Erfaringer med EKV. Marthe Wedø Aune NOKLUS & Avdeling for immunologi-og transfusjonsmedisin. Mars 2009

Transkript

1 Erfaringer med EKV ih hematologi Marthe Wedø Aune NOKLUS & Avdeling for immunologi-og transfusjonsmedisin St Olavs Hospital Mars 2009

2 Foredraget vil omhandle.. Hvilke program har vi innenfor EKV i hematologi? Historikk Utfordringer med kontrollmaterialet t l t Valg av kontrollmateriale NOKLUS Erfaringer og resultater fra EKV ved de ulike programmene

3 Programmer i hematologi Tellinger & indekser,diff, Retikulocytter 4 utsendelser pr år,noklus Postanalytisk kvalitetssikring Utsendelse av plott x 1 pr år, NOKLUS SR 3 pr år, Labquality Morfologi 3 utstryk x 2 pr år, Labquality Digital morfologi x 3 pr år, EQUALIS

4 Hematologiutsendelser fra NOKLUS-historikk ikk Labquality ( Finland)- fram til mars 1994 CPD-adenin blod utgått på dato tellinger,indekser og3-og5-part- DIFF Dansk selskap for klinisk kjemi ( Niels Jørgen Christensen)- fra april 1994-høsten 1996 Stabilisert K2EDTA +glutardialdehyd-tellinger,indekser,3-og-5-part tellinger indekser DIFF Instrumentene gruppert i 3 grupper NOKLUS ansatte ( og Marthe A) på opplæring i Århus i dansk metode våren 1996 NOKLUS-første utsendelse høsten 1996 Stabilisert kontrollmateriale: CPD-adenin + K2EDTA +glutardialdehyd til tellinger, 3 part DIFF og enkelte 5-part tdiffi instrumenter t K2EDTA fra samme blodgiver til de av 5-part DIFF instrumentene hvor det stabiliserte materialet ikke kunne benyttes Instrumentgruppene ble gruppert etter metode likhet Sending med Ekspress over natt med kjøling Unntak: SYSMEX NE1500 og DIFF måtte sendes i romtemp ( forskyvninger lymfo->neutro) Utsendelser fra og med : Stabilisert materiale til tellinger & retik, K2EDTA til 3-og 5-part DIFF.

5 Labquality Finland- EKV i hematologi til og med mars CPD ADENIN blod utgått på dato

6 Ekstern kvalitetskontroll i hematologi fra Dansk selskap for klinisk kjemi ( Niels Jørgen Christensen)- fra april 1994 ( stabilisert CPD adenin blod)

7 Plot fra ADVIA 120- stabilisert kontrollmateriale

8 Utfordringer /problemer med ekstern kvalitetskontroll i hematologi Finne det ideelle kontrollmateriale Det fins intet kommersielt kontrollmateriale som kan benyttes i alle typer hematologiinstrumenter mest mulig likt vanlig humant blod samme egenskaper som blod gir like resultater uansett metode Holdbarhet- materiale (og parametere) må være stabilt metodeavhengig transport Temperatur ( MÅ være > +2*C) Kontrollmaterialet t l t til DIFF er ferskvare - må analyseres innen 24 timer Gruppering av instrumenter/ metodeinndeling

9 De største utfordringene i ekstern kvalitetskontroll i hematologi er: Mange instrumenter med SVÆRT forskjellige måleprinsipper pp og metoder,systematiske forskjeller mellom enkelte målemetoder (eks retikulocytter ) Blodcellers volum er forskjellig i citrat blod (jfr CPD-adenin blod) og K2EDTA blod ( forskjellig i ulike typer instrumenter) Morfologiske endringer inntrer etter 4-7 timer i K2EDTA (påvirker primært DIFF-telling) Vakuolisering av monocytter og neutrofile granulocytter Degenerering av kjerner Pyknotiske kjerner, lappedeling av kjerner med mer. Trombocytter blir mer klebrige (kan ofte se adhesjon til monocytter og granulocytter v/24 timer)

