Kundeservice: Ytterligere informasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på

Transkript

1 system no Anti-HBs 7C18-27, - 37, - 34 G5-5409/R01 B7CY8N Anti-HBs Kundeservice: Ytterligere informasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på Instruksjonene i pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr for in vitro-diagnostikk Lotnummer Utløpsdato Serienummer Oppbevares ved 2 8 C Viktig Se pakningsvedlegg Produsent Reagenslot Kontrollnummer Kyvetter Prøvekopper Septum Ekstra skrukorker Inneholder natriumazid. Ved kontakt med syre utvikles meget giftig gass. Globalt varenummer Produseres i Irland Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. 1

2 NAVN ARCHITECT Anti-HBs BRUKSOMRÅDE ARCHITECT Anti-HBs-analysen er en immunkjemisk kjemiluminescensmikropartikkelanalyse (CMIA) til kvantitativ bestemmelse av antistoff mot hepatitt B-overflateantigen (anti-hbs) i humant serum og plasma. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING ARCHITECT Anti-HBs-analysen påviser konsentrasjonen av antistoff mot hepatitt B-overflateantigen (anti-hbs) i humant serum og plasma. Anti-HBs-analyser brukes ofte til å vurdere om hepatitt B-vaksinen var effektiv. Forekomst av anti-hbs har vist seg å være viktig som beskyttelse mot hepatitt B-virus (HBV)-infeksjon. 1 Flere studier har vist at hepatitt B-vaksinen er effektiv til stimulering av immunsystemets produksjon av anti-hbs og hindrer HBV-infeksjon. 2-4 Analyser av anti-hbs brukes også ved oppfølging av rekonvalesens og helbredelse av hepatitt B-smittede personer. Forekomsten av anti-hbs etter akutt HBV-infeksjon og tap av hepatitt B-virusoverflateantigen (HBsAg) kan være nyttig som indikator på at sykdommen er overstått. Deteksjon av anti-hbs hos en asymptomatisk person kan være en indikasjon på tidligere eksponering av HBV. Basert på anbefalingen fra Verdens helseorganisasjon (WHO) betraktes prøver med en anti-hbs-konsentrasjon 10 miu/ml som beskyttende mot hepatitt B-virusinfeksjon 5,6. ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT Anti-HBs-analysen er en totrinns immunkjemisk analyse som bruker teknologien for immunkjemisk kjemiluminescens mikropartikkelanalyse (CMIA), til kvantitativ bestemmelse av anti-hbs i humant serum og plasma. I det første trinnet blandes prøve og paramagnetiske mikropartikler belagt med rekombinant HBsAg (rhbsag). Anti-HBs i prøven bindes til de rhbsagbelagte mikropartiklene. Etter vasking tilsettes i trinn to akridinmerket rhbsag-konjugat. Etter enda en vaskesyklus tilsettes pretrigger- og trigger løsning til reaksjonsblandingen. Kjemiluminescensreaksjonen som oppstår, måles i relative lysenheter (RLU = Relative Light Units). Mengden av anti HBs i prøven og RLU målt av optikken i ARCHITECT i* System er direkte proporsjonale. Konsentrasjonen av anti-hbs i prøven bestemmes ved hjelp av en tidligere generert ARCHITECT Anti-HBs-kalibreringskurve. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. * i = immunkjemisk analyse REAGENSER Reagenspakke, 100/500 tester MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land eller til bruk på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt Abbott kundeservice. ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit (7C18) 1 eller 4 flasker (4,56 ml per flaske med 100 tester / 16,80 ml per flaske med 500 tester) mikropartikler belagt med hepatitt B-overflateantigen (subtype ad og ay) (E. coli rekombinant DNA uttrykt i murine celler) i TRIS-buffer med protein stabilisatorer. Minimums konsentrasjon: 0,125 % tørrstoff. Konserveringsmidler: natrium azid og antimikrobielle midler. 1 eller 4 flasker (5,9 ml per flaske med 100 tester / 26,3 ml per flaske med 500 tester) Konjugat: hepatitt B-overflateantigen (subtype ad og ay) (E. coli rekombinant DNA uttrykt i murine celler) merket med akridin i MES-buffer med proteinstabilisatorer (bovint og humant plasma). Minimumskonsentrasjon: 0,10 µg/ml. Konserveringsmidler: natrium azid og antimikrobielle midler. Fortynningsløsning ARCHITECT Anti-HBs Specimen Diluent (7C18-40) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT Anti-HBs Specimen Diluent som inneholder rekalsifisert humant plasma. Konserverings middel: ProClin 950 og natriumazid. