(12) Oversettelse av europeisk patentskrift

Transkript

1 (12) Oversettelse av europeisk patentskrift (11) NO/EP 1704 B1 (19) NO NORGE (1) Int Cl. C07D 49/ (06.01) A61K 31/438 (06.01) A61P 2/00 (06.01) Patentstyret (21) Oversettelse publisert (80) Dato for Den Europeiske Patentmyndighets publisering av det meddelte patentet (86) Europeisk søknadsnr (86) Europeisk innleveringsdag (87) Den europeiske søknadens Publiseringsdato (30) Prioritet , EP, , US, P (84) Utpekte stater AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR (73) Innehaver Eli Lilly and Company, Lilly Corporate Center, Indianapolis, IN 4628, USA (72) Oppfinner BENITO COLLADO, Ana Belen, Lilly S.A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania DIAZ BUEZO, Nuria, Lilly S.A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania JIMENEZ-AGUADO, Alma Maria, Lilly S.A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania LAFUENTE BLANCO, Celia, Lilly S.A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania MARTINEZ-GRAU, Maria Angeles, Lilly S.A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania PEDREGAL-TERCERO, Concepcion, Lilly S.A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania TOLEDO ESCRIBANO, Miguel Angel, Lilly S. A.Avenida de la Industria Alcobendas, Madrid, Spania (74) Fullmektig Zacco Norway AS, Postboks 03 Vika, 012 OSLO, Norge (4) Benevnelse Spiropiperidinforbindelser som oral-1-reseptorantagagonister (6) Anførte publikasjoner WO-A1-0/ WO-A1-0/ YOSHIZUM TAKASHI ET AL: "Design, synthesis, and structure-activity relationship study of a novel class of ORL1 receptor antagonists based on N-biarylmethyl spiropiperidine", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS,, vol. 18, 16 May 08 ( ), pages , XP002729, cited in the application

2 Spiropiperidinforbindelser som oral-1-reseptorantagagonister 1 Orfanin FQ (OFQ) / nociceptin er et peptid av 17 aminosyrer som har høy affinitet for den G-proteinbundne ORL1-reseptoren (eng.: G-protein coupled receptor, GPCR). ORL1-reseptoren er en GPCR i klasse A, som primært uttrykkes i sentralnervesystemet og perifernervesystemet, samt i fordøyelseskanalen, den glatte muskulaturen og immunsystemet. Selv om OFQ/nociceptin-systemet er strukturelt relatert til opioide peptider/reseptorer, fremviser det ingen betydelig kryssreaktivitet med klassiske opioide peptider/reseptorer og fremviser antiopioidaktivitet in vivo (for eksempel er ORQ/nociceptin rapportert å fremvise antinociseptive egenskaper). 1 Nociceptin/orfanin FQ-reseptorantagonister (NOC/OFQ-antagonister), spesifikt antagonister av ORL-1-reseptoren, har demonstrert antidepressiv aktivitet og anorektisk aktivitet i tallrike studier med dyremodeller for depresjon og spiseatferd. Som sådan anses ORL-1-antagonister å være nyttige i behandlingen av depresjon og /eller behandlingen av overvekt/fedme, og eller vektstabilisering etter behandling for overvekt eller fedme. WO 03/ beskriver enkelte spiropiperidinylforbindelser som ORL-1- antagonister for anvendelse som smertestillende midler Yoshizumi, Takashi et al. (08), Design, synthesis, and structure-activity relationship study of a novel class of ORL-1 receptor antagonists based on N- biarylmetyl-spiropiperidin, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters bind. 18, s , beskriver visse N-biarylmetyl-spiropiperidinforbindelser som selektive ORL-1-antagonister. Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer en familie av 4','- dihydrospirolpiperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-forbindelser med høy antagonistvirkeevne for ORL-1-reseptoren og høy ORL-1-reseptorutnyttelse in vivo i sentralnervesystemet. I tillegg har enkelte av forbindelsene en gunstig kardiotoksisk profil, som bestemt ved selektivitet for herg-kanalaktiviteten, samt høy selektivitet for andre fysiologisk viktige reseptorer (f.eks. mu-, kappaog delta-opioid-, serotonin- og dopaminreseptorer). Videre har enkelte av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen gunstige biofarmasøytiske og farmakokinetiske egenskaper (f.eks. oppløselighet, oral eksponering og gjennomtrengelighet i sentralnervesystemet). Enkelte av forbindelsene ifølge

3 2 den foreliggende oppfinnelsen fremviser redusert oksidativ metabolisme, som resulterer i gunstig oral biotilgjengelighet. Enkelte forbindelser har også demonstrert gjennom dyremodeller at forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen er nyttige for behandling av migrene. Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer forbindelser med formel I: 1 2 hvori R 1 er fluor eller klor; R 2a og R 2b hver er hydrogen eller hver er fluor; R 3 er hydrogen, metyl, hydroksymetyl eller (C 1 -C 3 )-alkoksymetyl; R 4 er valgt fra gruppen bestående av fluor, klor, cyano, cyanometyl, (C 1 -C 3 )-alkyl, syklopropyl, hydroksymetyl, metoksy, metoksymetyl, aminokarbonyloksymetyl, metylaminokarbonyloksymetyl, dimetylaminokarbonyloksymetyl, metylkarbonyl, aminokarbonyl, metylaminokarbonyl,_dimetylaminokarbonyl, NR R 6, -CH 2 -NR R 6, morfolin-4-yl, morfolin-4-ylmetyl, Ar 1, -CH 2 Ar 1, 3,3-difluorazetidin-1-ylmetyl, pyrrolidin-1-ylmetyl, 1-aminosyklopropyl, 1-metylaminosyklopropyl og 1- dimetylaminosyklopropyl; R er hydrogen, C 1 -C 4 -alkyl, syklopropyl, hydroksyetyl, metoksyetyl, -C(O)CH 3 - eller -C(O)O(C 1 -C 3 )-alkyl; R 6 er hydrogen eller metyl;

4 3 R 7 er hydrogen, fluor, klor, metyl, hydroksymetyl, eller metoksy; og Ar 1 er en enhet (eng.: moiety) valgt fra gruppen bestående av imidizol-1-yl, imidizol-2-yl, 2-metylimidizol-1-yl, 1-metylimidizol-2-yl og 1,2,4-triazol-3-yl; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. 1 2 I et annet trekk ved oppfinnelsen tilveiebringes det en farmasøytisk sammensetning omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med et farmasøytisk akseptabelt bærestoff, fortynningsmiddel eller hjelpestoff. Én utførelsesform av dette trekket ved oppfinnelsen, den farmasøytiske sammensetningen omfatter videre minst én ytterligere terapeutisk ingrediens, som for eksempel et SSRI-antidepressiva, som for eksempel fluoksetin. Dessuten tilveiebringer dette trekket ved oppfinnelsen en farmasøytisk sammensetning tilpasset til behandlingen av depresjon, omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med ett eller flere farmasøytisk akseptable hjelpestoffer, bærestoffer eller fortynningsmidler derav. I en annen utførelsesform av dette trekket ved oppfinnelsen tilveiebringes en farmasøytisk sammensetning tilpasset til behandlingen av overvekt, fedme og/eller vektstabilisering, omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med ett eller flere farmasøytisk akseptable hjelpestoffer, bærestoffer eller fortynningsmidler derav. En ytterligere utførelsesform tilveiebringer en farmasøytisk sammensetning tilpasset til behandlingen av migrene, omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med ett eller flere farmasøytisk akseptable hjelpestoffer, bærestoffer eller fortynningsmidler derav Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer også en fremgangsmåte for behandling av depresjon hos et pattedyr, omfattende administrasjon til et pattedyr med behov for slik behandling av en effektiv mengde av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. En ytterligere utførelsesform tilveiebringer en fremgangsmåte for behandling av depresjon hos et pattedyr, omfattende administrasjon til et pattedyr med behov for slik behandling av en effektiv mengde av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, og en effektiv mengde av et SSRI-

