IGGT. Immunglobulin G (turbidimetrisk) Ordreinformasjon. Spesifikke proteiner

Transkript

1 Ordreinformasjon REF CONTENT Immunoglobulin G (Turbidimetric) (100 analyser) System-ID Serum proteins T Standard (5 0.5 ml) System-ID Precinorm Protein (3 x 1 ml) System-ID Precinorm Protein (3 x 1 ml, for USA) System-ID Precinorm U (20 x 5 ml) System-ID Precinorm U (4 x 5 ml) System-ID Precipath Protein (3 x 1 ml) System-ID Precipath Protein (3 x 1 ml, for USA) System-ID PreciControl ClinChem Multi 1 (20 5 ml) System-ID PreciControl ClinChem Multi 1 (4 5 ml) System-ID PreciControl ClinChem Multi 1 (4 5 ml, for USA) System-ID PreciControl ClinChem Multi 2 (20 5 ml) System-ID PreciControl ClinChem Multi 2 (4 5 ml) System-ID PreciControl ClinChem Multi 2 (4 5 ml, for USA) System-ID NaCl Diluent 9 % (6 x 22 ml) System-ID Accelerator I (1 100 ml) System-ID Analyseinstrument(er) hvor cobas c kassetten kan brukes COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Norsk Systeminformasjon, ID (serum, plasma) C, ID (cerebrospinalvæske) Tilsiktet bruk In vitro-analyse til kvantitativ immunologisk bestemmelse av humant immunglobulin G i serum, plasma og cerebrospinalvæske på COBAS INTEGRA systemer. Sammendrag 1,2,3,4,5 Immunglobuliner beskytter kroppen mot fremmede organismer og aktive stoffer. Immunglobuliner inneholder en antigenbindende del (Fab-del) og en Fc-del hvor den sistnevnte kan reagere med celler i immunsystemet og komplementfaktorer. Immunglobulin Fab-delen gjenkjenner antigener i løsning (f.eks. toksiner) og antigener assosiert med mikroorganismer (f.eks. bakterier, virus). Antigen-bindingsplassen kan starte en direkte nøytralisering av toksiner, sensibilisering av immunkompetente celler, reduksjon av viral smitsomhet eller utvikling av en inflammatorisk reaksjon. Som et normalt resultat på infeksjon stiger konsentrasjonen av alle immunglobulinklassene i serum. I tillegg ses forhøyede nivåer av IgG ved autoimmune sykdommer og kronisk hepatitt. Malign celleformering av en immunglobulinproduserende celle (plasmacelle) medfører et forhøyet serumnivå av et enkelt immunglobulin (myelom). Immunglobulinmangler kan skyldes proteinreduserende syndromer, arvelige mangler eller kan være sekundære som følge av maligne lymfoide forandringer. Spedbarn mellom 3 og 6 måneder har redusert IgG fordi aktiv IgG-syntese fra nyfødte/i starten kun delvis erstatter IgG fra moren. Bestemmelse av IgG i cerebrospinalvæske () brukes til evaluering av infeksjoner i sentralnervesystemet (CNS), neoplasmaer eller primære nevrologiske sykdommer (særlig multippel sklerose). Forhøyede IgGkonsentrasjoner i kan forekomme enten på grunn av øket permeabilitet i blodhjernebarrieren, øket lokal produksjon av IgG eller begge deler. For spesifikt å kunne identifisere intratekal produksjon er det nødvendig å korrigere for den økede permeabilitet. For å bestemme den intratekale IgG-produksjonen nøyaktig kan en IgG-fraksjon som er fremkommet på grunn av økt permeabilitet, korrigeres for ved følgende beregninger: 4 Forkortet navn for ratio: IGGR2 (0 179) Ratio = IgG CSF (mg/l) / Albumin CSF (mg/l) En ratio > 0.27 indikerer en øket intratekal IgG-syntese. Forkortet navn for ratio: IGGI2 (0 180) IgG indeks = IgG CSF (mg/l) Albumin Ser (g/l) / IgG Ser (g/l) / Albumin CSF (mg/l) Indeksverdier > 0.7 betraktes som indikasjon på forhøyet IgG syntese. Hos > 80 % av personer med multippel sklerose er indeksen over 0.7. Det er kjent at de såkalte paraproteiner, som utskilles ved monoklonale gammopatier (monoklonal immunglobulinemi), kan avvike fra de respektive immunglobuliner av polyklonal opprinnelse i aminosyresammensetning og i størrelse. Dette kan svekke bindingen til antistoffet og derfor redusere den nøyaktige kvantifiseringen. Analyseprinsipp 6 Immunturbidimetrisk analyse Humant IgG danner