10 De største utfordringene i ekstern kvalitetskontroll i hematologi er (forts.): De ulike parametrenes holdbarhet varierer fra 8-96 timer (i romtemp) etter målemetoder og temperatur Stabilisator/fixeringsmiddel påvirker cellenes volum og optiske karakteristika gir forskjellige utslag for ulike parametere ved forskjellige målemetoder eks en del lymfocytter defineres som kjerneholdige røde i CELLDYN 4000 etter timer, påvirker LPK og DIFF monocytter kan clustres som lymfocytter i Coulter instrumenter Forsendelse (temperatur, tid, mekanisk behandling) påvirker cellene. Eks trombocyttene kan aktiveres ( degranuleres) og evt danne plateaggregater. Degranulerte trombocytter påvirker spesielt måling med optiske metoder ( ADVIA 120 og CELLDYN 4000, får falskt for lave resultater) <+2*C neutrofile granulocytter lyserer

11 Metoder til trombocyttelling Manuelle metoder Impedansmetode RBC Ghosts Debris Large Platelets Microcytes Platelets l t RBC Fragments L) Volume (fl 60 fl Platelet V 1-6» Optisk scatter Antistoff CD61 Fluorescense

12 Oversikt teknologiforskjeller DIFF

13 Oversikt metoder for retikulocyttmåling Sysmex XE 2100 ABX PENTRA DX 120 Polymethine Oxazine auramineo NMB mod.thiazole orange Enhet for ADVIA120/2120 SYSMEX R3000 GENS /LH 750 CELLDYN hematologi/akk/rit. Marthe Aune 4000/Sapphire28

14 Oversikt over teknologiforskjeller for telling av RBC&PLT og måling av RBC& PLT volum i de vanligste hematologimaskinene Instrument Metode Pulsediting Focusing Sphering CELLDYN Impedanse 4000/Sapphire Optisk CELLDYN 3200 Optisk CELLDYN 3500 Impedanse ADVIA 120/2120 Optical SYSMEX XE 2100 Impedanse /5000/ XT 2000 Coulter GENS & Impedanse LH 750 ABX PENTRA 120 Impedanse

15 Morfologiske endringer ved henstand i EDTA A C B D Degenerative forandringer i cellene oppstår ved henstand ( sees etter 3 timer, store endringer ved timer) uansett type antikoagulans Neutrofile : kjernene farges mer homogent sammenliknet med ferskt blod, kjernelobuli separeres, vakuolisering av cytoplasma (A,B). I en del av monocyttene sees vakuolisering i cytoplasma, kjernen kan få en irregulær lobulering og desintegreres (C) Lymfocytter: vakuolisering og lobulering av kjernen ( 2 eller 3 lobuli) (D,E,F) Erytrocytter: tt stabile min 6 timer i romtemp. Oppbevaring > 6 t fører til piggepledannelse og sfæring av cellene. E Overskudd piggepledannelse av EDTA og vil morfologiske føre til raskere F endringer i cellene. Oppbevaring ved 4*C forsinker alle morfologiske endringer. Dacie and LEWIS, Practical Haematology, NINTH edition, 2001, ISBN X

16 Gjennomsnittlig % endring fra mean ved 0-tid for trombocytter ved oppbevaring i romtemp og kjøleskap Trombocytter i K2EDTA blod oppbevart 0-72 timer i rom og kjøl, n=30-40 %avvik fra mean ved 0-tid ADVIA 120-rom SYSMEX XE 2100-rom CELLDYN 4000-rom ADVIA 120-kjøl SYSMEX XE 2100-kjøl CELLDYN 4000-kjøl Timer

17 Holdbarhet MCV K2EDTA rom og kjøl, n=30-40 prøver, % avvik fra mean ved 0- tid ( St Olav) Instr. 24 t 48 t 72 t 24 t 48 t 72 t rom rom rom kjøl kjøl kjøl ADVIA 120 9,1 14,5 15,8 1,6 3,6 6,5 SYSMEX XE ,7 13,0 16,0 0,3 0,9 1,5 CELLDYN ,4 10,6 11,11-0,4 0 0 ABX MICROS 1,2 4,3 6, ,4