5 4 antidepressiva, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som for eksempel fluoksetin. Andre utførelsesformer av oppfinnelsen tilveiebringer fremgangsmåter for behandling av overvekt/ og/eller fedme, og/eller en fremgangsmåte for vektstabilisering omfattende administrasjon til et pattedyr med behov for slik behandling, av en effektiv mengde av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. I én spesiell utførelsesform av disse trekkene ved oppfinnelsen er pattedyret et menneske Denne oppfinnelsen tilveiebringer også en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav for anvendelse i terapi. Innenfor dette trekket tilveiebringer oppfinnelsen en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse i behandlingen av depresjon hos pattedyr, særlig mennesker. Oppfinnelsen tilveiebringer også en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med et SSRI-antidepressiva, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som for eksempel fluoksetin, for anvendelse i behandlingen av depresjon hos pattedyr, særlig mennesker. Videre inkluderer dette trekket av oppfinnelsen ethvert av følgende: en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse i behandlingen av overvekt; en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse i behandlingen av fedme; en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse i stabiliseringen av vekt (for vektstabilisering), særlig etter behandling for overvekt eller fedme; en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for anvendelse i behandlingen av migrene. Et annet trekk ved denne oppfinnelsen vedrører anvendelsen av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til produksjon av et medikament for behandling av depresjon. En annen utførelsesform av oppfinnelsen tilveiebringer anvendelsen av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for produksjon av et medikament for behandling av overvekt, fedme og/eller vektstabilisering. Enda en annen utførelsesform av oppfinnelsen tilveiebringer anvendelsen av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for produksjon av et medikament for behandling av migrene. Forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen er baser, og reagerer følgelig med et antall organiske og uorganiske syrer for å danne farmasøytisk akseptable salter.

6 Farmasøytisk akseptable salter av hver av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen betraktes innenfor omfanget av den foreliggende søknaden. Betegnelsen "farmasøytisk akseptabelt salt" som anvendt heri, viser til et hvilket som helst salt av en forbindelse med formel I, som er vesentlig ikke-toksisk for levende organismer. Slike salter inkluderer dem som er oppført i Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2-19 (1977), som er kjent for fagmannen. Forkortelser anvendt heri defineres som følger: "BSA" betyr bovint serumalbumin. "mcpp" betyr meta-klorfenylpiperazin, en ikke-selektiv serotoninreseptoragonist. "EDTA" betyr etylen-diamin-tetraeddiksyre. "EGTA" betyr etylen-glykol-tetraeddiksyre. "GTP" betyr guanosin-trifosfat. "HEPES" betyr 4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinetansulfonsyre. 1 "HPLC" betyr høytrykksvæskekromatografi. "IC 0 " betyr konsentrasjonen der 0 % av maksimal hemming oppnås. "LC/MS" betyr væskekromatografi etterfulgt av massespektrometri. "LC/MS/MS" betyr væskekromatografi etterfulgt av massespektrometri, etterfulgt av en andre ioniserende massespektroskopi. "mfst" betyr tvunget svømmetest hos mus; en dyremodell for antidepressiv aktivitet. "MS" betyr massespektroskopi. "MS (ES+)" betyr massespektroskopi ved hjelp av elektrospray-ionisering. "NMR" betyr kjernemagnetisk resonans. 2 "RO-tracer" betyr 2-[(2-fluorfenyl)metyl]-3-(2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3- c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-yl)-n,n-dimetyl-propanamid. "RO" betyr reseptorutnyttelse. "SCX-kolonne" betyr kolonne for sterk kationutveksling. "SNAr" betyr nukleofil aromatisk substitusjon 30 "tbu" betyr en tertiær-butylenhet. "TLC" betyr tynnsjiktskromatografi.

7 6 "XRD" betyr røntgendiffraksjon. Foretrukne forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelsen er forbindelser hvori: 1) R 1 er klor; 2) R 2a og R 2b hver er fluor; 3) R 1 er klor og R 2a og R 2b hver er fluor; 4) R 1 er fluor og R 2a og R 2b hver er hydrogen; ) R 3 er hydrogen, metyl, hydroksymetyl eller metoksymetyl; 6) R 3 er metyl; 7) R 3 er hydroksymetyl; 8) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor, og R 3 er metyl; 9) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor, og R 3 er hydroksymetyl; 1 ) R 7 er hydrogen, fluor eller klor; 11) R 7 er fluor; 12) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor, og R 7 er fluor; 13) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor, R 3 er metyl, og R 7 er fluor; 14) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor, R 3 er hydroksymetyl, og R 7 er fluor; 1) R 4 er fluor, hydroksymetyl, metoksymetyl, metylkarbonyl eller 2- metylimidazol-1-yl; 16) R 4 er fluor; 17) R 4 er hydroksymetyl; 18) R 4 er metoksymetyl; 2 19) R 4 er metylkarbonyl; ) R 4 is 2-metylimidazol-1-yl; 21) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til og med 14) hvori R 4 er fluor; 30 22) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til og med 14) hvori R 4 er hydroksymetyl;

8 7 23) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til og med 14) hvori R 4 er metoksymetyl; 24) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til og med 14) hvori R 4 er metylkarbonyl; 2) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til og med 14) hvori R 4 er 2-metylimidazol-1-yl 1 Enkelte foretrukne forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelsen er hvilke som helst av 2-klor-1'-[[1-(2,6-difluorfenyl)-3-metyl-pyrazol-4-yl]metyl]-4,4-difluor-spiro[Htieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin], 1-(2-(4-((2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran]-1-yl)metyl)-3-metyl-1h-pyrazol-1-yl)-3-fluorfenyl)etanon, 2-klor-4,4-difluor-1'-[[1-[2-fluor-6-(2-metylimidazol-1-yl)fenyl]-3-metylpyrazol-4-yl]metyl]spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin], og [4-[(2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-yl)metyl]-1- (2,6-difluorfenyl)pyrazol-3-yl]metanol, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som eksemplifisert i eksempel 2, 40, 47 og 0. 2 I en annen foretrukket utførelsesform er det funnet at forbindelser hvori R 2a og R 2b hver er fluor, har forbindelsene en gunstigere farmakokinetisk profil, og er mer stabile mot oksidativ metabolisme. Dette har den generelle effekten at forbindelsenes orale biotilgjengelighet forbedres. Generell kjemi 30 3 Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen kan fremstilles ifølge de følgende synteseskjemaene ved fremgangsmåter som er velkjente og anerkjent i teknikken. Egnede reaksjonsbetingelser for trinnene i disse skjemaene er velkjente i teknikken, og passende substitusjoner av løsemidler og ko-reagenser er innenfor teknikkens fagkunnskap. Likeledes vil det forstås av fagmannen at syntetiske mellomprodukter kan isoleres og/eller renses ved ulike velkjente

