Analysering av HbA1c vurdering av unormale kromatogram sammen med hematologiske parametere BFI 19. mai 2015 v/ bioingeniør Gro Nielsen. Hva er HbA1c?

Størrelse: px

Begynne med side:

Download "Analysering av HbA1c vurdering av unormale kromatogram sammen med hematologiske parametere BFI 19. mai 2015 v/ bioingeniør Gro Nielsen. Hva er HbA1c?"

Benedicte Holm
8 år siden
Visninger:

1 Analysering av HbA1c vurdering av unormale kromatogram sammen med hematologiske parametere BFI 19. mai 2015 v/ bioingeniør Gro Nielsen Hva er HbA1c? Normalt hemoglobin hos voksne består av 2 alfakjeder og 2 bettakjeder med hver sine hemegrupper (Fe++). Glykosylert hemoglobin (HbA1c) er et glykoprotein dannet ved en irreversibel reaksjon mellom glukose og bettakjeden i hemoglobinet. Verdien reflekterer det gjennomsnittlige blodglukosenivået de siste 6-10 ukene før prøvetaking. HbA1c avhenger av normal levetid for erytrocyttene. Nedsatt levetid gir falsk for lave resultater. Hemolytiske anemier, medikamenter,eks Rivavirin (hep.c). 2 1

Glykosylert hemoglobin (HbA1c) er et glykoprotein dannet ved en irreversibel reaksjon mellom glukose og bettakjeden i hemoglobinet.

2 Changes in globin expression during embryonic, fetal and adult life α-chain γ-chain β-chain HbA1 HbA2 HbF δ-chain 0-6 months Birth 6 months 3 HbA1c diagnostisk test Kriterier: HbA1c > 6,5 % Fastende glukose >7,0 mmol/l (hvis ikke HbA1c kan benyttes) 2 timers venøs glukose etter 75 g oral glukose >11,1 mmol/l. 4 2

HbA1c diagnostisk test Kriterier: HbA1c > 6,5 % Fastende glukose >7,0 mmol/l

3 Instrument - TOSOH G8 Kolonne 3 elueringsbuffere Hemolyseløsning 250 prøver pr. døgn 4µL blod fortynnes med hemolyseløsning, 1:200. De ulike Hb-fraksjonene bindes til kolonnen. Elueringsbufferne drar med seg fraksjonene som er bundet, til detektoren. 5 Analysekvalitet - presisjon CVa (langtidscv): HbA1c nivå ca 6 %: CVa= 0,7 %. Kontrollmateriale, EDTA-blod HbA1c nivå ca 9 %: CVa= 1,0 %. Kommersiell kontroll, liquid. Kontrollmaterialene er uavhengige, dvs ikke fra instrumentleverandør. Tillatt total feil: TEa = 3-4 % 6 3

5 Analysekvalitet - presisjon CVa (langtidscv): HbA1c nivå ca 6 %: CVa= 0,7 %.

4 Analysekvalitet - riktighet Ekstern kvalitetsvurdering (Noklus) Bias ca +2 % (med ny TOSOH kalibrator). Ingen faktorisering på AHUS. Biaskrav +/- 2,3 % ved kolonnebytter. Små kolonnelot-variasjoner. 7 Normalt HbA1c- kromatogram *6 topper *Retensjonstid ok *Areal ok *Teoretisk plateverdi ok økende bindingsstyrke til kolonnen 8 Retensjonstid i min. 4

5 Hemoglobinopatier Syntesesvikt Talassemier (β og α) Mutasjoner i kjedene Ulike varianter (D, S, C og E) 9 Thalassemi vs hemoglobinvariant β - globinkjede α - globinkjede Normal β-thalassemi α-thalassemi Hb-variant 10 5

Thalassemi vs hemoglobinvariant β - globinkjede α -

6 Forekomst av hemoglobinopatier (Etnisk norske har ingen) Talassemier HbD HbC HbS HbE 11 Unormale kromatogram hemoglobinopati? Hva kan fanges opp med HbA1c kolonnene? β-talassemi minor β-talassemi major Fanges opp dersom HbF er litt forhøyet og hematologiske parametere samt etnisitet tilsier at det kan være talassemi. Gir kjempehøye HbF Ulike hemoglobinvarianter Gir >6 topper: HbD, HbS, HbC, HbE og varianter som gir uklassifiserte ekstratopper. α- talassemier fanges ikke opp med kromatografi. Gentester. 12 6

β-talassemi minor β-talassemi major Fanges opp dersom HbF er litt forhøyet og hematologiske parametere samt etnisitet tilsier

7 Unormale kromatogram - Hvilke parametere vurderes? β-talassemi minor (jernmangel ferritin??) β-talassemi major *HbF (evt hemoglobintyping) *Hb *MCV *MCH *RDW *Morfologiske funn *Etnisitet *HbF (evt hemoglobintyping) *Hb *MCV *MCH *RDW *Morfologiske funn *Etnisitet *Lett forhøyet HbF (evt høy A2) *Normal eller litt lav *<70 (ofte veldig lave) *<27 *Normal *Evt. target celler Sør-øst Asia Kjempehøy HbF (>70 %) Lav Lav Lav Forhøyet (blodoverføringer) Target celler/anisopoikilocytose Sør-øst Asia Ulike hemoglobinvarianter HbD, HbS, HbC, HbE. Kombinerte hemoglobinopatier? (Hb, MCV osv) >6 topper. HbSS gir sigdceller. Ellers normale hematologi funn. Kombinerte patier? Lav MCV 13 Sannsynlig D-variant Hemoglobinopatier- varianter HbD HbA1c kan gis ut med tillegg: Funn av variant. Som regel normale hematologiresultater 14 7

høy A2) *Normal eller litt lav *<70 (ofte veldig lave) *<27 *Normal *Evt.

8 Sannsynlig S- variant Hemoglobinopatier- varianter HbS HbA1c kan gis ut med tillegg: Funn av variant. Som regel normale hematologiresultater. Evt sigdceller 15 Hemoglobinopatier- varianter Sannsynlig C- variant 16 8

9 Sannsynlig E- variant Hemoglobinopatier- varianter (HbA2 > 10%) Tillegg til svaret: Utført på alternativ metode. Funn av variant. 17 Hemoglobinopatier- føtalt hemoglobin ( ) Økt mengde HbF (lite barn) HbA1c kan gis ut. HbF= <15 % 18 9

10 Hemoglobinopatier- Talassemi β- Talassemi minor (og diabetes): OBS! Diabetes med lav HbA1C. Nedsatt levetid på RBC? Hb,MCV, MCH, RDW?? HbA1c kan ikke rapporteres. HbF+ LabilA1c >15 %. 19 Hb-typing. Normalt kromatogram HbA0 Talassemi major? HbF > 70 % Talassemi minor? HbA2 > 4 % Hemoglobinvarianter (hetero/homozygot) 20 10

? HbA1c kan ikke rapporteres. HbF+ LabilA1c >15 %. 19 Hb-typing.

11 HbE på TOSOH G8 - kombinert hemoglobinopati? Pasient NN Høy HbA2 (HbE) HbE + høy HbA2?? 21 HbE på kapillærelektroforese HbE og HbA2 topp Pasient NN HbA

12 Takk for oppmerksomheten! 23 12

Like dokumenter

Analysering av HbA1c med kromatografisk metode

Analysering av HbA1c med kromatografisk metode BFI 03. februar 2015 v/ Gro Nielsen (AHUS) Hva er HbA1c? Normalt hemoglobin består av 2 alfakjeder og 2 bettakjeder Glykosylert hemoglobin (HbA1c) er et glykoprotein