ProGRP. Progastrin-frigivende peptid. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 ms_6969v orsk Viktig Den målte -verdien på en pasientprøve kan variere avhengig av analysemetode. Laboratorieresultater bør derfor alltid inneholde en opplysning om den brukte -analysemetoden. -verdier målt på pasientprøver ved hjelp av forskjellige analysemetoder er derfor ikke direkte sammenlignbare og kan gi feilaktige medisinske tolkninger. Hvis -analysemetoden endres under terapeutisk monitorering, skal de oppnådde -verdiene ved skifte til den nye metoden bekreftes ved parallelle målinger med begge metodene. Tilsiktet bruk Immunologisk analyse til kvantitativ bestemmelse av i humant plasma og serum. Analysen brukes som en hjelp i differensialdiagnose ved lungekreft og i behandling av pasienter med småcellet lungekreft sammen med andre kliniske metoder. Resultatene skal sees i sammenheng med andre metoder i overensstemmelse med standard kliniske retningslinjer. Elektrokjemiluminescensimmunoassay ECLIA brukes på de immunologiske analyseinstrumentene Elecsys og cobas e. Sammendrag Gastrinfrigivende peptid (GRP) er et viktig regulatorisk molekyl som er involvert i en rekke fysiologiske og patofysiologiske prosesser hos mennesker. Det er et tarmhormon og det mammalske motstykke av amfibie bombesin, opprinnelig isolert fra grisemage 2 og fordelt i stort omfang i det mammalske nervesystemet, så vel som i lungene og magetarmkanalen. Dets 48 aminosyre preproprotein, blir etter videre spalting med et signalpeptid prossesert til å danne 27 aminosyre GRP og 68 aminosyre. På grunn av den korte halveringstiden på 2 minutter, er det ikke mulig å måle GRP i blod. 4 Det ble derfor utviklet en analyse for måling av ( 98), en felles karboksyterminal region for tre typer av humane -varianter. Det ble påvist at nivåer av ( 98) i serum fungerer som en pålitelig biomarkør hos pasienter med småcellet lungekreft (SCLC). 2,,6,7 Elecsys -analysen måler ( 98) i plasma og serum. og neuronspesifikk enolase (SE) er to molekyler som assosieres med nevroendokrine vev og tumorer. Forhøyede konsentrasjoner av er sett i flere nevroendokrine tumorer, inkludert småcellet lungekreft, karsinoider, udifferensierte store karsinomer i lungene med nevroendokrine funksjoner, medullær thyreoideakarsinom, 8 andre nevroendokrine kreftformer 8 og i en undergruppe av androgen-uavhengig prostatakreft med nevroendokrine funksjoner. 9 i godartede sykdommer: Serumkonsentrasjoner av på mellom 2 og anses som normalt i litteraturen. I en studie på pasienter med godartede sykdommer (unntatt de med nyresvikt) inkludert leversykdommer ble det imidlertid funnet unormale serumnivåer > i 2. av pasientene. Alle nivåer var < 8. yresvikt er den eneste viktige kilden til forhøyede verdier av denne biomarkøren. Forhøyede nivåer av er høyspesifikk for SCLC og sees på som den mest sensitive biomarkør for SCLC sammenlignet med godartede sykdommer i lunge. 2 En klinisk studie med Elecsys -analysen (nærmere beskrevet i avsnittet "Referanseintervaller") bekreftet den høye spesifisiteten for SCLC i differensialdiagnostikk. i lungekreft: sees på som en spesifikk biomarkør for SCLC, men unormale nivåer kan sees i en liten undergruppe av pasienter med ikke-småcellet lungekreft (SCLC). Disse konsentrasjonene er signifikant lavere enn det -serumnivået funnet hos pasienter med SCLC. 7 serum nivåer korrelerer med tumorstadium. Elecsys 2 MODULAR AALYTICS E7 cobas e 4 cobas e 6 cobas e 62 i differensaldiagnose av lungekreft: Høye nivåer av (> 2 ) funnet hos lungekreftpasienter (uten nyresvikt) indikerer en høy sannsynlighet for SCLC. i kreftformer unntatt lungekreft: Forhøyede -serumnivåer sees hovedsakelig hos pasienter med SCLC eller nevroendokrine tumorer. 