CERTEST Rotavirus+ Adenovirus

Transkript

1 ERES Rotavirus+ denovirus ERINNS Rotavirus+denovirus KOMINSJONSKORES ERES IOE S.L.

2

3 ERES Rotavirus+denovirus Prueba combo de un solo paso para detección de Rotavirus y denovirus en formato cassette ENGELSK RUKSOMRÅDE erest Rotavirus+denovirus ettrinns kombinasjonskorttest er et farget kromatografisk immunoassay for samtidig kvalitativ påvisning av rotavirus og adenovirus i avføringsprøver. erest Rotavirus+denovirus kombinasjonskorttest er en enkel og svært følsom screeninganalyse for presumptiv diagnose av rotavirus- og adenovirusinfeksjon. INNLEDNING Rotavirus, adenovirus og astrovirus er de vanligste og viktigste årsakene til alvorlig gastroenteritt hos spedbarn og små barn. Det samme mønsteret er også observert hos voksne. Virusene smitter gjennom fekal-oral kontakt. De viktigste symptomene ved gastroenteritt er tynn diaré og oppkast. Personen som er berørt, kan også ha hodepine, feber og magekramper ("magesmerter"). Symptomene begynner vanligvis å opptre 1 til 2 dager etter infeksjon med et virus som forårsaker gastroenteritt og kan vare 1 til 10 dager, avhengig av hvilket virus som har forårsaket sykdommen (rotavirus 3 dager, adenovirus 5 til 8 dager og astrovirus 3 dager). ESPRINSIPP erest Rotavirus+denovirus er basert på prinsippet for kvalitativ immunokromatografisk analyse for påvisning av rotavirus og adenovirus i avføringsprøver. Remse består av en nitrocellulosemembran som på forhånd er påført monoklonale antistoff fra mus mot rotavirus på testlinjen () i resultatvinduet og med polyklonale antistoff fra kanin mot et bestemt protein på kontrollinjen (). Den absorberende overflaten er påført antistoffløsning (monoklonale antistoff fra mus mot rotavirus) med røde latekspartikler og kontrolløsning (spesifikt bindingsprotein) med grønne latekspartikler. Disse danner to fargede konjugatkompleks. Remse består av en nitrocellulosemembran som på forhånd er påført monoklonale antistoff fra mus mot adenovirus på testlinjen () i resultatvinduet og med polyklonale antistoff fra kanin mot et bestemt protein på kontrollinjen (). Den absorberende overflaten er påført antistoffløsning (monoklonale antistoff fra mus mot adenovirus) med røde latekspartikler og kontrolløsning (spesifikt bindingsprotein) med grønne latekspartikler. Disse danner to fargede konjugatkompleks. Dersom prøven er positiv for rotavirus, reagerer antigenene i den fortynnede prøven med det røde konjugatkomplekset (røde polystyrenmikrosfærer og monoklonale antistoff mot rotavirus) i remse, og dersom prøven er positiv for adenovirus, reagerer antigenene i den fortynnede prøven med det røde konjugatkomplekset (røde polystyrenmikrosfær og monoklonale antistoff mot adenovirus) i remse. Konjugatkompleksene er forhåndstørket på den absorberende overflaten. landingen beveger seg deretter oppover membranen ved hjelp av kapillærkrefter. Etter hvert som prøven flyter gjennom testmembranen, oppløses konjugatkompleksene. ntistoff mot rotavirus i membranen i remse (testlinjen) og antistoff mot adenovirus i membranen i remse (testlinjen) fanger opp det fargede konjugatet, og røde linjer vises på begge remsene. Disse remsene brukes til å tolke resultatet. Dersom prøven er negativ, inneholder den ikke rotavirus eller adenovirus. ntigenene kan likevel være til stede i konsentrasjoner som er lavere enn påvisningsgrensen, og i så fall reagerer ikke de røde konjugatkompleksene. ntistoffene mot rotavirus og adenovirus på membranene (testlinjene) i det røde konjugatkomplekset fanger ikke opp antigenet, og de røde linjene vises ikke. Uavhengig av om prøven er positiv eller negativ, fortsetter løsningen å flyte gjennom membranene i begge remsene til de immobiliserte antistoffene i kontrollinjene. ntistoff mot spesifikke proteiner fanger opp det grønne kontrollkonjugatkomplekset i begge membranene, slik at begge kontrollinjene alltid vises. ilstedeværelse av disse grønne linjene fungerer som: 1) bekreftelse på at det tilførte prøvevolumet er tilstrekkelig, 2) at flyten er tilstrekkelig samt 3) en intern kontroll av reagensene. LGRING OG SILIE Lagres i uåpnet emballasje ved 2 til 30 º. esten er stabil frem til utløpsdatoen som er oppført på den forseglede posen. esten må oppbevares i den forseglede posen frem til den brukes. Må ikke fryses. FORHOLDSREGLER - are for profesjonell in vitro-diagnostikk. - Skal ikke brukes etter utløpsdatoen. - lle prøver er å betrakte som potensielt smittefarlige og skal håndteres på samme måte som smittefarlige stoff. For å unngå feil knyttet til kontaminasjon må en ny test benyttes for hver enkelt prøve. - estene skal kastes i en beholder for smittefarlig avfall etter at de er utført. - Reagensene inneholder konserveringsmidler. Unngå kontakt med hud og slimhinner. Les sikkerhetsdatabladet, som er tilgjengelig på forespørsel. 1 IU-XR88V, utg. 00 September 2013, utgave 00 1 erest IOE S.L. Pol. Industrial Río Gállego II, alle J, Nº 1, 50840, San Mateo de Gállego, Zaragoza (SPIN)