9 8 teknikker etter behov eller ønske, og at det ofte vil være mulig å anvende ulike mellomprodukter direkte i sammenhengende syntesetrinn, med liten eller ingen rensing. Dessuten vil fagmannen forstå at rekkefølgen enheter introduseres i, under noen omstendigheter, ikke er kritisk. Den bestemte rekkefølgen av trinn som trengs for å fremstille forbindelsene med formel I avhenger av den bestemte forbindelsen som syntetiseres, startforbindelsen og de substituerte halvdelenes relative labilitet, noe som fagkjemikeren forstår godt. Alle substituenter er, med mindre noe annet er oppgitt, som definert tidligere, og alle reagenser er velkjente og anerkjente i teknikken. 1 Ved hjelp av reaksjonbetingelser for reaktiv aminering reageres forbindelse III med et riktig substituert pyrazolkarbaldehyd og en reduksjonsreagens så som natrium-triacetoksyborhydrid, i et egnet løsemiddel så som tetrahydrofuran ved romtemperatur, for å tilveiebringe forbindelse II. Under passende bindingsbetingelser bindes forbindelse II til forbindelse IV, hvori substituent Y er klor-, brom-, jod- eller boronsyre, med en egnet katalysator så som kobberjodid, en egnet base så som kaliumkarbonat, i et egnet løsemiddel så som toluen ved høy temperatur for å gi forbindelse I', hvori R 4' er lik R 4 eller en forløper av R 4. Forbindelsen med formel III kan også reagere med en passende substituert aldehydforbindelse V under betingelser for reduktiv aminering beskrevet ovenfor, for å gi den ønskede forbindelsen med formel I'. Når R 4' er en forløper av R 4, omdannes den deretter til R 4 ved kjente fremgangsmåter.

10 9 1 2 Forbindelse IIIa, IIIb og IIIc kan dannes som illustrert i skjema 2. Forbindelse XIV og XV reageres i et passende løsemiddel så som diklormetan, i nærvær av en egnet syre så som trifluoreddiksyre. Det resulterende trifluoracetat gjøres basisk med vandig natriumhydroksidløsning for å gi forbindelse XIII som en fri base. Forbindelse XIII i et egnet løsemiddel så som metyl-t-butyleter behandles med en løsning av sulfurylklorid i eddiksyre ved romtemperatur for å gi forbindelse VIII som et hydrokloridsalt. Forbindelse VIII avbeskyttes deretter med en nitrogenbeskyttende gruppe under betingelser som er velkjente for fagmannen, for å gi forbindelse VII. (Se for eksempel: Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, tredje utgave, kapittel 2 og 7, John Wiley and Sons Inc., (1999)). Beskyttelsesgruppen er typisk en Boc-gruppe (tert-butyloksykarbonylgruppe). Forbindelse VII reageres med N-bromsuksinimid i et passende løsemiddel så som klorbenzen, med bestråling av en lyskilde for å gi en bromidforbindelse, som deretter behandles med en baseløsning så som vandig natriumbikarbonat for å gi en hydroksylforbindelse. Med eller uten isolering kan hydroksylforbindelsen oksideres ytterligere under egnede oksideringsbetingelser så som i kaliumbromid, tetrametylpiperidin-n-oksid, og vandig natriumhypokloridløsning for å tilveiebringe den ønskede ketonforbindelsen VI. Forbindelse VI reageres deretter med (bis(2- metyletylamino)svovel-trifluorid i et passende løsemiddel så som tetrahydrofuran ved høy temperatur, produktet som oppnås avbeskyttes for å tilveiebringe forbindelse IIIa.

11 Forbindelsen med formel XIII beskyttes for å gi forbindelse XII med en fremgangsmåte som ligner på den som anvendes for å danne forbindelse VII. Forbindelse XII i et passende løsemiddel så som tetrahydrofuran ved lav temperatur behandles med en egnet bases så som litium-tetrametylpiperidide, etterfulgt av tilsetning av N-fluorbenzensulfonimid for å gi en fluoridforbindelse, som avbeskyttes med vandig HCl og gjøres basisk med vandig NaOH-løsning for å tilveiebringe forbindelse IIIb. 1 Ved den samme fremgangsmåten som anvendes for å danne forbindelse VI ovenfor, kan forbindelse IX oppnås fra forbindelse XII gjennom tretrinnssyntese, så som brominering, hydroksylering og oksidering. Hvert mellomprodukt kan isoleres som ren forbindelse for ytterligere reaksjon, eller reageres uten isolering som beskrevet i syntesen av forbindelse VI. Forbindelse IX behandles deretter med en egnet halogen-metallutvekslingsreagens så som butyl-litium i riktig løsemiddel så som tetrahydrofuran under lav temperatur, etterfulgt av en fluorineringsreagens så som N-fluor-benzensulfonimid for å gi det ønskede fluorinerte produktet, som deretter avbeskyttes passende for å gi den ønskede forbindelsen IIIc. 2 Forbindelsen med formel V kan dannes som illustrert i skjema 3. Forbindelse XVI reageres med forbindelse XVII for å gi forbindelse med formel XV under bindingsbetingelser beskrevet ovenfor for omdanningen av forbindelse II til forbindelse I. Når Y er F eller Cl, er nukleofil aromatisk substitusjon (SNaR) en alternativ fremgangsmåte for å danne forbindelse med formel XV. Mer spesifikt kan forbindelse XVI reagere med forbindelse XVII i et passende løsemiddel så

12 11 som dimetylformamid med en egnet base sås om kaliumkarbonat ved høy temperatur, for å tilveiebringe forbindelse XV. Når Z er hydrogen, kan det omdannes til et aldehyd gjennom Vilsmeier-Haacks reaksjon. Når Z er en estergruppe, kan den reduseres til en alkohol først med et passende reduksjonsmiddel så som litium-aluminiumhydrid i et passende løsemiddel så som tetrahydrofuran. Alkoholen oksideres deretter til et aldehyd med en passende oksideringsreagens så som mangan-(v)-oksid i et løsemiddel så som diklormetan. 1 Når R 4' er forløperen av R 4, inkluderer transformasjonen av R 4' til R 4, men er ikke begrenset til, reaksjoner så som reduktiv aminering for å tilveiebringe et ønsket nytt amin; reduksjon av en ester, et keton eller aldehyd til en alkohol, som kan omdannes videre til en alkoksyforbindelse eller et karbamat; reduksjon av en nitril til et amid eller et amin; transformasjonen av en ester til en heterosykel så som oksadiazol under riktig betingelse. (For flere eksempler, se: Richard C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, andre utgave, kapittel 2 og 7, John Wiley and Sons Inc., (1999)). Følgende fremstillinger og eksempler illustrerer fremgangsmåter som er nyttige for syntesen av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen. Navnene for mange av forbindelsene illustrert i fremstillingene og eksemplene er tilveiebrakt fra strukturer tegnet med 'Symyx Draw 3.1' eller 'Autonom 00 Name'. Fremstilling 1: 4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran] tiofenetanol (123,03 ml, 1,11 mol) tilsettes i en løsning av N-tertbutoksykarbonyl-4-piperidon (18 g, 928,48 mmol) i diklormetan (1300 ml) og røres om ved romtemperatur. Deretter tilsettes trifluoreddiksyre (280,82 ml, 3,71 mole) dråpevis ( min) under avkjøling med is-/vannbad (intern temperatur = 14 C-30 C, forsiktig: CO 2 -utvikling). Reaksjonsblandingen varmes gradvis til

