Chlamydia pneumoniae-igm-selisa medac. Norsk 432-TMB-VPN/010512

Transkript

1 Chlamydia pneumoniaeigmselisa medac Norsk TMBVPN/010512

2 FABRIKANT medac Gesellschaft für klinische Spezialpräparate mbh Fehlandtstraße 3 D20354 Hamburg DISTRIBUSJON medac Gesellschaft für klinische Spezialpräparate mbh Geschäftseinheit Diagnostika Theaterstraße 6 D22880 Wedel Telefon: ++49/ 4103 / Fax: ++49/ 4103 / TINGE ADDRESS Telefon: ++49/ 4103 / Fax: ++49/ 4103 / TMBVPN/010512

3 Chlamydia pneumoniaeigmselisa medac Enzyme immunoassay for påvisning av IgM antistoff mot Chlamydia pneumoniae Cat. no.: 432TMB KUN FOR IN VITRO DIAGNONOSTISK BRUK INTRODUKSJON Chlamydia er gramnegative bakterier De har en intracellulær livs syklus i den mucosale overflate, endothelial celler, smooth muscle celler, og i følge nyere oppdagelser i visse vevs strukturer i det sentrale nervesystem. Chlamydia er avhengig av energirike fosfater i sine verts celler og er derfor energi parasitter. Slekten chlamydia omfatter fire arter: C. pneumoniae, C. trachomatis, C. psittaci, og C. pecorum. C. pneumoniae og C. trachomatis er humane patogener. C. psittaci er patogene for mennesker og en del dyrearter. Opptil nå har, C. pecorum bare blitt isolert fra dyr. Infeksjoner med C. pneumoniae forekommer over hele verden. Sykdomsspekteret, i tillegg til influensalignende sykdom, omfatter også sinusittis, pharyngittis, bronkitt, kronisk obstruktive lunge sykdommer, pneumonia, og reaktiv artritt. Årsakssammenheng mellom C. pneumoniae ved infeksiøs astma, sarcoidosis, lungekreft, atherosclerose, akutt myocardialt infarkt, hjerne slag, multiple sklerose, og sen inntreden av Alzheimer s sykdom er områder som gjenstår å undersøke. I følge Grayston og Saikku (1989), som først beskrev denne Chlamydia arten, blir nesten alle infisert og reinfisert med C. pneumoniae gjennom hele livet. De hovedsakelig svake og/eller diffuse symptomene som C. pneumoniae infeksjoner forårsaker gjør den vanskelig å påvise; ikke påviste infeksjoner kan lede til, kroniske tilstander av sykdommer med alvorlige følger. Diagnosen av C. pneumoniae infeksjoner er basert på isolasjon av organismen fra cellekultur, direkte antigen påvisning, nuklein syre amplifikasjons tester og serologi. Isolasjon av organismen fra cellekultur trenger normalt flere påfølgende steg; det er tidkrevende, begrenset bare til spesial laboratorier, og bare noen få tilfeller lykkes. 432TMBVPN/

4 Direkte immunofluorescence tester (IFA) og antigen enzymeimmunoassays (EIA) er ikke tatt bredt i bruk; de har blitt rapportert til å ha lav sensitivitet og spesifisitet. For påvisning av arts spesifikt antistoff har microimmunofluorescence (MIF) blitt ansett som gull standard MIF er arbeidskrevende, subjektiv, og krever mye erfaring. Testsystemet er ikke standardisert og bruk av forskjellige antigener og cut off grenser for tidligere, ferske eller pågående infeksjoner gir signifikante lab til lab variasjoner. Chlamydia pneumoniaeselisa medac inneholder et høy renset og spesifikt antigen. Påvisning ev IgM, IgA, og IgG antistoff muliggjør vurdering av infeksjonens status og follow up etter behandling. IgM antistoff indikerer med en høy grad av sikkerhet for tilstedeværelse av akutt infeksjon. Chlamydia pneumoniaeselisa medac tilfredsstiller kravet til standardisering, objektivitet, og automatisering i et rutine laboratorium. 432TMBVPN/

5 TESTPRINSIPP Platen er coated med et høy renset C. pneumoniaespesifikt antigen. C. pneumoniaespesifikt antistoff fra prøven bindes til antigenet. Peroxidasekonjugert antihuman IgM antistoff bindes til IgM antistoff (P = peroxidase). Inkubrering med TMBsubstrat (*). Reaksjonen stoppes ved tilsetning av svovelsyre. Absorbsjonen leses fotometrisk. TESTENS FORDELER Høy sensitivitet og spesifisitet. Brytbare mikrobrønn strips gir god utnyttelse av kitet. 432TMBVPN/