4 ERES Rotavirus+denovirus Prueba combo de un solo paso para detección de Rotavirus y denovirus en formato cassette - Komponentene i settet er godkjent for bruk i kombinasjonskorttesten erest Rotavirus+denovirus. De må ikke brukes sammen med komponenter fra andre sett. - Følg god laboratoriepraksis og bruk beskyttelsesklær, som for eksempel laboratoriefrakk, engangshansker, vernebriller og maske. Du må ikke spise, drikke eller røyke i området der testen utføres. PRØVEKING OG KLRGJØRING V PRØVE vføringsprøver skal oppbevares i rene beholdere. Prøvene kan oppbevares i kjøleskap (ved 2 til 8 º) i 1 til 2 dager før testen utføres. Ved oppbevaring i lengre tid, maksimalt ett år, må prøven holdes frossen ved 20 º. Prøven skal være fullstendig tint og romtemperert når testen utføres. Sørg for at avføringsprøven er så homogen som mulig før klargjøringen. Klargjøring av prøve (se illustrasjon): 1. a ut korken av prøveflasken (1), og hent tilstrekkelig mengde av prøven med pinnen. Før pinnen inn i 4 forskjellige deler av avføringsprøven for å samle prøvemateriale (ca 125 mg) (2), og overfør den til prøveflasken. For flytende prøver overføres 125 µl til prøveflasken ved hjelp av en mikropipette. 2. Lukk flasken med fortynningsbufferen og prøven. Rist flasken for å sikre at prøven løser seg opp (3). vføringsprøve USYR OG MERILER INKLUDER ESPROSEDYRE Prøveflaske (1) (2) (3) KREVES I ILLEGG - erest Rotavirus+denovirus kombinasjonskorttester - Prøvebeholder - Pakningsvedlegg - Engangshansker - Prøveflasker med fortynningsbuffer - Stoppeklokke ester, avføringsprøver og kontroller skal være romtemperert (15 til 30 º) før testing. Vent med å åpne posene til analysen skal utføres. 1. Rist prøveflasken for å sikre at prøven løser seg godt opp. 2. a erest Rotavirus+denovirus kombinasjonskorttest ut av den forseglede posen rett før bruk. 3. a en prøveflaske og kutt av den ytterste delen av korken (4). Overfør 4 dråper til det runde vinduet merket med bokstaven (5) og 4 dråper fra den samme flasken i det runde vinduet merket med bokstaven (6). Unngå å overføre faste partikler med væsken. 4. Les av resultatet når det er gått 10 minutter ikke senere. Dersom testen ikke kan gjennomføres på grunn av faste partikler, rører du med pinnen i prøven som er tilført prøvevinduet (S). Dersom dette ikke fungerer, tilsetter du en dråpe fortynningsbuffer og kontrollerer at væsken renner gjennom reaksjonssonen. Resultatvinduer (/) Kontrollinje () estlinje () Rundt prøvevindu og (S) Rota- denovirus virus 2 IU-XR88V, utg. 00 September 2013, utgave 00 2 erest IOE S.L. Pol. Industrial Río Gállego II, alle J, Nº 1, 50840, San Mateo de Gállego, Zaragoza (SPIN)

