(12) Oversettelse av europeisk patentskrift

(12) Oversettelse av europeisk patentskrift (11) NO/EP 1703 B1 (19) NO NORGE (1) Int Cl. C07D 49/ (06.01) A61K 31/444 (06.01) A61P 2/00 (06.01) Patentstyret (21) Oversettelse publisert 13.12.16 (80) Dato for Den Europeiske Patentmyndighets publisering av det meddelte patentet 13.09.18 (86) Europeisk søknadsnr 782482.3 (86) Europeisk innleveringsdag.11. (87) Den europeiske søknadens Publiseringsdato 12.09.26 (30) Prioritet 09.11.16, EP, 09382246.01.27, US, 298629 P (84) Utpekte stater AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR Utpekte samarbeidende stater BA ME (73) Innehaver Eli Lilly and Company, Lilly Corporate Center, Indianapolis, IN 4628, USA (72) Oppfinner BENITO COLLADO, Ana Belen, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, 288 Alcobendas Madrid, Spania DIAZ BUEZO, Nuria, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, Madrid, Spania JIMENEZ-AGUADO, Alma Maria, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, Madrid, Spania LAFUENTE BLANCO, Celia, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, Madrid, Spania MARTINEZ-GRAU, Maria Angeles, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, Madrid, Spania PEDREGAL-TERCERO, Concepcion, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, Madrid, Spania TOLEDO ESCRIBANO, Miguel Angel, Lilly S.A.Avendia de la Industria 30, Madrid, Spania (74) Fullmektig Zacco Norway AS, Postboks 03 Vika, 012 OSLO, Norge (4) Benevnelse Spiropiperidinforbindelser som orl-1-reseptorantagonister (6) Anførte publikasjoner WO-A1-0/016913 WO-A1-0/066183 YOSHIZUM TAKASHI ET AL.: "Design, synthesis, and structure-activity relationship study of a novel class of ORL1 receptor antagonists based on N-biarylmethyl spiropiperidine", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 18, 16 May 08 (08-0-16), pages 3778-3782, XP002729, DOI:.16/j.bmcl.08.0.036 cited in the application

1 SPIROPIPERIDINFORBINDELSER SOM ORL-1-RESEPTORANTAGONISTER Orfanin FQ (OFQ) / nociseptin er et peptid med 17 aminosyrer som har høy affinitet for den G-proteinbundne ORL1-reseptoren (GPCR). ORL1-reseptoren er en klasse A GPCR som uttrykkes hovedsakelig i det sentrale og perifere nervesystemet samt i mage-tarm-kanalen, den glatte muskulaturen og immunsystemet. Selv om OFQ/nociseptin-systemet strukturelt er knyttet til opioide peptider/reseptorer, viser det ingen signifikant kryssreaktivitet overfor klassiske opioide peptider/reseptorer og viser anti-opioid aktivitet in vivo (f.eks. er ORQ/nociseptin rapportert å vise anti-nociseptive egenskaper). 1 Nociseptin/orfanin FQ-reseptorantagonister (NOC/OFQ-antagonister), spesifikt antagonister for ORL-1-reseptoren, har vist antidepressiv aktivitet og anorektisk aktivitet i atskillige studier med dyremodeller for depresjon og spiseatferd. ORL- 1-antagonister anses således å være nyttige for behandling av depresjon og/eller behandling av overvekt, fedme og/eller vektopprettholdelse etter behandling for overvekt eller fedme. WO 03/09427 beskriver visse spiropiperidinylforbindelser som ORL-1- antagonister til anvendelse som analgesika. 2 Yoshizumi, Takashi et al. (08), Design, synthesis, and structure-activiy relationship study of a novel class of ORL-1 receptor antagonists based on N- biarylmethyl spiropiperidine, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters bd. 18, s. 3778 3782, beskriver visse N-biarylmetyl-spiropiperidinforbindelser som selektive ORL-1-antagonister. 30 3 Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer en familie av 4','- dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-forbindelser med høy antagonistpotens for ORL-1-reseptoren og høy ORL-1-reseptorutnyttelse in vivo i CNS. Visse av forbindelsene har i tillegg en gunstig kardiotoksikologiprofil som bestemt ved selektivitet over herg-kanalaktiviteten, samt høy selektivitet over andre fysiologisk viktig reseptorer (f.eks. mu-, kappa- og delta-opioider, serotonin- og dopaminreseptorer). Visse av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen har ytterligere gunstige biofarmasøytiske og farmakokinetiske egenskaper (f.eks. løselighet, oral eksponering og CNS-permeabilitet). Visse av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen viser redusert oksidativ

2 metabolisme resulterende i gunstig oral biotilgjengelighet. Visse forbindelser har også vist gjennom dyremodeller at forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen er nyttige for behandling av migrene. Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer forbindelser med formel I: 1 2 hvori R 1 er fluor eller klor; R 2a og R 2b hver er hydrogen eller fluor; R 3 er hydrogen, metyl, hydroksymetyl eller (C 1 -C 3 )-alkoksymetyl; R 4 er valgt fra gruppen bestående av fluor, klor, cyano, cyanometyl, (C 1 -C 3 )-alkyl, syklopropyl, hydroksymetyl, metoksy, syklopropylmetoksy, aminokarbonylmetoksy, (C 1 -C 3 )-alkoksymetyl, syklopropyloksymetyl, syklopropylmetoksymetyl, 1-hydroksy-1-metyletyl, aminokarbonyloksymetyl, metylaminokarbonyloksymetyl, dimetylaminokarbonyloksymetyl, aminokarbonyl, aminokarbonylmetyl, -CH 2 -NR R 6, hydroksyimin, metoksyimin, morfolin-4-yl, morfolin-4-ylmetyl, Ar 1, -CH 2 Ar 1, tetrahydrofuran-2-yl, 3-oksomorfolin-4- ylmetyl, 2-oksopyrrolidin-1-ylmetyl og 2-oksopiperidin-1-ylmetyl; R er hydrogen, C 1 -C 3 -alkyl, cyanometyl, -C(O)CH 3 eller aminokarbonylmetyl; R 6 er hydrogen eller metyl; og

3 Ar 1 er en enhet valgt fra gruppen bestående av imidizol-1-yl, imidizol-2-yl, 2- metylimidizol-1-yl, pyrazol-1-yl, 1,2,3-triazol-1-yl; 1,2,3-triazol-2-yl; 1,2,4- triazol-1-yl, isoksazol-3-yl, oksazol--yl og 3-metyl-1,2,4-oksadiazol--yl; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. 1 2 I et annet aspekt av oppfinnelsen tilveiebringes det en farmasøytisk sammensetning omfattende en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med en farmasøytisk akseptabel bærer, tynner eller eksipient. Ifølge én utførelsesform av dette aspektet ved oppfinnelsen omfatter videre den farmasøytiske sammensetningen minst én ytterligere terapeutisk ingrediens, som for eksempel et SSRI-antidepressivum, som for eksempel fluoksetin. Dette aspektet ved oppfinnelsen tilveiebringer videre en farmasøytisk sammensetning tilpasset for behandling av depresjon omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med én eller flere farmasøytisk akseptable eksipienter, bærere eller fortynnere derav. I en annen utførelsesform av dette aspektet ved oppfinnelsen er det tilveiebrakt en farmasøytisk sammensetning tilpasset for behandling av overvekt, fedme og/eller vektopprettholdelse, omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med én eller flere farmasøytisk akseptable eksipienter, bærere eller fortynnere derav. En ytterligere utførelsesform tilveiebringer videre en farmasøytisk sammensetning tilpasset for behandling av migrene omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med én eller flere farmasøytisk akseptable eksipienter, bærere eller fortynnere derav. 30 3 Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer også en fremgangsmåte for behandling av depresjon hos et pattedyr omfattende administrering til et pattedyr med behov for slik behandling av en virkningsfull mengde av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. En ytterligere utførelsesform tilveiebringer en fremgangsmåte for behandling av depresjon hos et pattedyr omfattende administrering til et pattedyr med behov for slik behandling av en virkningsfull mengde av en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, og en virkningsfull mengde av et SSRI-antidepressivum eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som for eksempel fluoksetin. Andre utførelsesformer av oppfinnelsen tilveiebringer