18 Retikulocytter-gjennomsnittlig % endring fra mean 0-tid for ferskt K2EDTA-blod blod, n= tid e endring fra mean ved pr instrum mentgrupp % Timer ADVIA 120-rom SYSMEX XE 2100-rom CELLDYN 4000-rom ADVIA 120-kjøl SYSMEX XE 2100-kjøl CELLDYN 4000-kjøl

19 Valg av kontrollmateriale Lett stabilisert kontrollmateriale (CPD adenin +glutardialdehyd+k2edta) : Tellinger,indekser og retikulocytter samt CHr/RetHe Fersktappet K2EDTA blod: 3 og 5-part-DIFF alle instrumenter Sendes samme dag som det tappes og lages Sendes med kjøleelement med ekspress over natten post Pga ferskt K2EDTA blod til DIFF- bør analyseres innen 24 timer etter tapping og tillaging

20 Tillaging ekstern kvalitetskontroll (her intern prosesskontroll) 1 pose CPD-adenin blod blandes og stabiliseres med 450 ul 25% glutardialdehyd som er blandet med 20 ml 0,9% NaCl Pipetter i 3 ml K2EDTA-glass Sendes med Ekspress over natt post pakket med kjøleelement

21 Oversikt parametere inkludert i hematologiutsendelser fra NOKLUS LPK EPK Hgb EVF MCV MCH MCHC TPK Pasient-mean MCV, MCH, MCHC 5-part DIFF: Neutro # Lymfo # Mono # Eos # Baso # (LUC # - ADVIA 120/2120) 3-part DIFF Granulocytter # Lymfocytter# Monocytter# Retikulocytter # CHr / RetHe

22 CPD adenin blod stabilisert med glutardialdehyd og K2EDTA er det nærmeste vi kommer det ideelle kontrollmaterialet.. Lett stabilisert CPD-adeninblod som tilsettes K 2 EDTA er et materiale som oppfører seg tilnærmet likt EDTA-blod, men som er stabilt i dg hvis oppbevart 4-8 *C. Materialet kan benyttes som ekstern kvalitetskontroll til tellinger og retikulocyttmåling i alle instrumentyper I ADVIA 120 kan materialet også benyttes som prosesskontroll for 5-part DIFF

23 Stabilitet tellinger prosesskontroll ADVIA- her 14 dg

24 Ekstern kvalitetskontroll i hematologi i Norge 4 utsendelser pr år ( 1 nivå,2 glass) Tellinger (glass 1) DIFF (3 - og 5-part) (glass 2) Retikulocytter og CHr/RetHe (glass1 ) kontrollmaterialet lages og sendes ut av NOKLUS, blodet sjekkes for HIV og hepatitt før utsendelse Homogenitet og stabilitet sjekkes ved hver utsendelse Resultatene rapporteres på nett, resultatene bearbeides statistisk og kommenteres av NOKLUS,rapporteres via nett. Egne resultater sammenliknes med instrumenter fra laboratorier Norge, gruppert etter metode.

25 Oversikt deltakelse og instrumentering ved ekstern kvalitetskontroll 84 norske laboratorier 127 instrumenter 127 påmeldte for tellinger/diff 15 av disse med 3-part DIFF 75 påmeldte til retikulocytter 24 typer instrumenter t

26 % fordeling av instrumenter som deltar i EKV i Norge pr utsendelse ( 126 instrumenter totalt) ABX Micros/Act DIFF II/ADVIA 60 ABX 60,80,XL 80,DX ,3 7,1 8,7 ADVIA 120/2120 CELLDYN 3200/RUBY 5,6 0,8 16,7 6,3 21,4 CELLDYN 4000/SAPPHIRE Coulter LH 750 SYSMEX poch,k4500,kx21,kx21n SYSMEX Xe2100,5000,XT,XS,,