en utfelling med et spesifikt antiserum, som bestemmes turbidimetrisk ved 340 nm. Reagenser - arbeidsløsninger R1 R2 Anti-IgG T antiserum (kanin) spesifikt for human IgG i fosfatbuffer; konserveringsmiddel Reagens til kontroll av antigen overskudd IgG i fortynnet serum (human), konserveringsmiddel R1 er i posisjon A, og R2 er i posisjon C. Forholdsregler og advarsler Vær oppmerksom på alle advarsler og forholdsregler i avsnittet 1/ Innledning i denne metodemanual. Alt humant materiale skal betraktes som potensielt smittefarlig. Alle produkter fra humant blod er utelukkende fremstilt fra donorblod som er analysert individuelt og som er uten HBsAg og antistoffer mot HCV og HIV. De brukte analysemetodene er FDA-godkjent eller overholder Europaparlamentets Rådsdirektiv 98/79/EF, bilag II, liste A. Da ingen analysemetode med absolutt sikkerhet kan utelukke en potensiell smitterisiko, skal materialet håndteres med samme forsiktighet som en pasientprøve. Dersom en person har vært utsatt for smitte, skal direktivene fra helsemyndighetene følges. 7,8 Reagenshåndtering Klar til bruk Oppbevaring og holdbarhet Holdbarhet ved 2 8 C COBAS INTEGRA 400 plus analyseinstrument I bruk ved C COBAS INTEGRA 800 analyseinstrument Se utløpsdatoen på etiketten på cobas c pack 12 uker 1 / 5

2 I bruk ved 8 C 12 uker Prøvetaking og -forberedelse Benytt kun egnede prøvetakingsrør til prøvetaking og -forberedelse. Kun de nedenfor oppførte prøvematerialer er analysert og funnet akseptable. Serum Plasma: Li-heparin- eller EDTA-plasma CSF: Unngå blodkontaminering av -prøvene. Ved -punksjon bør blodkontaminering unngås da den totale proteinkonsentrasjon i fullblod er ca ganger høyere enn i normal. Sentrifuger før analysering. De oppførte prøvetypene ble analysert med et utvalg prøvetakingsrør som var kommersielt tilgjengelige på analysetidspunktet, dvs. ikke alle tilgjengelige rør fra alle produsenter ble analysert. Prøvetakingssystemer fra forskjellige produsenter kan inneholde ulike materialer som i visse tilfeller kan påvirke analyseresultatene. Dersom prøver analyseres i primærrør (prøvetakingssystemer), skal instruksjonene fra produsenten av disse rør følges. Prøver og kontroller forfortynnes automatisk med NaCl-løsning av instrumentet. Sentrifuger prøver som inneholder utfellinger før utførelse av analysen. Holdbarhet i serum/plasma: 9 4 måneder ved C 8 måneder ved 2 8 C 8 måneder ved ( 15) ( 25) C Holdbarhet i : 9 1 dag ved C 7 dager ved 2 8 C Medfølgende materialer Vennligst se avsnittet "Reagenser - arbeidsløsninger" med hensyn til reagenser. Nødvendige (men ikke medfølgende) materialer 1., C NaCl Diluent 9 %, kat.nr , system ID til automatisk prøvefortynning og serielle standardfortynninger. NaCl Diluent 9 % er holdbar i 4 uker på COBAS INTEGRA 400/400 plus/800 analyseinstrumentene. 2. C Accelerator I, kat.nr , system ID som spesialdiluent (SD) Holdbarhet i bruk: 7 dager Disse reagenser plasseres i sine predefinerte rackposisjoner. Analyse For en optimal ytelse av analysen skal anvisningene for det aktuelle analyseinstrument følges. Vennligst se den aktuelle brukermanualen for instrumentspesifikke analyseinstruksjoner. Applikasjon for serum, plasma og COBAS INTEGRA 400 plus analysedefinisjon Målemetode Abs. beregningsmetode Reaksjonsretning Reaksjonsstart med Absorbans Endepunkt Stigende Prøve Kontroll av antigen overskudd Ja (med R2) Serum og plasma Bølgelengde A D-R1-S-R2 340 nm Kalk. først/sist T 0 /33 Forfortynningsfaktor 21 > 94 g/l (> 9400 mg/dl eller > 627 µmol/l) g/l R1-SD/S-R2 Bølgelengde A/B 340/652 nm Kalk. først/sist T 0 /33 Forfortynningsfaktor Pipetteringsparametere > 405 mg/l (> 40.5 mg/dl eller > 2701 nmol/l) Nei mg/l Serum, plasma Diluent (H 2 O) R1 140 µl 5 µl Prøve 2 µl 20 µl R2 5 µl 5 µl Totalvolum 177 µl Diluent (H 2 O) R1 100 µl 5 µl Prøve 