Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 293 ml) Roche/Hitachi MODULAR P, MODULAR D

Transkript

1 Ordreinformasjon REF CONTENT Analyseinstrument(er) hvor kittet/kittene kan brukes Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 66 ml, [2] 6 x 43 ml) Roche/Hitachi MODULAR P Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 186 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([2] 6 x 118 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 470 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 293 ml) Roche/Hitachi MODULAR P, MODULAR D Roche/Hitachi MODULAR D Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 40 ml, [2] 3 x 49 ml) Roche/Hitachi Calibrator f.a.s. (12 3 ml) Kode Precinorm U (20 5 ml) Kode Precinorm U plus (10 x 3 ml) Kode Precipath U (20 5 ml) Kode Precipath U plus (10 x 3 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kode PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kode Chimneys Noen analyseinstrumenter og noen kit er ikke tilgjengelig i alle land. Ta kontakt med Roche Diagnostics for ytterligere systemapplikasjoner. Norsk Systeminformasjon Til Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D analyseinstrumenter: Urea ACN 418, ACN 419; BUN ACN 421, ACN 427. Tilsiktet bruk In vitro-analyse til kvantitativ bestemmelse av urea/urea-nitrogen i humant serum, plasma og urin på Roche automatiserte klinisk-kjemiske analyseinstrumenter. Sammendrag 1,2,3,4,5,6,7,8,9 Bestemmelsen av urea er den mest vanlig brukte analyse til evaluering av nyrefunksjon. Analysen er ofte brukt sammen med bestemmelse av kreatinin til differensialdiagnostisering av prerenal hyperuremi (hjerteinsuffisiens, væskemangel, øket proteinkatabolisme), renal hyperuremi (glomerulonefritt, kronisk nefritt, polycystisk nyre, nefrosklerose, tubulær nekrose) og postrenal hyperuremi (obstruksjonsanuri). Urea er sluttnedbrytingsproduktet ved protein- og aminosyremetabolisme. I proteinkatabolisme nedbrytes proteinene til aminosyrer og deamineres. Ammoniakken som dannes ved denne prosessen, syntetiseres til urea i leveren. Dette er den viktigste kataboliske prosess til eliminering av nitrogen overskudd i kroppen. I 1913 introduserte Marshall en analyse basert på enzymet urease til bestemmelse av urea i blodet. Ammoniakken som ble frigjort fra urea av urease ble målt titrimetrisk. Mange andre teknikker er siden blitt brukt til å måle den produserte ammoniakk. Disse omfatter Berthelots indofenolanalyse og reaksjonen av ammoniakk med Nesslers reagens. Etterfølgende modifikasjoner er offentliggjort av Fawcett og Scott samt av Chaney and Marbach. I 1965 publiserte Talke og Schubert en totallenzymatisk metode til bestemmelse av urea ved hjelp av det koblede urease/glutamat dehydrogenase (GLDH) enzymsystem. Roche -analysen er basert på Talke og Schuberts metode og er optimert til analyseinstrumenter som tillater kinetiske (fixed-time) målinger. Denne metode gir større linearitet og utvidet reagensholdbarhet. Analyseprinsipp Kinetisk UV-analyse Pipettering av prøve og tilsetning av R1 Tilsetning av R2 og start av reaksjon: Urea hydrolyseres av urease og danner CO 2-3 og ammoniakk. urease urea + H 2 O 2 NH CO 3 2- Den dannede ammoniakk reagerer med α ketoglutarat og NADH ved tilstedeværelse av GLDH og danner glutamat og NAD +. α ketoglutarat + NH NADH GLDH L glutamat + NAD + + H 2 O Absorpsjonsreduksjonen på grunn av NADH-forbruket måles