4 fremgangsmåter for behandling av overvekt og/eller fedme, og/eller en fremgangsmåte for vektopprettholdelse omfattende administrering til et pattedyr med behov for slik behandling av en virkningsfull mengde av en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. I én særlig utførelsesform av disse aspektene ved oppfinnelsen er pattedyret et menneske. 1 Denne oppfinnelse tilveiebringer også en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, til anvendelse som et legemiddel. Innenfor dette aspektet tilveiebringer oppfinnelsen en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til anvendelse i behandlingen av depresjon hos pattedyr, særlig mennesker. Oppfinnelsen tilveiebringer også en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, i kombinasjon med et SSRI-antidepressivum eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som for eksempel fluoksetin, til anvendelse i behandlingen av depresjon hos pattedyr, særlig mennesker. Dette aspektet ved oppfinnelsen inkluderer ytterligere et hvilket som helst av følgende: en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til anvendelse i behandlingen av overvekt, en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til anvendelse i behandlingen av fedme, en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til anvendelse i opprettholdelsen av vekt (til vektopprettholdelse), særlig etter behandling for overvekt eller fedme, en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til anvendelse i behandlingen av migrene. 2 30 Et annet aspekt ved den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer anvendelsen av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til produksjon av et medikament for behandling av depresjon. En annen utførelsesform av oppfinnelsen tilveiebringer anvendelsen av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav i produksjonen av et medikament for behandling av overvekt, fedme og/eller vektopprettholdelse. Enda en annen utførelsesform av oppfinnelsen tilveiebringer anvendelsen av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til produksjon av et medikament for behandling av migrene. 3 Forbindelser ifølge denne oppfinnelsen er baser og omsettes følgelig med atskillige organiske og uorganiske syrer for å danne farmasøytisk akseptable salter. Farmasøytisk akseptable salter av hver av forbindelsene ifølge den

foreliggende oppfinnelsen betraktes innenfor den foreliggende oppfinnelsens omfang. Betegnelsen "farmasøytisk akseptabelt salt" som anvendt heri, betyr et hvilket som helst salt av en forbindelse med formel I som i det vesentlige er ikke-toksisk for levende organismer. Slik salter inkluderer dem som er angitt i Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 19 (1977), hvilke er kjent for fagmannen. Forkortelser anvendt heri er definert som følger: "BSA" betyr bovint serumalbumin. "mcpp" betyr meta-klorfenylpiperazin, en ikke-selektiv serotoninreseptoragonist. "EDTA" betyr etylendiamintetraeddiksyre. "EGTA" betyr etylenglykoltetraeddiksyre. "GTP" betyr guanosintrifosfat. "HEPES" betyr 4-(2-hydroksyetyl)-1-piperazinetansulfonsyre. 1 "HPLC" betyr høytrykksvæskekromatografi. "IC 0 " betyr konsentrasjonen hvorved 0 % av den maksimale inhiberingen oppnås. "LC-MS" betyr væskekromatografi etterfulgt av massespektroskopi. "LC/MS/MS" betyr væskekromatografi etterfulgt av massespektroskopi, etterfulgt av en andre ioniseringsmassespektroskopi. "mfst" betyr tvangssvømmetest hos mus, en dyremodell for antidepressiv aktivitet. "MS" betyr massespektroskopi. "MS (ES+)" betyr massespektroskopi ved hjelp av elektrosprayionisering. 2 "NMR" betyr kjernemagnetisk resonans. "RO-tracer" betyr 2-[(2-fluorfenyl)metyl]-3-(2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3- c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-yl)-n,n-dimetyl-propanamid. "RO" betyr reseptorutnyttelse. "SCX-kolonne" betyr sterkkationebyttekolonne. 30 "SNAr" betyr nukleofil aromatisk substitusjon. "SSRI" betyr selektiv serotoningjenopptaksinhibitor. "tbu" betyr en tertiær-butylenhet.

6 "TLC" betyr tynnsjiktskromatografi. "XRD" betyr røntgendiffraksjon. Foretrukne forbindelser ifølge den foreliggende oppfinnelsen er forbindelser hvori: 1) R 1 er klor; 2) R 2a og R 2b hver er fluor; 3) R 1 er klor og R 2a og R 2b hver er fluor; 4) R 1 er fluor og R 2a og R 2b hver er hydrogen; ) R 3 er hydrogen, metyl, hydroksymetyl eller metoksymetyl; 6) R 3 er metyl; 7) R 3 er hydroksymetyl; 8) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor og R 3 er metyl; 1 9) R 1 er klor, R 2a og R 2b hver er fluor og R 3 er hydroksymetyl; ) R 4 er fluor, hydroksymetyl, metoksymetyl eller pyrazol-1-ylmetyl; 11) R 4 er fluor; 12) R 4 er hydroksymetyl; 13) R 4 er metoksymetyl; 14) R 4 er pyrazol-1-ylmetyl; 1) en hvilken som helst av foretrukne utførelsesformer 1) til 9) hvori R 4 er fluor; 16) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til 9) hvori R 4 er hydroksymetyl; 2 17) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til 9) hvori R 4 er metoksymetyl; 18) en hvilken som helst av de foretrukne utførelsesformene 1) til 9) hvori R 4 er pyrazol-1-ylmetyl; 30 Visse foretrukne forbindelser er

7 [2-[4-[(2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'- yl)metyl]-3-metyl-pyrazol-1-yl]-3-pyridyl]metanol; 2-klor-4,4-difluor-1'-[[3-metyl-1-[3-(pyrazol-1-ylmetyl)-2-pyridyl]pyrazol-4- yl]metyl]spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]; og [4-[(2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-yl)metyl]-1- (3-fluor-2-pyridyl)pyrazol-3-yl]metanol; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. (dvs. eksemplene 1,23, 3, 62 og 63) 1 Én særlig foretrukket forbindelse ifølge den foreliggende oppfinnelsen er [2-[4- [(2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-yl)metyl]-3- metyl-pyrazol-1-yl]-3-pyridyl]metanol, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som for eksempel L-tartratsaltet og/eller HCl-saltet, som vist i eksemplene 1, 62 og 63. Forbindelser hvori R 2a og R 2b hver er fluor, er foretrukket siden forbindelsene har en gunstigere farmakokinetisk profil, idet de er mer stabile overfor oksidativ metabolisme. Denne har den generelle effekten av å forbedre forbindelsenes orale biotilgjengelighet. Generell kjemi 2 30 3 Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen kan fremstilles ifølge de følgende syntetiske skjemaene ved fremgangsmåter som er velkjent og forstått i teknikken. Egnede reaksjonsbetingelser for trinnene i disse skjemaene er velkjent i teknikken, og egnede substitusjoner av løsemidler og koreagenser omfattes av teknikken. Det skal likeledes forstås av fagmannen at syntetiske mellomprodukter kan isoleres og/eller renses ved forskjellige velkjente teknikker etter behov eller ønske, og at det ofte vil være mulig å anvende forskjellige mellomprodukter direkte i etterfølgende syntetiske trinn med lite eller ingen rensing. Fagmannen vil videre forstå at rekkefølgen som enhetene administreres i, under noen omstendigheter ikke er kritisk. Den særlige rekkefølgen av de nødvendige trinnene for å fremstille forbindelsene med formel I avhenger av den særlige forbindelsen som syntetiseres, utgangsforbindelsen og de substituerte

