellen, kan påvirke testen forårsake feilaktige resultater. Spesifikke ytelsesegenskaper Typiske ytelsesresultatdata oppnådd på en Beckman Coulter AU680-analysator vises nedenfor. 11 Fortynningsgjenvinning -linearitet En høy pasienturinprøve som inneholdt ca metamfetamin, ble fortynnet serielt med analyttfri urin i trinn på 10 % testet 5 ganger i semi-kvantitativ modus. Alle prøvene ble gjenvunnet med mindre enn ± 10 % feil i forhold til den forventede verdien, R-verdien var 0,9998. Presisjon Prøver tilsatt ulike mengder d-amfetamin d-metamfetamin ble testet i kvalitativ semikvantitativ modus ved bruk av CLSI (EP05-A2)-presisjonsprotokoll. 12 Prøvene ble testet med 2 replikater, to ganger per dag i 20 dager, totalt N = 80. Resultatene vises i de følgende tabellene. Kvalitativ analyse: Prøvekonsentrasjon, Antall bestemmelser d-amfetamin / 0 80 / / 0 80 / / 0 80 / / / / / / 80 0 / / 80 0 / 80 d-metamfetamin / 0 80 / / 0 80 / / 0 80 / / / / / / 80 0 / / 80 0 / 80 Semi-kvantitativ analyse: Prøvekons., Resultatgjennomsnitt, Innen-kjøringpresisjon Total presisjon d-amfetamin ,9 9,0 6,2 10,1 6,9 80 / 0 80 / ,8 10,2 2,7 10,9 2,9 80 / 0 80 / ,9 11,2 1,6 13,5 2,0 0 / / ,4 14,1 1,8 17,6 2,3 0 / / ,9 23,6 1,8 28,4 2,2 0 / 80 0 / ,6 23,0 1,6 32,0 2,2 0 / 80 0 / 80 Tabell forts. Prøvekons., Resultatgjennomsnitt, Innen-kjøringpresisjon Total presisjon d-metamfetamin ,4 7,4 4,4 9,3 5,5 80 / 0 80 / ,8 8,0 2,0 11,1 2,8 80 / 0 80 / ,1 9,6 1,5 12,1 1,9 0 / / ,4 9,7 1,3 11,8 1,5 0 / / ,1 15,5 1,2 18,9 1,5 0 / 80 0 / ,1 21,4 1,4 27,3 1,8 0 / 80 0 / 80 Karakterisering av Prøver nær nivåene ble fremstilt ved å tilsette d-amfetamin d-metamfetamin hver for seg til utvalg av negativ urin. Prøvene ble analysert 20 ganger i både kvalitativ semikvantitativ modus. I kvalitativ modus ble alle prøvene korrekt registrert, med negative prøver som gjenvant mindre enn kalibratorene positive prøver som gjenvant mer enn kalibratorene. I semi-kvantitativ modus gjenvant prøvene med mindre enn ± 12 % feil i forhold til de nominelle verdiene. Presisjonen for de 20 gjenmtatte prøvene var mindre enn 1 for kvalitativ modus mindre enn 4 for semi-kvantitativ modus. Nøyaktighet 160 kliniske urinprøver ble testet med Amphetamines-analyse på Beckman Coulter AU680. Resultatene vises i de følgende tabellene. Noen avvikende resultater ble oppnådd da analysen ble brukt til å påvise amfetamin- metamfetaminanalytter enkeltvis. Analysen kan påvise tilstedeværelse av både amfetamin- metamfetaminanalytter med 100 % kryssreaktivitet til begge stoffene. Dette innebærer at prøver testet foe én analytt kan gi falske positive resultater på grunn av tilstedeværelse av den andre analytten. Kvalitativ analyse: Det totale et mellom Amphetamines-analysen for amfetamin var 58,0 % for en på ,4 % for en på Stratifiserte resultater 500 grense med (mindre enn 50 %) 50 % ) Positiv ,0% Negativ ,7% 1000 ng grense Positiv ,5% Negativ ,9% 500 Kvalitativ Semi-kvantitativ analyse: Det totale et mellom Amphetamines-analysen for amfetamin var 58,0 % for en på ,7 % for en på

3 Stratifiserte resultater 500 grense (mindre enn 50 %) 50 % ) Positiv ,0% Negativ ,7% 1000 ng grense Positiv ,5% Negativ ,9% 500 Semi-kvantitativ Sammendrag av avvikende resultater for amfetamin Nøyaktighetsprøvene ble kategorisert basert bare på -konsentrasjonen av d-amfetamin. Tabellen nedenfor viser prøvene med d-amfetaminkonsentrasjoner under en der det observerte Amphetamines-analyseresultatet var positivt. -resultat Amfetamin 500 Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv a Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Tabell forts. -resultat Amfetamin 500 Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv

4 Tabell forts. -resultat Amfetamin 1000 Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv b Positiv Positiv Negativ Kvalitativ analyse: Det totale et mellom Amphetamines-analysen for metamfetamin var 87,4 % for en på ,4 % for en på Stratifiserte resultater 500 grense (mindre enn 50 %) 50 % ) med Positiv ,0% Negativ ,0% 1000 grense Positiv ,0% Negativ ,9% Stratifiserte resultater 500 grense 500 Kvalitativ (mindre enn 50 %) 50 % ) med Positiv ,0% Negativ ,0% 1000 ng grense Positiv ,0% Negativ ,1% 500 Semi-kvantitativ Sammendrag av avvikende resultater for metamfetamin: Nøyaktighetsprøvene ble kategorisert basert bare på -konsentrasjonen av d-metamfetamin. Tabellen nedenfor viser prøvene med d-metamfetaminkonsentrasjoner under en der det observerte Amphetamines Assay-resultatet var positivt. -resultat Amfetamin GC/ 500 Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv

5 Tabell forts. -resultat Amfetamin GC/ 500 Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv Positiv a Prøven inneholdt så MDA~288 MDMA~2530. b Prøven inneholdt så PPA ~1000 pseudoefedrin 40 µg/ml. Spesifisitet Analysens spesifisitet ble vurdert ved å teste ulike strukturelt relaterte urelaterte forbindelser for kryssreaktivitet. Den potensielt kryssreaktive forbindelsen ble tilsatt til utvalg av negativ urin ved de oppgitte konsentrasjonene testet i kvalitativ semi-kvantitativ modus. Prøver som testet positivt eller høyere enn en for konsentrasjon, ble ansett for å kryssreagere med analysen, prøver som testet negativt eller lavere enn en for konsentrasjon, ble ansett for å ikke ha noen kryssreaktivitet av betydning. De følgende opprinnelige forbindelsene metabolittene ga positive resultater når de ble testet med Amphetamines-analysen ved de konsentrasjonene som er oppført nedenfor. Forbindelse 500 for konsentrasjon 1000 for konsentrasjon d-amfetamin d-metamfetamin Metylendioksyamfetamin (MDA) Metylendioksymetamfetamin (MDMA) Strukturelt urelaterte forbindelser /eller legemidler brukt samtidig ga negative resultater ved de konsentrasjonene som er oppført nedenfor. Forbindelse 500 for konsentrasjon 1000 for konsentrasjon Acetaminofen Acetylsalisylsyre l-amfetamin Bensoylekgonin Bensfetamin Benzylpiperazin Bupropion Koffein Cetirizindihydroklorid Klorpromazin Kodein Dextrometorfan d-efedrin l-efedrin Tabell forts. Forbindelse 500 for konsentrasjon 1000 for konsentrasjon d,l-efedrin Fenfluramin Isomethepten Isoxsuprin Mepiridin Mefentermin Metadon l-metamfetamin Metapyrilen Metylfenidat Metronidazol Morfin Norpseudoefedrin Oxazepam Fensyklidin Fendimetrazin Fenetylamin Fenmetrazin Fenobarbital Fenothiazin Fentermin Fenylefrin Fenylpropanolamin Prokainamid Prometazin Propranolol d-pseudoefedrin l-pseudoefedrin Ranitidin Skopolamin Secobarbital Tioridazin Trifluoperazin Triflupromazin Tyramin OH-tyramin