kinetisk. Reagenser - arbeidsløsninger R1 R2 CAPSO a) buffer: 5 mmol/l, ph 9.65; NADH (gjær) 0.23 mmol/l; konserveringmiddel BICIN b) buffer: 1000 mmol/l, ph 7.6; urease (jackbønne) 120 µkat/l; GLDH (bovin lever) 15.0 µkat/l; α ketoglutarat 8.3 mmol/l; konserveringsmiddel a) CAPSO = 3 [cykloheksylamino] 2 hydroksy 1 propansulfonsyre b) BICIN = N,N bis(2 hydroksyetyl) glysin Forholdsregler og advarsler Til in vitro-diagnostisk bruk. Ta de vanlige forholdsregler som er nødvendig ved håndtering av alle laboratoriereagenser. Fjerning av alle avfallsmaterialer skal følge lokale retningslinjer. HMS-Datablad er tilgjengelig på forespørsel. Reagenshåndtering R1: Klar til bruk R2: Klar til bruk Dette kit krever bruk av fargekodede chimneys (piper) som reduserer opptak av atmosfærisk NH3 i reagensene. Chimneys (pipene) skal plasseres direkte i de aktuelle reagensene: hvit = R1. Chimneys (pipene) kan gjenbrukes til reagensflaskene i samme kit. For å unngå kontaminering av reagenset med detergent eller fortynning av reagenset med vann, skal chimneys (pipene) ikke vaskes før gjenbruk. Chimneys (pipene) brukes på alle systemene. Oppbevaring og holdbarhet Uåpnede kitkomponenter: Inntil utløpsdatoen ved 2 8 C R1: 4 uker åpnet og avkjølt på analyseinstrumentet R2: 4 uker åpnet og avkjølt på analyseinstrumentet Prøvetaking og -forberedelse Benytt kun egnede prøvetakingsrør til prøvetaking og -forberedelse. 1 / 5

2 Kun de nedenfor oppførte prøvematerialer er analysert og funnet akseptable. Plasma: Li heparin-, Na heparin- eller K EDTA-plasma. Ikke bruk ammoniumheparin. Holdbarhet: 10 7 dager ved C 7 dager ved 2 8 C 1 år ved (-15) (-25) C : skal oppsamles uten å bruke konserveringsmidler. Holdbarhet: 10 2 dager ved C 7 dager ved 2 8 C 4 uker ved (-15) (-25) C Roche/Hitachi MODULAR analyseinstrumenter: prøvene fortynnes automatisk med 0.9 % NaCl eller destillert/deionisert vann på instrumentene. Det blir tatt høyde for de respektive fortynningene ved beregning av resultatene. Roche/Hitachi instrumenter uten automatisk prøvefortynning: Fortynn urinprøvene manuelt med 0.9 % NaCl eller destillert/deionisert vann (f.eks ). Multipliser resultatet med fortynningsfaktoren (f.eks. 11). De oppførte prøvetypene ble analysert med et utvalg prøvetakingsrør som var kommersielt tilgjengelige på analysetidspunktet, dvs. ikke alle tilgjengelige rør fra alle produsenter ble analysert. Prøvetakingssystemer fra forskjellige produsenter kan inneholde ulike materialer som i visse tilfeller kan påvirke analyseresultatene. Dersom prøver analyseres i primærrør (prøvetakingssystemer), skal instruksjonene fra produsenten av disse rør følges. Sentrifuger prøver som inneholder utfellinger før utførelse av analysen. Medfølgende materialer Vennligst se avsnittet "Reagenser - arbeidsløsninger" med hensyn til reagenser. Nødvendige (men ikke medfølgende) materialer Se avsnittet "Ordreinformasjon" 0.9 % NaCl Alminnelig laboratorieutstyr Analyse For en optimal ytelse av analysen skal anvisningene for det aktuelle analyseinstrument følges. Vennligst se den aktuelle brukermanualen for instrumentspesifikke analyseinstruksjoner. Ytelse av applikasjoner som ikke er validert av Roche kan ikke garanteres og må defineres av brukeren. Kalibrering Sporbarhet: Denne metode er standardisert opp mot SRM c) 909b. /urin S1: 0.9 % NaCl S2: C.f.a.s. (Calibrator for automated systems) Kalibreringsintervall 2 punktskalibrering