ABX Pentra Calcium AS CP

Transkript

1 05/0/0 A93A090CNO AA ml 400 Diagnostisk reagens for kvantitativ in vitro-bestemmelse av kalsium i serum, plasma og urin ved hjelp av kolorimetri. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Applikasjonsversjon Serum, plasma: CaAS a Urin: CaU_AS a Tilsiktet bruk b Reagensen, sammen de tilhørende kalibratorene og kontrollene, er en diagnostisk reagens for kvantitativ in vitro-bestemmelse av kalsium i humant serum, plasma og urin basert på en kolorimetrisk metode som benytter det kliniske kjemianalyseapparatet 400. Kalsiummålinger brukes til diagnostisering og behandling av parathyreoideasykdom, en rekke bensykdommer, kronisk nyresykdom og tetani (sporadiske muskelsammentrekninger eller spasmer). Klinisk interesse (,, 3) Kalsium spiller en viktig rolle i mange cellefunksjoner: intracellulært ved muskelsammentrekninger og glykogenstoffskifte, ekstracellulært ved beinmineralisering, blodkoagulering og overføring av nerveimpulser. Kalsium finnes i plasma i tre former: fritt, bundet til proteiner eller sammensatt med anioner så som fosfat, citrat og bikarbonat. Fysiologisk sett bestemmes kalsiumbalansen av forholdet mellom kalsiuminntak og kalsiumabsorposjon og -utskillelse. Urinutskillelse er en viktig bestemmende faktor for kalsiumretensjon i kroppen. Reduserte totale kalsiumnivåer kan forbindes med a Modifisering: endring av applikasjonsversjon. b Modifisering: endring av reagensvolum. skjelettrelaterte sykdommer (spesielt osteoporose), nyresykdommer (spesielt under dialyse), defekt tarmabsorpsjon og hypoparatyroidisme. Økte totale kalsiumnivåer kan finnes ved hyperparatyroidisme, ondartede sykdommer med metastaser og sarkoidose. Kalsiummålinger er også nyttige ved overvåking av kalsiumtilskudd, hovedsaklig i forbindelse med forebygging av osteoporose. Metode (4, 5, 6, 7) Mange kolorimetriske metoder har tidligere blitt brukt for bestemmelse av kalsium. Connerty og Briggs beskrev metoder som bruker alizarin-3-sulfonat (4) og kresolftalein-complexone (5) mens Gindler og King har beskrevet en metode som bruker thymolblått (6). Disse metodene har vært gjenstand for mange påfølgende endringer. Den metoden som brukes her er basert på metallokromogenet Arsenazo III. Kalsiumioner (Ca + ) reagerer med Arsenazo III (, -[,8-Dihydroksy-3,6- disulfonaftylen-,7-bisazo]- bisbenzenarsonsyre) ved ph 6,75 og danner en intens lillafarget kromofor. Absorbansen av Ca-Arsenazo III-komplekset måles bikromatisk ved 660/700 nm. Dette fører til en absorbansøkning i reaksjonsblandingen som er direkte proporsjonal med kalsiumkonsentrasjonen i prøven. Arsenazo III har høy affinitet (K = x 0-7 ) for kalsiumioner (7) og viser ingen interferens fra andre kationer som normalt er tilstedeværende i serum, plasma eller urin. ph 6,50 Ca ++ + Arsenazo III Ca-Arsenazo III-kompleks (lilla) / 6

