Blodutstryk kan avsløre leukemi

Transkript

1 Blodutstryk kan avsløre leukemi

2 Men det meste skjer nå ved hjelp av automatiske celletellere

3 BLOD Blod består av: vann oppløste stoffer celler Etter sentrifugering: plasma/serum ca 60% blodceller ca 40 %

4 Husker du dette fra tidligere? Hvilke typer blodceller har vi? Hvor dannes og modnes blodcellene? Hva er en stamcelle? Hva er en blastcelle? Hva er en modningsrekke/modningstrinn? Hvilke av cellenes modningstrinn finner vi i blod? Hva er de ulike blodcellenes funksjon?

5 Blodceller Erytrocytter (ca 98 % av cellene) oksygentransport Leukocytter (ca 2 % av cellene) granulocytter (nøytrofile, eosinofile,basofile) lymfocytter monocytter immunforsvar Trombocytter stanse blødninger (=hemostase)

6 Vanlige hematologiske analyser Hemoglobinkonsentrasjon Celletellinger Erytrocyttindekser: EVF (=Hct), MCV, MCH, MCHC, RDW Blodutstryk m/diff telling av leukocytter Hemostaseundersøkelser (Beinmargsutstryk m/spesialfarging)

7 Andre analyser i hematologi: Analyser ved anemiutredning: Jern Ferritin Transferrin Haptoglobin Bilirubin Vitamin B12 Folinsyre LDH Analyser ved leukemiutredning: Kromosomundersøkelser Flowcytometrisk undersøkelse av cellenes CD-antigener Spesialfarging av blod- og beinmargsutstryk

8 Telling og vurdering av blodceller Måler konsentrasjon av ulike celler i blod Beskriver de ulike celletypers morfologi Manuelle metoder Blodutstryk/differensialtelling Telling i mikroskop og tellekammer (PLT, eos, retic) Automatiske metoder Mange instrumenter som kombinerer flere prinsipp Motstand/impedans (Micros, Pentra, Coulter, Sysmex) Absorbans (Advia, Technicon H, Pentra) Lysspredning (Technicon H, Coulter, Bayer Advia) Spesifikk farging/merking (Advia, Technicon, Pentra)

9 Cobas Micros

10 Prinsipper Cobas Micros hematologiinstrument Teller celler, (RBC, WBC, PLT og 3-parts differensialtelling av leukocytter) vha motstandsprinsippet Måler Hb fotometrisk (cyanmethemoglobinmetode) EDTA-blod fordeles i 2 kanaler: Kanal 1: Erytrocytter og trombocytter Kanal 2: Leukocytter og Hb

11 Motstandsprinsippet (impedans) Måler økning i elektrisk spenning når en celle, suspendert i en strømledende væske, passerer en kapillæråpning.

12 Motstandsprinsippet En konstant strøm går gjennom kapillæråpningen Celler leder strøm meget dårlig Økt motstand, og derved økt spenning, når celler passerer kapillæråpningen Spenningsøkningen er proporsjonal med cellens volum Små celler gir liten spenningsøkning Store celler gir stor spenningsøkning Hva finner vi ut om cellene?

13 Erytrocytt (RBC)- og trombocytt (PLT)-tellingpå Micros RBC og PLT telles i samme kanal Skilles på grunnlag av volum Trombocytter 2-33 femtoliter Erytrocytter femtoliter Teller antall celler i et visst volum tellevæske, og beregner konsentrasjon Måler volum av hver enkelt celle, og beregner gjennomsnittsvolum (MCV, MPV)

14 Erytrocyttkurve, Micros Volum-distribusjonskurve

15 Trombocyttkurve Micros Volumdistribusjonskurve

16 Oppgave Petters blodprøve ble analysert på Cobas micros. Hva er konsentrasjonen av erytrocytter, leukocytter og trombocytter i Petters blod? Hva er gjennomsnittsvolum av erytrocytter og trombocytter? Har Petter anemi? Hvilke resultater er utenfor referanseområdet? Petter har en halsinfeksjon. Tror du den skyldes virus eller bakterier?