6 KIT INNHOLD Cat. no.: 432TMB 1. MTP Mikroplate: 12 x 8 brønner, (merket med CPM, med ramme og tørremiddel forseglet i en aluminium pose), brytbare, Uformede, coated med C. pneumoniaespesifikt antigen and FCS, ferdig til bruk. 2. CONTROL Negativ kontroll: 1 flaske med 1,5 ml, humant serum, ferdig til bruk, blåfarget, inneholder NBCS, phenol, ProClin TM 300 og gentamycin sulfat. 3. CONTROL + Positiv kontroll: 1 flaske med 1,5 ml, humant serum, ferdig til bruk, blåfarget, inneholder BSA, phenol, ProClin TM 300 og gentamycin sulfat. 4. WB Vaskebuffer: 1 flaske med 100 ml PBS/Tween (10x), ph 7,2 7,4, inneholder ProClin TM BACDIL Prøver fortynning: 1 flaske med 110 ml PBS/Tween/NBCS, ph 7,0 7,2, ferdig til bruk, blåfarget, innehold ProClin TM CON Konjugat: 4 flasker med 4,5 ml i hver, geit antihuman IgM, HRPkonjugert, ferdig til bruk, rødfarget, inneholder BSA, phenol, ProClin TM 300 og gentamycin sulfat. 7. TMB TMBsubstrat: 1 flaske med 10 ml, ferdig til bruk. 8. STOP Stopp løsning: 2 flasker med 11 ml i hver, 0,5 M svovel syre (H 2 SO 4 ), ferdig til bruk. 9. RFABS IgG/Rfabsorbent: 1 flaske med 4 ml, geit antihumant IgG antistoff, ferdig til bruk, inneholder < 0,1 % natrium azide. 432TMBVPN/

7 1. OPPBEVARING OG HOLDBARHET Material/Reagens Status Lagring Holdbarket Test kit uåpnet C Inntil utløpsdato Microplate åpnet C i 12 uker pose med tørremiddel Kontroller åpnet C 12 uker Vaskebuffer fortynnet C 12 uker Prøve fortynning åpnet C 12 uker Konjugat åpnet C 12 uker TMBsubstrat åpnet C 12 uker Stopp løsning åpnet C Inntil utløpsdato IgG/Rfabsorbent åpnet C 12 uker Ikke bruk reagenser etter utløpsdato. 2. REAGENSER OG MATERIALER SOM ER NØDVENDIGE, MEN SOM IKKE FØLGER MED I KITET 2.1. Destillert vann (H 2 O redist.). Bruk av deionisert vann kan forstyrre test prosedyren Justerbare mikro pipetter Rene glass eller plastikk beholdere til fortynning av vaskebuffer og prøver Passende utstyr for vasking av mikroplater (eks multistepper eller ELISA vasker) Inkubator for 37 C Mikroplate avleser med filtre for 450 nm and nm. 3. TILLAGING AV REAGENSER Alle kit komponenter må få romtemperatur før bruk. Beregn det nødvendige antall brønner som trengs Mikroplate Aluminium posen må forsegles helt tett igjen etter hver gang det taes ut brønner. Oppbevaring og stabilitet til brønnene er nevnt i avsnitt TMBVPN/