2 Reagenser er klart til bruk. Reagens: MES ph 6,50 Arsenazo III µmol/l må brukes i henhold til dette reagenspakningsvedlegget. Produsenten kan ikke garantere for produktets ytelse hvis det brukes på annen måte. Håndtering. Fjern hetten på kassetten.. Fjern eventuelt skum ved hjelp av en plastpipette. 3. Plasser den beskyttende hetten ref. GBM0969 på kassetten. 4. Plasser kassetten i den nedkjølte reagenskarusellen på 400. Kalibrator For kalibrering, bruk: Multical, ref. AA065 (medfølger ikke) 0 x 3 ml (lyofilisat) Kontroll For intern kvalitetskontroll, bruk: N Control, ref. AA0653 (medfølger ikke) 0 x 5 ml (lyofilisat) P Control, ref. AA0654 (medfølger ikke) 0 x 5 ml (lyofilisat) Urine Control L/H, ref. AA0674 (medfølger ikke) x 0 ml + x 0 ml Hver kontroll skal testes daglig og/eller etter kalibrering. Hyppigheten av kontrollene og konfidensintervallene må stemme overens med laboratoriets retningslinjer og det aktuelle landets direktiver. Du må følge føderale, statlige og lokale retningslinjer for testing av kvalitetskontrollmaterialer. Resultatene må befinne seg innenfor området for de definerte konfidensgrensene. Hvert laboratorium bør etablere en prosedyre som skal følges dersom resultatene overstiger disse konfidensgrensene. Nødvendige men ikke medfølgende materialer Automatisert klinisk kjemianalyseapparat: 400 Kalibrator: Multical, ref. AA065 Kontroller: N Control, ref. AA0653, og P Control, ref. AA0654 Urine Control L/H, ref. AA0674 Standard laboratorieutstyr. Prøvemateriale (8) Serum. Plasma i litiumheparin. Urin. EDTA-plasma må ikke brukes: EDTA-antikoagulant er ikke egnet til analyse siden denne forbindelsen chelaterer kalsium og gjør det utilgjengelig for reaksjon med reagenset. Andre antikoagulanter enn de som er oppført her har ikke blitt testet av HORIBA Medical og anbefales derfor ikke for bruk sammen med dette assayet. 4-timers urinprøver må innhentes med HCl 6N (9). Ikkeforsurende urin som har blitt nedkjølt må forsures og/eller varmes opp ved 56 C i 5 minutter for å oppløse eventuelt presipitat på nytt. Prøvestabilitet (8): Serum/plasma: opptil 7 dager ved 0-5 C. opptil 3 uker ved 4-8 C. opptil 8 måneder ved -0 C. Urin: opptil dager ved 0-5 C. opptil 4 dager ved 4-8 C. opptil 3 uker ved -0 C. Referanseområde () Hvert laboratorium bør etablere egne referansespektre. Verdiene som oppgis her er kun veiledende. Serum/plasma:,5 -,57 (8,6-0,3 ) / 6

3 Urin: Kvinner: < 6,4 mmol/4t (< 50 mg/4t) Menn: < 7,49 mmol/4t (< 300 mg/4t) Oppbevaring og stabilitet Reagenser i uåpnede kassetter er stabile frem til utløpsdatoen på merkelappen dersom de har blitt oppbevart ved -8 C og har vært beskyttet mot lys. Stabilitet etter åpning: se avsnittet "Ytelse på 400". Avfallshåndtering Vennligst overhold lokale lover og regler. Generelle forholdsregler c Dette reagenset må kun brukes til profesjonell in vitrodiagnostikk. Må kun brukes som foreskrevet. Denne reagensen er klassifisert som ufarlig i samsvar med forskrift (EF) nr. 7/008. Siden kalsium er et ubikvitært ion, er det av avgjørende betydning at forholdsregler tas mot tilfeldig kontaminering. Bruk kun engangsmaterialer. Laboratoriets standardforholdsregler for bruk må overholdes. Reagenskassettene er for engangsbruk og må kastes i samsvar med lokale forordninger. Vennligst les produktdatabladet som gjelder for reagenset. Ikke bruk produktet i tilfeller hvor det finnes synlig bevis på biologisk, kjemisk eller fysisk nedbryting. Det er brukerens ansvar å forsikre seg om at dette dokumentet gjelder for det reagenset som benyttes. Ytelse på 400 Ytelsesdataene nedenfor har blitt innhentet på et 400 analyseapparat. Serum, plasma Antall tester: 85 tester d Reagensstabilitet i maskinen e : Etter åpning er reagenskassetten som er plassert i den nedkjølte 400-delen stabil i 70 dager. Prøvevolum: 5 µl/test Kvantifiseringsgrense: Kvantifiseringsgrensen er fastsatt i henhold til CLSI (NCCLS), protokoll EP7-A (0) og tilsvarer 0,37 (,54 ). Deteksjonsgrense: Deteksjonsgrensen er fastsatt i henhold til CLSI (NCCLS), protokoll EP7-A (0) og tilsvarer 0,07 (0,8 ). Nøyaktighet og presisjon: Repeterbarhet (innen serie-presisjon) 3 prøveeksemplarer med lav, middels og høy konsentrasjon og kontrolleksemplarer testes 0 ganger i henhold til anbefalingene i Valtec-protokollen (). ar,09 8,39 0,49 3,,53 0,37,7 6,9 0,7,9 9,8 0,40 3,8 3,5 0,43 Reproduserbarhet (total presisjon) 3 prøveeksemplarer med lave, medium og høye nivåer, samt kontroller, blir testet i duplikat i 0 dager ( serier per dag) i henhold til anbefalingene i CLSI (NCCLS), EP5- A-protokollen ().,7 8,7,44 c Modifisering: endring av generelle forholdsregler. d Modifisering: nytt antall tester. e Modifisering: endring av reagensstabilitet i maskinen. 3 / 6

