Intact PTH. system B8K25N /R3. Intact PTH. Symbolforklaring 8K25. Les markerte endringer Revidert november 2008

Transkript

1 system Intact PTH no Intact PTH 8K25 B8K25N /R3 Les markerte endringer Revidert november 2008 Ytterligere produktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Dette pakningsvedlegget må leses nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr til in vitro-diagnostikk Lotnummer Utløpsdato Oppbevares ved 2 8 C Kyvetter kopper Septum Ekstra skrukorker Se pakningsvedlegg Serienummer Reagenslot Analyse-CD Produsent Kontrollnummer Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. 1

2 NAVN ARCHITECT Intact PTH BRUKSOMRÅDE ARCHITECT Intact PTH-analysen er en immunkjemisk in vitrokjemiluminescensmikropartikkelanalyse (CMIA) for kvantitativ bestemmelse av intakt paratyreoidhormon (PTH) i humant serum og plasma på System. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING PTH er en enkeltkjedet polypeptid med 84 aminosyrer produsert av biskjoldbruskkjertelen. Intakt PTH1-84 skilles ut i blodbanen og gjennomgår omfattende proteolyttiske endringer. I motsetning til nedbrytingsproduktene til intakt PTH er konsentrasjonen av intakt PTH relativt uavhengig av glomerulær filtreringshastighet og avspeiler den biologisk aktive delen av hormonet. 1 Hovedfunksjonen til PTH er å regulere kalsiumnivået i blodet. Lave konsentrasjoner av ionisert kalsium (Ca i ) stimulerer på noen få minutter syntesen og utskillelsen av PTH. PTHs biologiske aktivitet er å øke absorpsjonen av kostholdskalsium, redusere nyrens utskillelse og mobilisere kalsiumlagre i skjelettet. Abnormalt høye konsentrasjoner av Ca i hemmer utskillelse av PTH. 1 Sammen med kalsiumnivåer i serum kan PTH-analysen brukes som hjelp i differensialdiagnosen av hyperkalsemi, hypokalsemi og forstyrrelser i biskjoldbrusk kjertelen. Måling av PTH er viktig ved overvåking av dialysepasienter for å behandle nyre-osteodystrofi. ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT Intact PTH er en totrinns immunkjemisk "sandwich"-analyse for kvantitativ bestemmelse av intakt PTH i humant serum og plasma ved hjelp av CMIA-teknologi med fleksible analyseprotokoller som kalles Chemiflex. I det første trinnet blandes prøve, fortynningsløsning og anti-pth-belagte paramagnetiske mikropartikler. Intakt PTH i prøven bindes til de anti-pthbelagte mikropartiklene. Etter vasking tilsettes i trinn to akridin merket anti-pth-konjugat for å lage en reaksjonsblanding. Etter enda en vaskesyklus tilsettes reaksjonsblandingen en pretrigger- og en triggerløsning. Kjemiluminescensreaksjonen som oppstår, måles i relative lysenheter (RLU). Mengden av intakt PTH i prøven og mengden av RLU målt av optikken i System er direkte proporsjonale. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 3. REAGENSER Reagenspakke MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land. Kontakt Abbott kundeservice. ARCHITECT Intact PTH Reagent Kit (8K25) 1 eller 4 flasker (à 6,6 ml) anti-pth-belagte (geit, polyklonal) mikropartikler i TRIS-buffer. Konserveringsmiddel: natriumazid. 1 eller 4 flasker (à 5,9 ml) anti-pth-merket (geit, polyklonal) konjugat i MES-buffer med proteinstabilisator (bovin, geit). Konserveringsmiddel: natriumazid. 1 eller 4 flasker (à 10,0 ml) Intact PTHfortynningsløsning (Assay Diluent) som inneholder fosfatbuffer med proteinstabilisator (bovin, geit). Konserveringsmiddel: natriumazid. Fortynningsløsning Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (fortynningsløsning for flere analyser) som inneholder fosfatbufret saltvanns løsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. Andre reagenser Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. Wash Buffer Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig og håndteres i overensstemmelse med gjeldende sikkerhetsforskrifter for biologisk materiale. 