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk Instruksjonene i pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet inneholder komponenter av human opprinnelse og/eller potensielt smittefarlige komponenter. Se REAGENSER i dette pakningsvedlegget. Det finnes ingen kjent testmetode som kan garantere at produkter som er fremstilt av humant materiale eller inaktiverte mikroorganismer, ikke vil kunne overføre infeksjon. Alt materiale av human opprinnelse skal derfor anses som potensielt smittefarlig. Det anbefales at disse reagensene og humane prøver og alt materiale som inneholder eller kan inneholde smittefarlige stoffer, håndteres i overensstemmelse med gjeldende sikkerhetsforskrifter Det humane plasmaet som er brukt i konjugatet, er ikke-reaktivt for HBsAg, HIV-1 RNA eller HIV-1 Ag, anti-hcv, anti-hiv-1/hiv-2 og anti-hbs. Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for følgende komponenter: Mikropartikler Konjugat Inneholder natriumazid. EUH032 Ved kontakt med syre utvikles meget giftig gass. P501 Kast innhold/beholder i samsvar med lokale bestemmelser. Sikkerhetsdatablader er tilgjengelige på eller kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Informasjon om sikker uskadeliggjøring av natriumazid og en detaljert beskrivelse av forholdsregler ved bruk av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 8. Forholdsregler ved bruk Reagenspakker må ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme pakke eller fra forskjellige reagenspakker. Før ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha lagt seg på bunnen under transport. Informasjon om blanding av mikropartikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering av reagenser og for å sikre reagensenes holdbarhet. Hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når et septum settes på en reagensflaske uten kork. Etter at septum er satt på en åpen reagensflaske, må ikke flasken vendes. Det vil føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette er vanligvis inntørkede salter som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved bruk av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 7. 2

3 Oppbevaring ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit, Calibrators og Controls skal oppbevares ved 2 8 C i loddrett stilling og kan brukes med det samme de er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit kan oppbevares i ARCHITECT i System i maksimalt 30 dager. Etter 30 dager skal reagenspakken kastes. Informasjon om styring av reagensholdbarhet i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Reagensene kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT i System. Hvis reagensene tas ut av systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ekstra skrukorker) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i originalemballasjen for å sikre at de står loddrett. Hvis flasken med mikropartikler ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Når reagensene tas ut av systemet, må det startes en skanning for å oppdatere systemets holdbarhetstidsmåler. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Hvis en kontrollverdi ligger utenfor det spesifiserte området, kan det tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige og prøvene skal analyseres på nytt. Rekalibrering av analysen kan være nødvendig. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT Anti-HBs-analysefilen må installeres på ARCHITECT i System fra en ARCHITECT i System Assay CD-ROM før analysen utføres. Ytterligere informasjon om installering av analysefilen og om visning og endring av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Ytterligere informasjon om systemprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet. Standard benevning for ARCHITECT Anti-HBs-analysen er miu/ml. En alternativ benevning, IU/l, kan velges for resultatrapportering ved å endre analyseparameteren Result concentration units til IU/L. Systemet bruker omregningsfaktoren 1. PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Til ARCHITECT Anti-HBs-analysen kan det brukes humant serum (inkludert serum tatt i serumseparatorglass) eller plasma tatt i dikalium-edta, natriumcitrat, ACD, CPDA-1, litiumheparin og natriumheparin. Flytende antikoagulanter kan ha en fortynnende virkning som gir lavere konsentrasjoner i enkelte pasientprøver. Ingen andre antikoagulanter er blitt validert til bruk med ARCHITECT Anti- HBs-analysen. Følg glassprodusentens bruksanvisning for serumeller plasmaprøvetakingsglass. System kan ikke verifisere hvilket prøvemateriale som benyttes. Det er operatørens ansvar å kontrollere at riktig prøvemateriale brukes til ARCHITECT Anti-HBs-analysen. Det er ikke fastsatt ytelse med post mortem-prøver eller andre kroppsvæsker enn humant serum eller plasma. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver, slik at krysskontaminering unngås. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser. Denne analysen er utviklet og validert for bruk med humant serum eller plasma fra individuelle pasient- og donorprøver. Sammenslåtte prøver må ikke brukes, ettersom nøyaktigheten til slike testresultater ikke er validert. Ikke bruk varmeinaktiverte prøver. Ikke bruk kraftig hemolyserte prøver. Kontroller at det ikke er bobler i prøvene, slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analysen startes. Bruk en ny rørepinne til hver prøve for å unngå krysskontaminering. For å oppnå optimale resultater bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer eller andre utfellinger. Slike prøver kan medføre feilaktige resultater og skal overføres til et sentrifugeglass og sentrifugeres ved minst RCF (relativ sentrifugalkraft) i 10 minutter. 3 Kontroller at serumprøvene er fullstendig koagulert før sentrifugering. Enkelte prøver kan ha forlenget koaguleringstid, spesielt hvis de er tatt fra pasienter i antikoagulantbehandling eller trombolytisk behandling. Hvis prøven sentrifugeres før fullstendig koagulasjon, kan forekomst av fibrin medføre feilaktige resultater. Prøver fra pasienter som får heparinbehandling, kan delvis koagulere, og forekomsten av fibrin kan gi feilaktige resultater. For å forhindre dette må prøven tas før heparinbehandlingen. Gravitasjonsseparasjon er ikke tilstrekkelig for klargjøring av prøver. Prøver må skilles fra koagler eller røde blodlegemer ved hjelp av sentrifugering i samsvar med glassprodusentens anbefalinger. Prøver kan oppbevares uten å avpipetteres fra koagelet eller røde blodlegemer i opptil 14 dager ved 2 8 C. Hvis det vil ta mer enn 14 dager før analyseringen utføres, bør serum og plasma fjernes fra koagelet, serumseparatoren eller de røde blodlegemene og oppbevares i frossen tilstand (-20 C eller kaldere). Etter opptining skal fryste prøver blandes GRUNDIG ved LAV hastighet på en prøveblander. Sentrifugerte prøver som har et lipidlag på toppen, skal overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Pass på at bare den klare delen av prøven overføres og ikke det lipemiske materialet. Det er ikke observert kvalitative forskjeller i ytelsen mellom eksperimentelle kontroller og 24 ikke-reaktive eller 22 berikede reaktive prøver som var utsatt for nedfrysing og opptining 4 ganger. De kvantitative forskjellene i ytelse som ble observert, lå innenfor normal analysevariabilitet. Gjentatt nedfrysing og opptining bør likevel unngås. Ved forsendelse skal prøvene pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale regler for transport av prøver og smittefarlige komponenter. Prøvene kan sendes ved romtemperatur, ved 2 8 C (vanlig is) eller ved -20 C eller kaldere (tørris). Det må ikke avvikes fra tidsbegrensningene for oppbevaring som er angitt over. Før prøver sendes, anbefales det å separere prøver fra koagelet, serumseparatoren eller de røde blodlegemene. Det er ikke observert kvalitative forskjeller i ytelsen mellom eksperimentelle kontroller og 23 ikke-reaktive eller 23 berikede reaktive prøver som ble testet med forhøyede nivåer av triglyserider ( 3000 mg/dl),* bilirubin ( 20 mg/dl)* og hemoglobin ( 500 mg/dl).* Det er ikke observert noen kvalitative forskjeller i ytelsen mellom eksperimentelle kontroller og 30 ikke-reaktive eller 30 berikede reaktive prøver som ble testet med røde blodlegemer ved 0,4 % v/v.* Det er ikke observert kvalitative forskjeller i ytelsen mellom eksperimentelle kontroller og 21 ikke-reaktive eller 20 berikede reaktive prøver som ble testet med forhøyede nivåer av protein ( 12 g/dl).* ARCHITECT Anti-HBs Calibrators og Controls bør blandes ved å vende dem forsiktig før bruk. * De kvantitative forskjellene i ytelse som ble observert, lå innenfor normal analysevariabilitet. PROSEDYRE Medfølgende materialer 7C18 ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System ARCHITECT Anti-HBs-analysefilen, som kan hentes fra: System e-assay CD-ROM som ligger på System Assay CD-ROM 7C18-03 ARCHITECT Anti-HBs Calibrators 7C18-13 ARCHITECT Anti-HBs Controls 7C18-40 ARCHITECT Anti-HBs Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer finnes i bruker håndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) til pipettering av mengdene som er spesifisert i pasient- eller kontrollbestillingsskjermbildet.