8 enhetenes relative labilitet, hvilket en faglært kjemiker forstår. Alle substituenter er, med mindre annet er angitt, tidligere definert, og alle reagenser er velkjent og velforstått i teknikken. 1 Ved hjelp av reduktive amineringsreaksjonsbetingelser omsettes forbindelse III med et egnet substituert pyrazolkarbaldehyd og et reduserende reagens slik som natriumtriaketoksyborhydrid, i et egnet løsemiddel slik som tetrahydrofuran ved omgivelsestemperatur for å tilveiebringe forbindelse II. Under en egnet bindingsbetingelse er forbindelse II bundet med forbindelse IV, hvori Hal er klor, brom eller jod, med en egnet katalysator slik som kobberjodid, en egnet base slik som kaliumkarbonat, i et løsemiddel slik som toluen ved forhøyet temperatur for å gi forbindelse I', hvori R 4' er R 4 eller en forløper for R 4. Når Hal på forbindelse IV er F eller Cl, er nukleofil aromatisk substitusjon (SNAr) en alternativ fremgangsmåte for å fremstille forbindelse I'. Nærmere bestemt kan forbindelse II omsettes med forbindelse IV i et egnet løsemiddel slik som dimetylformamid med en egnet base slik som kaliumkarbonat ved forhøyet temperatur for å tilveiebringe forbindelse I'. Forbindelse III kan også omsettes med en egnet substituert aldehydforbindelse V under

9 reduksjonsamineringsbetingelser som ovenfor for å gi den ønskede forbindelsen I'. Når R 4' er en forløper for R 4, omdannes den deretter til R 4 ved kjente fremgangsmåter. 1 Forbindelse IIIa, IIIb og IIIc kan fremstilles som illustrert i skjema 2. Forbindelsene XIV og XV omsettes i et egnet løsemiddel slik som diklormetan i nærvær av en egnet syre slik som trifluoreddiksyre. Det resulterende trifluoracetatet gjøres basisk med vandig natriumhydroksidløsning for å gi forbindelse XIII som en fri base. Forbindelse XIII i et egnet løsemiddel slik som metyl t-butyleter behandles med en løsning av sulfurylklorid i eddiksyre ved omgivelsestemperatur for å gi forbindelse VIII som et hydrokloridsalt. Forbindelse VIII beskyttes deretter med en nitrogenbeskyttelsesgruppe under betingelser som er velkjent for fagmannen for å gi forbindelse VII. (Se for eksempel: Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Chapters 2 and 7, John Wiley and Sons Inc., (1999)). Beskyttelsesgruppen er typisk en Boc-gruppe (tert-butyloksykarbonyl). Forbindelse VII omsettes med N-bromsukkinimid i et egnet løsemiddel slik som klorbenzen med stråling fra en lett kilde for å gi en bromidforbindelse, som deretter behandles med en baseløsning slik som vandig natriumbikarbonat for å gi en hydroksylforbindelse. Med eller uten isolering kan hydroksylforbindelsen ytterligere oksideres under egnede oksideringsbetingelser slik som i kaliumbromid, tetrametylpiperidin-n-oksid og vandig natriumhypokloridløsning for å tilveiebringe den ønskede ketonforbindelsen VI. Forbindelse VI omsettes

deretter med (bis(2-metyletyl)amino)svoveltrifluorid i et egnet løsemiddel slik som tetrahydrofuran ved forhøyet temperatur, idet det oppnådde produktet avbeskyttes for å tilveiebringe forbindelse IIIa. Forbindelse med formel XIII beskyttes for å gi forbindelse XII med en fremgangsmåte lignende den som anvendes til å fremstille forbindelse VII. Forbindelse XII i et egnet løsemiddel slik som tetrahydrofuran ved senket temperatur behandles med en egnet base slik som litiumtetrametylpiperidin, etterfulgt av tilsetning av N-fluorbenzensulfonimid for å gi en fluoridforbindelse, som avbeskyttes med vandig HCl og gjøres basisk med vandig NaOH-løsning for å tilveiebringe forbindelse IIIb. 1 Ved hjelp av samme fremgangsmåte som anvendt til fremstilling av forbindelse VI ovenfor kan forbindelse IX oppnås fra forbindelse XII gjennom tretrinnssyntese, slik som brominering, hydroksylering og oksidering. Hvert mellomprodukt kan isoleres som ren forbindelse for ytterligere reaksjon, eller omsettes uten isolering som beskrevet i syntesen av forbindelse VI. Forbindelse IX behandles deretter med et egnet halogen-metallbyttereagens slik som butyllitium i egnet løsemiddel slik som tetrahydrofuran under senket temperatur, etterfulgt av et fluorinerende reagens slik som N-fluorbenzensulfonimid for å gi ønsket fluorinert produkt, som deretter avbeskyttes riktig for å gi den ønskede forbindelsen IIIc. 2 Forbindelser med formel V kan dannes som illustrert i skjema 3. Forbindelse XVI omsettes med forbindelse XVII for å gi forbindelse med formel XV under SNAr

11 eller bindingsbetingelser beskrevet ovenfor for omdannelsen av forbindelse II til forbindelse I'. Når Z er en estergruppe, kan den reduseres til en alkohol først med et egnet reduksjonsreagens slik som litiumaluminiumhydrid i egnet løsemiddel slik som tetrahydrofuran. Alkoholen oksideres deretter til aldehyd med et egnet oksideringsreagens slik som manganoksid (IV) i et løsemiddel slik som diklormetan. 1 Når R 4' er forløperen for R 4, vil transformasjonen av R 4' til R 4 inkludere, men ikke være begrenset til, reaksjoner slik som reduksjonsaminering for å tilveiebringe et ønsket nytt amin, reduksjon av et ester, keton eller aldehyd til en alkohol, som videre kan omdannes til en alkoksyforbindelse eller et karbamat, reduksjon av et nitril til et amid eller et amin, transformasjonen av et ester til en heteroring slik som oksadiazol under egnet betingelse. (Flere eksempler finnes i: Richard C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Second Edition, Chapters 2 and 7, John Wiley and Sons Inc., (1999)). Følgende fremstillinger og eksempler er tilveiebrakt for å illustrere nyttige fremgangsmåter for synteser av forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelsen. Navnene på mange av forbindelsene illustrert i fremstillingene og eksemplene er hentet fra strukturer tegnet med "Symyx Draw 3.1" eller "Autonom 00 Name". Fremstilling 1: 4','-Dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran] 2 30 3-Tiofenetanol (123,03 ml, 1,11 mol) tilsettes en løsning av N-tertbutoksykarbonyl-4-piperidon (18 g, 928,48 mmol) i diklormetan (1300 ml) og omrøres ved romtemperatur. Deretter tilsettes trifluoreddiksyre (280,82 ml, 3,71 mol) dråpevis ( min) under avkjøling med et is-/vannbad (intern temperatur = 14 C 30 C, forsiktig: CO 2 -utvikling). Reaksjonsblandingen oppvarmes gradvis til omgivelsestemperatur og omrøres ved denne temperaturen i h.

