G / R04 B2K47N. ARCHITECT Anti-TPO. Anti-TPO 2K47 2K K47-25

Transkript

1 ARCHITECT Anti-TPO Les markerte endringer: Revidert februar K K47-25 no Anti-TPO 2K47 G / R04 B2K47N Instruksjonene i pakningsvedlegget må følges nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. lnavn l ARCHITECT Anti-TPO lbruksområde l ARCHITECT Anti-TPO er en immunkjemisk kjemiluminescensmikropartikkelanalyse (CMIA) for kvantitativ bestemmelse av IgGklassen av antistoff mot thyreoideas peroksidase (anti-tpo) i humant serum og plasma på ARCHITECT isystem. ARCHITECT Anti-TPOanalysen skal brukes som hjelp i diagnostiseringen av tyreoideasykdom. lsammendrag l OG ANALYSEFORKLARING Det ble først påvist av Trotter o.a. i og deretter av Roitt og Doniach i at en rekke pasienter med Hashimotos tyreoiditt hadde påviselige mengder antistoffer i blodet rettet mot et tyreoideaantigen forskjellig fra tyreoglobulin. Antigenet fikk betegnelsen thyreoidea mikrosomale, og det har siden blitt påvist at de fleste, om ikke alle, anti-tyreoidea mikrosomale autoantistoffer gjenkjenner thyreoideas peroksidase (TPO). 3 TPO er et membranbundet glykoproteinenzym med en omtrentlig masse på 107 kd. In vivo-funksjonen er joderingen av tyrosin i syntesen av T 3 og T 4. 4 Autoimmun reaktivitet mot TPO antas å være polyklonal og heterogen av natur hvor minimum seks antigene determinanter gjenkjennes, blant annet strukturelle og lineære epitoper. 5, 6 I tillegg vil proporsjonen av hver immunglobulinklasse (G eller M) eller subklasse (G1 G4) samt affiniteten variere mye fra pasient til pasient. 7, 8 I motsetning til autoantistoffer mot tyreoglobulin (anti-tg), sørger autoantistoffer mot TPO for utfylling, 9 er potensielt skadelige og kan spille en patogen rolle i (destruktiv) autoimmun tyreoideasykdom. 10, 11 Anti-TPO-antistoffer finnes ofte i forbindelse med anti-tg i de fleste tilfeller av Hashimotos tyreoiditt, primært myxødem og Graves sykdom. Forekomsten av autoimmun tyreoideasykdom under svangerskap har skapt stor interesse med hensyn til gjenkjennelse av post partum tyreoideasykdomssyndromer. 12 Anti-TPO-antistoffer er påviselige i de fleste tilfeller av post partum tyreoiditt, og det er funnet at forekomst av autoantistoffer tidlig i svangerskapet ble forbundet med stor risiko for asymptomatisk post partum hypotyreoidisme Det er vanlig å finne anti-tpo-antistoffer i fravær av autoantistoffer mot tyreoglobulin, spesielt hos pasienter med liten skjoldbruskkjertel, og inntil 64 % av tilfellene av autoimmun hypotyreoidisme er rapportert å være forbundet med anti-tpo-antistoffer alene. 18 I tillegg oppdages anti-tpo-antistoffer ofte hos pasienter med andre autoimmune sykdommer som revmatoid artritt, Addisons sykdom og diabetes type I De påvises også ved lave nivåer hos inntil 20 % av asymptomatiske personer, 22 spesielt blant eldre mennesker 23 og oftere hos kvinner enn menn, selv om den kliniske betydningen av disse antistoffene er uklar. lanalyseprinsipper l ARCHITECT Anti-TPO-analysen er en totrinns immunkjemisk analyse for kvantitativ bestemmelse av anti-tpo i humant serum og plasma ved bruk av CMIA-teknologi med fleksible analyseprotokoller som kalles Chemiflex. 1. Prøve, fortynningsløsning og TPO-belagte paramagnetiske mikropartikler blandes og inkuberes. Anti-TPO i prøven bindes til de TPO-belagte mikropartiklene. 2. Etter vasking tilsettes akridinmerket anti-humant IgG-konjugat for å lage en reaksjonsblanding. 3. Etter enda en inkubasjon og vask tilsettes pretrigger- og triggerløsninger til reaksjonsblandingen. 4. Kjemiluminescensreaksjonen som oppstår, måles i relative lysenheter (RLU = Relative Light Units). Det er direkte proporsjonalitet mellom mengden av anti-tpo i prøven og mengden av RLU som måles av optikken i ARCHITECT isystem. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. lreagenser l Pakken inneholder ARCHITECT Anti-TPO 2K47 MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land eller til bruk på alle ARCHITECT isystems. Kontakt Abbott kundeservice. 2K K x 6,6 ml 4 x 6,6 ml 1 x 5,9 ml 4 x 5,9 ml 1 x 10,0 ml 4 x 10,0 ml (Rekombinant) thyreoideas peroksidase-belagte mikropartikler i MES-buffer med proteinstabilisator (bovin). Minimumskonsentrasjon: 0,10 % tørrstoff. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. Akridinmerket anti-humant IgG-konjugat (mus, monoklonalt) i MES-buffer med proteinstabilisator (bovin). Minimumskonsentrasjon: 80,0 ng/ml. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. Fortynningsløsning i MES-buffer. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. Andre reagenser ARCHITECT Pre-Trigger Solution som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT Trigger Solution som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT Wash Buffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. Viktige forholdsregler Til bruk ved in vitro-diagnostikk Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig og håndteres i samsvar med det amerikanske arbeidsmiljøinstituttet OSHAs standard Bloodborne Pathogens. 1

2 Biosafety Level 2 eller andre gjeldende sikkerhetsforskrifter for biologisk materiale bør benyttes ved håndtering av materialer som inneholder, eller kan inneholde, smittefarlige stoffer Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for: ADVARSEL H361 Forebygging P201 P280 Tiltak P308+P313 Avfallshåndtering P501 Inneholder kaliumferricyanid. Mistenkes for å kunne skade forplantningsevnen eller gi fosterskader. Innhent særskilt instruks før bruk. Benytt vernehansker/verneklær/ vernebriller. Ved eksponering eller mistanke om eksponering: Søk legehjelp. Kast innhold/beholder i samsvar med lokale bestemmelser. Følgende advarsler og forholdsregler gjelder for: ADVARSEL H319 Forebygging P264 P280 Tiltak P305+P351+P338 P337+P313 Gir alvorlig øyeirritasjon. Vask hendene grundig etter bruk. Benytt vernehansker/verneklær/ vernebriller. VED KONTAKT MED ØYNENE: Skyll forsiktig med vann i flere minutter. Fjern eventuelle kontaktlinser dersom dette enkelt lar seg gjøre. Fortsett skyllingen. Ved vedvarende øyeirritasjon: Søk legehjelp. Sikkerhetsdatablader er tilgjengelige på eller kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved bruk av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 8. Reagenshåndtering Reagenspakker må ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme pakke eller fra forskjellige pakker. Før reagenspakken plasseres i systemet for første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha bunnfalt under transport. Informasjon om blanding av mikropartikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering og for å sikre reagensenes holdbarhet. Hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når et septum settes på en reagensflaske uten kork. Etter at et septum er satt på en åpen reagensflaske, må ikke flasken vendes. Det vil føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette er vanligvis inntørkede salter som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved bruk av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 7. Reagensoppbevaring Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. Uåpnet/ åpnet* Oppbevaringstemperatur I systemet Systemtemperatur Maksimum oppbevaringstid 2 8 C Frem til utløpsdato Ytterligere instruksjoner for oppbevaring Kan brukes umiddelbart etter uttak fra oppbevaring ved 2 8 C. Oppbevares i loddrett stilling. 30 dager Kastes etter 30 dager. Informasjon om styring av holdbarhet i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. * Reagenser kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT isystem. Hvis reagensene tas ut av systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ekstra skrukorker) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i originalemballasjen for å sikre at de står loddrett. Hvis flasken med mikropartikler ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Informasjon om hvordan reagenser tas ut av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Når reagensene tas ut av systemet, må det startes en skanning for å oppdatere systemets holdbarhetstidsmåler. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Hvis en kontrollverdi ligger utenfor det spesifiserte området, kan det tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige, og prøvene må analyseres på nytt. Rekalibrering av analysen kan være nødvendig. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. linstrumentprosedyre l ARCHITECT Anti-TPO-analysefilen må installeres på ARCHITECT isystem før analysen utføres. Ytterligere informasjon om installering av analysefilen og om visning og endring av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Ytterligere informasjon om systemprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet. Standard resultatbenevning for ARCHITECT Anti-TPO-analysen er IU/ ml. lprøvetaking l OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Prøvetyper Verifiserte prøvetyper som kan brukes med denne analysen: Prøvetakingsglass Prøvetyper Glass Plast Serum Ingen tilsetning (ikke-belagt) Serumseparatorglass Plasma Litiumheparin Plasmaseparatorglass med litiumheparin EDTA Litiumheparin Plasmaseparatorglass med litiumheparin Natriumheparin EDTA Andre typer prøvetakingsglass er ikke testet med denne analysen. 2

3 Ved evaluering av serieprøver skal det benyttes samme prøvetype gjennom hele studien. Det er ikke fastsatt ytelse for bruk av post mortem-prøver eller andre kroppsvæsker enn humant serum eller plasma. Instrumentet kan ikke verifisere hvilken prøvetype som benyttes. Det er operatørens ansvar å kontrollere at det benyttes riktig prøvetype i analysen. Prøvetilstand Ikke bruk prøver i følgende tilstander: varmeinaktivert åpenbart mikrobielt kontaminert Skal resultatene bli nøyaktige, bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer og andre utfellinger. Serumprøver fra pasienter som får antikoagulantbehandling eller trombolytisk behandling, kan inneholde fibrin på grunn av ufullstendig koagulering. Kontroller at serumprøvene er fullstendig koagulert før sentrifugering. Enkelte prøver kan ha forlenget koaguleringstid, spesielt hvis de er tatt fra pasienter som får antikoagulantbehandling eller trombolytisk behandling. Hvis prøven sentrifugeres før fullstendig koagulasjon, kan forekomst av fibrin medføre feilaktige resultater. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser for å unngå krysskontaminering. Forberedelse til analysering Følg glassprodusentens instruksjoner for analysering av prøvetakingsglass. Pasientprøver som ser grumsete eller uklare ut, må sentrifugeres før testing. Etter sentrifugering må det unngås å pipettere et eventuelt lipidlag når prøvene pipetteres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Etter opptining skal fryste prøver blandes GRUNDIG ved LAV hastighet på en prøveblander eller ved å vende dem forsiktig, og sentrifugeres før bruk for å fjerne røde blodlegemer eller utfellinger. Dette gjøres for å sikre konsistente resultater. Unngå gjentatte nedfrysinger/opptininger av prøver. Alle prøver (pasientprøver, kontroller og kalibratorer) bør testes innen 3 timer etter at de er plassert i ARCHITECT-systemet. Detaljert beskrivelse av begrensninger for oppbevaring av prøver i systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Kontroller at det ikke er bobler i noen av prøvene. Fjern bobler med en rørepinne før analysering. Bruk en ny rørepinne til hver prøve for å unngå krysskontaminering. Prøveoppbevaring Oppbevaringstemperatur oppbevaringstid Maksimum Prøvetype Serum/plasma Romtemperatur 8 timer 2 8 C 72 timer -10 C eller kaldere 30 dager Hvis det vil gå mer enn 8 timer før analysering, må serum eller plasma fjernes fra serum- eller plasmaseparatoren, de røde blodlegemene eller koagelet. Prøver som er fjernet fra separatorgelen, blodlegemene eller koagelet, kan oppbevares i 72 timer ved 2 8 C. Prøver kan oppbevares i fryst tilstand i opptil 30 dager ved -10 C eller kaldere. Prøveforsendelse Prøver skal pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale bestemmelser for transport av kliniske prøver og smittefarlig materiale. Det anbefales at prøvene separeres fra koagelet, de røde blodlegemene eller separatorgelen. Prøvene kan sendes ved romtemperatur i opptil 8 timer etter prøvetaking eller på vanlig is eller tørris i opptil 72 timer etter prøvetaking. Det må ikke avvikes fra tidsbegrensningene for oppbevaring som er angitt over. lprosedyre l Medfølgende materialer 2K47 ARCHITECT Anti-TPO Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr ARCHITECT Anti-TPO-analysefilen fra ARCHITECT isystem e-assay CD-ROM som ligger på 2K47-01 ARCHITECT Anti-TPO Calibrators 2K47-10 ARCHITECT Anti-TPO Controls ARCHITECT Pre-Trigger Solution ARCHITECT Trigger Solution ARCHITECT Wash Buffer ARCHITECT Reaction Vessels ARCHITECT Sample Cups ARCHITECT Septum ARCHITECT Replacement Caps Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) til pipettering av mengdene som er spesifisert i pasient- eller kontrollbestillingsskjermbildet. Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Analyseprosedyre Før reagenspakken plasseres i systemet for første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha bunnfalt under transport. Etter at mikropartiklene er plassert i systemet første gang, er ikke videre blanding nødvendig. Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Se på flasken og kontroller visuelt at mikropartiklene er resuspendert. Hvis det fremdeles sitter mikropartikler fast i flasken, skal flasken vendes flere ganger til mikropartiklene er fullstendig resuspendert. MÅ IKKE BRUKES hvis mikropartiklene ikke blir resuspendert. Kontakt Abbott kundeservice. Sett et septum på flasken etter at mikropartiklene er resuspendert. Informasjon om hvordan det settes septum på flasker finnes under Reagenshåndtering i dette pakningsvedlegget. Plasser reagenspakken i ARCHITECT isystem. Kontroller at alle nødvendige reagenser er til stede. Kontroller at det er septum på alle reagensflasker. Bestill kalibrering om nødvendig. Informasjon om bestilling av kalibreringer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. Bestill testene. Informasjon om bestilling av pasientprøver og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillingsutskriften. Kontroller at prøvekoppen inneholder nok materiale før analysen utføres. Maksimalt antall replikater som kan tas fra samme prøvekopp: 10 Prioritert: Prøvevolum for den første testen: 75 µl Prøvevolum for hver påfølgende test fra samme prøvekopp: 25 µl 3 timer i systemet: Prøvevolum for den første testen: 150 μl 3

4 Prøvevolum for hver påfølgende test fra samme prøvekopp: 25 µl For å minimere virkningene av fordamping må alle prøver (pasientprøver, kalibratorer og kontroller) testes innen 3 timer etter at de er plassert i ARCHITECT isystem. Ved bruk av primær- eller sekundærglass bør det benyttes prøvemåler for å sikre at det er nok prøvemateriale. Forbered ARCHITECT Anti-TPO Calibrators og Controls. ARCHITECT Anti-TPO Calibrators og Controls skal forberedes i henhold til de respektive pakningsvedleggene. Hold flaskene loddrett og ha de anbefalte volumene i de respektive prøvekoppene. Anbefalte volumer: for hver kalibrator: 5 dråper for hver kontroll: 5 dråper Sett inn prøvene. Informasjon om plassering av prøver finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Trykk på RUN. Systemet utfører følgende funksjoner: Flytter prøven til aspirasjonsposisjonen. Setter inn en kyvette i analyseringsbanen. Aspirerer og overfører prøven til kyvetten. Flytter kyvetten én posisjon fram og overfører fortynningsløsning og mikropartikler til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter konjugat til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter pretrigger- og triggerløsninger. Måler emisjonen av kjemiluminescens for å bestemme mengden av anti-tpo i prøven. Aspirerer innholdet i kyvetten direkte til avløpet og overfører kyvetten til beholderen for fast avfall. Beregner resultatet. Ytterligere informasjon om betjeningsprinsipper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. For å sikre optimal ytelse er det viktig å følge rutinene for vedlikehold som er beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, kapittel 9. Foreta vedlikehold oftere hvis laboratoriets prosedyrer krever det. Prøvefortynningsprosedyrer Prøver med en anti-tpo-verdi som overstiger 1000,00 IU/ml, merkes med > og kan fortynnes med den automatiske fortynningsprotokollen eller den manuelle fortynningsprosedyren. Automatisk fortynningsprotokoll Systemet utfører en 1:2-fortynning av prøven og beregner automatisk konsentrasjonen til prøven før fortynning og rapporterer resultatet. Prøver med en anti-tpo-verdi som overstiger 2000,00 IU/ml, merkes med > og kan fortynnes med den manuelle fortynningsprosedyren. Manuell fortynningsprosedyre Anbefalt fortynning: 1:20 1. Før prøven fortynnes, dispenser ca. 10 dråper ARCHITECT Anti- TPO Calibrator A i et rent prøveglass til bruk i neste trinn. 2. Overfør 190 μl ARCHITECT Anti-TPO Calibrator A fra prøveglasset som ble klargjort i forrige trinn, til et annet, rent prøveglass, og tilsett 10 μl av pasientprøven. 