(12) Oversettelse av europeisk patentskrift (11) NO/EP 2222293 B1 (19) NO NORGE (1) Int Cl. A61K 31/ (06.01) A61P 9/00 (06.01) A61P 9/ (06.01) Patentstyret (21) Oversettelse publisert 11.12.27 (80) Dato for Den Europeiske Patentmyndighets publisering av det meddelte patentet: 11.08.03 (86) Europeisk søknadsnr: 0887026.2 (86) Europeisk innleveringsdag 08.12.03 (87) Den europeiske søknadens Publiseringsdato.09.01 (30) Prioritet 07.12.04 EP 07122272 07.12.04 EP 07122273 (84) Utpekte stater AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MT NL NO PL PT RO SE SI SK TR Utpekte samarbeidende stater AL BA RS (73) Innehaver Grindeks, a joint stock company, 3, Krustpils StreetRiga 7, Latvia (72) Oppfinner STONANS, Ilmars, 3 Krustpils streetlv-7 Riga, Latvia TARARAK, Eduard, Osennyaya Street 4-1-Moscow 121609, Russland ANDREYEVA, Elena, Osennyij Boulevard 12-11-164Moscow 121614, Russland (74) Fullmektig Oslo Patentkontor AS, Postboks 7007 Majorstua, 0306 OSLO, Norge (4) Benevnelse Medisinsk anvendelse av 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionat-hydrogenfumarat og - dihydrogenfosfat (6) Anførte publikasjoner WO-A-0/012233 B1, VEVERIS M ET AL: "Experimental hypercholesterolemia and atherosclerosis model in laboratory mice" BALTIC JOURNAL OF LABORATORY ANIMAL SCIENCE, vol., no. 3-4, 00, pages 194-199, XP00808767 ISSN: 1407-0944, OKUNEVICH I V ET AL: "[Anti-atherosclerotic action of mildronate in experiment]" PATOLOGICHESKAIA FIZIOLOGIIA I ÈKSPERIMENTAL'NAIA TERAPIIA 02 APR-JUN, no. 2, April 02 (02-04), pages 24-27, XP008087617 ISSN: 0031-2991, KARPOV R S ET AL: "CLINICAL AND INSTRUMENT ASSESSMENT OF THE EFFICACY OF TREATING PATIENTS WITH COMBINED ATHEROSCLEROSIS OF THE CORONARY CEREBRAL AND PERIPHERAL ARTERIES" TERAPEVTICHESKII ARKHIV, vol. 63, no. 4, 1991, pages 90-93, XP008087626 ISSN: 0040-3660
1 Teknisk område Den foreliggende oppfinnelsen angår anvendelsen av 3-(2,2,2- trimetylhydrazinium)propionatsalter, valgt fra gruppen av dihydrogenfosfat og hydrogenfumarat, for fremstillingen av et medikament for forhindring og terapi av aterosklerose. 1 Tidligere kjent teknikk Aterosklerose er en sykdom som påvirker arterielle blodårer. Det er en kronisk inflammatorisk respons i arterieveggene, for en stor del grunnet deponeringen av lipoproteiner (plasmaproteiner som bærer kolesterol og triglyserider). Dette er vanligvis referert til som en "hardgjøring" eller "furring" av arteriene. Dette er forårsaket av dannelsen av flere plakk inne i arteriene. Aterosklerose er en saktegående, komplisert sykdom som typisk starter i barndommen og ofte utvikler seg med alderen. I noen mennesker utvikler den seg raskt, selv i deres tredje tiår. Sykdommen er trodd å starte fra skade på det innerste laget av arterien som blir kallt endothelium. Skade på arterieveggen blir forårsaket av: forhøyede nivåer av kolesterol og triglyserid (tri-glis'er-id) i blodet høyt blodtrykk tobakksrøyk diabetes Se, http://www.americanheart.org/presenter.jhtml?identifier=4440 04.12.07 Aterosklerose er et stort sosialt og medisinsk-sosialt problem og dens kliniske utslag er hovedårsaken til høye nivåer av innleggelse på sykehus og død. 2 30 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionatdihydrat er kjent under det internasjonale ikke-proprietære navnet Meldonium-dihydrate. Karnitin og Meldonium er strukturelt veldig like. Karnitin har blitt brukt som et anti-aterosklerosemiddel, alene eller i kombinasjon med andre legemidler, fortrinnsvis naturlig forekommende preparater, sånn som flavonoider eller omega-3 type flerumettede syrer, etc. Patent EP1128822 (SIGMA TAU HEALTHSCIENCE SPA, publisert i 0.09.01) viser en farmasøytisk sammensetning omfattende L-karnitin og et flavonoid mot trombose og aterosklerose. Imidlertid har den farmakologiske virkningen av Meldoniumdihydrat blitt ansett å motvirke effekten av karnitin. Meldoniumdihydrat har blitt brukt i anti-aterosklerose
2 terapi. Meldoniumdihydrat viser hypolipodemisk aktivitet i rotter med triton WR- 1339 hyperlipidemi. (OKUNEVICH IV, RYZHENKOV VE et al, "Anti-aterosklerotisk action of Meldonium dihydrate in experiment", publisert i "Patologiteskaja Fiziologija I Eksperimentelljnaja Terapija" 02, Apr-Jun vol.2, p.24-7). Et experiment som beskriver aterosklerose i koronær, cerebral og perifere blodårer viser at Meldoniumdihydrat utøver en gunstig effekt på den regionale sirkulasjonen, lipidmetabolisme og kan bli anvendt i behandlingen av pasienter med samtidig forms av aterosklerose (see KARPOV RS, DUDKO VA. "The klinisk instrumental evaluation of behandling efficacy i pasienter med samtidig aterosklerose i de koronære, cerebrale og perifere blodårene", publisert i "Terapevticheskii Arkhiv" 1991. vol.63, nr.4, s.90-93). Dihydrogenfosfat- og hydrogenfumaratsalter av Meldonium er vist i EP 1667960 A (JOINT STOCK COMPANY GRINDEKS) 14.06.06 som mer stabile forbindelser sammenlignet med Meldoniumdihydrat. 