12 1 Løsningsmidlet avdampes for å tilveiebringe et beige, krystallinsk faststoff etter avkjøling in vacuo. Faststoffet oppslemmes i metyl-t-butyleter (0 ml), filtreres, vaskes med metyl-t-butyleter (2 x 00 ml) og tørkes under vakuum for å gi 4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-iumtrifluoracetat som et hvitt faststoff i 9 % utbytte. MS = (m/z): 2 (M+1). M natriumhydroksid (2,36 ml, 2, mol) tilsettes en omrørt suspensjon av 4','- dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-iumtrifluoracetat (28 g, 881,44 mmol) i diklormetan (1 l) med avkjøling (is-/vannbad), og den resulterende blandingen omrøres inntil en bifasisk blanding oppnås. Fasene separeres og det vandige sjiktet ekstraheres med diklormetan (2 x 0 ml). De kombinerte organiske fasene konsentreres under vakuum for å oppnå en tykk olje som tritureres med vann for å oppnå et lyst gult presipitat. Presipitatet filtreres, vaskes med vann (300 ml) og heksan (0 ml) og tørkes under vakuum ved 3 C i h for å gi tittelforbindelsen som et lyst gult faststoff i 86 % utbytte. MS (m/z): 2 (M+1). Fremstilling 2: tert-butyl-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat 2 30 Spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] (60 g, 286,6 mmol) i 2- metyltetrahydrofuran (600 ml) omrøres ved 22 C i min. Deretter tilsettes tert-butoksykarbonyl tert-butylkarbonat (6,6 g, 301 mmol) dråpevis i 2- metyltetrahydrofuran (300 ml). Etter 12 h tilsettes en vandig løsning av natriumklorid ( ml), og det organiske sjiktet separeres. Det vandige sjiktet vaskes to ganger med 2-metyltetrahydrofuran (2 x 0 ml) og organiske sjikt kombineres og vaskes med saltløsning, tørkes over natriumsulfat, filtreres og konsentreres under redusert trykk for å gi tittelforbindelsen i 99 % utbytte. MS (m/z): 3 (M+1).

13 Fremstilling 3: 2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,2-c]pyran-7,4'-piperidin] 1. tert-bulyl 2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]- 1'-karboksylat 1 2 2,2,6,6-Tetrametylpiperidin (18,7 ml, 1, mmol) settes til over tetrahydrofuran (0 ml) og løsningen avkjøles under nitrogen ved -78 C. 2, M løsning av butyllitium i heksan (37,2 ml, 93 mmol) tilsettes og blandingen omrøres i 30 min ved -78 C. Over den nylig fremstilte litium-2,2,6,6- tetrametylpiperidinløsningen tilsettes det en løsning av tert-butyl-spiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat ( g, 8,2 mmol) i tetrahydrofuran (90 ml) mens temperaturen holdes under -70 C. Etter min tilsettes en løsning av N-fluorbenzensulfonimid (30,26 g, 93,07 mmol) i tetrahydrofuran (0 ml), tidligere avkjølt under nitrogen ved - C, via kanyle. Etter 1 h omrøring tilsettes vann ( ml) og vandig løsning av ammoniumklorid (0 ml). Deretter separeres organisk sjikt, og det vandige sjiktet vaskes to ganger med metyl-t-butyleter (2 x 2 ml). Organiske sjikt kombineres, og løsemiddel avdampes under redusert trykk. Råmateriale renses ved normalfase- HPLC ved anvendelse av heksan/ metyl-t-butyleter som løsemidler for å gi tertbutyl 2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat i 0 % utbytte. MS (m/z): 328 (M+1). 2. 2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,2-c]pyran-7,4'-piperidin]37 % 30 Saltsyre (11,7 ml, 12,22 mmol) tilsettes i en løsning av tert-butyl 2'-fluor- 4','-dihydro-1H-spiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat (8,2 g, 2,04 mmol) i isopropylalkohol (7,4 ml) at 4 C. Den resulterende løsningen omrøres ved 4 C i 6, h. Løsemidlet konsentreres til en gul suspensjon. Vann

14 (0 ml) tilsettes og blandingen gjøres basisk med N vandig løsning av natriumhydroksid. Den vandige fasen ekstraheres med etylacetat (3 x 0 ml), og de kombinerte organiske ekstraktene vaskes med saltløsning (0 ml), tørkes over natriumsulfat, filtreres og konsentreres under redusert trykk for å gi tittelforbindelsen i 96 % utbytte. MS (m/z): 228 (M+1). Fremstilling 4: 2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran] hydroklorid 1 2 30 En løsning av 4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran] (0 g, 238,88 mmol) i en blanding av eddiksyre (400 ml) og metyl-t-butyleter(40 ml) avkjøles til 1 C. Deretter tilsettes en løsning av sulfurylklorid (21, ml, 262,77 mmol) i eddiksyre (0 ml) dråpevis i 40 min ved denne temperaturen (intern temperatur = 1 C 22 C), og blandingen omrøres ved romtemperatur i h. Deretter tilsettes en løsning av sulfurylklorid (11,6 ml, 143,33 mmol) i eddiksyre (0 ml) dråpevis ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen omrøres ved romtemperatur i 30 min. og tilsettes deretter dråpevis (30 min) over metylt-butyleter (1 l) under avkjøling med is-/vannbad under omrøring. En hvit suspensjon dannes og faststoffet filtreres. For å oppnå et andre utbytte av materialet, konsentreres filtratet (etterfylling med metyl-t-butyleter via rotavap). Det resulterende faststoffet suspenderes i metyl-t-butyleter (300 ml), suspensjon omrøres ved refluks (bad: 0 C) og metanol (30 ml) tilsettes inntil en uklar suspensjon dannes. Deretter avkjøles suspensjonen til romtemperatur natten over. Suspensjonen avkjøles ytterligere i et is-/vannbad og filtreres. Faststoffet vaskes med metyl-t-butyleter (0 ml) og kombineres med første utbytte for å gi tittelforbindelsen i et 60 % utbytte. MS (m/z): 244 (M+1). Fremstilling : 2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'- tieno[2,3-c]pyran]