2-5 Dette produktet inneholder natriumazid. En detaljert oversikt finnes under REAGENSER i dette pakningsvedlegget. Ved kontakt med syre utvikles meget giftig gass. Produktet og emballasjen skal uskadeliggjøres på en sikker måte. Sikkerhetsdatablad er tilgjengelig på forespørsel for produkt som ikke er klassifisert som farlig ifølge EU-direktiv 1999/45/EF med tillegg. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved bruk av systemet finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 8. Forholdsregler ved bruk Reagenspakker må ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme pakke eller fra forskjellige reagenspakker. Før ARCHITECT Intact PTH-reagenspakken plasseres i systemet første gang skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som har lagt seg på bunnen. Informasjon om blanding av mikropartikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering av reagenser og for å sikre reagensenes holdbarhet. Hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når et septum settes på en åpen reagensflaske. Når et septum er plassert på en åpen reagensflaske, må ikke flasken vendes. Det vil føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette er vanligvis tørkede salter, som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved betjening av systemet finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 7. Oppbevaring ARCHITECT Intact PTH-reagenspakken skal oppbevares ved 2 8 C i loddrett stilling og kan brukes straks den er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT Intact PTH-reagenspakken kan oppbevares i System i maksimum 30 dager. Etter 30 dager skal reagenspakken kastes. Informasjon om styring av reagensholdbarhet i systemet finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, Reagensene kan oppbevares i eller utenfor System. Hvis reagensene tas ut av systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ny skrukork) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i de opprinnelige eskene for å sikre at de står loddrett. Hvis en flaske ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Når reagensene tas ut av systemet, må det startes en reagensskanning for å oppdatere systemets holdbarhetstidsmåler. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Hvis en kontrollverdi ligger utenfor det angitte området, kan det tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige, og prøvene skal analyseres på nytt. Rekalibrering av analysen kan være påkrevd. Informasjon om feilsøking finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 10. 2

3 INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT Intact PTH-analysefilen (analyse nummer 581) skal installeres på System fra CD-en Assay CD-ROM Addition E før analysen utføres. ARCHITECT Intact PTH STAT-analysefilen (analyse nummer 585) skal installeres på System med STAT-protokoll fra CD-en Assay CD-ROM Addition E før analysen utføres. Det kan hende at rutineanalysen ikke er tilgjengelig på alle Systems. Detaljerte instruksjoner for installering av analysefilen og visning og endring av analyseparametere finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametere finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, Mer informasjon om systemprosedyrer finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken. Standard benevning for ARCHITECT Intact PTH-analysen er pg/ml. En alternativ benevning, pmol/l, kan velges for resultatrapporter ved å endre analyseparameteren "Result concentration units til "pmol/l". Systemet bruker omregningsfaktoren 0,106. Omregningsformel: (konsentrasjon i pg/ml) x (0,106) = pmol/l PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Typer prøvemateriale takingsglassene på listen nedenfor er godkjent for bruk med ARCHITECT Intact PTH-analysen. Humant serum (bruk av serumseparatorglass kan føre til redusert konsentrasjon). Humant plasma tatt i: litiumheparin natriumheparin kalium-edta Flytende antikoagulanter kan ha en fortynnende virkning som