Streptococcus agalactiae. Andreas Radtke overlege Nasjonal referanselaboratorium for gruppe B streptokokker

Størrelse: px

Begynne med side:

Download "Streptococcus agalactiae. Andreas Radtke overlege Nasjonal referanselaboratorium for gruppe B streptokokker"

Kathrine Ludvigsen
8 år siden
Visninger:

1 Streptococcus agalactiae Andreas Radtke overlege Nasjonal referanselaboratorium for gruppe B streptokokker 1

2 Streptococcus agalactiae S.agalactiae eneste streptokokken som agglutinerer gruppe B antistoffer Rebecca Lancefield (1933): klassifikasjon av ß- hemolytiske streptokokker synonym gruppe B streptokokk (GBS) Opprinnelig funnet i mastitt hos storfe (agalactiae). Første rapporter om human sykdom i 1935 Siden 1960 i økende grad erkjent som hovedårsak til septikemi hos nyfødte (i vestlige land) 2

3 Primærskål. Oppvekst av GBS fra vaginalpensel 3

4 Identifikasjon Agglutinasjonstest for gruppeantigener etter Lancefield Camp test Hippurathydrolyse 4

5 5

6 GBS overflateantigener Polysakkarid gruppeantigen Satt sammen av fire oligosakkarider Kapselpolysakkarid Oligosakkarider repetert ganger 10 forskjellige Stammevariable overflateproteiner Ladder-forming, stammevariabel, kan brukes til typing Andre overflateproteiner Pili 6

7 Typing av GBS 7

8 Typing av GBS Kapseltyping Proteintyping Antibiotikaresistens PFGE MLST MLVA 8

9 SEROTYPING AV GBS 1. Kapselpolysakkarider Ia, Ib, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, XI 2. Subtyping av overflateproteiner Alpha-like proteins C alpha (bca) Alp1 (alp1/epsilon) Alp2 (alp2) Alp3 (alp3) R4 (rib) andere: C beta (bac) R3 (sar5?) Z1, Z2 9

10 Laddering pattern in Western blot : SDS ekstrakt av GBS stammer med anti-c protein alpha Mab 10

11 Kapsel- og proteintyping St.Olavs Kapseltyping Multiplex-PCR (Imperi et al., J Microbiol Methods 2009) (Latex agglutinasjon: Statens Seruminstitutt) Proteintyping Multiplex-PCR (Creti et al. J Clin Microbiol 2004) Alternativer: single PCR, egne antistoffer 11

12 Genotyping PFGE med sma1 Repeterbarhet Ressurskrevende GBS: få bånd MLST Viktigste genotypingsmetode for tiden klonale komplekser (CC) noe over 600 forskjellige typer 12

13 GBS MLVA Multi-locus variable number of tandem repeats assay Basert på fem repetert områder i GBS genomet Arbeidsgang: PCR av fem områder, ev. multiplex Størrelsesanalyse av PCR produktene gelelektroforese fragmentanalyse 13

14 14 >gi : Streptococcus agalactiae A909, complete genome GCGGCTTCACCCGTTGATGGTAATTTTTTACTATAC TTTTTGTTTTCAATAGCTTTTTTAACCGCCAAGT TTCCGCTAGTATTAACCGATTTTTTGGTTG CTGGTTTGGCTT CTGGTTTAGCCT CTGGCTTAACGT CTGGTTTAACTT CTGGCTTAGCCT CTGGTTTGGCCT CTGGCTTAACGT CTGGTTTAACTT CTGGCTTAGCCT CTGGTCTGGCCT CTGGCTTAACGT CTGGTTTAATTT CTGGTTTAGCCT CTGGTTTGGCTT CTGGCTTAGCCT CTGGTTTAACTT CTGGCTTAACGT CTGGCTTAACGT CTGGCTTAACAT CTGGTTTGGCTT CTGGTTTAACTT CTGGCTTAGCTT CTGGTTTGGCTA CTTTTTTATCTTTTAATTCTAAACTTTGTAAAGCAT CACGTAGCTTGTTAGCTAATTGATTTGCTTGATCAG TGGTAATAAATTTTCCCTCT >NEM316_elfo:322bp_sekv:296bp GCTAGTATTAACCGATTTTTTGGTTG CTGGTTTGGCCT CTGGTTTAGCTT CTAGCTTAGCCT CTGGTTTAGCTT CTGACTTAGCCT CTGGTTTAGCTT CTGGCTTAGCCT CTGGTTTAACGT CTGGTTTAGCTT CTGGCTTAACGT CTGGCTTAGCTT CTGGTTTGGCCT CTGGCTTAGCTT CTGGCTTAGCTT CTGGCTTAGCTT CTGGCTTAGCTT CTGGTTTGGCCT CTGGTTTGGCTT CTGGTTTGGCTA CTTTTTTATCTTTTAATTCTAAACTTTGTAAAGCATCACGTA