1 2 30 3 Beskrivelse av oppfinnelsen Teknisk problem Uavhengig av en lang rekke farmakologiske preparater anvendt for å behandle pasienter med aterosklerose, sykdommen hvis ikke behørig kontrollert. Formålet med den foreliggende oppfinnelsen er å få en farmasøytisk forbindelse som er en mer effektiv forbindelse enn Meldoniumdihydrat i forhindring og terapi av aterosklerose. Vi har uventet funnet at salter av Meldonium - Meldoniumdihydrogenfosfat og Meldoniumhydrogenfumarat, effektivt reduserer aterosklerotiske uttrykk i aorta. Anti-Aterosklerotisk eksperiment Farmakologiske eksperiment ble utført for å undersøke den anti-aterosklerotiske virkningen av Meldoniumdihydrogenfosfat, eller Meldoniumhydrogenfumarat, i aorta. Eksperimentene med Meldoniumsalt sånn som Meldoniumdihydrogenfosfat, eller Meldoniumhydrogenfumarat, ble utført i 38 Chinchilla-kaniner som veide 2.-3.0 kg. Kaninene ble tilfeldig delt inn i 4 grupper: Kontroll (n=11), Meldoniumdihydratgruppe (n=9) og Meldoniumdihydrogenfosfat-gruppe (n=9) og Meldoniumhydrogenfumarat-gruppe (n=9). Eksperimentell aterosklerose, dvs. serum-hyperlipidemi og de aterosklerotiske uttrykk I aorta, ble indusert ved å administrere 1 % kolesterol basert på vekt sammen med standard diett. Kaninene ble foret med standard diet med 1 % kolesterol oppløst i solsikkefrø-olje (4% av den totale mengden mat). Dietten ble beriket med kolesterol som følger: kg standardmat for kaniner ble oppvarmet til 60 C og ble blandet med 0 g
3 1 varm kolesterol oppløst i 400 ml solsikkefrø-olje. Kaninene mottok 0 g av denne maten per dag. De eksperimentelle gruppene ble gitt Meldoniumdihydrat, Meldoniumdihydrogenfosfat og Meldoniumhydrogenfumarat, i en dose på 124 mg/kg, 16 mg/kg og 174 mg/kg. Preparatene ble tilsatt til drikkevannet. Etter 1 uker ble kaninene avlivet. Hjerte, aorta og lever ble samlet for undersøkelse. Aorta ble strippet for adventitia, kuttet longitudinalt og vasket med fosfatbuffer-løsning. Prøver fra abdominal, nedadgående og oppadgående aorta ble undersøkt med lysmikroskopi og immunomorfologi. Biter av aorta ble fiksert i 4% nøytral formaldehyd-buffer i 7 dager. For senere undersøkelser ble aorta, hjerte og lever nedfryst I flytende nitrogen og lagret ved 70 C. Prøver ble fiksert i methacarn for fremstilling av parafinseksjoner. Etter fiksering i formaldehyde ble prøvene vasket i 24 timer i rennende vann, farget med olje rød O ved standardmetoden og gransket for nærværet av lipidflekker, streker og plakk. I alle kaninene ble aterosklerotiske forandringer observert i alle preparatene av aorta farget med olje rød O. Resultater av disse proven viser at Meldoniumdihydrogenfosfat er i stand til å redusere fargeflekkene av ateroskleroseuttrykk, se Tabell 1. Anti-Aterosklerotisk aktivitet av Meldoniumdihydrogenfosfat
4 Tabell 1 Effekt av Meldoniumdihydrogenfosfat på aterosklerotiske uttrykk I kaninaorta. *p<0.0 sammenlignet med kontrollgruppen; #p<0.0 sammenlignet med Meldoniumdihydrat-gruppe. Tabell 1 viser at Meldoniumdihydrogenfosfat i farmakologisk reduserer >2-ganger arealet av aterosklerotisk plakk i kaninaorta sammenlignet med kontroll og Meldoniumdihydrat-grupper. Resultatene av disse testene viser at Meldoniumhydrogenfumarat reduserer ateroskleroseuttrykk, se Tabell 2. Anti-aterosklerotisk aktivitet av Meldoniumhydrogenfumarat 1 Tabell 2 Effekt av Meldoniumhydrogenfumarat på aterosklerotiske uttrykk i kaninaorta. *p<0.0 sammenlignet med kontrollgruppe; #p<0.0 sammenlignet med Meldoniumdihydrat-gruppe.
Tabell 2 viser at Meldoniumhydrogenfumarat i farmakologiske doser reduserer >2- ganger arealet av aterosklerotisk plakk i kanin-aorta sammenlignet med kontrollog Meldoniumdihydrat-gruppene.
6 Krav 1. Anvendelse av 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionatsalt valgt fra gruppen bestående av dihydrogenfosfat og hydrogenfumarat for fremstilling av et medikament for profylakse og/eller behandling av aterosklerose. 2. Anvendelse ifølge krav 1, hvori 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionatsaltet er hvori 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionate-dihydrogenfosfat. 3. Anvendelse ifølge krav 1, hvori 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionatsaltet er hvori 3-(2,2,2-trimetylhydrazinium)propionate-hydrogenfumarat. 4. 3-(2,2,2-Trimetylhydrazinium)propionatsalt valgt fra gruppen bestående av dihydrogenfosfat og hydrogenfumarat for anvendelse i profylakse og/eller behandling av aterosklerose.