4 Analyseprosedyre Før ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha lagt seg på bunnen under transport. Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Se på flasken og kontroller visuelt at mikropartiklene er resuspendert. Hvis det fremdeles sitter mikropartikler fast i flasken, skal flasken vendes flere ganger til mikropartiklene er fullstendig resuspendert. Når mikropartiklene er resuspendert, skrus lokket av og kastes. Bruk rene hansker, og ta et septum ut av posen. Sett septumet forsiktig på flaskeåpningen. Hvis mikropartiklene ikke er resuspendert, MÅ IKKE REAGENSET BRUKES. Kontakt Abbott kundeservice. Bestill kalibrering om nødvendig. Bestill testene. Informasjon om bestilling av pasientprøver, kalibratorer og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Plasser ARCHITECT Anti-HBs Reagent Kit i ARCHITECT i System. Kontroller at alle nødvendige reagenser er til stede. Kontroller at det er septum på alle reagensflasker. Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillings utskriften (Orderlist report). Det kan maksimalt tas 10 replikater fra samme prøvekopp. For at effekten av fordamping skal være minst mulig, må det kontrolleres at prøvekoppen inneholder nok materiale før analysen utføres. Prioritert: 125 µl for den første Anti-HBs-testen pluss 75 µl for hver av de påfølgende Anti-HBs-testene fra samme prøvekopp. 3 timer i systemet: 150 µl for den første Anti-HBs-testen pluss 75 µl for hver av de påfølgende Anti-HBs-testene fra samme prøvekopp. > 3 timer i systemet: mer prøvevolum er nødvendig. Informasjon om prøvefordamping og volumer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Ved bruk av primær- eller sekundærglass bør det benyttes prøvemåler for å sikre at det er nok prøvemateriale. ARCHITECT Anti-HBs Calibrators og Controls bør blandes ved å vende dem forsiktig før bruk. For å oppnå nødvendige mengder ARCHITECT Anti-HBs Calibrators og Controls, holdes flaskene loddrett, og 7 dråper av hver kalibrator (for 2 replikater) eller 5 dråper av hver kontroll (for 1 replikat) dispenseres i de respektive prøvekoppene. Sett inn prøvene. Informasjon om plassering av prøver finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Trykk på RUN. ARCHITECT i System utfører følgende funksjoner: Flytter prøven til aspirasjonsposisjonen. Setter inn en kyvette i analyseringsbanen. Aspirerer og overfører prøvemateriale til kyvetten. Flytter kyvetten én posisjon fram og overfører mikropartikler til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter konjugat til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter pretrigger- og triggerløsninger. Måler emisjonen av kjemiluminescens for å bestemme mengden av anti-hbs i prøven. Aspirerer innholdet i kyvetten direkte til avløpet og overfører kyvetten til beholderen for fast avfall. Beregner resultatet. For å sikre optimal ytelse er det viktig å følge rutineprosedyrene for vedlikehold slik de er beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, bør disse følges. Prøvefortynningsprosedyrer Prøver med en anti-hbs-verdi som overstiger 1000 miu/ml, flagges med koden > miu/ml og kan fortynnes med den manuelle fortynningsprosedyren. Manuell fortynningsprosedyre (for konsentrasjoner opptil miu/ml) Den anbefalte manuelle fortynningen for anti-hbs er 1:100. Det anbefales at fortynninger ikke overstiger 1:100. For å få en 1:100-fortynning tilsettes 10 μl av pasientprøven til 990 μl ARCHITECT Anti-HBs Specimen Diluent (7C18-40). Operatøren må oppgi fortynningsfaktoren i pasient- eller kontrollbestillingsskjermbildet. Alle valgte analyser i denne bestillingen vil bli fortynnet. Systemet