8 3.2. Vaskebuffer Bland en del vaskebuffer (10x) med ni deler destillert vann (eks 50 ml vaskebuffer (10x) med 450 ml vann). 10 ml fortynnet vaskebuffer trenges til 8 brønner. Krystaller i vaskebufferen (10x) må løses opp ved oppvarming (maks. 37 C) og/eller risting ved romtemperatur. Ikke bland test spesifikke reagenser (mikroplate, kontroller, konjugat) fra ulike kit lot nr. Prøve fortynning, vaskebuffer, TMBsubstrat, IgG/Rfabsorbent og stopp løsning kan innbyrdes byttes i alle Chlamydia og MycoplasmaELISA medac. Reagenser fra andre produsenter kan ikke brukes. Gyldige og reproduserbare resultater kan bare oppnåes hvis prosedyre er fulgt nøyaktig. 4. PRØVER 4.1. Testen er for serum prøver, men ikke for plasma. Pasientprøvene kan oppbevares i 7 dager ved 28 C. For lengre oppbevaring må prøvene fryses ved 20 C. Unngå gjentatte tining og frysing av prøvene For å unngå interferens med høye IgG titre og reumatoide faktorer (RF) skal absorpsjon av IgG/RF gjøres Ytterligere forbehandling av sera, eks. inaktivering, er ikke nødvendig. Men de må ikke være kontaminert med mikroorganismer eller inneholde røde blodlegemer. 5. TEST PROSEDYRE 5.A. IgG/RFABSORBSJON Viktig Kontrollene er ferdig til bruk (ingen absorpsjon er nødvendig). De følgende volumer er kun for enkelt bestemmelser. 5.A.1. Serum: 10 µl serum fortynnes med 240 µl prøve fortynning (fortynning 1:25). 5.A.2. Absorpsjon: 30 µl IgG/RfAbsorbent og 30 µl fortynnet serum blandes (fortynning 1:50) og inkuberes i 15 minutter ved romtemperatur. Alternativt: Absorpsjonen kan gjøres over natten ved 2 8 C. 5.A.3. Nå er test fortynningen 1: TMBVPN/

9 5.B. TEST PROSEDYRE 5.B.1. Klipp opp aluminium posen overfor zip låsen og ta ut det nødvendige antall mikroplate brønner (se 3.1.). Mikroplate brønnene er ferdig til bruk og trenger ikke å pre vaskes. 5.B.2. Pipetter 50 µl prøve fortynning til brønn A1 som blank (se 6.A.), og 50 µl negative kontroll (i duplikat), positive kontroll, og de fortynnede pasient prøvene. Hvis nødvendig kan mikroplate brønnene oppbevares i et fuktighets kammer i maksimum 30 minutter ved romtemperatur før videre prosedyre. 5.B.3. Inkuber mikroplate brønnene i 60 min (± 5 min) ved 37 (± 1 C) i et fuktighetskammer eller forseglet med dekkfolie over brønnene. o C 5.B.4. Etter inkubasjonen vaskes mikroplate brønnene tre ganger med 200 µl vaskebuffer pr. brønn. Pass på at alle brønnene fylles. Etter vaskingen bankes mikroplate brønnene mot et filter papir. Brønnene må ikke få tørke ut! Fortsett umiddelbart! 5.B.5. Tilsett konjugat (rød farget) til hver brønn. 50 µl konjugat må pipetteres til brønnene hvis testen gjøres manuelt. NB: Hvis det brukes automatisk utstyr må 60 µl konjugat tilsettes hver brønn grunnet høyere fordamping i utstyrets inkuberings kammer. Egnetheten til testen for automatisering er bekreftet under evaluering av testen. Men vi anbefaler å kontrollere samsvarheten med det utstyret som laboratoriet bruker. 5.B.6. Inkuber igjen i 60 min (± 5 min) ved 37 o C (± 1 C) i et fuktighetskammer, eller forseglet med dekkfolie over brønnene. 5.B.7. Eter inkubasjonen vaskes mikroplate brønnene igjen (se 5.B.4.). 5.B.8. Tilsett 50 µl TMBsubstrat til hver brønn og inkuber mørkt i 30 min (± 2 min) ved 37 o C (± 1 C) i et fuktighetskammer eller forseglet med dekkfolie over brønnene. Prøvene blir blå. 432TMBVPN/

10 5.B.9. Stopp reaksjonen ved å tilsette 100 µl stoppløsning til hver brønn. Positive prøver blir gule. Vask/tørk undersiden av mikroplatebrønnene før de leses av i fotometeret og pass på at det ikke er luftbobler i brønnene. Avlesningen må gjøres innen 15 minutter etter tilsetting av stopp løsningen. 5.C. TABELL FOR IgG/RFABSORBSJON Per bestemmelse 10 µl serum µl prøve fortynning 250 µl; dil. 1:25 30 µl IgG/Rfabsorbent + 30 µl fortynnet serum 60 µl; dil. 1:50 Vortex Inkuber i 15 min ved romtemperatur eller over natten ved 2 8 C Test fortynning 1:50 432TMBVPN/

