Differensialtelling av prøver med lave leukocytter på CellaVision DM96

Transkript

1 Differensialtelling av prøver med lave leukocytter på CellaVision DM96 Lamya Garabet 1, Siri Lund Støtterud 1, Siri Grønsleth 1, Erik Kolberg Amundsen 2, Tor-Arne Hagve 1 1 Tverrfaglig laboratoriemedisin og medisinsk biokjemi, Akershus universitetssykehus, 2 Avdeling for medisinsk biokjemi, Oslo universitetssykehus, Ullevål 1

2 Manuell differensialtelling Gullstandard Tidskrevende Behov for høy kompetanse 2

3 CellaVision DM96 Automatisert mikroskop for differensialtelling av leukocytter i blod og andre kroppsvæsker, samt karakterisering av erytrocytter. Viktig grunnlag for rask og nøyaktig diagnostisering. Sikrer effektiv arbeidsflyt og kompetanseutvikling. 3

4 Systemets funksjonalitet Mottar ordreinformasjon og sender resultater til LIS. Skanner, lokaliserer og tar bilder av celler som oppdages på blodutstryk. Lagrer bildene og resultatene i en database. Presenterer et oversiktsbilde av et brukerdefinert område på objektglass. 4

5 Preklassifisering 5

6 Etter reklassifisering 6

7 y-individual-cells.gif 7

8 Tidligere studier Yamamoto et al (Tokyo, Japan) Performance evaluation of the CellaVision DM96 system in WBC differentials Rinsho Byori patients Good correlation coefficients between CellaVision and manual differentials Briggs et al (London, UK) Can automated blood film analysis replace the manual differential? An evaluation of the DM96 International Journal of Laboratory Hematology (2009) 136 samples of various condition of which 45 normal, range x 10 9 /L Precision was similar to that of the 100-cell manual differential. DM96 was faster Cornet et al (Caen, France) Performance evaluation and relevance of the CellaVision DM96 in routine analysis and in malignant hematological diseases International Journal of Laboratory Hematology (2007) 440 patients with quantitative and/or qualitative abnormalities detected by Sysmex Very good correlation coefficients observed between DM96 and manual, accuracy is excellent. Ceelie et al (The Netherlands) Examination of peripheral blood films using automated microscopy; evaluation of Diffmaster Octavia and Cellavision DM96 J Clin Pathol samples flagged for microscopical review, WBC ranged x 10 9 /L Good correlation. Analysis time was 3.2 min/slide. Kratz et al (Boston, USA) Performance evaluation of the Cellavision DM 96 system Am J Clin Pathol slides with abnormal findings (some with very low WBC count) Performance of CellaVision is at least equal to that of direct microscopy 8

9 Mål Undersøke nytten av differensialtelling på CellaVision DM96 i prøver med lave leukocytter sammenlignet med manuell differensialtelling og telling på Sysmex XE

10 Metode - Blodprøver (n=71) med lave leukocytter (gjennomsnitt 1,95 x 10 9 /L, range 0,13-3,96 x 10 9 /L), analysert rutinemessig på Sysmex. - To blodutstryk ble laget av hver prøve. - Manuell telling ble utført av en bioingeniør. - Differensialtelling/ pre-klassifisering på CellaVision ble enten bekreftet eller reklassifisert av en lege 10

11 CellaVision-Lymphocytes CellaVision-Lymphocytes CellaVision-Neutrophils CellaVision-Neutrophils Differensialtelling av prøver med lave WBC på CellaVision sammenlignet med telling manuelt og på Sysmex Identity Identity 1 Passing & Bablok (I) fit ( x) 1 Passing & Bablok (I) fit ( x) Manual-Neutrophils Sysmex-Neutrophils Identity 1.5 Identity 1 Passing & Bablok (I) fit ( x) 1 Passing & Bablok (I) fit ( x) Manual-Lymphocytes Sysmex-Lymphocytes 11

12 CellaVision-Eosiniphils CellaVision-Eosinophils Cellavision-Monocytes CellaVision-Monocytes Differensialtelling av prøver med lave WBC på CellaVision sammenlignet med telling manuelt og på Sysmex Identity 1 Identity Passing & Bablok (I) fit ( x) Passing & Bablok (I) fit ( x) Sysmex-Monocytes Manual-Monocytes Scatter Plot with Passing & Bablok Fit Scatter Plot with Passing & Bablok Fit Identity 0.25 Identity Passing & Bablok (I) fit ( x) 0.15 Passing & Bablok (I) fit ( x) Sysmex-Eosinophils Manual-Eosinophils 12

13 Korrelasjon Korrelasjonskoeffisient (r) mellom differensialtelling på CellaVision sammenlignet med Sysmex og manuell telling varierte fra 0,91-0,98 bortsett fra korrelasjon mellom CellaVision og manuell for basofile r=0.59. CellaVision Nøytrofile Lymfocytter Monocytter Eosinofile Basofile Sysmex Manuell P-verdi < < < < <

14 Telling av nøytrofile ved preklassifisering og etter reklassifisering på CellaVision Korrelasjonskoeffisient (r) = 0,93 (p<0,0001). 14

15 CV fra duplikat tellinger for å vurdere reproduserbarhet n nummer av duplikater, x 1 og x 2 duplikat tellinger Literature: Jones R, Payne B (1997) Clinical investigation and statistics in laboratory medicine. London: ACB Venture Publications. 15

16 Reproduserbarhet for de ulike cellepopulasjoer på CellaVision og manuell basert på duplikat tellinger Nøytrofile Lymfocytter Monocytter Eosinofile Basofile CellaVision (reklassifisering) 12% 12% 31% 80% 148% Manuell 13% 8% 23% 41% 96% 16

17 Oppsummering God korrelasjon mellom differensialtelling på CellaVision sammenlignet med Sysmex og manuell telling og mellom telling av nøytrofile ved preklassifisering og etter reklassifisering. Regresjonsanalyser viser godt samsvar mellom metodene. Sammenligning av reproduserbarhet mellom manuell telling og CellaVision viser at CV er omtrent på samme nivå for nøytrofile og lymfocytter, men for de andre populasjonene er CV høyere for CellaVision. 17

18 Konklusjon I prøver med lave leukocytter er differensialtelling på CellaVision etter reklassifisering god sammenlignet med manuell differensialtelling med unntak av basofile. CellaVision er et pålitelig instrument for å utføre differensialtelling i prøver med lave leukocytter og kan brukes i den daglige rutinen der det er behov for en manuell differensialtelling. 18