bruker denne fortynningsfaktoren til automatisk beregning av prøve konsentrasjonen før fortynning og rapporterer resultatet. Konsentrasjonen som rapporteres av ARCHITECT i System, MÅ være større enn 8,00 miu/ml. Hvis den rapporterte konsentrasjonen er mindre enn 8,00 miu/ml, må det lages en mindre fortynning. Ytterligere informasjon om bestilling av fortynninger finnes i bruker håndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Kalibrering Test kalibrator A F i duplikat. Kalibratorene bør behandles som prioriterte prøver. Én prøve på hvert kontrollnivå må testes for å evaluere analysekalibreringen. Kontroller at analysens kontrollverdier ligger innenfor områdene som er spesifisert i pakningsvedlegget for den respektive kontrollen. Kalibratorområde: miu/ml. Når en ARCHITECT Anti-HBs-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten ytterligere kalibrering med mindre: Det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer. Daglige kvalitetskontrollresultater ligger utenfor statistikkbaserte kvalitets kontrollgrenser, som beskrevet under Prosedyrer for kvalitets kontroll i dette pakningsvedlegget, og som benyttes til å overvåke og kontrollere systemets ytelse. Hvis det ikke er tilgjengelige statistikkbaserte kvalitetskontrollgrenser, bør det ikke gå mer enn 30 dager mellom hver rekalibrering. Det kan også hende at ARCHITECT Anti-HBs-analysen må rekalibreres etter at det er utført bestemte serviceprosedyrer eller vedlikehold av viktige deler eller delsystemer som kan påvirke analysens ytelse. Ytterligere informasjon om hvordan en analysekalibrering utføres finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. PROSEDYRER FOR KVALITETSKONTROLL MERK: Det anbefales at ARCHITECT Anti-HBs Positive Control 1, Anti- HBs Positive Control 2 og Negative Control analyseres for å verifisere kalibreringen. Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT Anti-HBs-analysen er at én prøve av hver kontroll testes: Én gang daglig. Etter å ha utført kalibrering. Etter at det er utført serviceprosedyrer eller vedlikehold av instrumentet som kan påvirke analysens ytelse. Hvis laboratoriets prosedyrer for kvalitetskontroll krever hyppigere bruk av kontroller for å verifisere testresultatene, følges laboratoriets egne prosedyrer. Ytterligere kontroller kan testes i henhold til lokale og nasjonale bestemmelser eller akkrediteringskrav og laboratoriets rutiner for kvalitetskontroll. Det enkelte laboratoriet bør fastsette sine egne kontrollområder for å vurdere om analysens ytelse er akseptabel. Hvis en kontroll ligger utenfor det spesifiserte området, er de tilhørende prøveresultatene ugyldige, og prøvene skal testes på nytt. Rekalibrering kan være nødvendig. 4

5 For å fastsette statistikkbaserte kontrollgrenser bør de enkelte laboratoriene fastsette sine egne konsentrasjonsmål og områder for nye kontrolloter på hvert kontrollnivå som er klinisk relevant. Dette kan oppnås ved å analysere minimum 20 replikater i løpet av flere (3 5) dager og bruke de rapporterte resultatene til å fastsette forventet gjennomsnitt (mål) og variabilitet for dette gjennomsnittet (områder) for laboratoriet. Kilder til variasjon som bør tas med i studien for at den skal være representativ for systemets fremtidige ytelse, omfatter: flere lagrede kalibreringer flere reagensloter flere kalibratorloter flere instrumenter målinger gjort til forskjellige tider på dagen Disse resultatene bør anvendes i laboratoriets kvalitets kontrollprosedyrer. I tillegg må laboratoriet forsikre seg om at kontrollmaterialets matriks egner seg for bruk med analysen i henhold til paknings vedlegget for analysen. Med mindre annet er oppgitt, er målverdiene og områdene i pakningsvedlegget til kommersielle kontroller kun retningslinjer og bør ikke brukes til kvalitetskontrollformål. Se CLSI-dokumentet (Clinical and Laboratory Standards Institute) C24-A3 11. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Informasjon om protokoller for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, vedlegg B. ARCHITECT Anti-HBs-analysen tilhører metodegruppe 4. RESULTATER ARCHITECT Anti-HBs-analysen bruker en 4-parameters logistisk datareduksjonsmetode (4PLC, X-vektet) for å generere en kalibreringskurve. Tolkning av resultater Basert på anbefalingen fra Verdens helseorganisasjon (WHO) betraktes prøver med en anti-hbs-konsentrasjon 10 miu/ml som beskyttende mot hepatitt B-virusinfeksjon 5,6. Ytterligere informasjon om påvisningsmuligheten til ARCHITECT Anti-HBs-analysen finnes under SPESIFIKKE EGENSKAPER, Blankgrense, deteksjonsgrense og kvantiteringsgrense. Følg nasjonale bestemmelser og laboratoriets prosedyrer når resultatene rapporteres. Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Måleintervall Måleintervall defineres som området med verdier i miu/ml som er innenfor grensene for godkjent ytelse for både impresisjon og bias for en ufortynnet prøve. For verifiseringsstudiene som er beskrevet i dette pakningsvedlegget, var området 2,50 miu/ml (kvantiteringsgrense) til 1000,00 miu/ml. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER Hvis anti-hbs-resultatene ikke stemmer overens med den kliniske utredningen, anbefales det å utføre supplerende testing for å få bekreftet resultatet. For diagnostisering av akutt, kronisk eller helbredet infeksjon bør resultatene ses i sammenheng med pasienthistorikk og andre hepatittmarkører. Prøver som inneholder utfellinger eller røde blodlegemer, skal sentrifugeres før analysering. Det er ikke fastsatt ytelse med post mortem-prøver eller andre kroppsvæsker enn humant serum eller plasma. Ikke bruk varmeinaktiverte prøver. Prøver fra pasienter som får heparinbehandling, kan delvis koagulere, og forekomsten av fibrin kan gi feilaktige resultater. For å forhindre dette må prøven tas før heparinbehandlingen. Kvantitative verdier som oppnås med alternative analyser (f.eks. MEIA, EIA eller RIA) er muligens ikke ekvivalente og kan ikke brukes om hverandre. Det bør fastsettes en ny basislinje ved å bruke ARCHITECT Anti-HBs-analysen når vaksinerte følges opp. SPESIFIKKE EGENSKAPER For å beregne spesifisitet og sensitivitet ble prøver med resultatverdier på 10,00 miu/ml ansett for å være reaktive, og prøver med resultatverdier på < 10,00 miu/ml ble ansett for å være ikke-reaktive. Presisjon ARCHITECT Anti-HBs-analysens presisjon ble bestemt på grunnlag av kliniske studier som benyttet tre reagensloter. Et panel med fem unike prøver ble testet i replikater på fire med hver reagenslot én gang daglig i fem dager på tre laboratorier. De daglige analyseringene omfattet de positive ARCHITECT-kontrollene som ble testet i duplikat først og sist i analyseringene. Standardavviket (SD) innen-serie og mellom-serie ble, i likhet med den prosentvise variasjonskoeffisienten (% CV), bestemt med en variasjonskomponentanalyse 12 for en randomisert effektmodell 13 (tabell I). TABELL I ARCHITECT Anti-HBs-presisjon Samlet Totalt gjennomsnitt antall replikater miu/ml Innenserie Mellomserie a Total b Panelprøver SD % CV SD % CV SD % CV ,67 0,302 6,5 0,403 8,6 0,613 13, ,60 0,434 3,0 0,708 4,9 1,367 9, ,75 3,082 3,9 4,130 5,2 7,085 8, ,04 4,752 1,9 7,565 3,0 19,464 7, ,20 14,474 3,0 19,225 3,9 38,688 7,9 Positiv kontroll ,18 0,687 4,2 0,765 4,7 1,388 8,6 