13 12 1 romtemperatur og røres om ved den temperaturen. Etter t er løsemidlet fordampet og et beige faststoff krystalliseres under avkjøling in vacuo. Faststoffet slemmes opp i metyl-t-butyleter (0 ml), filtreres, vaskes med metyl-t-butyleter (2 x 00 ml) og tørkes under vakuum for å gi 4','- dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-ium-trifluoracetat som et hvitt faststoff med 9 % utbytte. MS = (m/z): 2 (M+1). M natriumhydroksid (2,36 ml, 2, mol) tilsettes i en omrørt suspensjon av 4','- dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-ium-trifluoracetat (28 g, 881,44 mmol) i diklormetan (1 l) med avkjøling (is-/vannbad) og den resulterende blandingen røres om til det oppnås en tofaseblanding. Fasene separeres og det vandige sjiktet ekstraheres med diklormetan (2 x 0 ml). Kombinerte organiske emner konsentreres under vakuum for å oppnå en tykk olje som tritureres med vann for å oppnå et lysegult bunnfall. Det filtreres, vaskes med vann (300 ml) og heksan (0 ml) og tørkes under vakuum ved 3 C i t for å gi tittelforbindelsen som et lysegult faststoff med 86 % utbytte. MS (m/z): 2 (M+1). Fremstilling 2: tert-butyl-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat 2 30 Spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] (60 g, 286,6 mmol) i 2- metyltetrahydrofuran (600 ml) røres om ved 22 C i min. Deretter tilsettes tert-butoksykarbonyl tert-butylkarbonat (6,6 g, 301 mmol) i 2- metyltetrahydrofuran (300 ml) dråpevis. Etter 12 timer tilsettes en vandig løsning av natriumklorid ( ml), og det organiske sjiktet separeres. Deretter vaskes det organiske sjiktet to ganger med 2-metyltetrahydrofuran (2 x 0 ml), og de organiske sjiktene forenes og vaskes med saltløsning, tørkes over

14 13 natriumsulfat, filtreres og konsentreres under redusert trykk for å gi tittelforbindelsen med 99 % utbytte. MS (m/z): 3 (M+1). Fremstilling 3: 2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,2-c]pyran-7,4'-piperidin] 1. tert-butyl-2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidinel- 1'-karboksylat 1 2 2,2,6,6-tetrametylpiperidin (18,7 ml, 1, mmol) tilsettes over tetrahydrofuran (0 ml), og løsningen avkjøles under nitrogen ved -78 C. 2,-M-løsning av butyl-litium i heksan (37,2 ml, 93 mmol) tilsettes og blandingen røres om i 30 min ved -78 C. Over den nye litium-2,2,6,6-tetrametylpiperidin-løsningen tilsettes en løsning av tert-butyl-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat ( g, 8,2 mmol) i tetrahydrofuran (90 ml) mens temperaturen holdes under -70 C. Etter min tilsettes en løsning av N- fluorbenzensulfonimid (30,26 g, 93,07 mmol) i tetrahydrofuran (0 ml), som tidligere er avkjølt under nitrogen ved - C, via kanyle. Etter omrøring i 1 t tilsettes vann ( ml) og vandig løsning av ammoniumklorid (0 ml). Deretter separeres det organiske sjiktet, og det vandige vaskes to ganger med metyl-tbutyleter (2 x 2 ml). Organiske emner kombineres, og løsemiddel fordampes under redusert trykk. Ubearbeidet stoff renses ved normalfase-hplc ved hjelp av heksan/metyl-t-butyleter som løsemidler for å gi tert-butyl-2-fluorspiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat med 0 % utbytte. MS (m/z): 328 (M+1) fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,2-c]pyran-7,4'-piperidin] % hydrokloridsyre (11,7 ml, 12,22 mmol) tilsettes i en løsning av tertbutyl-2'-fluor-4','-dihydro-1 H-spiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-

15 14 karboksylat (8,2 g, 2,04 mmol) i isopropylalkohol (7,4 ml) ved 4 C. Den resulterende løsningen røres om ved 4 C i 6, t. Løsemidlet konsentreres til en gul suspensjon. Det tilsettes vann (0 ml) og blandingen gjøres basisk med N vandig løsning av natriumhydroksid. Den organiske fasen ekstraheres med etylacetat (3 x 0 ml) og de kombinerte organiske ekstraktene vaskes med saltløsning (0 ml), tørkes over natriumsulfat, filtreres og konsentreres under redusert trykk for å gi tittelforbindelsen med 96% utbytte. MS (m/z): 228 (M+1). Fremstilling 4: 2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran] hydroklorid En løsning av 4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran] (0 g, 238,88 mmol) i en blanding av eddiksyre (400 ml) og metyl-t-butyleter (40 ml) avkjøles til 1 C. Deretter tilsettes en løsning av sulfurylklorid (21, ml, 262,77 mmol) i eddiksyre (0 ml) dråpevis i løpet av 40 min ved den temperaturen (intern temperatur = 1 C-22 C) og blandingen røres om ved romtemperatur i t. Deretter tilsettes en løsning sulfurylklorid (11,6 ml, 143,33 mmol) i eddiksyre (0 ml) dråpevis ved rt. Reaksjonsblandingen røres om ved romtemperatur i 30 min og tilsettes deretter dråpevis (30 min.) over metyl-t-butyleter (1 L) mens det avkjøles med is-/vannbad med omrøring. Det dannes en hvit suspensjon, og faststoffet filtreres. For å oppnå en andre mengde stoff, konsentreres filtratet (ved påfyll av metyl-t-butyleter via rotavapor. Det resulterende faststoffet suspenderes i metyl-t-butyleter (300 ml), suspensjonen røres om ved tilbakeløp (bad: 0 C) og metanol (30 ml) tilsettes til det dannes en uklar suspensjon. Deretter avkjøles suspensjonen til romtemperatur over natten. Suspensjonen avkjøles ytterligere i et is-/vannbad og filtreres. Faststoffet vaskes med metyl-tbutyleter (0 ml) og kombineres med den første mengden for å gi tittelforbindelsen med et utbytte på 60 %. MS (m/z): 244 (M+1).