4 Forhøyet -nivå hos pasienter med godt differensierte nevroendokrine tumorer indikerer en primærtumor i lungen og er en faktor for dårlig prognose. Litt forhøyede serum nivåer sees hos pasienter med andre kreftformer uten nyresvikt, og 99.7 av dem hadde nivåer <. Ved bruk av cutoff på som et av kriteriene, vil forutse en diagnose av SCLC med en sensitivitet på 72.. ved monitorering av SCLC-pasienter: Flere forskere har rapportert at er nyttig i monitorering av behandlingen av SCLC-pasienter og for påvisning av tilbakevendende sykdom 6,7 En klinisk studie med Elecsys -analysen (nærmere beskrevet i avsnittet "Referanseintervaller") bekreftet nytten av denne biomarkør i behandling- og oppfølging av behandling med forskjellige behandlingsregimer. er foreslått som den foretrukne biomarkør ved SCLC. Dette supporteres av sensitiviteten for i SCLC så vel som spesifisitet i andre kreftformer, normalverdier sett i de fleste sykdommer, foruten nyresvikt og fraværet av falske positive resultater som kommer fra hemolyse, i tillegg til den økte diskriminering mellom normalområdet og nivåene funnet hos SCLC-pasienter. SE kan være en utfyllende biomarkør i SCLC og ved å sammenstille SE og vil det føre til en bedre nøyaktighet i den histologiske diagnosen, prognosen og oppfølgingen. 8 er forhøyet i tidlige stadier av SCLC. Fordi forekomsten av SCLC i den generelle befolkningen er lav, er det likevel ikke anbefalt å benytte Elecsys analysen som en screening i den generelle befolkningen. Analyseprinsipp Sandwichprinsipp. Analysens totale varighet: 8 minutter.. inkubasjon: µl prøve, et biotinylert monoklonalt spesifikt antistoff og et monoklonalt spesifikt antistoff merket med et ruteniumkompleks a) danner et sandwichkompleks. 2. inkubasjon: Etter tilsetning av streptavidin-coatede mikropartikler blir komplekset bundet til fast fase via interaksjon mellom biotin og streptavidin. Reaksjonsblandingen suges opp i målecellen hvor mikropartiklene fanges magnetisk på elektrodens overflate. Ubundne stoffer fjernes deretter med ProCell/ProCell M. Ved å sette spenning til elektroden induseres deretter kjemiluminiscensemisjon som måles med en fotomultiplikator. Resultatet bestemmes via en kalibreringskurve som lages instrumentspesifikt med 2 punktkalibrering og en masterkurve, som er lest inn via reagensstrekkoden. a) Tris(2,2'-bipyridyl)rutenium(II)-kompleks (Ru(bpy) ) Reagenser - arbeidsløsninger Reagens rackpack er merket som. M Streptavidin-coatede mikropartikler (gjennomsiktig lokk), flaske, 6. ml: Streptavidin-coatede mikropartikler.72 mg/ml; konserveringsmiddel. 26-6, V 4. orsk / 8

2 ms_6969v4. R R2 Anti--As~biotin (grått lokk), flaske, 9 ml: Biotinylert monoklonalt anti antistoff (mus). mg/l; fosfatbuffer 4 mmol/l, ph 7.; konserveringsmiddel. Anti--As~Ru(bpy) (sort lokk), flaske, 9 ml: Monoklonalt anti antistoff (mus) merket med et ruteniumkompleks 2. mg/l; fosfatbuffer 4 mmol/l, ph 7.; konserveringsmiddel. Forholdsregler og advarsler Til in vitro-diagnostisk bruk. Ta de vanlige forholdsregler som er nødvendig ved håndtering av alle laboratoriereagenser. Fjerning av alle avfallsmaterialer skal følge lokale retningslinjer. HMS-Datablad er tilgjengelig på forespørsel. Unngå skumdannelse i alle reagenser og prøvematerialer (prøver, kalibratorer og kontroller). Reagenshåndtering Reagensene i kittet er samlet i en klar til bruk enhet som ikke kan deles. Alle nødvendige opplysninger for korrekt funksjon leses inn via reagensstrekkodene. Oppbevaring og holdbarhet Oppbevares ved 2 8 C. Må ikke fryses. Oppbevar Elecsys reagenskittet stående for å sikre mikropartiklenes fullstendige homogenitet under den automatiske blanding før bruk. Holdbarhet: uåpnet ved 2 8 C etter åpning ved 2 8 C på analyseinstrumentene inntil den oppførte utløpsdato 2 uker 42 dager Prøvetaking og -forberedelse kan brytes ned i serum av endogene proteaser som genereres under koagulasjonsprosessen. Derfor er ansett å være mer stabil i plasma enn i serum. Plasma er det foretrukne prøvematerialet i følge litteraturen. 