Positiv kontroll ,06 1,934 2,4 2,460 3,0 6,045 7,4 a Mellom-serie-variabilitet inkluderer innen-serie-variabilitet. b Analysens totale variabilitet omfatter innen-serie-, mellom-serie-, mellom-lot- og mellom-laboratorie-variabilitet. Sensitivitet Totalt 389 prøver fra 248 HBV-vaksinerte, 41 personer helbredet for HBV-infeksjon og 100 personer med risiko for HBV-infeksjon ble testet. Av de 389 prøvene var 340 (87,40 %) gjentatt reaktive og positive ved supplerende testing (tabell II). TABELL II ARCHITECT Anti-HBs-analysens reaktivitet i prøver fra HBVvaksinerte, personer som er helbredet for HBV-infeksjon og personer med økt risiko for HBV-infeksjon Kategori Antall testede prøver Antall gjentatt reaktive (% av total) Antall positive ved supplerende testing (% av gjentatt reaktive) HBV-vaksinerte (98,79 %) 245 (100,00 %) Helbredet for HBV-infeksjon a (95,12 %) 39 (100,00 %) Økt risiko for (56,00 %) 56 (100,00 %) HBV-infeksjon b TOTALT (87,40 %) 340 (100,00 %) a To prøver var reaktive for anti-hbc og anti-hbe, men også ikke-reaktive for anti-hbs med RIA. b Kategorien inkluderte følgende: sprøytenarkomane (34), hemodialysepasienter (33) og hemofilipasienter (33). Serielt donerte blodpaneler fra HBV-vaksinerte Totalt 90 prøver som omfattet 15 serielt donerte blodpaneler fra HBVvaksinerte, ble testet. Vaksinen ble gitt i tre injeksjoner over en seksmånedersperiode. Alle prøvene som ble tatt én måned etter den tredje og siste injeksjonen, var reaktive med ARCHITECT Anti HBs-analysen. 5

6 Spesifisitet Tre kliniske laboratorier testet totalt 1716 serum- og plasmaprøver fra følgende kategorier: frivillige fullbloddonorer, samsvarende serumog plasmapar, tilfeldige sykehuspasienter, medisinske tilstander uten sammenheng med HBV-infeksjon og potensielt interfererende komponenter. Totalt 259 (15,09 %) av de 1716 prøvene var gjentatt reaktive, og 254 (98,07 %) av de 259 prøvene var positive med supplerende testing (tabell III). TABELL III ARCHITECT Anti-HBs-analysens reaktivitet i prøver fra fullbloddonorer, plasmaprøver fra samsvarende serum-/plasmapar, sykehuspasienter, personer med medisinske tilstander uten sammenheng med HBV infeksjon, og i prøver som inneholdt potensielt interfererende komponenter Antall testede prøver Antall gjentatt reaktive (% av total) Antall positive ved supplerende testing a (% av gjentatt reaktive) Kategori Frivillige fullbloddonorer (15,31 %) 151 (98,05 %) Plasmaprøver fra samsvarende serum-/plasmapar 50 8 (16,00 %) 8 (100,00 %) Sykehuspasienter (13,00 %) 63 (96,92 %) Medisinske tilstander uten sammenheng med HBV-infeksjon og potensielt interfererende komponenter b (20,00 %) 32 (100,00 %) TOTALT (15,09 %) 254 (98,07 %) a Supplerende testing for anti-hbc, HBsAg og anti-hbe ble utført for å dokumentere forekomsten av anti-hbs i en ARCHITECT Anti HBsreaktiv prøve. Påvisning av anti-hbs med RIA ble også utført. En prøve ble definert som anti-hbs-positiv hvis én eller flere av følgende HBVmarkører ble påvist: anti-hbs (påvist med sammenligningsmetoden eller RIA), anti-hbc, HBsAg eller anti-hbe. b Kategorien inkluderte følgende: anti-cmv-positive (10), anti-ebvpositive (10), anti-hsv (10), anti-hav (10), anti-hcv (10), anti-hiv-1 (10), rubella-antistoffpositive (10), toksoplasma-antistoffpositive (10), E. coli-infeksjoner (10), gjærsoppinfeksjoner (10), syfilispositive (10), antinukleær-antistoffpositive (10), revmatoid faktor (10), multippelt myelom (10), HBsAg-positive (10) og alkoholisk leversykdom (10). Generell spesifisitet og sensitivitet Den generelle spesifisiteten og sensitiviteten ble bestemt ut fra resultatene til 2105 prøver som var testet