CELLETYPER I PATOLOGIEN

Transkript

1 IDENTIFISERING AV CELLETYPER I PATOLOGIEN Tumorbiologikursus Ole Didrik ik Lærum Gades Institutt, seksjon for patologi, Universitetet i Bergen

2 Hvordan stiller vi en diagnose Makroskopisk Lysmikroskopisk, Hematoxylin og eosin -Vevets sammensetning, hvordan ligger cellene i forhold til hverandre -Den enkelte celles utseende Immunhistokjemi og spesialfarvninger, ulike antistoffer i rutinen Molekylarpatologi, f.eks. spesifikke mutasjoner

3 Klassisk vurdering av malignitet Cytologisk atypi: Hver enkelt celler er avvikende (f.eks. Kjernens form og størrelse, hyperkromasi, etc.) Histologisk atypi: Vevet som helhet er avvikende (Tumorvev, bindevev, kar)

4 NOEN PERSPEKTIV Moderne histologisk teknikk med dehydrering av vev, bruk av paraffinblokker og mikrotom ble utviklet omkring Bruk av hematoksylin og eosin til farvning av vev er omtrent like gammel Formalinets evne til fiksering av vev ble oppdaget i ca Dagens histologiske teknikk er omtrent den samme som i 1900

5 GAMMELT OG NYTT Cytologisk teknikk ble utviklet etter den andre verdenskrigen Immunhistokjemisk teknikk som standard er fra etter 1990 Formalin laver kryssbindinger i protein. Man visste ikke den gangen at det bevarer epitoper for antistoffer Epitoper kan i tillegg demaskeres med oppvarming eller kjemikalier

6 Et tropisk tre og noen syntetiske farvestoff har hatt store konsekvenser SEQUENCE OF MALIGNANT TRANSFORMATION AT THE GASTRO-OESOPHAGEAL JUNCTION Barrett s metaplasia Dysplasia - Carcinoma in situ Adenocarcinoma

7 HVORFOR GAMMELT VEVSMATERIALE Kvalitetskontroll og rediagnostikk Tilgang til enormt forskningsmateriale Biologisk forskningsmateriale foreldes ikke. Kan bruke nye metoder og gammelt materiale Hvem vet hva som feilte tippoldefar

8 SCC esophagus, upar

9 FORDELEN MED PRESIS LOKALISERING I CELLER OG VEV Kan gjøre nye, spesifikke farvninger Kan lokalisere prosesser og faktorer med in situ hybridisering, etc Kan suspendere celler for flow cytometri Kan isolere vevsfragmenter med laser mikrodisseksjon Kan lave vevs-mikromatriser

10 LOGISTIKK VED BRUK AV IMMUNHISTOKJEMI

11 Histologiske og cytologiske preparater p kan stort sett farves tilsvarende Morfologien bestemmer hvilke hovedklasser vi farver for Histologi som grunnlag for videre u.s. Hovedmarker for vevs/ eller celletype f. eks. cytokeratin Hovedmarker for mesenchym f. eks. vimentin Hovedmarker for annet vev, f.eks. nevrogent vev for epitelklasse actin eller desmin eller lymfogent vev

12 EKSEMPEL: HUDEN ER ET KOMPLEKST ORGANSYSTEM

13

14 VED CANCER BLIVER DET ENDA MER KOMPLISERT Normale markører kan forsterkes eller forsvinne Nye markører kan opptre Ved progresjon av tumor kan mønsteret endres

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27 EGF/reseptor i glioblastom

28 Adenocarcinom som invaderer Adenocarcinom som invaderer rectumslimhinnen, PSA positivt

29 KONKLUSJONER Tilfeldige farvninger for identifisering av celler er dyrt og unyttig Logiske diagnostiske matriser gir en enkel og rimelig identifisering med stor treff-sikkerhet, dvs. et beslutnings-tre Immunmetoder i cytologi, histologi og flow cytometri gir tilsvarende og supplerende identifisering

30 Stadig nye muligheter Med vevs-mikromatriser kan multiple vev farves i ett eneste snitt Med oppskalering av farvemetodene kan multiple epitoper farves og lokaliseres Vev i paraffin kan i tillegg benyttes til biologiske analyser (DNA, RNA, protein)

31 DEN GODE DIALOG Metoder fra forskningen har revolusjonert patologien og gitt oss en biologisk diagnostikk

32 OPPTIL 4 ULIKE PARAMETRE KAN FARVES SAMTIDIG MED IMMUNFLUORESCENS

33 STADIEINNDELING AV SVULSTER HAR FÅTT ØKENDE BETYDNING 1.0 TNM stage 0.8 SURVIVAL p < EVENTS PATIENTS AT RISK TIME (MONTHS)

34 FLERE BIOLOGISKE MARKØRER KAN FORUTSI PROGNOSEN 1.0 Carcinom 0.8 SURVIVAL p = EVENTS PATIENTS AT RISK TIME (MONTHS) >2