5 ERES Rotavirus+denovirus Prueba combo de un solo paso para detección de Rotavirus y denovirus en formato cassette ilsett 4 dråper i vindu (4) (5) (6) OLKING V RESUL (se illustrasjonen nedenfor) : Grønt Negativ for rotavirus : Grønt/rødt Positiv for rotavirus : Grønt/rødt Positiv for rotavirus : Grønt Negativ for rotavirus : Grønt Negativ for adenovirus : Grønt/rødt Positiv for adenovirus : Grønt Negativ for adenovirus : Grønt/rødt Positiv for adenovirus UGYLDIGE RESUL 5. (rotavirus) (adenovirus) olking av resultatet Prøven inneholder verken rotavirus eller adenovirus. Ingen GRØN GRØN virusinfeksjon forårsaket av rotavirus eller adenovirus Prøven inneholder rotavirus og adenovirus. Virusinfeksjon GRØN/RØD GRØN/RØD forårsaket av rotavirus og adenovirus GRØN/RØD GRØN Prøven inneholder rotavirus. Virusinfeksjon forårsaket av rotavirus Prøven inneholder adenovirus. Virusinfeksjon forårsaket av GRØN GRØN/RØD adenovirus. 5. ndre resultat ndre resultat Ugyldig resultat for eller. Vi anbefaler at du analyserer den samme prøven ved hjelp av en ny test. UGYLDIG: otalt fravær av kontrollinjer (GRØNNE) uavhengig av om testlinjene (RØDE) vises. De vanligste årsakene til at kontrollinjene ikke vises, er utilstrekkelig prøvevolum, at testen ikke er utført på riktig måte eller at reagensene er svekket. Gjennomgå prosedyren, og gjenta analysen ved hjelp av en ny test. Dersom problemet fortsatt ikke er løst, slutter du å bruke testsettet og tar kontakt med den lokale distributøren. MERK VED OLKING V RESUL Konsentrasjonen av antigen i prøven avgjør hvor godt de røde båndene syns i testlinjene () i resultatvinduene. Verken den kvantitative verdien eller økning av mengde antigen kan fastsettes ved hjelp av denne kvalitative testen. 3 IU-XR88V, utg. 00 September 2013, utgave 00 3 erest IOE S.L. Pol. Industrial Río Gállego II, alle J, Nº 1, 50840, San Mateo de Gállego, Zaragoza (SPIN)