1 1. tert-bulyl 2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]- 1'-karboksylat 1 I en suspensjon av 2-klorspiro[4,-dihydrotieno[2,2-c]pyran-7,4'-piperidin] hydrokloridsalt (140 g, 0,49 mol) i diklormetan (1,12 l) tilsettes trietylamin (67,2 ml, 1,0 mol), 4-pyridinamin, N,N-dimetyl- (3,0 g, 0,02 mol) og di-tbutyldikarbonat (111,22 g, 0,09 mol) i porsjoner, og den resulterende blandingen omrøres ved romtemperatur natten over. Reaksjonen vaskes med 1N HCl (2 x) og vann. Den organiske fasen tørkes over magnesiumsulfat, filtreres og konsentreres under redusert trykk for å gi tert-butyl 2-klorspiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat i 3 % utbytte. MS (m/z): 244 (M+1-Boc). 2. tert-butyl 4'-okso-2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran]-1-karboksylat 2 30 I en l dobbeltvegget reaktor tilsettes N-bromsuksinimid (11,02 g, 639,77 mmol) i en løsning av tert-butyl 2-klorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat (0 g, 81,61 mmol) i klorbenzen (1,60 l) ved rt. Den resulterende suspensjonen bestråles med 3 X 0 W-lamper som er anbrakt nesten i kontakt med den ytre reaktorveggen, og reaktortemperaturen stilles til 4 C. Etter 4 h tilsettes N-bromsuksinimid (26,14 g, 14,40 mmol) og temperaturen holdes ved 40 C i 1 h. Reaksjonsblandingen avkjøles til 0 C og metyl-t-butyleter (00 ml) tilsettes. Faststoffet filtreres og løsningen konsentreres til ca. 00 ml løsning i klorbenzen. Deretter tilsettes metyl-tbutyleter (00 ml), faststoffer filtreres og filtrat konsentreres for å gi 600 ml av en klorbenzenløsning. Dimetylsulfoksid (806,47 ml, 11,3 mol) tilsettes og

16 1 natriumbikarbonat (9,38 g, 1,14 mol) tilsettes ved romtemperatur. Etter omrøring i 24 h ved romtemperatur tilsettes vann/is (00 ml) og fasene separeres. Organisk fase vaskes med vann (2 x 1 l) og konsentreres for å gi en løsning i klorbenzen. Deretter tilsettes diklormetan (1,2 l) og blandingen avkjøles til C (is-/vannbad). Kaliumbromid (,27 g, 170,31 mmol) og 2,2,6,6- tetrametylpiperidin-n-oksid (4,43 g, 28,38 mmol) tilsettes. Deretter blir en løsning av natriumhypokloritt 6 % i vann (644,40 ml, 67,68 mmol) justert ved ph = 9 med natriumbikarbonat (s) tilsatt i reaksjonsblandingen ved C, og den resulterende blandingen omrøres 1 h ved C til romtemperatur. Vann (1 l) tilsettes og fasene separeres. Organisk fase vaskes med vann (2 x 0, l) og ble avkjølt med is-/vannbad. Deretter ble kaliumbromid (2,03 g, 17,03 mmol), 2,2,6,6-tetrametylpiperidin-N-oksid (0,0 g, 0,32 mmol) og en løsning av 6 % natriumhypokloritt i vann (128,88 ml, 113,4 mmol) justert ved ph = 9 med fast natriumbikarbonat satt til reaksjonsblandingen ved C, og den resulterende blandingen omrøres i 1 h fra C til romtemperatur. Deretter tilsettes vann (1 l) og fasene separeres. Organisk fase vaskes med vann (2 x 1 l), tørkes og konsentreres for å gi et mørk brunt faststoff. Faststoffet tritureres med heksan (00 ml), metyl-t-butyleter/heksan % ( ml) og metyl-t-butyleter/heksan % ( ml) for å oppnå tert-butyl 4'-okso- 2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat som et lys brunt faststoff i et 66 % utbytte. MS (m/z): 28 (M+1 (Boc)). 3. tert-butyl 2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'- tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat 2 30 3 I en 00 ml PFE-kolbe lastet med tetrahydrofuran (81 ml) tilsettes (bis(2- metoksyetyl)amino)svoveltrifluorid (183,62 g, 829,94 mmol) og tert-butyl 4'- okso-2'-klor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat (13 g, 377,24 mmol). Den resulterende suspensjonen omrøres ved 70 C i 24 h. Deretter avkjøles den til romtemperatur og helles langsomt over en blanding av is og mettet vandig løsning av natriumbikarbonat (4 l) under omrøring (gassutvikling). Metyl-t-butyleter anvendes til å overføre det gjenværende materialet fra kolber. Etter at gassutvikling opphørte, tilsattes fast natriumbikarbonat under omrøring inntil ph 8 ble nådd. Den resulterende blandingen ekstraheres med metyl-t-butyleter (3 x 00 ml) inntil det ikke ble påvist produkt ved TLC i den vandige fasen. De kombinerte organiske fasene

17 vaskes med vann (3 x 00 ml) og saltløsning (00 ml), tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi en mørk tykk olje ( g). Råmateriale løses i diklormetan og filtreres gjennom en silikagelplugg eluerende med metyl-tbutyleter/heksan % (6 l) og metyl-t-butyleter/heksan (4 l). Fraksjoner samles inntil det ikke ble påvist produkt ved TLC ( % metyl-t-butyleter/heksan UV, Rf = 0,). Filtrat konsentreres for å oppnå et lys brunt faststoff som tørkes under vakuum ved 40 C til konstant vekt for å gi 70 % utbytte av tert-butyl 2'- klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1- karboksylat. MS (m/z): 324 (M+1 tbu). 4. 2'-klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3- c]pyran] 1 2 37 % saltsyre (74,12 ml, 789,78 mmol) tilsettes i en løsning av tert-butyl 2'- klor-4',4'-difluor-4','-dihydrospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1- karboksylat (60 g, 17,96 mmol) i isopropylalkohol (4 ml) at 4 C. Den resulterende løsningen omrøres ved 4 C i 1 h. Deretter konsentreres blandingen til 1/4 volum for å gi en hvit suspensjon. Vann (0 ml) tilsettes og suspensjonen gjøres basisk med 6N vandig løsning av natriumhydroksid for å oppnå en tosjiktsblanding som ekstraheres med metyl-t-butyleter (3 x 0 ml). De kombinerte organiske fasene vaskes med saltløsning (0 ml), tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi et lys brunt faststoff som tørkes under vakuum inntil konstant vekt for å gi 97 % av tittelforbindelsen. MS (m/z): 280 (M+1). Fremstilling 6: 2,4,4-trifluorspiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] 30 1. tert-butyl 2-brom-4-hydroksy-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran- 7,4'-piperidin]-1'-karboksylat

18 1 N-bromsuksinimid (2,2 ekv.) tilsettes i en løsning av tert-butyl-spiro[4,- dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat (13, g) i klorbenzen (8 ml). Den resulterende suspensjonen bestråles med 260 W-lampe natten over. Mer N-bromsuksinimid (1,7 g) tilsettes i blandingen, og blandingen bestråles med 260 W-lampe i 3 timer. Løsemidlet elimineres under redusert trykk og gir en rest som løses i aceton (60 ml), og en løsning av sølvnitrat (8,8 g) i vann (60 ml) tilsettes. Blandingen omrøres ved romtemperatur natten over. Blandingen filtreres fra og acetonet avdampes. Etylacetat tilsettes, og det organiske sjiktet vaskes med mettet vandig løsning av natriumbikarbonat og saltløsning. Det organiske sjiktet tørkes over natriumsulfat, filtreres, og løsemidlet avdampes under redusert trykk. Resten renses ved normalfase Iscokromatografi (eluent: heksan/etylacetat 1-60 %) for å gi tert-butyl-2-brom-4- hydroksy-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat i et 38 % utbytte. MS (m/z): 426/428 (M+23/M+2+23) karboksylat 2 30 2. tert-butyl 2'-brom-4'-okso-spiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1- Kaliumbromid (3,67 mg, 4,0 mmol) tilsettes i en løsning av tert-butyl 2- brom-4-hydroksy-spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'-sykloheksan]-1'- karboksylat (7,28 g) og 2,2,6,6-tetrametylpiperidin-N-oksid (281,33 mg, 1,80 mmol,) i diklormetan (70 ml) ved 0 C. I en annen beholder tilsettes natriumbikarbonat i % natriumhypokloritt (22,34 ml, 36,01 mmol) i vann inntil ph 9. Denne natriumhypokloritt-natriumbikarbonatløsningen tilsettes dråpevis ved 0 C og den resulterende mørke suspensjonen omrøres ved 0 C i 1 min. Diklormetan ( ml) og vann ( ml) tilsettes og fasene separeres. Den organiske fasen vaskes med vann ( ml) og tørkes over natriumsulfat. Løsemidlet elimineres under redusert trykk for å gi tert-butyl 2'-brom-4'-oksospiro[piperidin-4,7'-tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat i et 99 % utbytte. MS (m/z): 346/348 (M+1 tbu/m+3-tbu) 3. tert-butyl 2-brom-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-karboksylat 3