25 µl Spesialdiluent (SD) 30 µl R2 5 µl 25 µl Totalvolum 190 µl COBAS INTEGRA 800 analysedefinisjon Målemetode Abs. beregningsmetode Reaksjonsretning Reaksjonsstart med Absorbans Endepunkt Stigende Prøve Kontroll av antigen overskudd Ja (med R2) Serum og plasma Bølgelengde A D-R1-S-R2 340 nm Kalk. først/sist T 0 /44 Forfortynningsfaktor 21 Bølgelengde A/B > 70 g/l (> 7000 mg/dl eller > 467 µmol/l) g/l R1-SD/S-R2 340/652 nm Kalk. først/sist T 0 /44 Forfortynningsfaktor Pipetteringsparametere > 405 mg/l (> 40.5 mg/dl eller > 2701 nmol/l) Nei mg/l Serum, plasma Diluent (H 2 O) R1 140 µl 5 µl Prøve 2 µl 20 µl R2 5 µl 5 µl Totalvolum 177 µl Diluent (H 2 O) 2 / 5

3 R1 100 µl 5 µl Prøve 25 µl Spesialdiluent (SD) 30 µl R2 5 µl 25 µl Totalvolum 190 µl Kalibrering Kalibrator Kalibreringsfortynningsratio Serum, plasma Serum proteins T Standard 1:6, 1:12, 1:24, 1:48, 1:96 utføres automatisk av instrumentet 1:150, 1:300, 1:600, 1:1200, 1:2400 utføres automatisk av instrumentet Kalibreringsmetode Logit/log 5 Kalibrering Kalibreringsintervall Duplikatmålinger anbefales Hver lot og som påkrevet ifølge kvalitetskontrollprosedyrene Tast inn den lotspesifikke IgG-verdien for den ufortynnede kalibratoren som er oppført i pakningsvedlegget til Serum proteins T Standard. Sporbarhet: Denne metoden er standardisert opp mot et sertifisert referansemateriale i humant serum fra IRMM (Institute for Reference Materials and Measurements) ERM - DA470/IFCC. Kvalitetskontroll Kvalitetskontroll serum, plasma Referanseområde Patologisk område Kvalitetskontroll Kontrollintervall Kontrollrekkefølge Kontroll etter kalibrering Precinorm Protein, Precinorm U eller PreciControl ClinChem Multi 1 Precipath Protein eller PreciControl ClinChem Multi 2 Kvantitative -kontroller anbefales til rutinemessig kvalitetskontroll. 24 timer anbefales Brukerdefineres Anbefales Bruk det kontrollmaterialet som er oppført i avsnittet "Ordreinformasjon", til kvalitetskontroll. I tillegg kan andre egnede kontrollmaterialer brukes. Kontrollintervallene og -grensene bør tilpasses hvert enkelt laboratoriums individuelle krav. Oppnådde kontrollverdier skal ligge innenfor definerte grenser. Hvert laboratorium bør innføre korrigerende tiltak dersom verdier faller utenfor de definerte grensene. Følg gjeldende offentlige forskrifter og lokale retningslinjer for kvalitetskontroll. Beregning COBAS INTEGRA analyseinstrumenter beregner automatisk analyttkonsentrasjonen i hver prøve. For ytterligere informasjon, vises til Dataanalyse i Online Help (COBAS INTEGRA 400 plus/800 analyseinstrumenter). Omregningsfaktorer: 10 Molekylvekt: g/l 6.67 = µmol/l g/l x 100 = mg/dl mg/l 6.67 = nmol/l Begrensninger - interferens Kriterium: Gjenfinning innen ± 10 % av opprinnelig verdi. Serum, plasma Hemolyse: 11 Ingen signifikant interferens. Ikterus: 11 Ingen signifikant interferens. Lipemi (Intralipid): 11 Ingen signifikant interferens. Revmatoide faktorer: Ingen signifikant interferens opp til et revmatoid faktornivå på 800 IU/mL. Medikamenter: Terapeutisk medikamentinterferens ble analysert i henhold til anbefalingene fra VDGH a). Det er ikke funnet interferens. Som ved andre turbidimetriske eller nefelometriske metoder kan denne analyse gi unøyaktige resultater for pasienter med monoklonal gammopati noe som kan verifiseres ved hjelp av elektroforese. 