gir lavere konsentrasjoner i enkelte pasientprøver. System kan ikke verifisere hvilken type prøve materiale som benyttes. Det er brukerens ansvar å kontrollere at det benyttes riktig type prøvemateriale til ARCHITECT Intact PTH-analysen. Glass med natriumcitrat, natriumfluorid/kaliumoksalat og ammoniumheparin kan ikke brukes med ARCHITECT Intact PTH-analysen. Tilstanden til prøvematerialet Ikke bruk prøvemateriale i følgende tilstander: varmeinaktivert sammenslått kraftig hemolysert (> 500 mg/dl) åpenbar mikrobiell kontaminering post mortem-prøver og alle andre kroppsvæsker For at resultatene skal bli nøyaktige, bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer eller utfellinger. Serumprøver fra pasienter som får antikoagulantbehandling eller trombolyttisk behandling, kan inneholde fibrin på grunn av ufullstending koagulering. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver slik at krysskontaminering unngås. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser. Kontroller at det ikke er bobler i prøvene, slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analysering. Bruk en ny rørepinne til hver prøve slik at krysskontaminering unngås. Forberedelse til analysering Følg glassprodusentens bruksanvisning for serum- og plasmaprøvetakingsglass. Gravitasjonsseparasjon er ikke tilstrekkelig for klargjøring av prøver. Bland tint prøvemateriale grundig, ved lav hastighet på en prøveblander eller ved å vende det 10 ganger. Se på prøvematerialet og kontroller at det er tilstrekkelig blandet. Hvis lagdeling eller stratifisering forekommer, må prøvene blandes ytterligere til de er homogene. For å oppnå optimale resultater skal prøvemateriale overføres til et sentrifugeglass og sentrifugeres ved relativ sentrifugalkraft (RCF) i 10 minutter hvis det inneholder fibrin, røde blodlegemer eller andre utfellinger det må analyseres på nytt Overfør klare prøver til en prøvekopp eller et sekundær glass for testing. Sentrifugerte prøver som har et lipidlag på toppen, skal overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Pass på at bare den klare delen av prøven overføres og ikke det lipemiske materialet. Oppbevaring r kan oppbevares uten å avpipetteres fra koagelet eller røde blodlegemer i opptil 2 dager ved 2 8 C. Hvis det vil gå mer enn 2 dager før analysering, må serum eller plasma fjernes fra koagelet, serumseparatoren eller røde blodlegemer og fryses. r som hadde vært frosset i 6 måneder viste ingen forskjell i ytelse. r bør ikke fryses/tines mer enn 5 ganger. Forsendelse Det anbefales at prøver separeres fra koagelet eller røde blodlegemer før de sendes. Ved forsendelse skal prøver pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale regler for transport av kliniske prøver og smittefarlig materiale. materiale kan sendes på vanlig is eller tørris. Det bør ikke avvikes fra tidsbegrensningene for oppbevaring som er angitt over. PROSEDYRE Reagenspakken inneholder 8K25 ARCHITECT Intact PTH Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System 1L66 - WW (excluding US) - Addition E 8K25-01 ARCHITECT Intact PTH Calibrators 8K25-10 ARCHITECT Intact PTH Controls 7D82-50 Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 9. Analyseprosedyre Før ARCHITECT Intact PTH-reagenspakken plasseres i systemet første gang skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som har lagt seg på bunnen. Etter at mikropartiklene er plassert i systemet første gang, er ikke videre blanding nødvendig. Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Se på flasken og kontroller at mikropartiklene er resuspendert. Hvis det fremdeles sitter fast mikropartikler på bunnen av flasken, må flasken vendes til mikropartiklene er helt resuspendert. Hvis mikropartiklene ikke er resuspendert, MÅ IKKE REAGENSET BRUKES. Kontakt Abbott kundeservice. Når mikropartiklene er resuspendert, settes et septum på flasken. Informasjon om plassering av septum på flasker finnes under Forholdsregler ved bruk i dette pakningsvedlegget. Plasser ARCHITECT Intact PTH-reagenspakken på et ARCHITECT i System eller et System med STAT-protokoll. Kontroller at alle nødvendige reagenser er på plass. Kontroller at det er septum på alle reagensflasker. 3