19 1 I en 0 ml perfluoralkoksy-kolbe-kolbe tilsettes (bis(2- metoksyetyl)amino)svoveltrifluorid (,16 ml, 27,96 mmol) i tørt tetrahydrofuran (3, ml). Deretter tilsettes tert-butyl 2'-brom-4'-okso-spiro[piperidin-4,7'- tieno[2,3-c]pyran]-1-karboksylat (4, g, 11,19 mmol). Løsningen omrøres ved 70 C natten over. Etter dette tidspunktet tilsettes metyl-t-butyleter (30 ml), og reaksjonsblandingen helles forsiktig over natriumbikarbonat (mettet vandig løsning) avkjølt i et isbad. CO 2 utvikling observeres, og natriumbikarbonat (mettet vandig løsning) tilsettes inntil ph 8. Blandingen ekstraheres med metylt-butyleter. Organisk sjikt dekanteres, vaskes med saltløsning (2 x), tørkes over magnesiumsulfat og løsemidlet avdampes under redusert trykk. Råmaterialet renses ved normalfase-isco-kromatografi eluerende med metyl-tbutyleter/heksan for å gi 3,2 g tert-butyl 2-brom-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3- c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat. MS (m/z): 368/370 (M+1-tBu/M+3-tBu). 4. tert-butyl 2,4,4-trifluorspiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'- karboksylat 2 30 2, M butyllitium i heksan (47 ml) settes til over en løsning av tert-butyl 2- brom-4,4-difluor-spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat (1,99 g, 4,69 mmol) i tetrahydrofuran (0 ml) under nitrogen og at -78 C. Blandingen omrøres ved -78 C i 1 time og fast N-fluor-benzensulfonimid (3,69 g,11,73 mmol) tilsettes. Blandingen tillates å oppvarmes til romtemperatur og omrøres ved romtemperatur natten over. Mettet vandig løsning av ammoniumklorid tilsettes, og den organiske fasen ekstraheres med etylacetat, tørkes over natriumsulfat og løsemidlet elimineres under redusert trykk. Råmaterialet renses ved normalfase-isco-kromatografi (heksan/etylacetat 3 12 %) for å gi 1,3 g tert-butyl 2,4,4-trifluorspiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat som renses ytterligere ved HPLC for å oppnå 0,818 g av den forbindelsen. MS (m/z): 308 (M+1-tBu).. 2,4,4-trifluorpiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] 3 t-butyl 2,4,4-trifluorspiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin]-1'-karboksylat (2,00 g,,0 mmol) løses i saltsyre (4N i dioksan) ( ml, 40 mmol). Blandingen omrøres ved romtemperatur i 1h og passeres deretter gjennom en

0 g SCX-patron (fast kationebytte) for å gi 1,3 g av tittelforbindelsen etter inndamping av 2 N ammoniakk i metanolfraksjon. MS (m/z): 264 (M+1). Fremstilling 7: 2-klor-4,4-difluor-1'-[(3-metyl-1H-pyrazol-4- yl)metyl]spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin] 1 Forbindelsene ifølge fremstilling 8 11 fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 7 ved anvendelse av 1,2-dikloretan som løsemiddel. Prep. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%): Fysiske data: (m/z) MS 8 I en løsning av 2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran-7,4'-piperidin ( g, 37 mmol) i tetrahydrofuran (1,8 l) tilsettes 3-metyl-1H-pyrazol-4- karbaldehyd (43,40 g, 394,12 mmol), og blandingen omrøres ved romtemperatur i 1 h. Deretter tilsettes pulverisert natriumtriacetoksyborhydrid (9,46 g, 40,42 mmol) i 3 porsjoner. Blandingen omrøres ved romtemperatur i 1 h. Deretter helles reaksjonsblandingen over en is-natriumbikarbonat-mettet vandig løsning (400 ml). Fasene separeres. Det vandige sjiktet blir ekstrahert med etylacetat (0 ml). Kombinerte organiske sjikt vaskes med 0 % saltløsning og et faststoff utfelles i den organiske fasen. Organisk fase konsentreres for å gi 170 g av tittelforbindelsen. MS (m/z): 374 (M+1). 2-fluor-1'-[(3-metyl-1H-pyrazol-4- yl)metyl]spiro[4,-dihydrotieno[2,3- c]pyran-7,4'-piperidin] 93 322 (M+1)

21 Prep. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%): Fysiske data: (m/z) MS 9 c]pyran-7,4'-piperidin] 99 338 (M+1) 7,4'-piperidin] 99 38 (M+1) 11 2-klor-1'-[(3-metyl-1H-pyrazol-4- yl)metyl]spiro[4,-dihydrotieno[2,3-2,4,4-trifluor-1'-[(3-metyl-1h-pyrazol- 4-yl)metyl]spiro[H-tieno[2,3-c]pyran- 2-klor-1'-(1H-pyrazol-4- ylmetyl)spiro[4,-dihydrotieno[2,3- c]pyran-7,4'-piperidin] 99 324 (M+1) Fremstilling 12: 2-[4-[(2-klor-4,4-difluor-spiro[H-tieno[2,3-c]pyran- 7,4'-piperidin]-1'-yl)metyl]-3-metyl-pyrazol-1-yl]pyridin-3-karbaldehyd I en ml kolbe tilsettes kopper(i)jodid (1,91 g,,03 mmol), 2-klor-4,4- difluor-1'-[(3-metyl-1h-pyrazol-4-yl)metyl]spiro[h-tieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin] (2 g, 66,87 mmol), kaliumkarbonat (19,60 g, 140,43 mmol), toluen (0 ml) og en stangmagnet. Reaksjonsblandingen avgasses ved vakuum- /etterfyllingssykluser. Deretter tilsettes 2-brom-3-formylpyridin (18,66 g, 0,31 mmol) og trans-n,n'-dimetylsykloheksan-1,2-diamin (3,16 ml,,06 mmol)l.

