Olgunn S. Lid, seksjonsleder for Seksjon for hematologi-og koagulasjonsanalyser, Lab.for klinisk biokjemi,

Transkript

1 TELLING AV TROMBOCYTTER Olgunn S. Lid, seksjonsleder for Seksjon for hematologi-og koagulasjonsanalyser, Lab.for klinisk biokjemi,

2 Innhold: Presentasjon Ulike instrument som analyserer trombocytter Hva analyserer vi fra blodbanken? Utfordringer med trombocyttmåling i blodprodukt Generelle utfordringer med trombocyttmålinger Eksempler Oppsummering

3 Seksjon for hematologi-og koagulasjonsanalyser 1 av 11 analytiske seksjoner ved Laboratorium for klinisk biokjemi. 25 bioingeniører ved seksjonen Døgndrift 3 fagbioingeniører koagulasjon 4 fagbioingeniører hematologi Ca 2000 prøver hematologi pr døgn Ca 350 prøver koagulasjon pr. døgn

4 To typer instrument: CellDyn Sapphire. Impedansemetode Optisk metode Immunologisk metode, CD61 Advia 2120 Optisk metode

5 Nytt hematologisystem installert. Forhåpentligvis i drift i løpet av mai. Sysmex XN analysemoduler Utstryk og fargemaskin Digitalt mikroskop Arkiveringsmodul

6 Hva gjør vi av trombocytt tellinger fra blodbanken? Teller trombocytter i blod fra plategivere( aferese) under tapping. Dette gjøres innen 10 minutter fra tappestart. Prøvemateriale: EDTAblod Teller trombocytter i plasma, innhold av residuale celler. Prøvemateriale: plasma Teller trombocytter i trombocyttkonsentrat Prøvemateriale: Tpk konsentrat Diverse forskningsprosjekt.

7 Trombocytter fra plategiver. Analyseres på CellDyn Sapphire Optisk metode PSS (90 o ), mål for celleinnhold Sapphire laser IAS (7 o ), mål for cellestørrelse - Edtablod - Normale prøvesvar - Uproblematisk - «billig»

8 Trombocytter i trombocyttkonsentrat Celldyn Sapphire, impedansemåling benyttes Cellen passerer gjennom en kapillæråpning i en strømførende væske Størrelsen på motstanden er proporsjonal med cellestørrelsen. Antall motstander er prop. med celleantallet.

9 Impedansemetode Skiller rbc. og plt. på grunnlag av størrelse. Y- aksen : Antall celler X- aksen : Størrelse. Hver kanal Viktig at kurven er rett for å få et riktig svar

10 Utfordringer Hematologiske Celldyn Sapphire har en instrumenter er ikke statistisk beregning av laget eller validert for coinsidence for analysering i trombocytter/erytrocytter. blodkomponenter, men i fullblod, EDTAblod Olgunn S.Lid

11 Coincidense Dvs at erytrocytter og trombocytter passerer kapillæråpningen samtidig. Instrumentet har en automatisk korreksjon av dette. Hva så når prøvematerialet ikke innholder erytrocytter? Platetall må korrigeres med en beregnet faktor. Celldyn sapphire : dele med 1,25 Olgunn S.Lid

12 Nytt system:sysmex XN 9100 Impedance Optisk Fluorescense flowcytometri, PLT-F Høyere kostnad enn impedance metoden Må us. før Celldyn Sapphire «forsvinner»

13 Generelle utfordringer med trombocyttmåling Trombocyttaggregering Store TPK Microcytter Fragmenter blastfragmenter LPK fragmenter RBC fragmenter Immunglobuliner Proteinutfellinger Malaria,bakterier,sopp Lipid

14 Store trombocytter Tpk opt=6 Tpk imp=43 Tpk CD61=19 Olgunn S.Lid

15 Microcytter Tpk,opt=7 Tpk,imp=83 TpkCD61=9 Olgunn S.Lid

16 Fragmenter fra WBC og blaster Tpk,opt=44 Tpk,imp=73 TpkCD61= 3 Olgunn S.Lid

17 WBC Leukemi Tpk,opt=13 Tpk,imp= ikke svar TpkCD61=8. Pas. fikk tpk konsentrat Olgunn S.Lid

18 MDS- AML,pas. med feber Tpk,opt=14 Tpk,imp=31 Tpk,CD61=28 Pas. fikk ikke tpk konsentrat Olgunn S.Lid

19 RBC fragmenter/schistocytter Tpk, opt= 43* Tpk,imp= 94* CD61= 54 *upålitelig svar Olgunn S.Lid

20 immunglobuliner Tpk,opt= 1110 Tpk,imp= 1170 Tpk,CD61= 181 Olgunn S.Lid

21 Lipid Tpk,opt=7 Tpk,imp=62 Tpk,CD61=11 Tpk.man=11 Normalt CD61 IIplott Olgunn S.Lid

22 Andre tilfeller: Malaria Trombocytter Bakterier / sopp Gir falsk for høye trombocytter ved TPK,opt og TPK,imp Tpk CD 61 OK Olgunn S.Lid

23 Mikroskopet er fortsatt fasit! Olgunn S.Lid

24 Kontrollrutiner for hematologi Daglig kontrollkjøring med intern kommersiell kontroll i tre nivå: lavt,normalt og høyt Daglig samkjøring mellom instrument med pasientprøve mot verdier fra fasitinstrument Driftkontroll, analyseres gjentatte ganger i løpet av et døgn. Får daglig fra blodbanken et prøverør fra blodgiver XB- gjennomsnittsverdien av mcv,mch og mchc monitoreres kontinuerlig Ukentlig samkjøring i lavt nivå, for eksempel trombocytter < 50 10*9/l, mellom alle hematologiinstrument på HUS. Ekstern kvalitetskontroll, 4 x pr år. NOKLUS

25 Oppsummering Telling av trombocytter kan være komplisert. Viktig med god kompetanse på metoder, prinsipp og begrensninger. Viktig med godt samarbeid med blodbanken

26