UTFORDRINGER OG MULIGHETER. Ingvild Koren Lobmaier Overlege avd. for Patologi OUS

Transkript

1 DEKALSINERING UTFORDRINGER OG MULIGHETER 1 Ingvild Koren Lobmaier Overlege avd. for Patologi OUS UTREDNING AV PASIENTER HVA GJØR PATOLOGEN Ved spørsmål og kreft eller annen sykdom hos pasienter kan man få en patolog til å undersøke vevsprøver: enten nålebiopsier eller åpne biopsier Biopsimaterialet må bearbeides før det kan undersøkes; fiksering i formalin, trekke ut vann med forskjellige alkoholkonsentrasjoner, støpes i parafin, snittes og farges Patologene ser på det snittede vevet i mikroskop og stiller en diagnose 2 1

2 BENVEV EN UTFORDRING Når det man ønsker å undersøke sitter i ben, eller produserer ben eller kalk, er vevet hardt dette er en utfordring for den videre prosessen Vevet som skjæres må ha samme fasthet som parafinen det er støpt i for å få pene snitt Dette krever at benvevet forbehandles for å bli mykt Det er dette man kaller DEKALSINERING 3 HVA SKJER NÅR VI DEKALSINERER? Skjelettet vårt er hardt fordi det inneholder mineralsalter med calcium og fosfat, som nesten er uoppløselige Ved hjelp av SYRER er det imidlertid mulig å danne løselige calcium- og forfatsalter og slik gjøre skjelettet mykt og elastisk Med CHELATER kan man oppnå samme effekt, men prosessen er mye langsommere 4 2

3 HVILKE SYRER BRUKER VI? Saltsyre Saltpetersyre Maursyre CHELAT EDTA 5 HVA ER FORSKJELLEN OG NÅR BRUKER VI HVA? Sterke syrer: Når? Operasjonspreparater Kortikal (hardt ben) Når det haster Svake syrer: Når? Nålebiopsier Benmarg/spongiøst ben/små biopsier (ikke så hardt ben) Når det haster litt EDTA: Når? Operasjonspreparater når man ikke får tatt bort bløtvevet Når det er viktig med genetikk.. 6 3

4 ER IKKE SYRER ETSENDE PÅ VEV? Problemet med syrer er at de ødelegger bløtvevet rundt benet (muskulatur, bindevev og fett) og dreper osteocyttene (bencellene) i benet Derfor er det ekstremt viktig at man først har fiksert vevet skikkelig fiksert vev ødelegges ikke i like stor grad som ufiksert vev Vevet må derfor skjæres i skiver som ikke er for tykke (3-4 mm) både for å fremskynde fiksering og redusere lengden i syre 7 KAN MAN GJØRE ALLE UNDERSØKELSER PÅ DEKALSINERT VEV? DNA blir ødelagt, slik at man ikke bør bruke sterke syrer dersom genetiske analyser er avgjørende for diagnostikken Maursyre og EDTA fungerer best Syrene lager også problemer med både H&E og spesialfarger fordi vevet blir for SURT 8 4

5 EDTA er ekstremt skånsomt på vevet og brukes spesielt i Øre-Nese-Hals-området (tynne ben og umulig å skille bløtvev fra ben) Problemet er at prosessen er mye langsommere enn med syre det kan ta opptil flere uker 9 HVORDAN SKJÆRER MAN BEN? 10 5

6 HVA KAN MAN GJØRE FOR Å FRAMSKYNDE PROSESSEN? Det er gjort en del forskning som sammenlikner metoder for å finne ut hvordan prosessen kan fremskyndes og hvilken innvirkning det har på resultatet Bevegelse: mekanisk bevegelse fremskynder prosessen uten at det har negativ effekt på snittkvaliteten Varme: varmebehandling opptil 37ºC har positiv effekt, men varmen må være jevn For høy temp (>40ºC) skader vevet 11 HVA KAN MAN GJØRE FOR Å FRAMSKYNDE PROSESSEN? På OUS bruker vi begge deler! Preparatene fikseres og legges i briketter som beveges i syren mens den varmes i en spesialmikrobølgeovn. 12 6

7 13 VURDERING AV DEKALSINERINGEN.. For å teste om vevet er ferdig kan man: Stikke en nål for å kjenne etter kalk Bøye snittet for å sjekke elastisiteten (mest skånsom) Radiologisk vurdering 14 7

8 HVORFOR ER DET VIKTIG MED GOD OG RIKTIG DEKALSINERING? Dårlig Bra 15 HELSE MILJØ OG SIKKERHET Arbeidet på en histologilab er ikke risikofri Formalin er teratogent og carcinogent - det er viktig at man har god ventilasjon og bruker beskyttelsesutstyr Saltsyre og formalin lager en giftig gass som er etsende og carcinogen laben må ha god ventilasjon med kunststoffrør i avtrekket og gode rutiner for håndtering av materialet for å minimere risikoen 16 8

9 GOD KVALITET I HØYSETET For best mulig diagnostikk og dermed best mulig pasientbehandling er det viktig at kvaliteten på det vi gjør er på topp Når det gjelder dekalsinering kan dårlig kvalitet ha stor betydning for diagnostikken! Man kan overse svulster fordi: - de mangler på snitt som ikke er behandlet lenge nok - de forsvinner i en rosa grøt pga for lang syrebehandling 17 GOD KVALITET I HØYSETET Nøkkelen til god kvalitet er god kommunikasjon og godt samarbeid mellom patolog og bioingeniør! 18 9

10 19 10