22 Reaksjonen omrøres ved romtemperatur i minutter. Deretter nedsenkes den i et foroppvarmet oljebad ved 11 C og omrøres i 1 h ved denne temperaturen. Reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur, fortynnes med 300 ml etylacetat og filtreres gjennom celite. Den vaskes med etylacetat (0 ml) og vandig løsning av ammoniumhydroksid (3 %) (4 x 0 ml) for å fjerne kopperspor, og deretter vaskes den med vann (0 ml) og saltløsning (0 ml). Løsning tørkes over natriumsulfat. Løsemidlet avdampes in vacuo for å gi et lys brunt faststoff. Faststoffet ble filtrert gjennom en pute av silikagel ved anvendelse av 2-propanol/diklormetan (3 % til % av 2-propanol) som eluent for å gi tittelforbindelsen i 69 % utbytte. MS (m/z): 479 (M+1). Fremstilling 13: 2-[4-[(2-fluorspiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]-1'-yl)metyl]-3-metyl-pyrazol-1-yl]pyridin-3-karbaldehyd 1 Forbindelsen ifølge fremstilling 13 fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 12 ved anvendelse av 2-brompyridin-3-karbaldehyd og 2-fluor-1'- [(3-metyl-1H-pyrazol-4-yl)metyl]spiro[4,-dihydrotieno[2,3-c]pyran-7,4'- piperidin]. Resten renses ved normalfase-isco-kromatografi for å gi 83 % av tittelforbindelsen. MS (m/z): 427 (M+1). Fremstilling 14: N-[(2-klor-3-pyridyl)metyl]acetamid 2 I en løsning av (2-klor-3-pyridyl)metanamin (300 mg, 2, mmol) i diklormetan (2 ml) ved romtemperatur tilsettes eddiksyreanhydrid (198,88 µl, 2, mmol) og trietylamin (293,26 µl, 2, mmol). Reaksjonen stanses etter 1 h med mettet

23 vandig natriumbikarbonatløsning og ekstraheres med diklormetan. Det organiske sjiktet ble separert, tørket over magnesiumsulfat og løsemidlet avdampet in vacuo for å gi 184 mg N-[(2-klor-3-pyridyl)metyl]acetamid. MS (m/z): 18 (M+1) Fremstilling 1: (2-brom-3-pyridyl)metylmetansulfonat 1. (2-brom-3-pyridyl)metanol 1 I en 2 l rundbunnet kolbe (utstyrt med stangmagnet, under nitrogen og ved 0 C) inneholdende 2-brom-3-pyridin-karboksaldehyd (22,1 g, 119,08 mmol) og metanol (0 ml) tilsettes natriumborhydrid (1,3 g, 3,72 mmol) i tre porsjoner. Etter 1 h ved 0 C tilsettes vann (0 ml), og reaksjonen konsentreres under redusert trykk for å fjerne metanolen. Den resulterende resten løses i etylacetat og vaskes med vann (0 ml). Den organiske ekstraheringen vaskes med saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat, filtreres og konsentreres for å gi 22 g (2-brom-3-pyridyl)metanol som et hvitt faststoff. MS (m/z): 188 (M+1), 190 (M+3). 2. (2-brom-3-pyridyl)metylmetansulfonat 2 Trietylamin (8,90 ml) tilsettes en rundbunnet kolbe inneholdende en løsning av (2-brompyridin-3-yl)metanol (8 g, 42, mmol) i diklormetan (212 ml) ved 0 C, deretter tilsettes metansulfonylklorid (3,9 ml), og blandingen omrøres ved denne temperaturen i 1, h. Etter dette tidspunktet vaskes blandingen med vann og organisk sjikt dekanteres, tørkes over magnesiumsulfat og løsemiddel avdampes under redusert trykk for å gi,4 g av tittelforbindelsen, som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 266, 268 (M+1; M+3). Fremstilling 16: 2-(2-brom-3-pyridyl)propan-2-ol 30

24 Litiumdiisopropylamid (2M, 12, ml, 2 mmol) løses i tetrahydrofuran (40 ml) og avkjøles til 78 C. 2-brompyridin (3,9 g, 2 mmol) tilsettes dråpevis og reaksjonen omrøres i 3 h før tilsetning av aceton (1 ml, tørkes over nylig aktiverte molekylsiler) og tillates oppvarming til romtemperatur. Reaksjonen stanses med mettet ammoniumklorid og ekstraheres med etylacetat. Det organiske sjiktet tørkes over magnesiumsulfat og avdampes. Resten renses ved flash kolonnekromatografi på silika, eluerende med % heksan/tertbutylmetyleter for å gi tittelforbindelsen (1,4 g, 26 %). 1 H-NMR (d 6 - dimetylsulfoksid): 8,23 (dd, J=1,9, 4, Hz, 1H), 8,19 (dd, J=2,0, 7,8 Hz, 1H), 7,44 (dd, J=4,, 7,7 Hz, 1H),,43 (s, 1H), 2,12 (s, 1H), 1,46 (s, 6H). Fremstilling 17: Etyl 3-metyl-1H-pyrazol-4-karboksylat 1 Svovelsyre (18 ml, 337,69 mmol) tilsettes i en suspensjon av 1H-pyrazol-4- karboksylsyre, 3-metyl- ( g, 79,29 mmol) i etanol (90 ml), og blandingen omrøres ved 8 C i h. Etter dette tidspunktet blir løsemiddelet delvis fjernet. Resten gjøres basisk med 1M natriumhydroksidløsning til ph 6 7 og ekstraheres med diklormetan. Organisk sjikt dekanteres, tørkes over magnesiumsulfat og løsemiddel avdampes under redusert trykk for å gi,3 g av tittelforbindelsen, som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 1 (M+1). Fremstilling 18: Metyl-2-fluorpyridin-3-karboksylat 2 30 2 M litiumdiisopropylamid (11,3 ml, 22, mmol) tilsettes langsomt over en løsning av 2-fluorpyridin (2 g,, mmol) i tetrahydrofuran (90 ml) under nitrogenatmosfære ved 78 C. Etter 4 h ved denne temperaturen tilsettes metylklorformat (1,9 ml, 24,6 mmol), og blandingen omrøres i ytterligere en time ved 78 C og tillates å nå romtemperatur natten over.

2 Reaksjonsblandingen helles langsomt over vann og ekstraheres i dietyleter. Organisk sjikt vaskes med saltløsning, tørkes over natriumsulfat og løsemiddel avdampes in vacuo. Resten renses ved normalfase-isco-kromatografi eluerende med heksan/dietyleter (9/1) for å gi 49,2 mg av tittelforbindelsen. MS (m/z): 16 (M+1). Fremstilling 19: 1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-metyl-pyrazol-4-karbaldehyd 1 Kalium-t-butylalkohol (29,2 g, 260,68 mmol) tilsettes i en løsning av 3-metyl- 1H-pyrazol-4-karbaldehyd (26,00 g, 236,12 mmol) i dimetylformamid ( ml) avkjøles med et vannbad. Blandingen omrøres ved romtemperatur i min. Deretter tilsettes 2,3-difluorpyridin (2 g, 217,24 mmol), og blandingen omrøres ved romtemperatur i h. Blandingen helles over en is-/vannblanding og ekstraheres i etylacetat (3 x ml). Organiske stoffer tørkes over magnesiumsulfat og løsemiddel avdampes in vacuo. Resten renses ved silikagelkromatografi ved anvendelse av heksan/isopropylalkohol som eluent for å gi et råmateriale med resterende dimetylformamid. Materialet løses deretter i etylacetat (0 ml) og vaskes med vann (3 x ml). Vandig fase ekstraheres med etylacetat (2 x ml). De kombinerte organiske fasene tørkes over natriumsulfat og konsentreres for å gi 19 g av tittelforbindelsen. MS (m/z): 6 (M+1). Fremstilling : 2-(4-formyl-3-metyl-pyrazol-1-yl)pyridin-3-karbonitril 2 Forbindelsen ifølge fremstilling fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 19 ved anvendelse av 3-metyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd og 2-