6 ERES Rotavirus+denovirus Prueba combo de un solo paso para detección de Rotavirus y denovirus en formato cassette KVLIESKONROLL Interne kontroller følger med testen. De grønne linjene som vises i kontrollinjene () i resultatvinduene, er interne kontroller som bekrefter tilstrekkelig prøvevolum og riktig bruk av testen. EGRENSNINGER 1. esten må utføres innen 2 timer etter at den forseglede posen er åpnet. 2. Dersom prøvevolumet er for stort, kan dette føre til feilaktige resultat (brune bånd vises). ynn ut prøven med fortynningsbufferen, og gjenta testen. 3. estlinjen varierer fra svært kraftig ved høy antigenkonsentrasjon til svak når konsentrasjonen nærmer seg påvisningsgrensen for testen. 4. Etter én ukes infeksjon synker antallet virus i avføringen, slik at prøvens reaksjonsevne svekkes. vføringsprøver bør tas senest én uke etter at symptomene oppstår. 5. erest Rotavirus+denovirus skal bare brukes med human avføring. ruk sammen med andre prøver er ikke testet. Kvaliteten på testen er avhengig av prøvens kvalitet. vføringsprøven må tas på riktig måte. 6. Et positivt resultat indikerer at avføringsprøver inneholder rotavirus og/eller adenovirus. Positive resultat bør imidlertid bekreftes med andre laboratorietester (biokjemiske metoder eller mikroskopi). Stadfesting av infeksjon kan bare foretas av en lege etter at alle kliniske resultat og laboratoriedata er evaluert, og må være basert på sammenhengen mellom resultatene og videre kliniske observasjoner. 7. esten kan ikke brukes til å utelukke infeksjon, ettersom antigenkonsentrasjonen i avføringsprøver kan være lavere enn påvisningsgrensen. Dersom symptomene vedvarer, bør forekomsten av rotavirus og/eller adenovirus påvises ved hjelp av en annen teknikk (for eksempel mikroskopi). FORVENEDE VERDIER kutt gastroenteritt er vanlig hos små barn. Den tilknyttede dehydreringen er blant de vanligste årsakene til sykehusinnleggelse i industriland. kutt diaré er et stort helseproblem internasjonalt og er en vanlig dødsårsak i utviklingsland. Enterovirus blir betraktet som den viktigste årsaken til sykdommen, og fire kategorier av virus klassifiseres som klinisk relevante: rotavirus (Reoviridae) i gruppe, norovirus (aliciviridae), adenovirus og astrovirus. Flere studier har påvist 46 prosent koinfeksjoner ved akutt tynn diaré hos spedbarn. YELSESKRKERISIK Klinisk følsomhet og spesifisitet En evaluering med avføringsprøver ble gjennomført ved hjelp av en immunokromatografisk test (erest Rotavirus+denovirus, erest). Disse resultatene ble sammenliknet med en kommersielt tilgjengelig test (Ridascreen Rotavirus ELIS est, r-iopharm) for remse, og resultatene for remse ble bekreftet ved hjelp av PR. Resultatene var som følger: Ridascreen Rotavirus ELIS est erest Rotavirus+denovirus (rotavirus) + - otalt otalt Sensitivitet Spesifisitet PPV NPV erest Rotavirus+denovirus (Rotavirus) kontra Ridascreen Rotavirus ELIS est > 99 % 98% > 94 % > 99 % 4 IU-XR88V, utg. 00 September 2013, utgave 00 4 erest IOE S.L. Pol. Industrial Río Gállego II, alle J, Nº 1, 50840, San Mateo de Gállego, Zaragoza (SPIN)

7 ERES Rotavirus+denovirus Prueba combo de un solo paso para detección de Rotavirus y denovirus en formato cassette PR erest Rotavirus+denovirus (adenovirus) + - otalt otalt Sensitivitet Spesifisitet PPV NPV erest Rotavirus+denovirus (denovirus) kontra PR > 99 % > 99 % > 99 % > 99 % Resultatene viste at erest Rotavirus+denovirus har høy følsomhet og spesifisitet for påvisning av rotavirus og adenovirus. Kryssreaktivitet Det ble gjennomført en evaluering av kryssreaktivitet for erest Rotavirus+denovirus. Det ble ikke påvist kryssreaktivitet mot gastrointestinale patogene organismer som kan forekomme i avføring: denovirus (remse ) Escherichia coli O157:H7 Salmonella typhimurium strovirus Giardia lamblia Salmonella typhi ampylobacter coli Helicobacter pylori Shigella boydii ampylobacter jejuni Listeria monocytogenes Shigella dysenteriae lostridium difficile Norovirus Shigella flexneri ryptosporidium parvum Rotavirus (remse ) Shigella sonnei Enterovirus Salmonella enteritidis Staphylococcus aereus Entamoeba hystolitica Salmonella paratyphi Yersinia enterocolitica 5 IU-XR88V, utg. 00 September 2013, utgave 00 5 erest IOE S.L. Pol. Industrial Río Gállego II, alle J, Nº 1, 50840, San Mateo de Gállego, Zaragoza (SPIN)

8 erest IOE S.L. Pol. Industrial Río Gállego II, alle J, Nº 1, 50840, San Mateo de Gállego, Zaragoza (SPIN)