anbefales: hver 42. dag etter skifte av reagenslot som påkrevet ifølge kvalitetskontrollprosedyrene. c) SRM = Standard Reference Material Kvalitetskontroll /urin Bruk det kontrollmaterialet som er oppført i avsnittet "Ordreinformasjon", til kvalitetskontroll. I tillegg kan andre egnede kontrollmaterialer brukes. Kontrollintervallene og -grensene bør tilpasses hvert enkelt laboratoriums individuelle krav. Oppnådde kontrollverdier skal ligge innenfor definerte grenser. Hvert laboratorium bør innføre korrigerende tiltak dersom verdier faller utenfor de definerte grensene. Følg gjeldende offentlige forskrifter og lokale retningslinjer for kvalitetskontroll. Beregning Analyseinstrumentet beregner automatisk analyttkonsentrasjonen i hver prøve. Omregningsfaktorer: mg/dl urea x = mmol/l urea mmol/l urea x =mg/dl urea mg/dl urea-nitrogen x = mmol/l urea mg/dl urea x = mg/dl urea-nitrogen Hvis det brukes døgnurin som prøvemateriale, multipliseres resultatet med døgnvolumen for å oppnå resultater i g eller mmol/døgn. Begrensninger interferens Kriterium: Gjenfinning innen ± 10 % av opprinnelig verdi. /plasma Ikterus: 11 Ingen signifikant interferens opp til en l-indeks på 60 for konjugertog ukonjugert bilirubin (konjugert- og ukonjugert bilirubinkonsentrasjon på ca: 1026 µmol/l eller 60 mg/dl). Hemolyse: 11 Ingen signifikant interferens opp til en H-indeks på 1000 (hemoglobinkonsentrasjon på ca: 621 µmol/l eller 1000 mg/dl). Lipemi (Intralipid): 11 Ingen signifikant interferens opp til en L-indeks på Det er dårlig korrelasjon mellom L-indeksen (svarende til turbiditet) og triglyseridkonsentrasjonen. Ammoniakk som er produsert i kyvetten under bestemmelse av GLDH interferer med urea/bun-analysen. Urea/BUN-reagenset må derfor ikke plasseres på instrumentet sammen med reagensene til GLDH-analysen. Endogene ammoniumioner interferer med urea/bun-analysen i urin. Forhøyede konsentrasjoner kan forekomme under sure betingelser (f.eks. acidose). Medikamenter: Det ble ikke funnet noen interferens ved terapeutiske konsentrasjoner ved bruk av vanlige medikamentpaneler. 12,13 Det må tas forholdsregler for å forhindre ammoniakkontaminering av de prøver og kalibratorer som brukes i urea/urea-nitrogen-analysen. I meget sjeldne tilfeller kan gammopati, særlig type IgM (Waldenströms makroglobulinemi), forårsake upålitelige resultater. 14 Medikamenter: Det ble ikke funnet noen interferens ved terapeutiske konsentrasjoner ved bruk av vanlige medikamentpaneler. 13 Til diagnostiske formål skal resultatene alltid sees i sammenheng med pasientens anamnese, kliniske undersøkelser og andre resultater. NØDVENDIG HANDLING Spesielle vaskeprogrammer: Bruk av spesielle vaskesyklus anbefales når visse analysekombinasjoner utføres samtidig på Roche/Hitachi analyseinstrumenter. For ytterligere instruksjoner; se de seneste versjonene med oversikt over analyser med risiko for carry over samt brukermanual. Ved behov skal spesielle vaske/carry over program implementeres før det rapporteres resultater på denne analysen. Grenser og akseptert grense for avvik Måleområde /plasma mmol/l (5 400 mg/dl urea eller mg/dl urea-nitrogen) Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D analyseinstrumenter: Reanalyser prøver med høye konsentrasjoner ved hjelp av reanalyseringsfunksjonen. Fortynningen av prøver via reanalyseringsfunksjonen er en 1:1.5 fortynning. Resultater fra prøver som er fortynnet ved å bruke reanalyseringsfunksjonen multipliseres automatisk med en faktor på 1.5. På instrumenter uten reanalyseringsfunksjon fortynnes prøvene manuelt med 0.9 % NaCl eller destillert/deionisert vann (f.eks ). Multipliser resultatet med fortynningsfaktoren (f.eks. 2). Roche/Hitachi 902 analyseinstrument 2 / 5