1 En blanding av 3-metyl-1H-pyrazol-4-karbaldehyd (300 mg, 2,72 mmol), kaliumkarbonat (6 mg, 4,08 mmol), metyl 2-fluorpyridin-3-karboksylat (07 mg, 3,27 mmol) og dimetylformamid (2 ml) omrøres ved 60 C i 16 h. Vann tilsettes og forbindelsen ekstraheres i etylacetat. Det organiske sjiktet vaskes med saltløsning, tørkes over natriumsulfat og løsemiddel avdampes. Den ubearbeidede blandingen renses ved normalfase-isco-kromatografi ved anvendelse av heksan:etylacetat, 2:1 som eluent for å gi 422 mg av tittelforbindelsen. MS (m/z): 246 (M+1). Forbindelsen ifølge fremstilling 22 23 kan være i hovedsak fremstilt som beskrevet i fremstilling 21 ved anvendelse av den tilsvarende 2- klorpyridylreagenten. Prep. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%) Fysiske data: (m/z) MS 22 26 fluorpyridin-3-karbonitril. Tittelforbindelsen oppnås med et utbytte på 23 %. MS (m/z): 213 (M+1). Fremstilling 21: Metyl 2-(4-formyl-3-metyl-pyrazol-1-yl)pyridin-3- karboksylat N-[[2-(4-formyl-3-metyl-pyrazol- 1-yl)-3-pyridyl]metyl]acetamid 6 29 (M+1)

27 Prep. nr. Kjemisk navn Struktur Utbytte (%) Fysiske data: (m/z) MS 23 Etyl-1-(3-formyl-2-pyridyl)-3- metylpyrazol-4-karboksylat 2 260 (M+1) Fremstilling 24: 1-[3-(dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol- 4-karbaldehyd 1. Etyl-1-[3-(dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat 1 Denne forbindelsen fremstilles i hovedsak som beskrevet i fremstilling 7 ved anvendelse av etyl-1-(3-formyl-2-pyridyl)-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat og dimetylamin i et 9 % utbytte og anvendes uten ytterligere rensing etter bearbeiding. MS (m/z): 289 (M+1) 2. 2. [1-[3-(dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4- yl]metanol I en løsning av etyl-1-[3-(dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4- karboksylat (217,7 g, 0,7 mmol) i tetrahydrofuran ( ml) avkjølt til 0 C og under nitrogen, tilsettes 1 M litiumaluminumhydrid i tetrahydrofuran (0,9 ml, 0,9 mmol), og blandingen omrøres ved denne temperaturen i minutter. Reaksjonen stanses med mettet vandig løsning av ammoniumklorid og råmaterialet ekstraheres med etylacetat. Det organiske sjiktet separeres, tørkes

28 på natriumsulfat og løsemidlet avdampes in vacuo. I dette bestemte eksempelet isoolers ikke forbindelsen i den organiske ekstraheringen og separeres endelig fra den vandige løsningen med en SCX-patron for å gi 146 mg (78 %) [1-[3- (dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4-yl]metanol som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 247 (M+1). 3. 1-[3-(dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4-karbaldehyd 1 3,3,3-triacetoksy-3-iodoftalid (0,3 g, 1,3 mmol) tilsettes i en løsning av [1-[3- (dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4-yl]metanol (0,146 g, 0,9 mmol) i diklormetan (4 ml) ved romtemperatur. Etter én time stanses reaksjonen ved å sette til 2N natriumkarbonatløsning, og forbindelsen ekstraheres i diklormetan. Det organiske sjiktet separeres, tørkes over magnesiumsulfat og løsemidlet avdampes in vacuo for å gi 126 mg 1-[3- (dimetylaminometyl)-2-pyridyl]-3-metyl-pyrazol-4-karbaldehyd som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 24 (M+1). Fremstilling 2: 1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4- karbaldehyd 1. Etyl 3-(brommetyl)-1-(3-fluor-2-pyridyl)pyrazol-4-karboksylat 2 30 l en løsning av etyl-1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-metyl-pyrazol-4-karboksylat (,2 g, 40,9 mmol) i klorbenzen ( ml) tilsettes N-bromsuksinimid (8 g) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen omrøres og bestråles under en 0 W- lampe ved romtemperatur natten over. Deretter tilsettes mer N-bromsuksinimid (2 g), og etter 2 h påvises intet utgangsmateriale. Faststoffer filtreres og løsemiddel avdampes. Råmaterialet renses ved normalfase-isco-kromatografi

29 ved anvendelse av diklormetan og metanol som eluent for å gi,3 g etyl-3- (brommetyl)-1-(3-fluor-2-pyridyl)pyrazol-4-karboksylat. MS (m/z): 328; 330 (M+1; M+3). 2. Isopropyl 1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4- karboksylat 1 I en løsning av etyl 3-(brommetyl)-1-(3-fluor-2-pyridyl)pyrazol-4-karboksylat (1, g, 4,7 mmol), i propan-2-ol (23 ml), tilsettes litiumisopropoksid (3,02 g), og blandingen omrøres natten over ved romtemperatur. Etter dette tidspunktet tilsettes mer litiumisoproksid (4, g) i tre porsjoner på 1, g hver, hver 16. time. Etter den siste tilsetningen omrøres reaksjonsblandingen endelig ved 40 C i 16 timer. Løsemiddel avdampes og resten løses i etylacetat og vaskes med saltløsning. Organisk sjikt dekanteres og tørkes over natriumsulfat. Løsemiddel avdampes og resten renses ved normalfase-isco-kromatografi ved anvendelse av diklormetan og metanol som eluent for å gi 317 mg isopropyl 1-(3-fluor-2- pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4-karboksylat. MS (m/z): 322 (M+1). 3. [1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4-yl]metanol 2 I en løsning av isopropyl 1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4- karboksylat (316 mg, 0,98 mmol) i dietyleter (4,9 ml) under nitrogen og avkjølt til 0 C, tilsettes 1M litiumaluminiumhydrid i tetrahydrofuran (1,2 ml). Reaksjonsblandingen omrøres ved 0 C i 1 t. Vann (46 µl) tilsettes og omrøres i min, deretter tilsettes 1 % vandig løsning av NaOH (46 µl) og vann (138 µl) i rekkefølge. Faststoffer filtreres og løsemiddel avdampes for å oppnå 241 mg [1- (3-fluor-2-pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4-yl]metanol som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 266 (M+1). 4. 1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-[isopropoksymetyl]pyrazol-4-karbaldehyd 30 3 En blanding av [1-(3-fluor-2-pyridyl)-3-(isopropoksymetyl)pyrazol-4-yl]metanol (241 mg; 0,91 mmol) og mangan(iv) oksid (791 mg) omrøres i diklormetan ( ml) ved romtemperatur natten over. Etter dette tidspunktet filtreres reaksjonsblandingen over celite og løsemiddel avdampes for å oppnå 197 mg av tittelforbindelsen, som anvendes uten ytterligere rensing. MS (m/z): 264 (M+1).