11 5.D. TABELL FOR TEST PROSEDYRE Prøve fortynning Negativ kontroll Positiv kontroll Absorbert prøve Blank (A1) 50 µl Negativ kontroll 50 µl Positiv kontroll 50 µl Prøve 50 µl Inkuber i 60 min ved 37 C, vask 3 x med 200 µl vaskebuffer Konjugat 50/60 µl*) 50/60 µl*) 50/60 µl*) 50/60 µl*) Inkuber i 60 min ved C 37, vask 3 x med 200 µl vaskebuffer TMBsubstrat 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl Inkuber mørkt i 30 min ved 37 o C Stopp løsning 100 µl 100 µl 100 µl 100 µl Fotometrisk avlesning ved 450 nm (ref nm) *) manuell/automatisk prosedyre (se 5.B.5.) 6.A. BEREGNING AV RESULTATER (VALIDERING) Avles OD verdiene ved 450 nm (referanse bølgelengde nm). Trekk OD verdien til blank(brønn A1) fra alle de andre OD verdiene. Blank OD verdien må være < 0,100. Gjennomsnitts OD verdien til de negative kontrollene må være < 0,100. OD verdien til den positive kontrollen må være > 0,800. Cutoff = gjennomsnitts OD verdien til de negative kontrollene + 0,380 Grå sone = Cutoff ± 10 % Repeter kjøringen hvis resultatene ikke møter spesifikasjonen. 432TMBVPN/

12 6.B. EVALUERING AV RESULTATENE: 6.B.1. KVALITATIV Resultat OD < Grå sone OD av Cutoff ± 10 % OD > Grå sone Validering negativ usikker positiv 6.B.2. SEMIKVANTITATIV CutoffIndex: OD Prøve OD Cutoff Validering < 0,9 negativ 0,9 1,1 usikker > 1,1 positiv Prøver med OD verdier innen grå sonen skal retestes sammen med ferske prøver som er tatt 14 dager senere for å se om det er titer endring. Resultatene skal alltid tolkes i samband med IgG og IgA, og med kliniske data og andre diagnostiske parametere. Høye konsentrasjoner av hemoglobin og bilirubin i serum har ingen innvirkning på resultatene. Imidlertid kan høye lipid konsentrasjoner øke OD verdiene til negative prøver. Kryssreaksjoner med antinuklære antistoffer, heterofile antistoffer og antistoff mot to C. psittaci så vel som mot C. trachomatis kan ikke sees bort fra i enkelt tilfeller. 432TMBVPN/

13 6.C. SPESIFIKK IgM/IgA/IgGTOLKNING Mulige resultater IgM IgA IgG COI* COI COI >1,1 <0,9 <0,9 + >1,1 >1,1 <0,9 + + >1,1 <0,9 >1,1 + + >1,1 >1,1 >1, <0,9 >1,1 >1,1 + + <0,9 <0,9 >1,1 + <0,9 >1,1 <0,9 + <0,9 <0,9 <0,9 * CutoffIndex Tolkning 1. Serologisk indikasjon på tidlig fase av infeksjon eller polyclonal Bcelle stimulering. Retest IgM, IgA og IgG etter 14 dager. 2. Serlogisk indikasjon på akutt infeksjon. Retest IgG etter 14 dager. 3. Serologisk indikasjon på akutt infeksjon. 4. Serologisk indikasjon på akutt infeksjon. 5. Serologisk indikasjon på aktuell infeksjon 1. Retest IgA og IgG etter 14 dager. 6. Serologisk indikasjon på gjennomgått infeksjon. Ved klinisk mistanke, retest IgA og IgG etter 14 dager. 7. Serologisk indikasjon på tidlig fase av infeksjon eller et enkelt, persisterende IgA 2. Retest IgM, IgA og IgG etter 14 dager. 8. Ingen serologisk indikasjon på aktuell eller gjennomgått infeksjon 3. Ved klinisk mistanke, retest IgM, IgA og IGg antistoff etter 14 dager. Kommentar: Resultater nær grenseverdier kan indikere begynnende eller andre infeksjoner. Retesting etter 14 dager er anbefalt. 432TMBVPN/

14 1 En aktuell infeksjon kan bety: kronisk infeksjon med persisterende patogener: Cutoffindexverdiene av antistoffene forblir konstante i flere uker. akutt infeksjon: Cutoffindexverdiene av antistoffene øker signifikant. høy IgG konsentrasjon: En akutt infeksjon kan ikke utelukkes. I følge Grayston et al. (1989), MIF IgGtiter 1:512 tyder på akutt infeksjon. 2 I noen tilfelle kan et enkelt IgAantistoff persistere. Dette immunologiske fenomenet vises ved forskjellige bakteriologiske infeksjoner. Klinisk relevans kan ikke vurderes. 3 Ved akutte C. pneumoniae infeksjoner eller kan de serologiske antistoff resultatene være negative til tross for symptomer og positive antigen påvisning. Ved serologisk bekreftelse av positivt antigenresultat eller dersom oppfølging er ønskelig, anbefales testing for serokonversjon etter 14 dager. 432TMBVPN/