3 1 735 mmol/l ( mg/dl urea eller mg/dl urea-nitrogen) På instrumenter uten reanalyseringsfunksjon fortynnes prøvene manuelt med 0.9 % NaCl eller destillert/deionisert vann (f.eks ). Multipliser resultatet med fortynningsfaktoren (f.eks. 3). Reanalyser prøver med lavere konsentrasjoner enn den tekniske grensen på 66.6 mmol/l (400 mg/dl urea eller 186 mg/dl urea-nitrogen) ufortynnet. Roche/Hitachi MODULAR P analyseinstrumenter: mmol/l ( mg/dl urea eller mg/dl urea-nitrogen) Reanalyser prøver med høye konsentrasjoner ved hjelp av reanalyseringsfunksjonen. Fortynningen av prøver via reanalyseringsfunksjonen er en 1:1.5 fortynning. Resultater fra prøver som er fortynnet ved å bruke reanalyseringsfunksjonen multipliseres automatisk med en faktor på 1.5. Reanalyser prøver med lavere konsentrasjoner enn den tekniske grensen på 66.6 mmol/l (400 mg/dl urea eller 186 mg/dl urea-nitrogen) via reanalyseringsfunksjonen. Prøvene måles ufortynnet. Nedre grense for måleområdet Nedre deteksjonsgrense for analysen /plasma Deteksjonsgrense: 0.83 mmol/l (5 mg/dl urea eller 2 mg/dl urea-nitrogen) Deteksjonsgrense: 1.0 mmol/l (6 mg/dl urea eller 2.8 mg/dl ureanitrogen). Den nedre deteksjonsgrensen representerer den lavest målbare konsentrasjonen som kan skilles fra null. Den beregnes som den verdien som ligger 3 standardavvik over den laveste standard (standard SD, repeterbarhet, n = 21). Referanseintervaller (urea) /plasma mmol/l ( mg/dl) Døgnurin mmol/døgn ( g/døgn), svarende til mmol/l ( g/dl) Basert på en gjennomsnittlig urinmengde på L/døgn. Referanseintervaller (urea-nitrogen) /plasma Voksne (18 60 år): mmol/l (6 20 mg/dl) Voksne (60 90 år): mmol/l (8 23 mg/dl) Spedbarn (< 1 år): mmol/l (4 19 mg/dl) Spedbarn/barn: mmol/l (5 18 mg/dl) Døgnurin: mmol/døgn (12 20 g/døgn) urea-nitrogen svarende til mmol/l ( mg/dl) d) d) Basert på en gjennomsnittlig urinmengde på L/døgn Hvert enkelt laboratorium bør undersøke om referanseintervallene kan overføres til egne pasientgrupper og om nødvendig fastsette egne referanseintervaller. Spesifikk ytelsesevne Representativ ytelsesevne på instrumentene er oppført under. Resultatene kan variere fra laboratorium til laboratorium. Presisjon Urea 3 / 5 Humant serum Precinorm U Precipath U Humant serum Humant serum Humant serum Urea-nitrogen Humant serum Precitrol N Precitrol A (2 pipetteringer pr. kjøring, 1 kjøring pr. dag, 10 dager). Følgende resultater Human urin Kontrollurin Kontrollurin Metodesammenligning Urea En sammenligning av den nye bølgelengdekombinasjon 700/340 nm (y) og den tidligere kombinasjon 405/340 nm (x) ved å bruke Roche flytende reagenser til urea på Roche/Hitachi 717 analyseinstrumentet ga følgende korrelasjon (mg/dl urea): y = 1.01x y = 1.02x τ = r = 1.00 Antall målte prøver: 85 Konsentrasjonen i prøvene lå mellom 4.84 og 57.3 mmol/l (29 og 343 mg/dl) urea. En sammenligning av den nye bølgelengdekombinasjon 700/340 nm (y) og den tidligere kombinasjon 376/340 nm (x) ved å bruke Roche flytende