6 Interferens De potensielle effektene av ph, endene eksene stoffer på gjenvinningen av amfetaminer ved hjelp av Amphetamines Assay ble vurdert ved å tilføre kjente mengder av potensielt interfererende stoffer til to prøver av urin uten stoffer som inneholder den høyeste konsentrasjonen av amfetamin metamfetamin som konsekvent gir et negativt resultat, den laveste konsentrasjonen av amfetamin metamfetamin som konsekvent gir et positivt resultat, innenfor ± 25 % fra en. Prøvene ble testet i både kvalitativ semikvantitativ modus. Det ble ikke observert interferens ved tilsettelse av forbindelsene opp til konsentrasjonsnivåene som er oppført i den følgende tabellen. Stoff: Amfetamin, Interferentforbindelse Konsentrasjon av forbindelse 500 (NEG/POS) 1000 (NEG/POS) Neg nivå Pos nivå Neg nivå Pos nivå Acetaminofen 100 µg Neg. Pos. Neg. Pos. Aceton 1 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Askorbinsyre 1 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Aspirin 100 µg Neg. Pos. Neg. Pos. Koffein 100 µg Neg. Pos. Neg. Pos. Kreatinin 500 mg/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Etanol 1 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Galaktose 10 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. -globulin 500 mg/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Glukose 3 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Referanser 1. Urine Testing for Drugs of Abuse. National Institute on Drug Abuse (NIDA). Research Monraph 73, Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Prrams. National Institute On Drug Abuse. Federal Register Vol. 73, No. 228, 2008: Julien RM. A Primer of Drug Action. 6th ed. New York, NY: WH Freeman & Co; Miller NS, Gold. Amphetamine and its derivatives. I: Giannini AJ, Slaby AE, eds. Drugs of Abuse. Oradell, NJ: Medical Economics Books; Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man, 5th ed. Foster City, CA: Chemical Toxicoly Institute; Rubenstein KE, Schneider RS, and EF Ullman: Homenous Enzyme Immunoassay: A New Immunochemical Technique. Biochem Biophys Res Commun. 1972:47, Jimenez, et al, Stability Studies of amphetamine and ephedrine derivatives in urine. Journal of Chromatraphy B, (2006) 84: Drugs of Abuse, Clinical Reference Laboratory, Inc., (2009) C52-A2, Toxicoly and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline Second Edition, Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) (April 2007). 10. Notice of Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Prram: Final Guidelines; Federal Register, Substance Abuse and Mental Health Administration (SAMHSA), (1994) 110 (June 9): Data på fil hos Micrenics Corporation, en del av Thermo Fisher Scientific. 12. Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline. 2nd ed. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS EP05-A2 Document Ordliste: Hemlobin 150 mg/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Humant serumalbumin 500 mg/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Ibuprofen 100 µg Neg. Pos. Neg. Pos. Oksalsyre 100 mg/dl Neg. Pos. Neg. Pos. ph-område 3 11 Neg. Pos. Neg. Pos. Riboflavin 7,5 mg/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Natriumklorid 1 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Egenvekt (alkoholkonsentrasjon) 1,004 1,038 g/ml Neg. Pos. Neg. Pos. Urea 1,25 g/dl Neg. Pos. Neg. Pos. Micrenics Corporation, en del av Thermo Fisher Scientific Kato Road Fremont, CA USA Kundestøtte teknisk støtte for USA: B R A H M S GmbH Neuendorfstrasse Hennigsdorf, Germany Oppdateringer knyttet til pakningsvedlegg finner du på: Andre land: Kontakt din lokale Thermo Fisher Scientific-representant NO 2017/08 6