3. Operatøren må oppgi fortynningsfaktoren i pasienteller kontrollbestillingsskjermbildet. Systemet bruker denne fortynningsfaktoren til automatisk beregning av prøvekonsentrasjonen før fortynning og rapporterer resultatet. Resultatet bør være > 5,61 IU/ml før fortynningsfaktoren brukes. Ytterligere informasjon om bestilling av fortynninger finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. Kalibrering Test kalibrator A F i duplikat. Kalibratorene bør behandles som prioriterte prøver. Én prøve på hvert kontrollnivå må testes for å evaluere analysekalibreringen. Kontroller at analysens kontrollverdier ligger innenfor områdene som er spesifisert i pakningsvedlegget for den respektive kontrollen. Kalibreringsområde: 0, ,00 IU/ml. Når en ARCHITECT Anti-TPO-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten ytterligere kalibrering med mindre: Det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer eller Kontrollene ligger utenfor spesifisert område. Ytterligere informasjon om hvordan en analysekalibrering utføres finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. Prosedyrer for kvalitetskontroll Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT Anti-TPO-analysen er at én prøve på hvert kontrollnivå testes én gang daglig. Hvis laboratoriets prosedyrer for kvalitetskontroll krever hyppigere bruk av kontroller for å verifisere testresultatene, følges laboratoriets egne prosedyrer. Kontrollverdiene for ARCHITECT Anti-TPO må ligge innenfor de godkjente områdene som er spesifisert i pakningsvedlegget for kontrollen. Hvis en kontroll ligger utenfor det spesifiserte området, er de tilhørende testresultatene ugyldige og prøvene må analyseres på nytt. Rekalibrering kan være nødvendig. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Informasjon om protokoller for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, vedlegg B. ARCHITECT Anti-TPO-analysen tilhører metodegruppe 1. lresultater l Beregning ARCHITECT Anti-TPO-analysen bruker en 4-parameters logistisk datareduksjonsmetode (4PLC, Y-vektet) for å generere en kalibreringskurve. Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 5. lprosedyrens l BEGRENSNINGER Måling av antistoffer representerer én parameter i en diagnostiseringsprosess bestående av flere kriterier. Ved diagnostisering av tyreoideasykdom bør det benyttes en kombinasjon av testmetoder i samsvar med kliniske symptomer. Omtrent 20 % av asymptomatiske prøver kan vise anti TPOautoantistoffer, og dette gjenspeiler prevalensen i tilsynelatende friske populasjoner. Prevalensen av anti-tpo kan også avhenge av den valgte populasjonens alder, kjønn og geografisk plassering. Enkelte prøver fortynnes kanskje ikke lineært på grunn av fysiokjemiske egenskaper som heterogeniteten til autoantistoffene. Prøver fra pasienter som har fått preparater med monoklonale antistoffer fra mus for diagnostisering eller behandling, kan inneholde humane anti-museantistoffer (HAMA). Slike prøver kan vise enten falskt forhøyede eller falskt for lave verdier når de testes med analysepakker som inneholder monoklonale antistoffer fra mus. Analyseresultater som ikke samsvarer med andre kliniske observasjoner, kan kreve ytterligere informasjon for diagnostisering. 28, 29 4

5 Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med reagensimmunglobuliner og interferere med immunkjemiske in vitro-analyser. Forekomst av heterofile antistoffer i en pasientprøve kan forårsake unormale verdier. Mer informasjon kan være nødvendig for å stille diagnose. 30 lforventede l VERDIER I en studie ble det tatt prøver med humant serum fra en populasjon på 236 tilsynelatende friske personer. Alle prøvene ga TSH-verdier innenfor det normale referanseområdet. Av denne populasjonen ga 9 av prøvene positivt resultat i en kommersielt tilgjengelig anti- TPO-analysemetode og ble utelukket fra videre analysering for å fastsette et normalt referanseområde. Persentilkonsentrasjonen på 97,5 av den resterende populasjonen var 5,61 IU/ml. I denne studiepopulasjonen er normalområdet < 5,61 IU/ml. Totalt 97,8 % (222/227) av populasjonen ga verdier som var innenfor normalområdet.