4 reagenser til urea på Roche/Hitachi 911 analyseinstrumentet ga følgende korrelasjon (mg/dl urea): y = 0.99x y = 1.00x τ = r = Antall målte prøver: 53 Konsentrasjonen i prøvene lå mellom 15.4 og 271 mmol/l (92 og 1625 mg/dl) urea. Urea N En sammenligning av urea N-bestemmelsen ved å bruke Roche Diagnostics Germany urea flytende reagens og Roche Diagnostics Corporation reagens til urea N på Roche/Hitachi 917 analyseinstrumentet ga følgende korrelasjon (mg/dl urea N): y = 0.992x y = 0.982x τ = r = 1.00 Antall målte prøver: 51 Konsentrasjonen i prøvene lå mellom 3.21 og 51.4 mmol/l (9 og 144 mg/dl) urea N. En sammenligning av urea N-bestemmelsen ved å bruke Roche Diagnostics Germany urea flytende reagens og Roche Diagnostics Corporation reagens til urea N på Roche/Hitachi 917 analyseinstrumentet ga følgende korrelasjon (mg/dl urea N): y = 0.975x y = 0.958x τ = r = Antall målte prøver: 30 Konsentrasjonen i prøvene lå mellom 35.0 og 451 mmol/l (98 og 1262 mg/dl) urea N. Referanser 1 Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1976; Marshall EK Jr. A new method for the determination of urea in blood. J Biol Chem 1913;15: Berthelot MPE. Repert Chim Appl 1859; Gentzkow CJ. An accurate method for the determination of blood urea nitrogen by direct Nesslerization. J Biol Chem 1942;143: Fawcett JK, Scott JE. A rapid and precise method for the determination of urea. J Clin Path 1960;13: Chaney AL, Marbach EP. Modified reagents for determination of urea and ammonia. Clin Chem 1962;8: Talke H, Schubert GE. Enzymatische Harnstoffbestimmung im Blut und im optischen Test nach Warburg. Klin Wschr 1965;43: Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1995; Neumann U, Ziegenhorn J. Scand J Clin Lab Invest 1977;37:Supplement 147: Abstract Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Löhr B, El-Samalouti V, Junge W, et al. Reference Range Study for Various Parameters on Roche Clinical Chemistry Analyzers. Clin Lab 2009;55: Wu AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th edition. St. Louis (MO): Saunders Elsevier 2006; Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Instrumentinnstillinger Brukere av Roche/Hitachi MODULAR analyseinstrumenter: Tast inn applikasjonsparametrene via strekkodeskjemaet. Roche/Hitachi 902 analyseinstrument No. <Chemistry> 1 Test Name UREA 2 Assay Code (Mthd) 2 Point Kin. 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 5 5 Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wavelength (SUB) Wavelength (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Large 15 R2 Volume R2 Pos R2 Bottle Size Large 18 R3 Volume 0 19 R3 Pos R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos S1 ABS 0 4 / 5

5 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit Abs. Limit (D/I) Decrease 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting Data tastes inn av brukeren For ytterligere informasjon bruk manualen til det aktuelle analyseinstrumentet, de relevante applikasjonsskjemaene og metodeark til alle nødvendige komponenter. Et punktum (punktum/stopp) brukes alltid i dette metodearket som desimalskilletegn for å skille mellom heltalls- og fraksjonsdelen av et desimaltall. Skilletegn for tusengrupper brukes ikke. Symboler Roche Diagnostics bruker følgende symboler og tegn i tillegg til de som er listet opp i ISO standarden CONTENT Pakningsinnhold Reagens Kalibrator Volum etter rekonstitusjon eller blanding Vesentlige tilføyelser eller endringer er merket med en strek i margen. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 5 / 5