4 Bestill kalibrering om nødvendig. Informasjon om bestilling av kalibrering finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 6. Bestill testene. Informasjon om bestilling av pasientprøver og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillingsutskriften (Orderlist report). Det kan maksimalt tas 9 replikater fra samme prøvekopp. For å redusere effekten av fordamping må det kontrolleres at prøvekoppen inneholder nok materiale før analyseringen utføres. Prioritert: 200 μl for den første ARCHITECT Intact PTH-testen pluss 150 μl for hver ytterligere ARCHITECT Intact PTH-test fra samme prøvekopp. 3 timer i systemet: 200 μl for den første ARCHITECT Intact PTH-testen pluss 150 μl for hver ytterligere ARCHITECT Intact PTH-test fra samme prøvekopp. > 3 timer i systemet: større prøvevolum er påkrevd. Informasjon om prøvefordamping og volumer finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, Det bør alltid kontrolleres at det er nok prøvemateriale i primærog sekundærglassene. Klargjør kalibratorene og kontrollene. Bland ARCHITECT Intact PTH-kalibratorer og -kontroller ved å vende dem forsiktig før bruk. For å oppnå anbefalt mengde for ARCHITECT Intact PTHkalibratorer og -kontroller holdes flaskene loddrett og 15 dråper av hver kalibrator eller 10 dråper av hver kontroll fylles i de respektive prøvekoppene. Sett inn prøvene. Informasjon om plassering av prøver finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, Trykk på RUN. Ytterligere informasjon om betjeningsprinsipper finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 3. For å sikre optimal yteevne er det viktig å følge rutinene for vedlikehold som er beskrevet i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, skal disse prosedyrene følges. Fortynningsprosedyrer r med en konsentrasjon av intakt PTH på > 3000,0 pg/ml (rutineprotokoll) eller > 2500,0 pg/ml (STAT-protokoll) merkes med > pg/ml eller > pg/ml og kan fortynnes med den manuelle fortynningsprosedyren. Manuelle fortynninger skal utføres på følgende måte: Anbefalt fortynning for ARCHITECT Intact PTH-analysen er 1:2. Tilsett 150 μl av pasientprøven til 150 μl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent. Brukeren må taste inn fortynningsfaktoren på pasient- eller kontrollbestillingsskjermen. Systemet bruker denne fortynningsfaktoren til å regne ut prøvekonsentrasjonen før fortynning automatisk og rapportere resultatet. Resultatet (før fortynningsfaktoren brukes) skal være større enn 1,0 pg/ml. Ytterligere informasjon om bestilling av fortynninger finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, Kalibrering En ARCHITECT Intact PTH-kalibrering utføres ved at kalibrator A, B, C, D, E og F testes i replikater på to. Én prøve for hvert Intact PTHkontrollnivå må testes for å evaluere analysekalibreringen. Kontroller at analysens kontrollverdier ligger innenfor konsentrasjonsområdene som er angitt i pakningsvedlegget for kontrollen. Kalibratorer bør behandles som prioriterte prøver. Kalibreringsområde: Rutineprotokoll: 0,0 3000,0 pg/ml STAT-protokoll: 0,0 2500,0 pg/ml Når en ARCHITECT Intact PTH-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten ytterligere kalibrering med mindre: det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer kontrollene ligger utenfor spesifisert område Ytterligere informasjon om hvordan en kalibrering utføres finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 6. 