* Normalområdet foreslås som en retningslinje, og hvert laboratorium bør opprette et normalområde i samsvar med deres pasientpopulasjoner med hensyn til alder, kjønn, geografisk plassering og laboratoriets egne kliniske prosedyrer. avvike lspesifikke l EGENSKAPER Presisjon ARCHITECT Anti-TPO-analysen skal ha en analysepresisjon på 10 % total CV for prøver 5,61 IU/ml. Det ble utført en studie for ARCHITECT Anti-TPO-analysen med veiledning fra EP5-A-protokollen fra National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). 31 ARCHITECT Anti-TPO Positive Control og tre humane paneler ble analysert med tre reagensloter i to replikater på to forskjellige tidspunkter om dagen i 20 dager på tre instrumenter. Hver reagenslot brukte én kalibreringskurve gjennom hele studien. Data fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Reagenslot Gj.snittskons.- Innen-serie Totalt Prøve Instrument n verdi (IU/ml) SD % CV SD % CV 1 A 80 74,85 2,11 2,8 2,16 2,9 B 80 74,20 1,89 2,6 2,04 2,7 C 80 74,63 2,01 2,7 2,17 2,9 2 A 80 77,42 2,11 2,7 3,25 4,2 Positiv B 80 75,32 1,92 2,5 2,54 3,4 kontroll C 80 74,59 1,73 2,3 2,57 3,4 3 A 80 75,41 2,13 2,8 2,52 3,3 B 80 75,48 1,90 2,5 2,13 2,8 C 80 76,66 2,42 3,2 2,87 3,7 1 A 80 1,57 0,08 4,8 0,10 6,5 B 80 1,46 0,06 3,8 0,09 5,8 C 80 1,64 0,09 5,6 0,10 6,1 2 A 80 1,60 0,09 5,3 0,12 7,6 Panel 1 B 80 1,53 0,06 3,9 0,11 7,2 C 80 1,52 0,10 6,7 0,12 7,7 3 A 80 1,47 0,08 5,3 0,11 7,8 B 80 1,47 0,07 4,7 0,13 8,5 C 80 1,52 0,14 9,5 0,15 9,8 1 A 80 20,98 0,65 3,1 0,76 3,6 B 80 21,14 0,61 2,9 0,66 3,1 C 80 21,51 0,71 3,3 0,75 3,5 2 A 80 21,27 0,61 2,9 0,98 4,6 Panel 2 B 80 21,62 0,66 3,0 0,90 4,2 C 80 20,82 0,67 3,2 0,85 4,1 3 A 80 21,00 0,73 3,5 0,86 4,1 B 80 21,77 0,60 2,7 0,84 3,8 C 80 21,24 0,70 3,3 0,89 4,2 Reagenslot Gj.snittskons.- Innen-serie Totalt Prøve Instrument n verdi (IU/ml) SD % CV SD % CV 1 A ,78 5,14 2,4 6,48 3,0 B ,79 4,73 2,1 5,82 2,6 C ,71 5,36 2,5 6,36 2,9 2 A ,32 4,41 2,0 8,61 3,9 Panel 3 B ,54 4,04 1,8 13,37 6,0 C ,73 5,76 2,6 13,18 6,0 3 A ,91 6,11 2,9 6,84 3,2 B ,46 5,15 2,3 5,67 2,5 C ,17 5,80 2,5 7,09 3,1 Funksjonell sensitivitet I en studie ble humane paneler med konsentrasjoner fra 0,16 1,20 IU/ml testet i 2 replikater i 10 dager på ett instrument med to reagensloter og tre kalibreringer på totalt 40 replikater per panel. Verdiene for total % CV (varianskomponenter for replikat, analysering, dag og reagenslot sett under ett) ble beregnet og plottet mot gjennomsnittskonsentrasjon. En resiprok kurve ble tilpasset gjennom dataene, og verdien for funksjonell sensitivitet ble beregnet som konsentrasjonen som tilsvarer den tilpassede kurvens 20 %-CVnivå. Den laveste ARCHITECT Anti-TPO-analyseverdien som viste 20 % CV, er 0,50 IU/ml.* Analytisk sensitivitet ARCHITECT Anti-TPO-analysen skal ha en analytisk sensitivitet på 1,0 IU/ml. ARCHITECT Anti-TPO-analysens analytiske sensitivitet, definert som konsentrasjonen ved to standardavvik over ARCHITECT Anti-TPO Calibrator A (0,0 IU/ml), ble beregnet til 0,16 IU/ml* ved 95 %-konfidensnivået (basert på én studie med n = 48 analyseringer, 10 replikater av kalibrator A og 4 replikater av kalibrator B per analysering). Linearitet ARCHITECT Anti-TPO-analysen er lineær mellom 3,0 og 1000,0 IU/ml basert på en studie som ble utført med veiledning fra EP6-A-protokollen fra NCCLS. 32 Verifisering av automatisk fortynning Den automatiske fortynningsprotokollen for ARCHITECT Anti-TPO skal gjenfinne innen 15 % av manuelt fortynnede prøver. I en studie ble den automatiske fortynningsprotokollen (1:2) sammenlignet med en manuell 1:2-fortynningsprosedyre ved hjelp av 9 humane prøver med anti-tpo-nivåer høyere enn kalibrator E (250 IU/ml). Den manuelle fortynningsprosedyren ble utført med ARCHITECT Anti-TPO Calibrator A. De observerte resultatene for prosentvis gjenfinning er oppsummert i tabellen nedenfor.* Automatisk Manuell fortynning Prøve-ID fortynning (IU/ml) (IU/ml) % gjenfinning** 1 861,25 859,27 100, ,49 703,64 97, ,36 847,62 99, ,55 757,09 95, ,46 688,49 103, , ,18 100, ,43 931,80 101, ,77 851,72 98, ,48 998,45 96,8 ** % gjenfinning = automatisk fortynning (IU/ml) x 100 manuell fortynning (IU/ml) 5