27 Antall Oversikt instrumenter som deltar i EKV i Norge (utsendelse ) - Totalt 126 instrumenter, t 24 forskjellige ter AcT diff 2 ABX Micros CRP ABX Pentra 60 ABX Pentra 80 ABX Pentra XL 80 ABX Pentra DX 120 ABX Pentra 120 Advia 120 Advia 2120 Cell ell-dyn 3200 Cell ell-dyn Ruby Cell ell-dyn 4000 Cell-Dy Dyn Sapphire Cou oulter LH750 Sysmex PocH-100i Sysm smex K4500 Sysm smex KX-21 Sysme mex KX-21N Sysme mex XE-2100 Sysme mex XE-5000 Sysmex XT-2000i Sysmex XT-1800i Sysmex XS 1000i ADVIA 60 Coulter A

28 Gruppeinndelinger Celletellinger og differensialtellinger: ABX Micros CRP 200, Advia 60, Coulter AcTdiff 2 (Gir kun 3-parts diff) ABX Pentra 60/80/XL80/120/DX120 Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter LH750 Sysmex K-4500, KX -21, KX- 21N, Sysmex Poch-100i (Gir kun 3-parts diff) Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i/1800i, XS-1000i Retikulocytter: ABX Pentra 120/DX 120 Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter LH750 Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i CHr/Ret-He: Advia 120, 2120 Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i

29 Hgb utsendelser Hgb i g/d dl 13 12, , ,5 ABX Argos, Micros CRP, Advia 60 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter 10 9,5 9 Hb 1/07 Hb 2/07 Hb 3/07 Hb 4/07 Hb 1/08 Hb 2/08 Hb 3/08 Hb 4/08 Hb 1/09 Hb 2/09 Hb 3/09 Hb 4/09 Hb 5/09 Sysmex K-4500, KX-21, KX- 21N Sysmex XE-2100/5000, XT- 1800i/2000i, XS-1000i Alle Utsendelser

30 Median MCV utsendelse ABX Micros CRP 200, Advia 60, Coulter AcTdiff 2 95 ABX Pentra 80/XL80/120/DX120 Advia 120, 2120 MC CV i fl Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter LH Uts 1 Uts 2 Uts 3 Uts 4 Uts 5 Utsendelse nr Sysmex K-4500, KX -21, KX- 21N, Sysmex Poch-100i Sysmex XE-2100/5000, XT- 2000i/1800i, XS-1000i

31 n alle r fra median trumenter %avvik f inst 3,0 2,0 1,0 0,0-1,0-2,0-3,0 MCV-%avvik median instrumentgruppe/ median alle instrumenter Uts 1 Uts 2 Uts 3 Uts 4 Uts 5 Utsendelser i 2009 ABX Micros CRP 200, Advia 60, Coulter AcTdiff 2 ABX Pentra 80/XL80/120/DX120 Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter LH750 Sysmex K-4500, KX -21, KX- 21N, Sysmex Poch-100i Sysmex XE-2100/5000, XT- 2000i/1800i, XS-1000i

32 MCV-CV% ulike metodegrupper utsendelser ,5 3 2,5 ABX Micros CRP 200, Advia 60, Coulter AcTdiff 2 ABX Pentra 80/XL80/120/DX120 Advia 120, 2120 CV% 2 Cell-Dyn 3200, Ruby 1,5 Cell-Dyn 4000, Sapphire 1 0,5 0 Uts 1 Uts 2 Uts 3 Uts 4 Uts 5 Utsendelser 2009 Sysmex K-4500, KX -21, KX- 21N, Sysmex Poch-100i Sysmex XE-2100/5000, XT- 2000i/1800i, XS-1000i

33 Trombocytter ;% avvik fra median alle % avvik fr ra median alle 15,0 10,0 50 5,0 0,0-5,0-10,0-15,0 Optiske metoder (unntak ABX Micros) Impedansemetoder Uts 1 Uts 2 Uts 3 Uts 4 Uts 5 ABX Micros CRP 200, Advia 60, Coulter AcTdiff 2 ABX Pentra 80/XL80/120/DX120 Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter LH750 Sysmex K-4500, KX -21, KX- 21N, Sysmex Poch-100i Sysmex XE-2100/5000, XT- 2000i/1800i, XS-1000i