16 1 Fremstilling : 2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'- tieno[2,3-c]pyran] 1. tert-butyl-2-klorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]- 1'-karboksylat 1 I en suspensjon av 2-klorspiro[4,-dihydrotieno[2,2-c]pyran-7,4'-piperidin]- hydrokloridsalt (140 g, 0,49 mol) i diklormetan (1,12 l) tilsettes trietylamin (67,2 ml, 1,0 mole), 4-pyridinamin, N,N-dimetyl- (3,0 g, 0,02 mole) og dit-butyldikarbonat (111,22 g, 0,09 mole) i porsjoner og den resulterende blandingen røres om ved romtemperatur over natten. Reaksjonen vaskes med 1N HCl (2 x) og vann. Den organiske fasen tørkes over magnesiumsulfat, filtreres og konsentreres under redusert trykk for å gi tert-butyl-2-klorspiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat med 3 % utbytte. MS (m/z): 244 (M+1-Boc). 2. tert-butyl-4'-okso-2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran]-1-karboksylat 2 30 I en l dobbeltvegget reaktor tilsettes N-bromsuksinimid (11,02 g, 639,77 mmol) til en løsning av tert-butyl-2-klorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat (0 g, 81,61 mmol) i klorbenzen (1,60 l) ved rt. Den resulterende suspensjonen bestråles med lamper med 3 x 0-w lyspærer anordnet nesten i kontakt med den utvendige reaktorveggen, og reaktortemperaturen settes til 4 C. Etter 4 t, tilsettes N-bromsuksinimid (26,14 g, 14,40 mmol), og temperaturen holdes ved 40 C i 1 t. Reaksjonsblandingen avkjøles til 0 C og metyl-t-butyleter (00 ml) tilsettes.

17 16 1 Faststoffet filtreres og løsningen konsentreres til omtrent 00 ml oppløsning i klorbenzen. Deretter tilsettes metyl-t-butyleter (00 ml), faststoffene filtreres og filtratet konsentreres for å gi 600 ml klorbenzenløsning. Dimetyl-sulfoksid (806,47 ml, 11,3 mol) tilsettes og natriumbikarbonat (9,38 g, 1,14 mol) tilsettes ved romtemperatur. Etter omrøring i 24 t ved romtemperatur tilsettes vann/is (00 ml) og fasene separeres. Den organiske fasen vaskes med vann (2 x 1 l) og konsentreres for å gi en løsning i klorbenzen. Deretter tilsettes diklormetan (1,2 l), og blandingen avkjøles til C (is-/vannbad). Kaliumbromid (,27 g, 170,31 mmol) og 2,2,6,6-tetrametylpiperidin-N-oksid (4,43 g, 28,38 mmol) tilsettes. Deretter tilsettes en løsning av 6 % natriumhypokloritt i vann (644,40 ml, 67,68 mmol), justert ved ph = 9 med natriumbikarbonat (s), i reaksjonsblandingen ved C, og den resulterende blandingen røres om 1 t ved C. Romtemperert vann (1 l) tilsettes og fasene separeres. Den organiske fasen vaskes med vann (2 x 0, l) og ble avkjølt med is-/vannbad. Deretter tilsettes kaliumbromid (2,03 g, 17,03 mmol), 2,2,6,6-tetrametylpiperidin-Noksid (0,0 g, 0,32 mmol) og en løsning av 6 % natriumhypokloritt i vann (128,88 ml, 113,4 mmol), justert ved ph = 9 med natriumbikarbonat i fast form, til reaksjonsblandingen ved C, og den resulterende blandingen røres om 1 t fra C til romtemperatur. Deretter tilsettes vann (1 l), og fasene separeres. Den organiske fasen vaskes med vann (2 x 1 l), tørkes og konsentreres for å gi et mørkebrunt faststoff. 2 Faststoffet tritureres med heksan (00 ml), metyl-t-butyleter/heksan % ( ml) og metyl-t-butyleter/heksan % ( ml) for å oppnå tert-butyl-4'-okso- 2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat som et lysebrunt faststoff med et utbytte på 66 %. MS (m/z): 28 (M+1-Boc). 3. tert-butyl-2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospirotpiperidin4,7'- tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat 30 3 I en 00 ml PFA-kolbe fylt med tetrahydrofuran (81 ml) tilsettes (bis(2- metoksyetyl)amino)svoveltrifluorid (183,62 g, 829,94 mmol) og tert-butyl-4'- okso-2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat (13 g, 377,24 mmol). Den resulterende suspensjonen røres om ved 70 C i 24 t. Deretter avkjøles den til romtemperatur og helle sakte over en blanding av is og mettet vandig løsning av natriumbikarbonat (4L), med omrøring (gassutvikling). Metyl-t-butyleter anvendes for å overføre det resterende stoffet

18 17 1 fra kolbene. Etter at gassutvikling opphørte, tilsettes natriumbikarbonat med omrøring til ph 8 ble nådd. Den resulterende blandingen ekstraheres med metylt-butyleter (3 x 00 ml) til det ikke ble detektert noe produkt i den vandige fasen ved TLC. Kombinerte organiske emner vaskes med vann (3 x 00 ml) og saltløsning (00 ml), tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi en mørk, tykk olje ( g). Ubearbeidet stoff løses opp i diklormetan og filtreres gjennom en silikagelplugg ved elusjon med metyl-t-butyleter/heksan % (6 L) og metyl-t-butyleter/heksan (4 L). Fraksjoner samles opp til det ikke ble detektert noe produkt ved TLC ( % metyl-t-butyleter/heksan, UV, Rf = 0,). Filtratet konsentreres for å oppnå et lysebrunt faststoff som tørkes under vakuum ved 40 C til konstant vekt, for å gi 70 % utbytte av tert-butyl-2'-klor-4',4'-difluor-4','- dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat. MS (m/z): 324 (M+1-tBu). 4. 2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran] 2 37 % hydrokloridsyre (74,12 ml, 789,78 mmol) tilsettes i en løsning av tert- butyl-2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1- karboksylat (60 g, 17,96 mmol) i isopropylalkohol (4 ml) ved 4 C. Den resulterende løsningen røres om ved 4 C i 1 t. Deretter konsentreres blandingen til 1/4 volum for å gi en hvit suspensjon. Vann (0 ml) tilsettes, og blandingen gjøres basisk med 6N vandig løsning av natriumhydroksid for å oppnå en tosjiktsblanding som ekstraheres med metyl-t-butyleter (3 x 0 ml). Det kombinerte organiske emnene vaskes med saltløsning (0 ml), tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi et lysegult faststoff som tørkes under vakuum til konstant vekt for å gi 97 % av tittelforbindelsen. MS (m/z): 280 (M+1). Fremstilling 6: 2,4,4-trifluorspiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] 30