4 PROSEDYRER FOR KVALITETSKONTROLL Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT Intact PTH-analysen er at én prøve av hvert kontrollnivå testes 1 gang daglig. Hvis kvalitetskontrollprosedyrene for laboratoriet krever hyppigere bruk av kontroller for å verifisere testresultatene, skal disse prosedyrene følges. Kontrollverdiene for ARCHITECT Intact PTH må ligge innenfor de godkjente verdiene som er angitt i pakningsvedlegget for kontrollene. Hvis en kontroll ligger utenfor angitt område, er de tilhørende testresultatene ugyldige, og prøvene må analyseres på nytt. Rekalibrering kan være nødvendig. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Ytterligere informasjon om fremgangsmåte for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, vedlegg B. ARCHITECT Intact PTH-analysen tilhører metodegruppe 1. ARCHITECT Intact PTH-kalibratorer kan brukes hvis MasterCheck ikke er tilgjengelig. Se ARCHITECT-brukerhåndboken, vedlegg B. RESULTATER Beregning ARCHITECT Intact PTH-analysen bruker en punkt-til-punkt data reduksjonsmetode for å generere en kalibreringskurve. Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, Måleområde Måleområdet for ARCHITECT Intact PTH-analysen er - STAT-protokoll: 4,0 pg/ml til 2500,0 pg/ml - Rutineprotokoll: 3,0 pg/ml til 3000,0 pg/ml Resultater under måleområdet bør rapporteres som henholdsvis < 4,0 pg/ml eller < 3,0 pg/ml. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER Hvis resultatene for intakt PTH ikke samsvarer med den kliniske utredningen, anbefales det å utføre supplerende testing for å få bekreftet resultatet. For å stille en diagnose bør resultatene brukes i sammenheng med andre data, f.eks. symptomer, resultater fra andre tester, kliniske inntrykk osv. Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med reagensimmunoglobuliner, noe som interfererer på immun kjemiske in vitroanalyser. 6 Pasienter som jevnlig eksponeres for dyr eller animalske serumprodukter, kan være utsatt for slik interferens, og unormale verdier vil kunne observeres. Mer informasjon kan være nødvendig for å stille diagnose. FORVENTEDE VERDIER Det anbefales at det enkelte laboratorium etablerer sitt eget referanseområde, som kan være unikt for populasjonen det betjener avhengig av geografiske faktorer, kosthold og miljø. Det ble utført en studie for ARCHITECT Intact PTH-analysen med plasmaprøver fra tilsynelatende friske voksne for å fast sette referanseområdet. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Intakt PTH (pg/ml) 2,5. 97,5. n Median persentil persentil Friske voksne ,6 15,0 68,3

5 SPESIFIKKE EGENSKAPER Presisjon ARCHITECT Intact PTH-analysen skal ha en presisjon på 9 % total CV for den lave kontrollen og 7 % total CV for mediumkontrollen og den høye kontrollen. Det ble utført en studie for ARCHITECT Intact PTHanalysen basert på veiledning fra EP5-A-protokollen 7 fra National Committee for Clinical Laboratory Standards Institute (NCCLS). Flere ARCHITECT Intact PTH-kontrolloter ble analysert med to reagensloter i replikater på to på to forskjellige tidspunkter per dag i 20 dager på et laboratoraium med to instrumenter som bruker STAT-protokollen og på et annet laboratorium med to instrumenter som bruker rutineprotokollen. I tillegg ble det utført en annen presisjonsstudie der to reagensloter ble analysert i fire replikater per serie på to forskjellige tidspunkter per dag i 10 dager på ett instrument på et tredje laboratorium som bruker STATprotokollen, og på ett instrument på et fjerde laboratorium som bruker rutineprotokollen. De enkelte reagenslotene brukte én kalibreringskurve i hele studien. Data fra begge studiene er oppsummert i tabellene nedenfor.