34 CHr /RetHe - utsendelser 2008 og Tr rimmet me edian, pg uts 1-08 uts 2-08 uts 3-08 uts 4-08 uts 1-09 uts 2-09 uts 3-09 uts 4-09 uts-5-09 Advia 120, 2120 Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i, SF-3000 Alle

35 Chr /RetHe ( Advia n=6, Sysmex n=24), utsendelser 2008nog 2009 Gjennomsn nuittli % av vvik fra me dian alle 8,0 6,0 4,0 2,0 0,0-2,0-4,0-6,0-8,0 uts uts uts uts uts uts uts uts uts Advia 120, 2120 Sysmex XE-2100/5000, XT- 2000i, SF-3000

36 Retikulocytter utsendelser 2008 og2009 RETIC 5/09 RETIC 4/09 RETIC 3/09 RETIC 2/09 RETIC 1/09 RETIC 4/08 RETIC 3/08 Alle Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i, SF-3000 (n=37) Cell-Dyn 4000, Sapphire (n=17) Advia 120, 2120 (n=7) RETIC2/ Retikulocytter x 10*9/L

37 Retikulocytter utsendelse , median verdier pr instrumentgruppe 80 ABX Pentra 120/DX 120 Retik x 10*9/L Uts 1 Uts 2 Uts 3 Uts 4 Uts 5 Utsendelse nr Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Cell-Dyn 4000, Sapphire Coulter LH750 Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i, SF-3000

38 Retikulocytter utsendelse , % avvik median instrumentgruppe t fra median alle ian alle k fra med % avvi 70,0 60,00 ABX Pentra 120/DX ,0 40,0 Advia 120, ,0 20,00 10,0 Cell-Dyn 3200, Ruby 0,0-10,0 Cell-Dyn 4000, Sapphire -20,0 0-30,0-40,0 Coulter LH750-50,0-60,00 Sysmex XE-2100/ /5000, XT- -70,0 2000i, SF-3000 Uts 1 Uts 2 Uts 3 Uts 4 Uts 5 Utsendelse nr

39 Retikulocytter uts Instr.gruppe ABX Pentra120/120 DX Retik# (10 9 /L, trimmet median CV inter 41,50 1 ADVIA 120, ,25 19,2 8 CELLDYN 3200,RUBY 38,0 3 CELLDYN 4000/ 58,63 6,1 16 Sapphire Coulter LH SYSMEX XT, 39,45 10,00 35 XE2100 /5000 Alle metoder 42,0 23,5 63 n

40 5-part DIFF- medianverdier,kontrollmateriale K2EDTA Neut 5-parts DIFF Lymf 5-parts DIFF 5 2,2 4,5 2 Trimmet median, 10^9/L 4 3,5 3 2,5 2 1,5 Trimmet median, 10^9/L 1,8 1,6 1,4 1,2 1 Neut 1/08 Neut 2/08 Neut 3/08 Neut 2/09 1 Lymf 1/08 Lymf 2/08 Lymf 3/08 Lymf 2/09 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle Mono 5-parts DIFF Eos 5-parts DIFF 0, ,26 0,6 0,24 Trim mmet median, 10^9/L 0,5 0,4 0,3 02 0,2 0,1 Trimm met median, 10^9/L 0,22 0,2 0,18 0,16 0,14 0,12 0 Mono 1/08 Mono 2/08 Mono 3/08 Mono 2/09 0,1 Eos 1/08 Eos 2/08 Eos 3/08 Eos 2/09 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle

41 5-part DIFF-fra uts.2-08,k2edta til alle, CV% hver instrumentgruppe Neutrofile 5-parts DIFF Lymf 5 parts CV % 10 CV % Neut(64/63) 1/07 Neut(63/66) 2/07 Neut(40/46) 3/07 Neut(53/57) 4/07 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Neut(1,77) 1/08 Neut(3,59) 2/08 Neut(3,04) 3/08 Neut(4,39) 2/09 Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Alle 0 Lymf(28/28) 1/07 Lymf(24/26) 2/07 Lymf(44/44) 3/07 Lymf(34/36) 4/07 Lymf (1,60) 1/08 Lymf (1,88) 2/08 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle Lymf (1,14) 3/08 Lymf (1,28) 2/09 Mono 5 parts EOS 5 parts CV % Mono(5/9) 1/07 Mono(10/8) Mono (9/12) Mono(8/7) 4/07 Mono 1/08 Mono(0,35) Mono(0,48) Mono(0,54) 2/07 3/07 2/08 3/08 1/09 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle CV % Eos(1,10) 1/07 Eos(1,85) 2/07 Eos(3,75) 3/07 Eos(3,50) 4/07 Eos(0,15) 1/08 Eos(0,19) 2/08 Eos(0,23) 3/08 Eos(0,16) 2/09 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle

42 5-part DIFF,basofile granulocytter- median og cv uts 08 og 09 Baso 5-parts DIFF 0,12 ian, 10^9/L Trimmet med 0,1 0,08 0,06 0,04 0,02 Mdi Median 0 Baso 1/08 Baso 2/08 Baso 3/08 Baso 2/09 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle Baso 5-parts DIFF CV% CV % Baso(0,80) 1/07 Baso(0,60) 2/07 Baso(1,70) 3/07 Baso 4/07 Baso 1/08 Baso(0,05) 2/08 Baso(0,02) 3/08 Baso(0,035) 2/09 ABX Pentra 60/80/XL80/120/120DX Alltid fått K2EDTA Advia 120, 2120 Cell-Dyn 3200, Ruby Alltid fått K2EDTA Cell-Dyn 4000, Sapphire Alltid fått K2EDTA Sysmex XE-2100/5000, XT-1800i/2000i, XS-1000i Alle

43 Resultater 5-part DIFF uts , trimmet median,n=101 Gruppe Neutro # Lymfo # Mono # EOS # Baso # Luc # ABX Pentra, 60,80,XL80, 120/DX , , , ,21 0, ADVIA 120, 230 2, , , ,22 0, , CELLDYN 1,61 1,94 0,38 0,19 0, , RUBY CELLDYN 4000/ SAPPHIRE 2,04 2,10 0,45 0,19 0,055 Coulter LH 2,24 1,94 0,48 0,20 0, SYSMEX XE 213 2, , , ,20 0, og XT Alle 2,12 2,00 0,47 0,205 0,055 0,190

44 Resultater 5-part DIFF uts , CV %,n=101, kontrollmateriale K2EDTA Gruppe n Neutro # Lymfo # Mono # EOS # Baso # Luc # ABX Pentra, 60,80,XL80, 120/DX ,7 10,4 13,9 57 5,7 158,9 ADVIA 120, 27 5,8 5,3 11,9 8,2 37,9 21, CELLDYN 6 11,9 10,2 12,8 3,6 23,2 3200, RUBY CELLDYN 4000/ SAPPHIRE Coulter LH ,6 3,9 10,5 10,8 25,8 SYSMEX XE 40 3,5 3,9 7,4 6,7 15,2 og XT Alle 101 9,5 6,3 12,2 8,3 52,0 21,5

45 Resultater 3-part DIFF uts , kontrollmateriale K2EDTA (kjøl) n=12, median og CV% Gruppe n Median Gran # Median Lymfo # Median Mono # CV% Gran # CV% Lymfo # CV% Mono # ABX Micros CRP 200/ADVIA 60,Coulter Act diff2 SYSMEX K4500,KX21, KX21N,Sysm ex Poch-100i 7 2,60 1,95 0,50 7,3 20,4 25,7 5 2,05 2,00 0,80 26,1 2,2 51,1 K4500 KX21 Alle-3-part , ,00 0,500 17,5 14,44 62,22 DIFF Alle 5-part 101 2,12 1,995 0,465 9,5 6,3 12,2 DIFF