15 7. KARRAKTERISTISKE EGENSKAPER Følgede egenskaper er blitt fastsatt under den diagnostiske evalueringen. 7.A. SPESIFISITET OG SENSITIVITET 121 sera som var IgM negative med MIF for C. pneumoniae (31 pasienter med klinisk mistanke om Chlamydia infeksjon (1) og 90 STD pasienter som var dyrknings positive for C.trachomatis (2) samt 159 IgM negative sera (referanse ELISA) fra blod givere (3) (menn og kvinner fra 20 til 60 år) ble undersøkt for fastsettelse av spesifisitet. 38 sera fra pasienter med respiratorisk infleksjon(4) undersøkt for å fastsett sensitivitet. IgM antistoff mot C. pneumoniae var påvisbare med MIF i alle sera. Pasient Gruppe Spesifisitet IgM Sera uten IgM antistoff mot C. pneumoniae med MIF: (1) Pasienter med mistenkt Chlamydia infeksjon (n=31) (2) STD pasienter (n=90) C. pneumoniae IgM negative sera med referanse ELISA: (3) Blod givere (n=159) Pasient Gruppe Sera med IgM antistoff mot C. pneumoniae med MIF: (4) Pasienter med respiratorisk infeksjon (n=38) 90% (28/31) 98% (88/90) 99% (157/159) Sensitivitet IgM 97% (37/38) 432TMBVPN/

16 7.B. PRESISJON Prøve Intraassay variasjon Prøve Interassay vaiasjon (n = 11) OD gj. SD CV (%) n OD gj. SD CV (%) sn. sn. NC 0,036 0, NC 0,035 0,003 9 BC 0,503 0, BC 0,521 0,027 5 PC 1,216 0, PC 1,225 0,063 5 N 1 0,844 0, N 3 0,051 0,004 8 N 2 0,719 0, N 4 0,848 0,061 7 NC = negative kontroll; BC = svak positiv kontroll (følger ikke med i kitet); PC = positiv kontroll GENERELLE RÅD * For å unngå kryss kontaminasjon, ikke bland flaskene og de tilhørende korkene. * Reagensene må forsegles umiddelbart etter bruk for å forhindre fordampning og mikrobiell kontaminasjon. * Etter bruk må reagensene oppbevares som anbefalt for garantere holdbarheten. * Etter bruk må alle komponenter i kitet oppbevares i deres originale forpakning for å unngå blanding med andre andre reagenser eller lot nr. (se også 3.). HELSE OG SIKKERHETS INFORMASJON * De lokale helsemyndigheters reguleringer må følges. Reagenser av human opprinnelse er testet negativt på HBsAg og på antistoff mot HIV1/2 og HCV. Men det anbefales på det sterkeste at dette materialet så vel som det som er av animalsk opprinnelse (se kit innhold) behandles som potensielt smittefarlig. KASSERING Rester av kjemikalier og reagenser er å anse som risikoavfall. Kassering skal skje i henhold til lokale eller nasjonale regler. Ta kontakt med lokal myndighet som vil gi råd om hvordan risikoavfall skal håndteres. Dato utgave: TMBVPN/