19 18 1. tert-butyl-2-brom-4-hydroksy-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran- 7,4'-piperidin]-1'-karboksylat 1 N-bromsuksinimid (2,2 ekviv.) tilsettes i en løsning av tert-butyl spiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat (13, g) i klorbenzen (8 ml). Den resulterende suspensjonen bestråles med lampe med 260 w lyspære, over natten. Mer N-bromsuksinimid (1,7 g) tilsettes i blandingen, og blandingen bestråles med lampe med 260 w lyspære i 3 timer. Løsemidlet elimineres under redusert trykk, noe som gir en rest som løses opp i aceton (60 ml), og en løsning av sølvnitrat (8,8 g) i vann (60 ml) tilsettes. Blandingen røres om ved romtemperatur i mørke over natten. Blandingen filtreres av og acetonet fordamper. Etylacetat tilsettes og det organiske sjiktet vaskes med mettet vandig løsning av natriumbikarbonat og saltløsning. Det organiske sjiktet tørkes over natriumsulfat, filtreres, og løsemidlet fordampes under redusert trykk. Resten renses ved normalfase Isco-kromatografi (eluent: heksan/etylacetat 1-60%) for å gi tert-butyl-2-brom-4-hydroksy-spiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat med et utbytte på 38 %. MS (m/z): 426/428 (M+23/M+2+23) 2. tert-butyl-2'-brom-4'-okso-spiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1- karboksylat 2 30 Kaliumbromid (3,67 mg, 4,0 mmol) tilsettes i en løsning av tert-butyl-2- brom-4-hydroksy-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-sykloheksan]-1'- karboksylat (7,28 g) og 2,2,6,6-tetrametylpiperidin-N-oksid (281,33 mg, 1,80 mmol,) i diklormetan (70 ml) ved 0 C. I en annen beholder tilsettes natriumbikarbonat til % i vann-natrium-hypokloritt (22,34 ml, 36,01 mmol) til ph 9. Denne natriumhypokloritt-natriumbikarbonat-løsningen tilsettes dråpevis ved 0 C og den resulterende mørke suspensjonen røres om ved 0 C i 1 min. Diklormetan ( ml) og vann ( ml) tilsettes, og fasene separeres. Den organiske fasen vaskes med vann ( ml) og tørkes over natriumsulfat.

20 19 Løsemidlet elimineres under redusert trykk for å gi tert-butyl-2'-brom-4'-oksospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat med et utbytte på 99 %. MS (m/z): 346/348 (M- t-bu) 3. tert-butyl-2-brom-4,4-difluor-spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat 1 I en 0 ml perfluoralkoksy-kolbe-kolbe tilsettes (bis(2- metoksyetyl)amino)svoveltrifluorid (,16 ml, 27,96 mmol) til tørr tetrahydrofuran (3, ml). Deretter tilsettes tert-butyl-2'-brom-4'-oksospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat (4, g, 11,19 mmol). Løsningen røres om ved 70 C over natten. Etter den tiden tilsettes metyl-tbutyleter (30 ml), og reaksjonsblandingen helles forsiktig over natriumbikarbonat (mettet vandig løsning) avkjølt i et isbad. CO2-utvikling observeres og natriumbikarbonat (mettet vandig løsning) tilsettes til ph 8. Blandingen ekstraheres med metyl-t-butyleter. Organisk sjikt dekanteres, vaskes med saltløsning (2 x), tørkes over magnesiumsulfat, og løsemidlet fordampes under redusert trykk. Det ubearbeidede emnet renses ved normalfase Iscokromatografi, ved elusjon med metyl-t-butyleter/heksan for å gi 3,2 g tert-butyl- 2-brom-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat. MS (m/z): 368 (M-). 4. tert-butyl-2,4,4-trifluorspiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'- karboksylat , M butyl-litium i heksan (47 ml) tilsettes over en løsning av tert-butyl-2- brom-4,4-difluor-spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat (1,99 g, 4,69 mmol) i tetrahydrofuran (0 ml) under nitrogen og ved -78 C. Blandingen røres om ved -78 C i 1 time og N-fluor-benzensulfonimid i fast form (3,69 g, 11,73 mmol) tilsettes. Blandingen får varme seg til romtemperatur og røres om ved romtemperatur over natten. Mettet vandig løsning av ammoniumklorid tilsettes og den organiske fasen ekstraheres med etylacetat, tørkes over natriumsulfat, og løsemidlet elimineres under redusert trykk. Det ubearbeidede stoffet renses ved normalfase Isco-kromatografi (heksan/etylacetat 3-12 %) for å gi 1,3 g tert-butyl-2,4,4-trifluorspiro[h-

21 tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat som renses ytterligere ved HPLC for å oppnå 0,818 g av den forbindelsen. MS (m/z): 308 (M-t-Bu).. 2,4,4-trifluorspiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] t-butyl-2,4,4-trifluorspiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat (2,00g,,0 mmol) løses opp i hydrokloridsyre (4N i dioksan) ( ml, 40 mmol). Blandingen røres om ved romtemperatur i 1 t og passeres deretter gjennom en 0 g SCX-patron for å gi 1,3 g av tittelforbindelsen etter fordamping av 2N ammoniakk i metanolfraksjon. MS (m/z): 264 (M+1). Fremstilling 7: 2-klor-4,4-difluor-1'-[(3-metyl-1H-pyrazol-4- yl)metyl]spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] 1 2 I en løsning av 2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] ( g, 37 mmol) i tetrahydrofuran (1,8 t) tilsettes 3-metyl-1H-pyrazol-4- karbaldehyd (43,40 g, 394,12 mmol), og blandingen røres om ved romtemperatur i 1 t. Deretter tilsettes natrium-triacetoksyborhydridpulver (9,46 g, 40,42 mmol) i 3 porsjoner. Blandingen røres om ved romtemperatur i 1 t. Deretter helles reaksjonsblandingen over en mettet vandig løsning av isnatriumbikarbonat (400 ml). Fasene separeres. Den vandige fasen ekstraheres med etylacetat (0 ml). De kombinerte organiske sjiktene vaskes med 0 % saltløsning, og et faststoff utfelles i den organiske fasen. Den organiske fasen konsentreres for å gi 170 g av tittelforbindelsen. MS (m/z): 374 (M+1). 30 Forbindelsene ifølge fremstilling 8-11 fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 7, ved hjelp av 1,2-dikloretan som løsemiddel.

22 21 Fremst. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%) Fysiske data: (m/z) MS 8 c]pyran-7,4'-piperidin] (M+1) 9 c]pyran-7,4'-piperidin] (M+1) 2-fluor-1'-[(3-metyl-1H-pyrazol-4- yl)metyl]spiro[4,-dihydrotieno[2,3-2-klor-1'-[(3-metyl-1h-pyrazol-4- yl)metyl]spiro[4,-dihydrotieno[2,3-2,4,4-trifluor-1'-[(3-metyl-1h (M+1) 11 pyrazol-4-yl)metyl]spiro[h- tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] 2-klor-1'-(1H-pyrazol-4- ylmetyl)spiro[4,-dihydrotieno[2,3- c]pyran-7,4'-piperidin] (M+1) Fremstilling 12: 1-(2,6-difluorfenyl)-3-metyl-pyrazol-4-karbaldehyd 1. 1-(2,6-difluor-fenyl)-3-metyl-1H-pyrazol