46 Resultater 3-part DIFF uts , kontrollmateriale K2EDTA (kjøl) n=12, median og CV% Gruppe n Median Gran % ABX Micros CRP 200/ADVIA 60,Coulter Act diff2 SYSMEX K4500,KX21, KX21N,Sysm ex Poch-100i Median Lymfo % Median Mono % CV% Gran % CV% Lymfo % CV% Mono % 10 56,5 24,75 18,3 3,1 21,5 18,8 4 42,65 41,28 15,25 3,6 4,5 4,9 K4500 KX21 Alle-3-part 14 54,55 33, ,25 11,3 27,0 28,7 DIFF Alle 5-part ,1 41,4 11,5 7,7 10,1 21,7 DIFF Sysmex K4500,KX21,KX21N/Poch-i: KX21 KX21N/P kontrollmaterialet t l t bør endres tilbake til stabilisert. Gir bedre overenstemmelse med 5-part DIFF median alle og bedre CV%

47 Instrumentspesifikke kommentarer Til deltakere med Cell-Dyn 3200 og Ruby: LPK: I glass 1 er det tilsatt en stabilisator som påvirker volumet til leukocyttene. Cell-Dyn 3200 og Cell-Dyn Ruby har to ulike kanaler for telling av leukocytter. Det er viktig at alle deltakerne rapporterer leukocyttene fra den samme WBC-kanalen. Vi ønsker derfor at dere rapporterer LPK fra Nuclear Optical Count- kanalen (NOCkanalen).Dette gjelder kun for glass 1. For glass 2 skal WOCkanalen benyttes. Til deltakere med Cell-Dyn 4000 og Sapphire: TPK: Rapporter svar fra impedansekanalen. LPK: På grunn av stabiliseringen kan LPK målt med Cell-Dyn 4000 eller Cell-Dyn Sapphire falle i NRBC (kjerneholdige røde) området. Rapporter derfor LPK som sum av LPK + totalantall NRBC.

48 Resultatrapport fra EKV-hematologi, NOKLUS Trombocytter x10 9 /L, ABX Pentra 80 Historikk: Avvik i % Historikk: Avvik i konsentrasjonsenheter 60 20% Eget snitt: 198,5( ) Avvik fra median: -1,7% -40 Aksept.omr. (median ± 20%): 161,6-242,4 Alle TPK -20% -60 Egen metodegruppe Numerisk oversikt Metodegruppe Median SD CV n nx ABX Micros CRP 200, Advia 60, Coulter AcTdiff 2 212,3 19, ,4 8 0 ABX Pentra 60/80/XL80/120/DX ,03 5, Advia 120, 2120/2120i 216,5 11,75 5, Cell-Dyn 3200, Ruby 215,3 15,32 7,1 8 0 Cell-Dyn 4000, Sapphire 222,5 11,5 5, Coulter LH ,5 1 0 Sysmex K-4500, KX -21, KX- 21N, Sysmex Poch-100i ,77 7,7 7 0 Sysmex XE-2100/5000, XT-2000i/1800i, XS-1000i 193,5 7,56 3, Tillagt verdi, 10*9/L Kommentarfelt Alle TPK 204,8 15,85 7,

49 Oversikt median CV% LPK,Hgb,MCV,TPK og neutrofile granulocytter (5-part DIFF) for alle instrumenter ian CV% Medi LPK Hgb MCV TPK Neut År

50 Hva har vi oppnådd siden 1996? Avdekket nivåforskjeller for en del parametere analysert med ulik teknologi ( Hgb, trombocytter, monocytter, basofile, retikulocytter, Chr/RetHe) Laboratoriene er etter hvert blitt bedre samkalibrert Rapporterte parametere endret mht DIFF ( totalantall rapportert fra utsendelse ) og CHr/RetHe er blitt inkludert Besvarelsene skjer nå via internett tt Svarprosent: 98%! Tillaging av kontrollmateriale, statistisk behandling av samt kommentering av resultater t og utsendelse av svarrapporter skjer hos NOKLUS Etablert program for postanalytisk kvalitetssikring av automatisert hematologi ( utsendelse og tolking av plot)- årlige utsendelser far 2006