17 LITTERATUR Balin, B.J., Gérard, H.C., Arking, E.J., Appelt, D.M., Branigan, P.J., Abrams, J.T., WhittumHudson, J.A., Hudson, A.P.: Identification and localization of Chlamydia pneumoniae in the Alzheimer s brain. Med. Microbiol. Immunol. 187, 2342 (1998). Christiansen, G., Boesen, T., Hjerno, K., Daugaard, L., Mygind, P., Madsen, A.S., Knudsen, K., Falk, E., Birkelund, S.: Molecular biology of Chlamydia pneumoniae surface proteins and their role in immunopathogenicity. Am. Heart J. 138, (1999). Danesh, J., Collins, R., Peto, R.: Chronic infections and coronary heart disease: is there a link? Lancet 350, (1997). Elkind, M.S., Lin, I.F., Grayston, J.T., Sacco, R.L.: Chlamydia pneumoniae and the risk of first ischemic stroke. The Northern Manhattan stroke study. Stroke 31, (2000). Gérard, H.C., Schumacher, H.R., ElGabalawy, H., GoldbachManksy, R., Hudson, A.P.: Chlamydia pneumoniae present in the human synovium are viable and metabolically active. Microb. Pathog. 29, 1724 (2000). Grayston, J.T.: Epidemiology of Chlamydia pneumoniae (TWAR). In: Chlamydia Research. Angelika Stary (ed.). Proceedings of the Third Meeting of the European Society for Chlamydia Research, Vienna, Austria, September, (1996). Grayston, J.T., Aldous, M.B., Easton, A., Wang, S.P., Kuo C.C., Campbell, L.A., Altman, J.: Evidence that Chlamydia pneumoniae causes pneumonia and bronchitis. J. Infect. Dis. 168, (1993). Gupta, S., Leatham, E.W., Carrington, D., Mendall, M.A., Kaski, J.C., Camm, A.J.: Elevated Chlamydia pneumoniae antibodies, cardiovascular events, and azithromycin in male survivors of myocardial infarction. Circulation 96, (1997). Gurfinkel, E., Bozovich, G., Daroca, A., Beck, E., Mautner, B.: Randomised trial of roxithromycin in nonqwave coronary syndromes: ROXIS pilot study. Lancet 350, (1997). Hahn, D.L., Peeling, R.W., Dillon, E., McDonald, R., Saikku, P.: Serologic markers for C. pneumoniae in asthma. Ann. Allergy Asthma Immunol. 84, (2000). Hunter, S.F., Hafler, D.A.: Ubiquitous pathogens: Links between infection and autoimmunity in MS? Neurology 55, (2000). Kuo, C. C., Jackson, L.A., Campbell, L.A., Grayston, J.T.: Chlamydia pneumoniae(twar). Clin. Microbiol. Rev. 8, (1995). LayhSchmitt, G., Bendl, C., Hildt, U., DongSi, T., Jüttler, E., Schnitzler, P., GrondGinsbach, C., Grau, A.J.: Evidence for infection 432TMBVPN/

18 with Chlamydia pneumoniae in a subgroup of patients with multiple sclerosis. Ann. Neurol. 47, (2000). Maass, M., Bartels, C., Engel, P.M., Mamat, U., Sievers, H.H.: Endovascular presence of viable Chlamydia pneumoniae is a common phenomenon in coronary artery disease. J. Am. Coll. Cardiol. 31, (1998). Muhlestein, J.B.: The link between Chlamydia pneumoniae and atherosclerosis. Infect. Med. 14, , 392, 426 (1997). Saikku, P.: Chronic Chlamydia pneumoniae infections. In: Chlamydia Research. Angelika Stary (ed.). Proceedings of the Third Meeting of the European Society for Chlamydia Research, Vienna, Austria, September (1996). Saikku, P., Leinonen, M., Mattila, K., Ekman, M.R., Nieminen, M.S., Mäkela, P.H., Huttunen, J.K., Valtonen, V.: Serological evidence of an association of a novel Chlamydia, TWAR, with chronic coronary heart disease and acute myocardial infarction. Lancet 2, (1988). Saikku, P., Leinonen, M., Tenkanen, L., Linnanmäki, E., Ekman, M.R., Manninen, V., Manttari, M., Frick, M.H., Huttunen, J.K.: Chronic Chlamydia pneumoniae infection as a risk factor for coronary heart disease in the Helsinki Heart Study. Ann. Intern. Med. 116, (1992). Samra, Z., Soffer, Y.: IgA antichlamydial antibodies as a diagnostic tool for monitoring of active chlamydial infection. Eur. J. Epidemiol. 8, (1992). Schumacher, H.R.: Chlamydial Arthritis. In: Chlamydia Research. Pekka Saikku (ed.). Proceedings of the 4 th Meeting of the European Society for Chlamydia Research, Helsinki, Finland, August. 229 (2000). Sriram, S., Stratton, C.W., Yao, S.: Chlamydia pneumoniae infection in the central nervous system in multiple sclerosis. Ann. Neurol. 46, 6 14 (1999). Stille, W., JustNübling, G.: Argumente für eine AntibiotikaTherapie der Arteriosklerose. Chemotherapie Journal 6, 15 (1997). 432TMBVPN/