23 22 I et prøverør med skrukork tilsettes kobber(i)jodid (1,86 g, 9,74 mmol), 3- metyl-1-h-pyrazol (3,92 ml, 48,72 mmol) og kaliumkarbonat (14,28 g, 2,31 mmol). Deretter tilsettes 2-brom-1,3-difluor-benzen (13,7 ml, 121,80 mmol) og trans-n,n'-dimetylsykloheksan-1,2-diamin (3,07 ml, 19,49 mmol), og blandingen røres om ved 11 C i 24 t. Reaksjonen kjøles ned, vann (0 ml) tilsettes og blandingen ekstraheres med diklormetan (3 x ml). Organiske emner tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi en mørk olje. Resten renses ved silikagelkromatografi ved hjelp av klormetan/heksan som eluent (fra 0 til 0 % diklormetan) for å gi 2, g 1-(2,6-difluor-fenyl)-3-metyl-1Hpyrazol. MS (m/z): 19 (M+1) (2,6-difluorfenyl)-3-metyl-pyrazol-4-karbaldehyd 1 2 Fosforylklorid (9,19 ml, 98,88 mmol) tilsettes dråpevis til dimetylformamid (7,6 ml, 98,88 mmol) ved 0 C og blandingen røres om i min ved den temperaturen. Deretter tilsettes 1-(2,6-difluor-fenyl)-3-metyl-1H-pyrazol (4,80 g, 24,72 mmol) til den resulterende suspensjonen, og reaksjonsblandingen røres om ved 8 C i t. Reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur, og is og vann ( ml) tilsettes uten eksoterm. Blandingen helles over mettet vandig løsning av natriumbikarbonat (30 ml) og gjøres basisk med 2 N natriumhydroksid. Blandingen ekstraheres med metyl-t-butyleter (2 x 30 ml), og det organiske sjiktet vaskes med saltløsning (2 x 30 ml), tørkes over natriumsulfat, og løsemidlet fordampes under redusert trykk for å gi,3 g av tittelforbindelsen. MS (m/z): 223 (M+1). Fremstilling 13: Etyl-3-metyl-1H-pyrazol-4-karboksylat 30 Svovelsyre (18 ml, mmol) tilsettes i en suspensjon av 1H-pyrazol-4- karboksylsyre, 3-metyl- ( g, 79,29 mmol) i etanol (90 ml) og blandingen røres

24 23 om ved 8 C i t. Etter den tiden fjernes løsemidlet delvis. Resten gjøres basisk med 1M natriumhydroksid-løsning til ph 6-7 og ekstraheres med diklormetan. Organisk sjikt dekanteres, tørkes over magnesiumsulfat, og løsemiddel fordampes under redusert trykk for å gi,3 g av tittelforbindelsen, som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 1 (M+1). Fremstilling 14: Metyl-2,3-difluorbenzoat 1 Forbindelsen ifølge fremstilling 14 fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 13, ved hjelp av 2,3-difluorbenzosyre og metylalkohol med et utbytte på 96 %: 1 H-NMR (CDCl 3 ): 7,70 (m, 1H), 7,3 (m, 1H), 7,14 (m, 1H), 3,9 (s, 3H) Fremstilling 1: 2,3-difluor-N-metyl-benzamid 2 En blanding av 2,3-difluorbenzosyre (1 g, 6,32 mmol) og tionylklorid (9 ml, 123,3 mmol) røres om og varmes opp ved tilbakeløp i 2 t. Løsemidlet fordampes in vacuo og resten fordampes sammen med toluen. Når den er tørket løses resten opp i ml tetrahydrofuran, kjøles av ved 0 C og monometylamin (6,32 ml, 12,6 mmol) tilsettes. Etter min bråkjøles reaksjonen med vann og ekstraheres med etylacetat. Det organiske sjiktet ble separert, tørket over magnesiumsulfat, og løsemidlet fordampet in vacuo for å gi 790 mg av tittelforbindelsen. MS (m/z): 172 (M+1)

25 Fremstilling 16: 3-fluor-2-(4-formyl-3-metyl-pyrazol-1-yl)benzamid 24 1 En blanding av 3-metyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (1,2 g, 138,49 mmol) og 2,3-difluorbenzamid (26,11 g, 166,19 mmol) i dimetylformamid (228,7 ml) avkjøles med is-/vannbad og deretter tilsettes kalium-tert-butoksid (17,09 g, 12,34 mmol). Den resulterende blandingen røres om ved 0 C i t. Reaksjonsblandingen kjøles ned til romtemperatur. Deretter tilsettes is/vann (300 ml) og blandingen ekstraheres med etylacetat (3 x 0 ml). Organiske emner kombineres, tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi en lysegul olje inneholdende % av den andre pyrazol-regioisomeren. Resten renses ved silikagelkromatografi ved hjelp av etylacetat/heksan som eluent for å gi 17,4 g av tittelforbindelsen. MS (m/z): 248 (M+1). Forbindelsene ifølge fremstilling fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 16, fra det tilsvarende 2,3-difluorfenylderivatet. Fremst. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%) Fysiske data: MS (m/z) 17 yl)benzamid (M+1) 18 3-fluor-2-(4-formyl-pyrazol-1- Metyl-3-fluor-2-(4-formyl-3- metyl-pyrazol-1-yl)benzoat (M+1)

26 2 Fremstilling 19: 1-(2-fluor-6-nitro-fenyl)-3-metyl-1H-pyrazol-4- karbaldehyd 1 I en løsning av 3-metyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (1 g, 9,08 mmol) i acetonitril ( ml) tilsettes kaliumkarbonat (1,76 g, 12,71 mmol) og 2,3-difluornitrobenzen (1,73 g,,90 mmol), og blandingen røres om ved romtemperatur over natten. Vann tilsettes og den organiske fasen ekstraheres med etylacetat. Organisk sjikt tørkes over natriumsulfat, og løsemidlet fordampes under redusert trykk. Resten renses ved normalfase Isco-kromatografi ved hjelp av etylacetat/heksan (-80 %) som eluent for å gi et utbytte på 62 % av en blanding av regioisomerer, inneholdende tittelforbindelsen som hovedprodukt, som anvendes uten ytterligere rensing. 1 H-NMR samsvarer med ønsket struktur, selv om det detekteres blandinger av regioisomerer. 1 H-NMR (MeOD): 9,98 (s, 1H), 8,6 (d, 1H, J= 1,6 Hz), 7,99-7,26 (m, 3H), 2,49 (s, 3H). Fremstilling : 3-fluor-2-(4-formyl-3-metyl-pyrazol-1-yl)benzonitril 2

27 26 En blanding av 3-metyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd ( g, 4,41 mmol), kaliumkarbonat (9,41 g, 68,11 mmol), 2,3-difluorbenzonitril (6,06 ml, 4, mmol) og dimetylformamid (0 ml) røres om ved 0 C i t, og deretter ved romtemperatur over natten. Vann tilsettes, og det dannes et bunnfall. Bunnfallet filtreres. Den vandige filtrerte løsningen ekstraheres i etylacetat. Organisk sjikt vaskes med saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat, og løsemiddel fordampes. Både det utfelte faststoffet og faststoffet som er gjenvunnet fra det organiske sjiktet etter fordampning kombineres, og,4 g av tittelforbindelsen oppnås og anvendes uten ytterligere rensing (tittelforbindelsen er kontaminert med den andre pyrazol-regioisomeren i et forhold av 90:). MS (m/z): 230 (M+1). Forbindelsene ifølge fremstilling fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling, fra det tilsvarende fluorfenylderivatet. Fremst. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%) Fysiske data: (m/z) MS (M+1) 22 3-klor-2-(4-formyl-3-metylpyrazol-1-yl)benzamid 3-fluor-2-(4-formyl-3-metyl- pyrazol-1-yl)-n-metyl- benzamid (M+1) 23 Metyl-3-brom-2-(4-formyl-3- metyl-1h-pyrazol-1- yl)benzoat , 32 (M+1, M+3)