15 PCR av et VNTR område Gelelektroforese BioAnalyzer Kapillær elektroforese sekvensator 15

16 16

17 Stammer fra Barn 2006 (n=51) mors Ia Ib II III IV V VI Kapseltype Stammer fra barn <1år 2007 (n=49) mors Ia Ib II III IV V 17

18 2006/2007 Kapseltype V, resistent mot Ery/Klinda mors mors mors mors mors 18

19 2006/2007 Kapseltype V, resistent mot Ery/Klinda SATR5 (bp) 681 mors mors mors mors mors

20 Antibiotikaresistens Ingen penicillinresistente stammer Stammer med nedsatt sensitivitet rapportert (Japan, USA) Resistens ovenfor erytromycin og klindamycin 3 typer resistens Lavgradig Induserbar klindamycinresistens Høygradig Norge Noe Ery/Klindaresistens (rundt 10%) NORM 20

21 Sykdomsspektrum og epidemiologi 21

22 GBS kolonisering 25-35% av befolkningen i fertil alder er kolonisert Reservoar Tarm Vagina (nedre tredel) Storfe ser ikke ut til å være kolonisert obligat patogen 22

23 GBS sykdomspanorama Perinatale infeksjoner (insidens i Norge: 0,4-0,8 / 1000 levendfødte ) pneumoni sepsis meningitt Gravide og fødende Voksne urinveisinfeksjoner amnionitt/puerperalsepsis senaborter oftest > 60 år, (diabetes, malignitet mm.) septikemi, urosepsis, septisk artritt, hud- og bløtdelsinfeksjoner, pneumoni, meningitt, endokarditt 23

24 Mor til barn overføring ring (EOD) GBS kolonisert mor (25-33%) 50% 50% non-kolonisert nyfødt kolonisert nyfødt >99% <1% asymptomatisk Early-onset sepsis, pneumoni, meningitt 24

25 Clinical characteristics of neonatal group B streptococcal infections Early onset newborn disease (EOD) Late onset newborn disease (LOD) Age < 7days >7days<90 days GBS transmission Risk factors Ascending infection from the genital tract, colonization of the infant before or during delivery Maternal carriage of GBS, prematurity, maternal obstetrical complications Not well understood, vertical and horizontal colonization, in neonatal intensive care units Not well understood, term and premature infants, breastfeeding with GBS mastitis Clinical presentation Respiratory distress, apnea, hypotension bacteraemia (40-60%), pneumonia (30-50%), meningitis (5-15 %) Fever, often non-specific symptoms, bacteraemia (60%), meningitis (40%) Mortality 5-15 % 0-5 % 25

26 EOD LOD Høiby, E.A./Hasseltvedt, V. 26

27 Fordeling kapseltyper 2007 alle innsendte stammer stammer barn <1år n=188 n=49 V 24 % VI 1 % Ia 15 % Ib 6 % IV 8 % V 16 % VI 0 % Ia 12 % Ib 8 % II 10 % II 10 % IV 19 % III 25 % III 46 % 27

28 Antall tilfeller EOD og LOD EOD LOD EOD ikke III EOD III LOD ikke III LOD III 28

29 Insidens GBS nyfødtsykdom (St.Olavs tall): total, EOD og LOD 1,00 0,90 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 0,30 0,20 0,10 0, Insidens Insidens EOD Insidens LOD Gjennomsnittlig insidens/1000 levendfødte for perioden: Total: 0,73; EOD: 0,42; LOD: 0,31 29

30 GBS i USA

31 GBS sykdom meldt til MSIS < år år

32 Stammer innsendt St.Olavs / Tilfeller meldt MSIS Invasive stammer St.Olavs vs. meldte tilfeller MSIS St.Olavs, typete stammer MSIS, antall tilfeller