* ARCHITECT Intact PTH-presisjon med STAT-protokollen Gjennomsnittlig konsentrasjon Innen-serie Total a n (pg/ml) SD % CV SD % CV Lav kontroll 878 8,5 0,74 8,7 0,74 8,7 Medium kontroll ,5 2,34 4,1 2,35 4,2 Høy kontroll ,9 8,62 4,1 8,62 4,1 ARCHITECT Intact PTH-presisjon med rutineprotokollen Gjennomsnittlig konsentrasjon Innen-serie Total a n (pg/ml) SD % CV SD % CV Lav kontroll ,7 0,65 6,1 0,69 6,4 Medium kontroll ,6 2,28 3,3 2,31 3,3 Høy kontroll ,8 7,40 2,9 7,56 3,0 a Total analysevariabilitet inneholder variasjon innen-serie, mellom-serier og fra-dag-til-dag. Gjenfinning ARCHITECT Intact PTH-analysen skal ha en gjennomsnittlig gjenfinning på 100 ± 10 %. Det ble utført en studie hvor 10 sekundærglass humant plasma med endogene nivåer på mellom 22,9 pg/ml og 162,8 pg/ml intakt PTH ble tilsatt kjente konsentrasjoner (0, 4,8, 24, 120, 600 pg/ml) av intakt PTH. Konsentrasjonen av intakt PTH og prosentvis gjenfinning ble beregnet for hver prøve. Den prosentvise gjenfinningen for ARCHITECT Intact PTH-analysen ga et gjennomsnitt på 101 %. Dataene er representative ytelsesdata, men resultatene som oppnås i de enkelte Linearitet ARCHITECT Intact PTH-analysen skal gjenfinne fortynnede prøver innenfor ± 10 % av det forventede resultatet i fortynningsområdet fra 20 % til 80 %. Det ble utført en studie av lineariteten ved fortynning ved hjelp av prøver med ufortynnet intakt PTH-verdier på mellom 65,6 pg/ml og 2257,0 pg/ml. Disse prøvene ble fortynnet manuelt med Multi-Assay Manual Diluent ved ulike fortynnings faktorer (0,2 til 0,8) for å gi 80 % til 20 % av det endogene nivået for intakt PTH. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellene nedenfor.* Fortynningsfaktor Observerte verdier (pg/ml) % gjennomsnittlig gjenfinning a 1 ufortynnet 65,6 0,2 til 0,8 53,8 til 12, ufortynnet 779,9 0,2 til 0,8 644,7 til 163, ufortynnet 2257,0 0,2 til 0,8 1860,5 til 435,2 98 I tillegg ble det utført en fortynningsstudie med prøver med ulike høye og lave konsentrasjoner av intakt PTH på mellom 19,1 pg/ml og 2038,8 pg/ml. n med lavt nivå ble brukt til å fortynne prøven med høyt nivå til ulike konsentrasjoner (fortynningsfaktorene var 0,25, 0,50 og 0,75). Data fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Ufortynnet konsentrasjonsnivå (pg/ml) Fortynnet konsentrasjonsområde (pg/ml) % gjennomsnittlig gjenfinning a 1 Lavt 19,1 168,3 til 101 Høyt 615,0 477,1 2 Lavt 21,5 339,5 til 104 Høyt 1271,9 989,4 3 Lavt 22,8 522,6 til 102 Høyt 2038,8 1580,8 a prosentvis gjenfinnelse = observert verdi (pg/ml) x 100 forventet verdi (pg/ml) % gjennomsnittlig gjenfinning = gjennomsnittet av % gjenfinning for alle fortynninger av en prøve ulike Funksjonell sensitivitet ARCHITECT Intact PTH-analyen skal ha en funksjonell sensitivitet på 5 pg/ml ved en total CV på 20 %. Det ble utført en studie der det ble brukt humane prøver med utgangskonsentrasjoner av intakt PTH på 3 pg/ml, 4 pg/ml og 5 pg/ml. Disse prøvene ble testet i replikater på to over 10 dager med to reagensloter på to instrumenter med STATprotokollen og på ett instrument med rutineprotokollen. Funksjonell sensitivitet ble bestemt til å være 4 pg/ml* for STAT-protokollen og 3 pg/ml* for rutineprotokollen. Analytisk sensitivitet ARCHITECT Intact PTH-analysen skal ha en analytisk sensitivitet på 1 pg/ml. Analytisk sensitivitet defineres som konsentrasjonen ved to standardavvik over kalibrator A (0,0 pg/ml). I en studie (n = 12 serier, 20 replikater av kalibrator A og 10 replikater av kalibrator B, med tre instrumenter og to reagensloter) ble den analytiske sensitiviteten beregnet til å være 0,23 pg/ml* ved bruk av rutineprotokollen og 0,31 pg/ml* ved bruk av STAT-protokollen ved 95 %-konfidensnivå. Spesifisitet Spesifisiteten til ARCHITECT Intact PTH-analysen skal ha en kryssreaktivitet på 0,01 % når den testes med forbindelser med lik struktur som er oppført i tabellen nedenfor. Det ble utført en studie med ARCHITECT Intact PTH-analysen basert på veiledning fra EP7-A-protokollen 8 fra NCCLS. Sekundærglass med ARCHITECT Intact PTH-kalibrator A ble tilsatt potensielle kryssreaktanter ved de angitte konsentrasjonene og ble testet for intakt PTH. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* PTH-fragment Konsentrasjoner % kryssreaktivitet a pg/ml 0, pg/ml 0, pg/ml 0, pg/ml 0, pg/ml 0,00 a % kryssreaktivitet = beriket gjennomsnittsverdi - ikke-beriket gjennomsnittsverdi (pg/ml) kryssreaktantkonsentrasjon (pg/ml) x 100 ulike 5