17 Petters resultater fra Cobas micros

18 Diskriminatorgrenser Angir grensene mellom ulike cellepopulasjoners volum Flytende grenser justeres fra prøve til prøve Faste grenser gjelder for alle prøver

19 Coincidence (=sammentreff) Når 2 celler passerer kapillæret samtidig 2 små celler vil da kunne telles som 1 stor Sannsynligheten for dette er beregnet og en korreksjonsfaktor lagt inn i instrumentet

20 Leukocytt- telling på Micros Blod fortynnes med tellevæske og lysereagens Cellene vil da i varierende grad skrumpe (lymfocytter skrumper mye, monocytter mindre, granulocytter minst) Leukocyttene skilles etter volum Deles inn i 3 populasjoner Lymfocytter femtoliter (fl = liter) Monocytter fl Granulocytter > 150 fl

21 Leukocytt-telling Micros

22

23 Litt hodebry: Ved motstandsprinsippet registreres: a) Cellenes antall b) Cellenes form c) Cellenes størrelse d) Cellenes innhold e) Cellenes modningsgrad f) Hemoglobin (Hb) Forklar hva vi mener med: Cellepopulasjoner Diskriminatorgrenser Alarmsoner Coincidens 3-parts differensialtelling

24 RBC indekser: MCV, EVF, MCH, MCHC, RDW Beskriver størrelse (MCV, EVF, RDW) og Hb-innhold (MCH, MCHC) i erytrocyttene Nyttig i diagnostisering av anemier

25 RBC-indekser; EVF (=Hct, PCV) Angir hvor stor volumandel erytrocyttene utgjør av hele blodvolumet Måles eller beregnes Angis i % eller fraksjon F.eks 35%, eller 0,35

26 RBC-indekser; MCV = middel celle volum i femtoliter (10-15 liter) EVF(%) x10 MCV(fl) = RBC (10 12 /l) MCV fl = normocytær MCV <80 fl = mikrocytær MCV > 100 fl = makrocytær

27 Eksempel: En pasient med jernmangelanemi hadde følgende verdier: RBC: 3.50 x /l EVF: 0.25 Lider pasienten av normo- mikro- eller makrocytær anemi?

28 RBC-indekser; MCH - middel celle Hb-innhold (pg) (pg = picogram = g) Hb (g/dl)x10 MCH (pg) = antall RBC/ liter Referanseområde: pg

29 MCH Regn ut det gjennomsnittlige Hb innhold pr celle hos pasienter med følgende verdier: Pasient 1: Hb = 12 g/dl, RBC = 4,0 x /l Pasient 2: Hb = 8 RBC = 3,0 Pasient 3: Hb = 12 RBC = 3,0

30 RBC-indekser; MCHC Middel celle Hb-konsentrasjon (g/dl) Hb (g/dl) MCHC = x100 EVF (%) Referanseområde: g/dl MCHC < 31 = hypokrom MCHC = normokrom MCHC > 36 = hyperkrom

31 MCHC Hva blir MCHC når: a) Hb = 12 g/dl, EVF = 36 b) Hb = 8 g/dl, EVF = 36 c) Hb = 12 g/dl, EVF =30 Hvilke celler tilsvarer a, b, og c?

32 RBC indekser Lag en skisse av cellene i a og b Beregn MCH, MCHC og EVF (Hct) a) - Hb 12 g/l -MCV 70 fl -RBC 4,0x10 12 /l b) Hb 12 g/l MCV 100 fl RBC 4,0x10 12 /l

33 RBC-indekser; RDW (= Red Cell Distribution Width) Angir størrelsesvariasjonen på RBC Beregnes som % CV av erytrocyttvolum Stor variasjon = anisocytose

34 Hva står disse forkortelsene for: LPK EVF PLT RBC EPK WBC MCV HCT MCHC Hb HCT MCH RDW MPV Hvilke av dem betyr det samme?