33 GBS mastitt hos storfe Ingen kolonisering Akutt sykdom Hyppigere: subakutt sykdom med arrdannelse i melkeganger Kan spre seg i besetninger Var hyppigste mastitt agens før ca tallet Betydelige anstrengelser for å eradikere GBS fra norske besetninger på 1970 og 80-tallet Løsdriftfjøs, melkeroboter Smitte mellom mennesker og kyr? 33

34 Profylakse av EOD i Norge 34

35 Forebygging neonatal sykdom: Aktuelle strategier mens vi venter på en vaksine og har ingen tilbud til LOD profylakse Antibiotikaprofylakse under fødsel basert på: vurdering av risikofaktorer i svangerskap og ved fødsel eller identifisere GBS bærere før fødsel (screening uke 35-37) 35

36 Norge: Strategi basert på risikofaktorer Skal kunne forebygge 50-70% av tidlig GBS sykdom Norsk veileder for fødselshjelp Penicillin i.v. gis til kvinner som tidligere har født barn med alvorlig GBS-sykdom har hatt GBS UVI eller bakteriuri i aktuell svangerskap har fått tilfeldig påvist GBS i fødselskanalen/rektum og har en av følgende risikofaktorer: Preterm fødsel (før 37 uker) Fostervannsavgang over cirka 18 timer før barnet er født (grensen er veiledende: det er ikke grunn for å starte antibiotika når kvinnen sover, eller fødsel er nær forestående) eller det taes en vaginalprøve til hurtig-pcr 36

37 Factors associated with early-onset GBS disease: multivariable analysis Characteristic Adjusted RR (95% CI) GBS screening 0.46 ( ) Prolonged ROM (> 18 h) 1.41 ( ) Pre-term delivery 1.50 ( ) Black race 1.87 ( ) Maternal age <20 y 2.22 ( ) Previous GBS infant 5.54 ( ) Intrapartum fever 5.36 ( ) Schrag et al, NEJM

38 Screening i uke ved innleggelse i fødeavdelingen Svar foreligger ved innleggelse Ca % overenstemmelse med situasjonen ved fødsel Svartid: < 90 min? Ulemper: Kostnad (GeneXpert) Døgndrift av laboratorium? Fødsler før resultatet foreligger: 20-25% Sensitivitet GeneXpert? Opsjoner ved positiv resultat: Antibiotikaprofylakse til alle bærere eller Vurdering av risikofaktorer 38

39 Klinisk prøvemateriale Vaginal/rektal pensel Dyrkning i selektiv buljong + på selektiv agar 18 t Subkultur fra buljong ved iv. av GBS på agar 18 t Totaltid for standart dyrkning > 2 dager Hurtig DNA ekstraksjon min Real-time PCR < 35 min Totaltid for real-time PCR <2 timer? GeneXpert system 75 min Uten anrikning: Ikke anbefalt av CDC 39

40 Strategi basert på prenatal GBS screening (USA siden 2002, mange europeiske land) Kan forebygge ca. 85% av tidlig GBS sykdom Utføres i uke % overenstemmelse med bærertilstand ved fødsel Hvis positiv - tilbud om antibiotika under fødsel Hvis negativ - profylakse unødvendig Risikofaktorer benyttes som beslutningsgrunnlag når resultatet av screening ikke foreligger 40

41 Vaksine Vil beskytte EOD, LOD barn og utsatte voksne Kandidatantigener: Kapselpolysakkarid Alpha-like proteins Div. andre overflateproteiner Pili Fase I/II: trivalent vaksine CPS Ia, Ib, III Novartis 41

42 Konklusjon Hovedårsak til invasiv bakteriell sykdom hos nyfødte Risikobasert strategi for profylakse Hva med late-onset disease? Økende antall tilfeller hos voksne Resistens ovenfor erytromycin og klindamycin 42

Like dokumenter

Laboratoriemedisinsk klinikk Avdeling for medisinsk mikrobiologi ÅRSRAPPORT fra. Nasjonalt referanselaboratorium for Streptococcus agalactiae

Laboratoriemedisinsk klinikk Avdeling for medisinsk mikrobiologi ÅRSRAPPORT 2016 fra Nasjonalt referanselaboratorium for Streptococcus agalactiae Postadresse: St. Olavs Hospital HF, Sentral stab, Fagavdelingen,