6 Interferens Interferens fra forhøyede nivåer av bilirubin, hemoglobin, triglyserider og totalprotein i ARCHITECT Anti-TPO-analysen skal være 15 % ved de angitte nivåene. Det ble utført en studie med ARCHITECT Anti-TPO-analysen basert på veiledning fra EP7-A-protokollen 33 fra NCCLS. Prøver med anti TPO-nivåer mellom 45,07 og 361,64 IU/ml ble tilsatt følgende potensielt interfererende komponenter. Gjennomsnittlig mengde interferens observert i studien var fra -3,6 % til +3,7 %.* Konsentrasjon av potensielt Potensielt interfererende komponent interfererende komponent Bilirubin 20 mg/dl Hemoglobin 1000 mg/dl Totalprotein (lav) 4 g/dl Totalprotein (høy) 10 g/dl Triglyserider 1000 mg/dl avvike Evaluering av prøver som er positive for autoimmune sykdommer og høyt titer IgG Potensiell interferens fra prøver som er positive for autoimmune sykdommer, og prøver med høyt titer IgG i ARCHITECT Anti-TPOanalysen skal være 15 %. I en studie ble ARCHITECT Anti-TPOanalysen evaluert ved å teste prøver med kjente autoimmune sykdommer og forhøyet IgG. Prøvene ble evaluert med berikede anti- TPO-nivåer mellom 131,44 og 568,78 IU/ml. Gjennomsnittlig absolutt prosentvis interferens er oppsummert i tabellen nedenfor.* Gjennomsnittlig Klinisk tilstand absolutt % interferens Anti-nukleært antistoff (ANA) 1,6 Revmatoid artritt (RA) 1,6 Systemisk lupus erythematosus (SLE) 1,1 Insulinkrevende diabetes mellitus (IDDM) 1,0 Crohns sykdom 2,4 Multippel sklerose 1,7 Ulcerøs kolitt 1,5 Hyperglobulinemi (høy IgG) 0,9 avvike Evaluering av andre potensielle interferenter Potensiell interferens fra HAMA og revmatoid faktor (RF) i ARCHITECT Anti-TPO-analysen skal være 15 %. I en studie ble ARCHITECT Anti-TPO-analysen evaluert ved å teste prøver som inneholdt HAMA og RF, for å få en ytterligere vurdering av den kliniske spesifisiteten. Prøver som var positive for HAMA og prøver som var positive for RF, ble evaluert med tanke på prosentvis interferens med anti-tpo-nivåer beriket mellom 163,0 og 184,3 IU/ml. Gjennomsnittlig absolutt prosentvis interferens er oppsummert i tabellen nedenfor.* Andre potensielle Gjennomsnittlig interferenter Antall prøver absolutt % interferens HAMA-positiv 10 2,1 RF-positiv 10 1,6 avvike Klinisk sensitivitet I to studier ble klinisk sensitivitet evaluert ved å teste 139 prøver som var positive for klinisk definert Hashimotos tyreoiditt, og 125 prøver som var positive for Graves sykdom. Den kliniske diagnosen var basert på kriteriene til det respektive laboratoriet. Forekomsten av antistoffer mot tyreoglobulin og/eller TPO var ikke et nødvendig diagnostisk kriterium for prøvene som var positive for Graves sykdom og Hashimotos tyreoiditt. Data fra disse studiene er oppsummert i tabellen nedenfor.* Hashimotos tyreoiditt Graves sykdom n % positiv n % positiv Studie , ,0 Studie , ,0 Konkordans Ytelsen til ARCHITECT Anti-TPO ble sammenlignet med en kommersielt tilgjengelig immunkjemisk analyse for påvisning av anti- TPO. Totalt 500 prøver ble evaluert i en studie med tilsynelatende friske personer og pasienter med autoimmun tyreoideasykdom (Graves sykdom og Hashimotos tyreoiditt). Prøvene ble testet i ett replikat med ARCHITECT Anti-TPO-analysen med tre reagensloter på tre instrumenter og sammenlignet med en kommersielt tilgjengelig immunkjemisk analyse (sammenligningsanalyse). Data fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Sammenligningsanalyse ARCHITECT Anti-TPO Negativ Positiv Negativ Positiv Konkordans = 92,6 % lreferanseliste l 1. Trotter WR, Belyavin G, Waddams A. Precipitating and complement-fixing antibodies in Hashimoto s disease. Proc Royal Soc Med. 1957;50: Roitt IM, Doniach D. Human auto-immune thyroiditis: serological studies. Lancet. 1958;7055: Ruf J, Czarnocka B, De Micco C, et al. Thyroid peroxidase is the organspecific microsomal autoantigen involved in thyroid autoimmunity. Acta Endocrinol (Copenh). 1987;S281: Degroot LJ, Niepomniszcze H. Biosynthesis of thyroid hormone: basic and clinical aspects. Metabolism. 1977;26(6): Doble ND, Banga JP, Pope R, et al. Autoantibodies to the thyroid microsomal / thyroid peroxidase antigen are polyclonal and directed to several distinct antigenic sites. Immunology. 1988;64: Libert F, Ludgate M, Dinsart C, et al. Thyroperoxidase, but not the thyrotropin receptor, contains sequential epitopes recognized by autoantibodies in recombinant peptides expressed in the puex vector. J Clin Endocrinol Metab. 