4 ar Måleområde: 3,5 3,0,49,75 7,03,56,36 9,47,54 3,3,93,54 Assayet bekreftet et måleområde på to 4,50 (4,0 to 8,05 ), med en automatisk etterfortynning på opptil 3,50 (54,5 ). Reagenslineariteten er vurdert opptil 4,50 (8,05 ) i henhold til anbefalingene fra CLSI (NCCLS), i EP6-A-protokollen (3). Korrelasjon: 45 pasientprøver (serum og plasma) blir korrelert med en kommersiell reagens som referanse i henhold til anbefalingene fra CLSI (NCCLS), i EP9-A-protokollen (4). Verdiene rangerte fra,04 til 3,93 (4,7 til 5,76 ). Ligningen for den allometriske linjen ved hjelp av regresjonsprosedyren Passing-Bablock (5) er: Y =,00 X + 0,0 () Y =,00 X + 0,04 () med korrelasjonskoeffisient r = 0,9903. Matrisesammenligningsstudie: En matrisesammenligningsstudie mellom serum- og litiumplasmaprøver ble utført ved hjelp av 3 par av serum- og litiumplasmaprøver med en kalsiumkonsentrasjon som gikk fra,0 til 4,36 (4,0 til 7,5 ) (3 prøver ble endret). Hver prøve ble testet i singulat med assayreagensen ABX Pentra. En lineær regresjonsanalyse av plottingen av serum- (x-aksen) og litiumplasma- (y-aksen) prøvene viste følgende forhold mellom matrisetypene: Y =,006 X - 0,00, r = 0,996. Interferenser: Hemoglobin: Ingen betydelig interferens observert opptil 90 µmol/l (500 ). Lipemi: Ingen betydelig interferens observert opp til en Intralipid -konsentrasjon (representativt for lipemi) på 500. Totalbilirubin: Ingen betydelig interferens observert opptil 788 µmol/l (46, ). Direkte bilirubin: Ingen betydelig interferens observert opptil 445 µmol/l (6,0 ). Askorbinsyre: Ingen betydelig interferens observert opptil 3,40 (60 ). Magnesium: Ingen betydelig interferens observert opptil 4,4 (0,7 ). Acetaminofen: Ingen betydelig interferens observert opptil 34 µmol/l (0 ). Ibuprofen: Ingen betydelig interferens observert opptil,4 (50, ). Acetylsalisylsyre: Ingen betydelig interferens observert opptil 3,6 (65, ). Andre begrensninger er gitt av Young som en liste over medikamenter og preanalytiske variabler som er kjent for å påvirke denne metodologien (6, 7). Kalibreringsstabilitet: Reagenset kalibreres på dag 0. Kalibreringsstabiliteten kontrolleres ved å teste kvalitetskontroller. Kalibreringsstabiliteten er på 0 dager. Merk: En rekalibrering anbefales når reagenslotnumre endres, og når resultatene fra kvalitetskontrollen faller utenfor det fastsatte området. Applikasjonsversjon a : Urin Antall tester: 85 tester d Reagensstabilitet i maskinen e : Etter åpning er reagenskassetten som er plassert i den nedkjølte 400-delen stabil i 70 dager. Prøvevolum: 5 µl/test Kvantifiseringsgrense: Kvantifiseringsgrensen er fastsatt i henhold til CLSI (NCCLS), protokoll EP7-A (0) og tilsvarer 0,6 (0,64 ). a Modifisering: endring av applikasjonsversjon. d Modifisering: nytt antall tester. e Modifisering: endring av reagensstabilitet i maskinen. 4 / 6