51 Hva gjenstår? Utfordringer/forbedringer? Fortsette med optimalisering av kotrollmaterialet mht 3-part DIFF ( stabilisert best for SYSMEX instrumentene) 5-part DIFF- registrere % i tillegg? ( for å avdekke feil clustring ved analysering- viktig mht vurdering av holdbarhetsendringer for materialet- K2EDTA) Hva gjør vi med BASO? Ønske om arkiv funksjon for svarrapportene Videreutvikle postanalytisk kvalitetssikring utsendelsene

52 SR-Labquality 3 utsendelser pr år 476 laboratorier fra 17 land deltar 22 norske laboratorier Antall grupper/metoder: 30 Norge deltar innenfor: SedRate Timer,Screener ( Greiner) (n=12) Automat StaRsed (n=2) Automat : Sedi-15 (BD) (n=5) Westergren :Sediplast (n=3) Kontrollmateriale: suspensjon av erytrocytter fra pattedyr i en plasmaliknende lik væske tilsatt tt konserveringsmiddel. idd Nivå: varierer fra normalt til høyt ved de ulike utsendelsene CV for norske laboratorier: 2,4-19,1 % nivå: 52mm/t ved utsendelse 3-09 Konklusjon: fungerer godt

53 Morfologi- utstryk- Labquality 3 fargede utstryk x 2 pr år 321 laboratorier fra 17 land deltar hvorav19 norske Utstrykene er ledsaget av korte sykehistorier God variasjon i mht normale/ abnormale/ patologiske blodbilder Manuell DIFF utføres samt bedømmelse av morfologi for leukocytter, erytrocytter og trombocytter Fasit: konsensus ved 6 av 8 hematologer

54 Rapport manuell DIFF&morfologi- Labquality

55 Rapport manuell DIFF&morfologi- Labquality

56 Rapport manuell DIFF& morfologi- Labquality

57 Digital morfologi- EQUALIS (Equator) Nettbasert 3 utsendelser pr år 3 besvarelser pr lab nr 1 kasus pr utsendelse God variasjon i normale/abnormale/patologiske blodbilder Resultatframstilling tf tilli Tilbakemelding om % samsvar for hver enkelt celle Forklaring til hver enkelt celle (riktig/feil klassifisertekspertbedømmelse)

58 EQUALIS-digital morfologi-resultater

59 Resultatframstilling digital morfologi EQUALIS-

60 Postanalytisk kvalitetssikring-noklus Utsendelser x1 pr år Utsendelsen består av PLOT fra ulike analysemaskiner, en kort sykehistorie og spørsmål vedrørende resultater, plot, verifiserende tiltak, kommentering og rapportering 2001: pilot Norge og Sverige (KLL) 2006: 41 deltakere, AML M1 Lave trombocytter, umodne leukocytter ( 35% blaster) 2007:41 deltakere, Mononukleose DIFF ikke rekvirert-fokus på ikke rekvirerte parametere og oppfølging av patologiske resultater ( her DIFF) 2008: 40 deltakere, MDS utviklet til leukemi-aml,m2. Cytopeni i alle cellerekker og blaster tilstede. Besvarelse på nett! 2009: bredding til 18 europeiske land pilot november-09 Utsendelse til 3703 laboratorier i mai 2010 PLOT: en godbit..

61 18 deltakende land fra laboratorier Norge Portugal Finland Romania Danmark Russland Belgia Spania Kroatia Sveits Frankrike Storbritannia Tyskland Finland Ungarn Litauen Il Irland Italia

62 Postanalytisk kvalitetssikring av automatisert hematologi -NOKLUS

63 Postanalytisk Hematologi -breddes til 18 europeiske land (pilot nov -09,utsendelse til 3703 lab. i mai 2010)

64

65

66 Hensikt med postanalytisk kvalitetssikring Forhindre at feil svar blir rapportert Standardisering av tolking av plot og resultater,verifiserende tiltak, kommentering og rapportering. Læring Erfaringer så langt: stor variasjon i verifiserende tiltak og kommentering av abnormale funn. Morfologikompetanse mangelvare