1991;73(4): Parkes AB, McLachlan SM, Bird P, et al. The distribution of microsomal and thyroglobulin antibody activity among the IgG subclasses. Clin Exp Immuno.l 1984;57: Weetman AP, Black CM, Cohen SB, et al. Affinity purification of IgG subclasses and the distribution of thyroid auto-antibody reactivity in Hashimoto s thyroiditis. Scan J Immunol. 1989;30: Holborow EJ, Brown PC, Roitt IM, et al. Cytoplasmic localization of complement-fixing auto-antigen in human thyroid epithelium. Br J Exp Pathol. 1959;XL(6): Khoury EL, Hammond L, Bottazzo GF, et al. Presence of the organspecific microsomal autoantigen on the surface of human thyroid cells in culture: its involvement in complement-mediated cytotoxicity. Clin Exp Immunol. 1981;45: Banga JP, Pryce G, Hammond L, et al. Structural features of the autoantigens involved in thyroid autoimmune disease: the thyroid microsomal / microvillar antigen. Mol Immunol. 1985;22(6): Davies TF, Weiss I. Autoimmune thyroid disease and pregnancy. Am J Reprod Immunol. 1981;1: Amino N, Yabu Y, Miki T, et al. Serum ratio of triiodothyronine to thyroxine, and thyroxine-binding globulin and calcitonin concentrations in Graves disease and destruction-induced thyrotoxicosis.j Clin Endocrinol Metab. 1981;53(1): Jansson R, Bernander S, Karlsson A, et al. Autoimmune thyroid dysfunction in the postpartum period. J Clin Endocrinol Metab. 1984;58(4): Othman S, Phillips DIW, Parkes AB, et al. A long-term follow-up of postpartum thyroiditis. Clin Endocrinol. 1990;32: Harris B, Othman S, Davies JA, et al. Association between postpartum thyroid dysfunction and thyroid antibodies and depression. BMJ. 1992;305: Glinoer D. The systematic screening and management of hypothyroidism and hyperthyroidism during pregnancy. TEM. 1998;9(10): Nordyke RA, Gilbert FI Jr, Miyamoto LA, et al. The superiority of antimicrosomal over antithyroglobulin antibodies for detecting Hashimoto s thyroiditis. Arch Intern Med. 1993;153: Chang C-C, Huang C-N, Chuang L-M. Autoantibodies to thyroid peroxidase in patients with type I diabetes in Taiwan. Eur J Endocrinol 1998;139:

7 Symbolforklaring ll 20. Walker DJ, Griffiths M, Griffiths ID. Occurrence of autoimmune diseases and autoantibodies in multicase rheumatoid arthritis families. Ann Rheum Dis. 1986;45: Scherbaum WA. On the clinical importance of thyroid microsomal and thyroglobulin antibody determination. Acta Endocrinol (Copenh). 1987;S281: Rosenbaum D, Davies TF. The clinical use of thyroid autoantibodies. The Endocrinologist. 1992;2(1): Mariotti S, Chiovato L, Franceschi C, et al. Thyroid autoimmunity and aging. Exp Gerontol. 1998;33(6): US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 25. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: CLSI; Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45(2): Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, et al. Sandwich -type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal antibodies for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34(2): Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34(1): National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline. NCCLS Document EP5-A. Wayne, PA: NCCLS; National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline. NCCLS Document EP6-A. Wayne, PA: NCCLS; National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline. NCCLS Document EP7-A. Wayne, PA: NCCLS; Se pakningsvedlegg Produsent Tilstrekkelig for Temperaturgrenser Brukes innen / utløpsdato Fortynningsløsning Konjugat Kontrollnummer Autorisert representant i EU Medisinsk utstyr for in vitrodiagnostikk Lotnummer Mikropartikler Pretriggerløsning Produseres for Abbott av Produseres i USA Kyvetter Reagenslot Bestillingsnummer Ekstra skrukorker Prøvekopper Septum Serienummer Triggerløsning Advarsel: Gir alvorlig øyeirritasjon. Advarsel: Reproduksjonsskadelig Vaskebuffer ARCHITECT og Chemiflex er varemerker for Abbott Laboratories i forskjellige jurisdiksjoner. Alle andre varemerker tilhører de respektive eierne. Abbott Laboratories Diagnostics Division Abbott Park, IL USA ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany Fisher Diagnostics en divisjon av Fisher Scientific Company LLC en del av Thermo Fisher Scientific Inc Valley Pike, Middletown, VA USA Kundeservice: Ytterligere informasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på Revidert februar , 2015 Abbott Laboratories 7