12 Til diagnostiske formål skal resultatene alltid sees i sammenheng med pasientens anamnese, kliniske undersøkelser og andre resultater. a) Verband der Diagnostica und Diagnostica Geräte Hersteller. Metodemanualen, avsnitt 1 / Innledning, inneholder en liste over de analyserte medikamenter og deres konsentrasjoner. NØDVENDIG HANDLING Spesielle vaskeprogrammer: Bruk av spesielle vaskesyklus er obligatoriske når visse analysekombinasjoner utføres på COBAS INTEGRA analyseinstrumenter. For ytterligere instruksjoner, se Metodemanualen, Innledning, Ekstra vaskesyklus. Ved behov skal spesielle vaske/carry over program implementeres før det rapporteres resultater på denne analysen. VIKTIG Konsentrasjonen av IgG i serum er mye høyere enn i -prøver. For å oppnå høy sensitivitet brukes 25 µl ufortynnet prøve til -applikasjonen. Denne applikasjonen er derfor følsom overfor prøve carryover av IgG. For å unngå prøve carry-over på COBAS INTEGRA 800 analyseinstrumenter skal -prøver analyseres i batch mode. Den ekstra vaskesyklusen (EWC S, 0 989) som er beskrevet i metodemanualen, Innledning, skal utføres før -bestemmelse i batch. Grenser og akseptert grense for avvik Måleområde g/l ( mg/dl eller µmol/l) (typisk måleområde) Den øvre og nedre grensen for måleområdet avhenger av den aktuelle kalibratorverdien. Reanalyser prøver med høye konsentrasjoner ved hjelp av reanalyseringsfunksjonen. Fortynningen av prøver via reanalyseringsfunksjonen er en 1:4.7 fortynning. Resultater fra prøver som er fortynnet ved å bruke reanalyseringsfunksjonen multipliseres automatisk med en faktor på 4.7. Reanalyser prøver med lave konsentrasjoner ved hjelp av reanalyseringsfunksjonen. For prøver med lavere konsentrasjoner reduserer reanalyseringsfunksjonen forfortynningsfaktoren til 5.3. Resultatene multipliseres automatisk med den reduserte forfortynningsfaktoren mg/l ( mg/dl eller nmol/l) (typisk måleområde) Den øvre og nedre grensen for måleområdet avhenger av den aktuelle kalibratorverdien. Reanalyser prøver med høye konsentrasjoner ved hjelp av reanalyseringsfunksjonen. Fortynning av prøver via reanalyseringsfunksjonen er en 1:10 fortynning. Resultater fra prøver som er fortynnet ved å bruke reanalyseringsfunksjonen multipliseres automatisk med en faktor på 10. Nedre grense for måleområdet Nedre deteksjonsgrense for analysen: 3.0 g/l (300 mg/dl eller 20.0 µmol/l) Den nedre deteksjonsgrensen representerer den lavest målbare konsentrasjonen som kan skilles fra null. Den beregnes som den verdien som ligger 3 standardavvik over en nullprøve (nullprøve + 3 SD, repeterbarhet, n = 30). Nedre deteksjonsgrense for analysen: 2.0 mg/l (0.20 mg/dl eller 13.3 nmol/l) Den nedre deteksjonsgrensen representerer den lavest målbare konsentrasjonen som kan skilles fra null. Den beregnes som den verdien som ligger 3 standardavvik over en nullprøve (nullprøve + 3 SD, repeterbarhet, n = 21). 3 / 5

4 Referanseintervaller g/l mg/dl µmol/l Voksne Barn og unge år år år år år år år år Roche har ikke evaluert referanseområder i en pediatrisk populasjon. IgG 15 IgG-indeks IgG/ALB ratio 4 < mg/l ( mg/dl eller nmol/l) Hvert enkelt laboratorium bør undersøke om referanseintervallene kan overføres til egne pasientgrupper og om nødvendig fastsette egne referanseintervaller. Spesifikk ytelsesevne for serum/plasma () Representativ ytelsesevne på instrumentene er oppført under. Resultatene kan variere fra laboratorium til laboratorium. Presisjon Presisjon ble fastsatt ved hjelp av humane prøver og kontroller i følge en intern protokoll med repeterbarhet og intermediær presisjon (2 pipetteringer pr. kjøring, 2 kjøringer pr. dag, 20 dager). Følgende resultater ble oppnådd: Middel Nivå 1 Nivå g/l (1020 mg/dl eller 68.0 µmol/l) 24.5 g/l (2450 mg/dl eller 163 µmol/l) CV repeterbarhet 0.94 % 1.4 % CV intermediær presisjon 2.1 % 1.9 % Metodesammenligning IgG-verdier i humane serum- og plasmaprøver oppnådd på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument med reagenset COBAS INTEGRA Immunoglobulin G (Turbidimetric) (y) ble sammenlignet med verdier funnet med kommersielt tilgjengelige reagenser til IgG på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument (x) og et automatisert system fra en alternativ leverandør (turbidimetrisk bestemmelse) (x). Prøvene ble målt