med ARCHITECT Anti-HBs på fem kliniske laboratorier. For at de skulle respresentere unike prøver ble resultatene fra HBV-vaksinerte serielt donerte blodpaneler og serumprøvene fra de samsvarende serum-/plasmaparene utelatt fra disse utregningene. Den generelle spesifisiteten ble beregnet til 99,67 % (1491/1496) med et 95 %-konfidensintervall på 99,22 % til 99,89 %. Den generelle sensitiviteten ble beregnet til 97,54 % (594/609) med et 95 %-konfidensintervall på 95,97 % til 98,62 %. Blankgrense, deteksjonsgrense og kvantiteringsgrense Blankgrensen (LoB = Limit of Blank) og deteksjonsgrensen (LoD = Limit of Detection) til ARCHITECT Anti-HBs-analysen ble bestemt med veiledning fra CLSI-protokollen EP17-A2 14 med andeler av falskt positive (α) på mindre enn 5 % og falskt negative (β) på mindre enn 5 %. Disse bestemmelsene ble gjort ved å bruke 4 blankverdier (15 replikater av hver) og 8 anti-hbsprøver med lavt nivå (30 replikater av hver). Blankgrensen = 0,43 miu/ml og deteksjonsgrensen = 0,90 miu/ml. Kvantiteringsgrensen (LoQ = Limit of Quantitation) til ARCHITECT Anti- HBs-analysen ble bestemt basert på veiledning fra CLSI-protokollen EP17-A2 14. Kvantiteringsgrensen er definert som den laveste mengden analytt i en prøve som kan kvantiseres nøyaktig med en tillatt prosentvis total feil på 30 %. Kvantiteringsgrensen = 2,50 miu/ml. REFERANSELISTE 1. Wainwright RB, McMahon BJ, Bulkow LR, et al. Duration of Immunogenicity and Efficacy of Hepatitis B Vaccine in a Yupik Eskimo Population-Preliminary Results of an 8-year Study. In: Hollinger FB, Lemon SM, Margolis HS, editors. Viral Hepatitis and Liver Disease. Baltimore: Williams & Wilkins, 1991: Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P, et al. Persistence of Vaccine-induced Antibodies to Hepatitis B Surface Antigen and the Need for Booster Vaccination in Adult Subjects. Postgrad Med J 1987;63(S2): Krugman S, Giles JP, Hammond J. Viral Hepatitis Type B (MS-2 Strain): Studies on Active Immunization. JAMA 1971;217: Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune Response to Hepatitis B Revaccination. J Med Virol 1988;24: World Health Organization. Hepatitis B vaccines. Weekly epidemiological record No. 40, 2009, 84, Jack AD, Hall AJ, Maine N, Mendy M and Whittle HC. What Level of Hepatitis B Antibody Is Protective? Journal of Infectious Diseases 1999;179: US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 8. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: CLSI; Clinical and Laboratory Standards Institute. Statistical Quality Control for Quantitative Measurement Procedures: Principles and Definitions; Approved Guideline Third Edition. CLSI Document C24-A3. Wayne, PA: CLSI, Box GEP, Hunter WG, Hunter JS. Statistics for Experimenters: An Introduction to Design, Data Analysis, and Model Building. New York: John Wiley & Sons, Inc, 1978:510-39, SAS Institute Inc. The MIXED Procedure. In: SAS Technical Report P-229, SAS/STAT Software: Changes and Enhancements, Release Cary, NC: SAS Institute Inc, 1992: Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Detection Capability for Clinical Laboratory Measurement Procedures; Approved Guideline Second Edition. CLSI Document EP17-A2. Wayne, PA: CLSI, ARCHITECT er et varemerke for Abbott Laboratories i forskjellige jurisdiksjoner. Følgende amerikanske patenter gjelder for ARCHITECT System eller dets komponenter. Det finnes andre slike patenter og patentsøknader i USA og andre steder i verden. 5,468,646 5,543,524 5,545,739 5,565,570 5,669,819 5,783,699 Abbott Ireland Diagnostics Division Finisklin Business Park Sligo Ireland Mars Abbott Laboratories