28 27 Fremst. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%) Fysiske data: (m/z) MS 24 yl)benzonitril (M+1) 2 3-fluor-2-(4-formylpyrazol-1- Etyl-1-(2-acetyl-6-fluor- karboksylat (M+1) 26 fenyl)-3-metyl-pyrazol-4- Etyl-1-(2-klor-6-formyl- karboksylat (M+1) 27 fenyl)-3-metyl-pyrazol-4- Etyl-1-(2-fluor-6-formyl- fenyl)-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat (M+1) Fremstilling 28: Etyl-1-[2-(dimetylaminometyl)-6-fluor-fenyl]-3-metylpyrazol-4-karboksylat

29 28 Forbindelsen fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 7, ved hjelp av etyl-1-(2-fluor-6-formyl-fenyl)-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat og dimetylamin. Resten renses ved normalfase Isco-kromatografi (eluent: diklormetan/metanol) for å gi etyl-1-[2-(dimetylaminometyl)-6-fluor-fenyl]-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat med et utbytte på 90 %. MS (m/z): 306 (M+1) Fremstilling 29: [1-[2-(Dimetylaminometyl)-6-fluor-fenyl]-3-metylpyrazol-4-yl]metanol 1 2 I en løsning av etyl-1-(2-dimetylaminometyl-6-fluor-fenyl)-3-metyl-1h-pyrazol- 4-karboksylsyre-etylester (1,9 g, 6,39 mmol) i tetrahydrofuran (42,6 ml) avkjølt til 0 C, og under nitrogen, tilsettes 1 M litium-aluminiumhydrid i tetrahydrofuran (9,6 ml, 9,6 mmol) tilsettes og blandingen røres om ved den temperaturen i 1 t. Reaksjonsblandingen behandles ved 0 C med 0,36 ml vann, 0,36 ml 1 % natriumhydroksidløsning og til slutt 1,08 ml vann, og røres om ved romtemperatur i 1 min. Faststoffet filtreres av og løsemidlet fordampes in vacuo for å avgi 1,68 g av tittelforbindelsen som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 264 (M+1). Fremstilling 30: 1-[2-(Dimetylaminometyl)-6-fluor-fenyl]-3-metylpyrazol-4-karbaldehyd

30 29 En blanding av [1-(2-dimetylaminometyl-6-fluor-fenyl)-3-metyl-1H-pyrazol-4- yl]-metanol (4,89 mmol; 1,43 g) og mangan-(iv)-oksid (4,2 g, 48,88 mmol) røres om i diklormetan (0 ml) ved romtemperatur over natten. Reaksjonsblandingen filtreres over celitt, og løsemidlet fordampes under redusert trykk for å gi 1,4 g tittelforbindelsen, som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 262 (M+1). Fremstilling 31: 1-[2-fluor-6-(morfolinmetyl)fenyl]-3-metyl-pyrazol-4- karbaldehyd 1 1. Etyl-1-[2-fluor-6-(morfolinmetyl)fenyl]-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat Denne forbindelsen fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 7, ved hjelp av etyl-1-(2-fluor-6-formyl-fenyl)-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat og morfolin. MS (m/z): 348 (M+1) 2. [1-[2-fluor-6-(morfolinmetyl)fenyl]-3-metyl-pyrazol-4-yl]metanol 2

31 30 Denne forbindelsen fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 29, ved hjelp av etyl-1-[2-fluor-6-(morfolinmetyl)fenyl]-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat. MS (m/z): 306 (M+1) 3. 1-[2-fluor-6-(morfolinmetyl)fenyl]-3-metyl-pyrazol-4-karbaldehyd 1 3,3,3-triacetoksy-3-jodftalid (0,42 g, 0,96 mmol) tilsettes i en løsning av [1-(2- fluor-6-morfolin-4-ylmetyl-fenyl)-3-metyl-1h-pyrazol-4-yl]-metanol (0,24 g, 0,8 mmol) i diklormetan (3 ml) ved romtemperatur. Etter én time bråkjøles reaksjonen ved tilsetning av 2N natriumkarbonatløsning, og forbindelsen ekstraheres i diklormetan. Det organiske sjiktet separeres, tørkes over magnesiumsulfat, og løsemidlet fordampes in vacuo for å gi tittelforbindelsen med et utbytte på 99 %, som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 304 (M+1). Fremstilling 32: 1-[2-klor-6-(dimetylaminometyl)fenyl]-3-metylpyrazol-4-karbaldehyd Tittelforbindelsen fremstilles ved hjelp av en fremgangsmåte i hovedsak som beskrevet i fremstilling 31 ved hjelp av dimetylamin og etyl-1-(2-klor-6-formylfenyl)-3-metylpyrazol-4-karboksylat (68 % utbytte). MS (m/z): 278 (M+1). 2 Fremstilling 33: tert-butyl N-syklopropyl-N-[[3-fluor-2-(4-formyl-3- metyl-pyrazol-1-yl)fenyl]metyl]karbamat

32 31 1. Etyl-1-[2-[(syklopropylamino)metyl]-6-fluor-fenyl]-3-metyl-pyrazol- 4-karboksylat Den følgende forbindelsen fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 7, ved hjelp av etyl-1-(2-fluor-6-formyl-fenyl)-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat og syklopropylamin MS (m/z): 318 (M+1) 2. Etyl-1-[2-[(tert-butoksykarbonyl(syklopropyl)amino)metyl]-6-fluorfenyl]-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat 1 I en løsning av 1-(2-syklopropylaminometyl-6-fluor-fenyl)-3-metyl-1H-pyrazol- 4-karboksylsyre-etylester (330,00 mg, 1,04 mmol) i diklormetan (3 ml) tilsettes ved romtemperatur tert-butoksykarbonyl-tert-butyl-karbonat (226,94 mg, 1,04 mmol) og trietylamin (11,2 mg, 1,14 mmol). Etter 1 t tilsettes vann, og forbindelsen ekstraheres med DCM. Det organiske sjiktet separeres, tørkes over magnesiumsulfat, og løsemidlet fordampes under redusert trykk. Det ubearbeidede emnet renses med en kort silikagelplugg og heksan/etylacetat :1 som eluent for å gi 349 mg of etyl-1-[2-[(tert butoksykarbonyl(syklopropyl)amino)metyl]-6-fluor-fenyl]-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat. MS (m/z): 418 (M+1) 3. tert-butyl N-syklopropyl-N-[[3-fluor-2-[4-(hydroksymetyl)-3-metylpyrazol-1-yl]fenyl]metyl]karbamat 2 30 Den følgende forbindelsen fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 29, ved 0 C ved hjelp av etyl-1-[2-[(tert- butoksykarbonyl(syklopropyl)amino)metyl]-6-fluor-fenyl]-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat med et utbytte på 92 %. MS (m/z): 376 (M+1)