i duplikat. Antall prøver (n) representerer alle bestemmelser. COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument Antall prøver (n) 600 Korrelasjonskoeffisient (r) (r s ) y = 0.970x g/l y = 0.974x g/l Alternativt system Antall prøver (n) 600 Korrelasjonskoeffisient (r) (r s ) y = 0.990x g/l y = 1.029x g/l Prøvekonsentrasjonene lå mellom 4.76 og 15.9 g/l (480 og 1590 mg/dl eller 32.0 og 106 µmol/l). Spesifikk ytelsesevne for cerebrospinalvæske (C) Representativ ytelsesevne på instrumentene er oppført under. Resultatene kan variere fra laboratorium til laboratorium. Presisjon Presisjon ble fastsatt ved hjelp av humane prøver og kontroller i følge en intern protokoll med repeterbarhet og intermediær presisjon (2 pipetteringer pr. kjøring, 2 kjøringer pr. dag, 20 dager). Følgende resultater ble oppnådd: Middel Nivå 1 Nivå mg/l (3.45 mg/dl eller 230 nmol/l) 54.1 mg/l (5.41 mg/dl eller 361 nmol/l) CV repeterbarhet 1.2 % 1.8 % CV intermediær presisjon 1.7 % 2.2 % Metodesammenligning IgG-verdier i humane -prøver funnet på et COBAS INTEGRA 700 analyseinstrument med COBAS INTEGRA Immunoglobulin G (Turbidimetric) reagenset (y) ble sammenlignet med verdier funnet med kommersielt tilgjengelige reagenser til IgG på et automatisert system fra en alternativ leverandør (nefelometrisk bestemmelse) (x). Antall prøver (n) 97 Korrelasjonskoeffisient (r) (r s ) y = 0.994x mg/l y = 0.968x mg/l Prøvekonsentrasjonene lå mellom 2.7 og 459 mg/l (0.27 og 45.9 mg/dl eller 18.0 og 3062 nmol/l). Referanser 1 Brostoff J, Scadding GH, Male D, et al. Clinical Immunology. London: Gower Medical Publishing 1991: Bodansky O, Latner AL. Advances in Clinical Chemistry. New York: Academic Press 1971;14: Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1995; Silverman LM, Christenson RH. Amino acids and proteins. In Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th ed. Philadelphia: WB Saunders 1996; Tibbling G, Link H, Ohman S. Principles of albumin and IgG analyses in neurological disorders I. Scand f Clin Lab Invest 1977;37: Becker W, Rapp W, Schwick HG, et al. Methoden zur quantitativen Bestimmung von Plasmaproteinen durch Immunpräzipitation. Z Klin Chem Klin Biochem. 1968;6: Occupational Safety and Health Standards: bloodborne pathogens. (29 CFR Part ). Fed. Register. 8 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 9 Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2. Jan Young DS, Huth EJ. SI Units For Clinical Measurement. American College of Physicians / 5

5 11 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Attaelmannan M, Levinson SS. Understanding and identifying monoclonal gammopathies. Clin Chem 2000;46(8 Pt 2): Schumann G, Dati F. Vorläufige Referenzbereiche für 14 Proteine im Serum (für Erwachsene) nach Standardisierung immunchemischer Methoden unter Bezug auf das internationale Referenzmaterial CRM 470. Lab Med 1995;19: Soldin JS, Brugnara C, Wong EC. Pediatric Reference Intervals. AACC Press, 5th ed., Reiber H, Thompson EJ, Grimsley G, et al. Quality Assurance for Cerebrospinal Fluid Protein Analysis: International Consensus by an Internet-based Group Discussion. Clin Chem Lab Med 2003;41: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Et punktum (punktum/stopp) brukes alltid i dette metodearket som desimalskilletegn for å skille mellom heltalls- og fraksjonsdelen av et desimaltall. Skilletegn for tusengrupper brukes ikke. Symboler Roche Diagnostics bruker følgende symboler og tegn i tillegg til de som er listet opp i ISO standarden CONTENT Pakningsinnhold Volum etter rekonstitusjon eller blanding Vesentlige tilføyelser eller endringer er merket med en strek i margen. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribueres i USA av: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN US Customer Technical Support / 5