PRINSIPPER PENTRA 120

Transkript

1 ABX Pentra 120

2 PRINSIPPER PENTRA 120 Tre ulike analyseprinsipp kombineres: Motstand (impedans) Cytokjemi (spesifikk farging) Optisk måling (absorbans)

3 Pentra har 4 kanaler: RBC/PLT-kanal Teller antall erytrocytter og trombocytter WBC/Hb-kanal Teller antall leukocytter og måler Hb BASO-kanal Teller anatll leukocytter og basofile LMNE (matrix) kanal: Diff.telling av neutro, mono, eos, lymfo, ALY og LIC

4 Flowdiagram Pentra

5 Prinsipp for RBC/PLT-kanal : Blod blandes med fortynningsvæske i RBC/PLT målekammer Fortynningen suges gjennom aperturet Erytrocytter og trombocytter telles v.h.a. motstandsprinsipp Cellene plottes i histogrammer etter størrelse RBC parametrene HCT, MCV, MCH, MCHC og RDW beregnes PLT parametrene PCT, PDW og MPV beregnes

6 Prinsipp for WBC/Hb-kanal Blod blandes med fortynningsvæske i WBC/Hb målekammer Erytrocytter og trombocytter lyseres med lysereagens Leukocyttene telles med motstandsprinsipp Hb måles fotometrisk v.h.a. modifisert cyanmethemoglobinmetode (Abs leses ved 550 nm)

7 Resultater fra RBC/PLT-kanal og WBC/Hb-kanal

8 Flowdiagram Pentra:

9 Prinsipp for BASO-kanal Blodet blandes med BASOLYSE i BASOkammer Erytrocytter og trombocytter lyseres Alle leukocytter (bortsett fra basofile) strippes for membran og cytoplasma Basofile og leukocyttkjerner telles med motstandsprinsipp Resultatet (dvs basofile og totalt antall WBC plottes i histogram

10 Resultat BASO-kanal

11 Prinsipp LMNE (MATRIX)-kanal Blodet blandes med et farge- og fikseringsreagens EOSINOFIX i LMNEkammer Hemolyse av RBC og PLT Leukocyttene fikseres i opprinnelig form og størrelse Eosinofile farges spesifikt

12 LMNE (MATRIX)- kanalen forts Cellefortynningen ledes gjennom flowcellen og cellene måles på to måter: Motstandsmåling av cellenes volum Absorbansmåling av cellenes struktur/kompleksitet

13 Oppgave: Hva er prinsippet for: - telling av RBC og PLT på Pentra? - telling av LPK? - telling av basofile? - telling av neutrofile, monocytter, lymfocytter og eosinofile? - måling av hemoglobin?

14 Prinsipp for LMNE-kanalens flowcelle: Celle-fortynningen ledes gjennom flowcellen ved hjelp av to hjelpeløsninger. Leukocyttene legger seg på rekke og rad - og måles en og en. Alle cellene telles to ganger: -motstandsmåling -absorbansmåling

15 Prinsipp for flowcelle, forts Den første tellingen skjer ved motstandsprinsipp når cellene passerer en kapillæråpning, og cellenes volum registreres. Den andre målingen skjer ved at cellene bestråles med monokromatisk lys (laser). Cellene vil i varierende grad absorbere og spre lys, og dette gjenspeiler cellenes struktur og kompleksitet.

16 Resultater LMNE- kanal Motstands- og absorbansverdi for hver enkelt celle plottes i en matrix, med motstand (volum) på x-akse og absorbans (kompleksitet) på y-akse). Matrix er inndelt i bokser som tilsvarer ulike cellepopulasjoner. Kompleksitet/ absorbans Volum/impedanse

17 Lymfocytter Små celler (= liten motstand) Tett, rund kjerne og homogen struktur (=liten lysspredning og absorbans) Lymfocyttene havner dermed i nedre del av både absorbans- og volum-akse

18 Monocytter Store celler (= stor motstand) Stor kjerne med noe uregelmessig form og struktur (= middels absorbans og lysspredning)

19 Neutrofile granulocytter Middels store celler Lappedelt kjerne, og granula i cytoplasma gir stor lysspredning og absorbans.

20 Eosinofile granulocytter Middels store celler Spesifikk farging gir høy absorbans

21 LIC (Large Immature Cells) Umodne celler er vanligvis store Umodne celler har stor kjerne og uregelmessig kjernestruktur Kan være blaster, myelocytter, metamyelocytter

22 ALY - Atypiske lymfocytter Store/middels store celler Homogen kjerne Kan være reaktive lymfocytter, plasma celler, (eller små blaster)

23 Matrixet er egentlig tredimensjonalt,dvs angir cellene størrelse, struktur og mengde Hver prikk representerer en celle Jo tettere de ligger jo flere celler er det i den aktuelle populasjon

24 Flagg og alarmer Ulike flagg og alarmer vil varsle om unormale resultater eller problemer under analyseringen resultat utenfor referanseområdet unormal cellemorfologi tekniske problemer

25

26 Hvilke celler befinner seg i de ulike delene av cytogrammene? Hvilke resultater og cytogrammer hører sammen?

27 Første cytogram viser en normal prøve. Greier du å se hva som er hhv Lymfatisk leukemi? Eosinofili? Myelogen (granulocytt) leukemi?