6 Interferens ARCHITECT Intact PTH-analysens potensielle interferens fra hemoglobin, bilirubin, triglyserider og totalprotein skal være 10 % ved nivåene angitt nedenfor. Interferens ble vist gjennom en studie basert på veiledning fra EP7-A-protokollen 8 fra NCCLS. Ingen vesentlig interferens ble observert siden % gjennomsnittlig gjenfinning ligger innenfor ± 10 % av den forventede verdien. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* Potensielt interfererende komponent Konsentrasjon % gjennomsnittlig gjenfinning a Hemoglobin 500 mg/dl 102 Bilirubin 20 mg/dl 98 Triglyserider 5000 mg/dl 105 Lavt proteinnivå 4 g/dl 106 Høyt proteinnivå 9,5 g/dl 93 Høyt proteinnivå (rutineprotokoll) 10,5 g/dl 94** a % gjenfinning = observert verdi (pg/ml) x 100 forventet verdi (pg/ml) % gjennomsnittlig gjenfinning = gjennomsnittet av % gjenfinning for alle testede prøver ulike ** Når STAT-protokollen brukes kan det forekomme interferens med høye proteinnivåer. Metodesammenligning ARCHITECT Intact PTH-analysen skal ha en korrelasjonskoeffisient på 0,95 sammenlignet med en sammenligningsanalyse. Det ble utført en studie med ARCHITECT Intact PTH-analysen hvor regresjonsanalyse ble utført med Passing-Bablok- og minste kvadraters-metodene. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* ARCHITECT Intact PTH sammenlignet med sammenligningsanalyse Regresjonsmetode n Slope Intercept Passing-Bablok a 199 1,02 0,61 Minste kvadraters 199 0,98 9,00 Korrelasjonskoeffisient 0,99 a En lineær regresjonsmetode som ikke tar spesielle hensyn til fordeling av prøveresultater og målefeil. 9 I denne sammenligningen varierte prøvekonsentrasjonene fra 5,9 pg/ml til 1277,0 pg/ml med ARCHITECT Intact PTH-analysen og fra 7,5 pg/ml til 1344,3 pg/ml med sammenligningsanalysen. Det ble utført en annen studie der ARCHITECT Intact PTH-analysen ble sammenlignet med en kommersielt tilgjengelig metode. I denne studien ble 709 prøver analysert og korrelasjonskoeffisienten var 0,99*. konsentrasjonene varierte fra 1,5 til 2326,9 pg/ml med ARCHITECT Intact PTH-analysen og fra 1,2 til 1813,0 pg/ml med den kommersielt tilgjengelige metoden. Disse prøvekategoriene er tatt med i studien: normale voksne (285), serie med intra-operative målinger av paratyreoidektomi (32), hypoparatyreoidisme (20), primær hyperparatyreoidisme (39), kronisk nyresvikt (93), ondartet hyperkalsemi (40), randomiserte PTH-nivåer (200). * Representative ytelesesdata vises. Variabler som ulik prøvestørrelse og -populasjon kan påvirke analysens korrelasjon, og resultatene som oppnås i de ulike laboratoriene, kan derfor avvike fra disse dataene. REFERANSELISTE 1. Goltzman D, Hendy GN. Parathyroid hormone. In: Becker KL, editor. Principles and Practice of Endocrinology and Metabolism, 3rd edition. Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins; 2001: US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 3. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th. ed. Washington, DC: US Government Printing Office; January World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34(1): National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices Approved Guideline. NCCLS document EP5-A. Wayne, PA: NCCLS, National Committee for Clinical Laboratory Standards. Interference Testing in Clinical Chemistry: Approved Guideline. NCCLS document EP7-A. Wayne, PA: NCCLS, Passing H, Bablok W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J Clin Chem Clin Biochem 1983;21: ARCHITECT og Chemiflex tilhører Abbott Laboratories i ulike jurisdiksjoner. ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany Produsert av Biokit S.A., Barcelona, Spain for Abbott Diagnostics Division Distribueres av Abbott Laboratories Abbott Park, IL USA og ABBOTT, Wiesbaden, Germany ABBOTT Diagnostics Division November , 2008 Abbott Laboratories 6