5 Deteksjonsgrense: Deteksjonsgrensen er fastsatt i henhold til CLSI (NCCLS), protokoll EP7-A (0) og tilsvarer 0,07 (0,3 ). Nøyaktighet og presisjon: Repeterbarhet (innen serie-presisjon) 3 prøveeksemplarer med lav, medium og høy konsentrasjon og kontroller blir testet 0 ganger i henhold til anbefalingene i Valtec-protokollen (). ar,8 7,7 0,6,7 0,86 0,76,93 7,73 0,46,6 0,50 0,56 3,6 4,50 0,37 Reproduserbarhet (total presisjon) 3 prøveeksemplarer med lave, medium og høye nivåer, samt kontroller, blir testet i duplikat i 0 dager ( serier per dag) i henhold til anbefalingene i CLSI (NCCLS), EP5- A-protokollen (). ar Måleområde:,8 7,8,45,67 0,7,50,9 7,70,57,56 0,7,57 3,54 4,,56 Assayet bekreftet et måleområde på 0,6 til 4,50 (0,64 til 8,05 ), med en automatisk etterfortynning på opptil 3,50 (54,5 ). Reagenslineariteten er vurdert opptil 4,50 (8,05 ) i henhold til anbefalingene fra CLSI (NCCLS), i EP6-A-protokollen (3). Korrelasjon: 43 pasientprøver (urin) har blitt korrelert med et kommersielt reagens som referanse i henhold til anbefalingene fra CLSI (NCCLS), i EP9-A-protokollen (4). Verdiene rangerte fra 0,6 til 4,44 (0,64 til 7,80 ). Ligningen for den allometriske linjen ved hjelp av regresjonsprosedyren Passing-Bablock (5) er: Y = 0,98 X - 0,0 (µmol/l) Y = 0,98 X - 0,03 () med korrelasjonskoeffisient r = 0,993. Interferenser: Hemoglobin: Ingen betydelig interferens observert opptil 90 µmol/l (500 ). Lipemi: Ingen betydelig interferens observert opp til en Intralipid -konsentrasjon (representativt for lipemi) på 00. Direkte bilirubin: Ingen betydelig interferens observert opptil 43 µmol/l (5,3 ). Askorbinsyre: Ingen betydelig interferens observert opptil 3,40 (60 ). Magnesium: Ingen betydelig interferens observert opptil 5,34 (3,0 ). ph: Urinen må ikke være alkalisert. Andre begrensninger er gitt av Young som en liste over medikamenter og preanalytiske variabler som er kjent for å påvirke denne metodologien (6, 7). Kalibreringsstabilitet: Reagenset kalibreres på dag 0. Kalibreringsstabiliteten kontrolleres ved å teste kvalitetskontroller. Kalibreringsstabiliteten er på 0 dager. Merk: En rekalibrering anbefales når reagenslotnumre endres, og når resultatene fra kvalitetskontrollen faller utenfor det fastsatte området. Applikasjonsversjon a : Konversjonsfaktor: x 4,0 = a Modifisering: endring av applikasjonsversjon. 5 / 6

6 Referanser. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft (998): Endres DB, Rude RK. Mineral and bone metabolism. In: Burtis C.A., Ashwood E.R., editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3 rd ed. Philadelphia: WB. Saunders Company (999): Matkovic V, Llich JZ, Andon MB, Hsieh LC, Tzagournis MA, Lagger BJ, Goel PK, Am. J. Clin. Nutr. (995) 6 (): Connerty HV, Briggs AR. Clin. Chem. (965) : Connerty HV, Briggs AR. Am. J. Clin. Path. (966) 45: Gindler EM, Kin JD, Am. J. Clin. Path. (97) 58: Bauer PJ. Anal. Biochem. (98) 0: Ehret W, Heil W, Schmitt Y, Töpfer G, Wisser H, Zawta B et al. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigations and stability of blood, plasma and serum samples. WHO publication WHO/DIL/LAB/99. Rev.: 5 (00). 9. NCCLS. Urinalysis and collection, transportation and preservation of urine specimen; Approved guideline - nd Edition, NCCLS document GP6-A, (9). 0. Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP7-A (004) 4 (34).. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (986) 44: Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A (004) 4 (5). 3. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (003) 3 (6). 4. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A (00) (9). 5. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (983) : Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (997) 3: Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. nd Edition, Washington, DC, AACC Press (997) 3: / 6