9 Det er imidlertid mulig å bruke serum for å utføre Elecsys analysen fordi antistoffene i analysen binder seg i en region som er mindre utsatt for spalting av proteaser. Kun de nedenfor oppførte prøvematerialer er analysert og funnet akseptable. Serum fra standard prøvetakingsrør eller rør som inneholder separasjonsgel. Li heparin, K 2 EDTA og K EDTA plasma samt Li heparinplasmarør som inneholder separasjonsgel. Kriterium: Slope.9. + intercept ± 6, korrelasjonskoeffisient.9. Holdbar i 72 timer ved 2 8 C, 9 timer ved 2 C, 2 uker ved -2 C. Prøvene kan fryses 2 ganger. (Akseptkriterier: For serum og plasma: < 6 ± 6 > 6 ±. I tillegg, for serum opptil av prøvene: < 6 ± 8 > 6 ±.) De oppførte prøvetypene ble analysert med et utvalg prøvetakingsrør som var kommersielt tilgjengelige på analysetidspunktet, dvs. ikke alle tilgjengelige rør fra alle produsenter ble analysert. Prøvetakingssystemer fra forskjellige produsenter kan inneholde ulike materialer som i visse tilfeller kan påvirke analyseresultatene. Dersom prøver analyseres i primærrør (prøvetakingssystemer), skal instruksjonene fra produsenten av disse rør følges. Sentrifuger prøver som inneholder utfellinger før utførelse av analysen. Bruk ikke varme inaktiverte prøver. Ikke bruk prøver og kontroller stabilisert med azid. Prøvene, kalibratorene og kontrollene må ha samme temperatur, 2 2 C før analysering. På grunn av mulig fordampningseffekt bør prøver, kalibratorer og kontroller på instrumentet analyseres/måles innen 2 timer. Medfølgende materialer Vennligst se avsnittet "Reagenser - arbeidsløsninger" med hensyn til reagenser. ødvendige (men ikke medfølgende) materialer 6979, CalSet, til 4 x ml 69889, PreciControl, til 2 x ml av henholdsvis PreciControl og , PreciControl Lung Cancer, til 4 x ml av henholdsvis PreciControl Lung Cancer og , Diluent MultiAssay, 2 x 6 ml prøvediluent Alminnelig laboratorieutstyr Elecsys 2, MODULAR AALYTICS E7 eller cobas e analyseinstrument Tilbehør til Elecsys 2 og cobas e 4 analyseinstrumenter: , ProCell, 6 x 8 ml systembuffer , CleanCell, 6 x 8 ml målecelle-rens 94622, Elecsys SysWash, x ml systemvask 99, adapter til SysClean 7682, Elecsys 2 AssayCup, 6 x 6 reaksjonskopper 76799, Elecsys 2 AssayTip, x 2 pipettespisser Tilbehør til MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 og cobas e 62 analyseinstrumenter: 48849, ProCell M, 2 x 2 L systembuffer , CleanCell M, 2 x 2 L målecelle-rens 24, PC/CC Cups, 2 kopper til forvarming av ProCell M og CleanCell M før bruk 729, ProbeWash M, 2 x 7 ml renseløsning til vask av reagensnål og for å unngå kontaminering via reagensprobe 48999, PreClean M, x 6 ml forvask av reaksjonsløsning 227, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 magasiner x 84 reaksjonskopper eller pipettespisser, avfallsposer 2, WasteLiner, avfallsesker 276, SysClean Adapter M Tilbehør til alle analyseinstrumenter: 2986, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, x ml system-rens Analyse For en optimal ytelse av analysen skal anvisningene for det aktuelle analyseinstrument følges. Vennligst se den aktuelle brukermanualen for instrumentspesifikke analyseinstruksjoner. Rekonstitusjon av mikropartiklene skjer automatisk før bruk. Innles de analysespesifikke parametere ved hjelp av reagensstrekkoden. Dersom strekkoden i sjeldne tilfeller ikke kan leses, skal den sifrede tallsekvensen tastes inn manuelt. MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 og cobas e 62 analyseinstrumenter: PreClean M løsning er nødvendig. Temperer de avkjølte reagensene til ca. 2 C og sett dem i reagenskarusellen (2 C) på instrumentet. Unngå skumdannelse. Systemet regulerer automatisk reagenstemperaturen og åpning/lukking av flaskene. Kalibrering Sporbarhet: Analysen er standardisert opp mot ARCHITECT analysen fra Abbott Diagnostics. Alle Elecsys reagenssett er merket med en strekkode som inneholder spesifikke opplysninger til kalibrering av det gjeldende reagenslotnummer. Den predefinerte masterkurve tilpasses instrumentet ved hjelp av gjeldende CalSet. Kalibreringsintervall: Kalibrering skal utføres en gang pr. reagenslot med nytt reagens (høyst 24 timer etter at reagenskittet ble registrert på instrumentet). Fornyet kalibrering anbefales som beskrevet: 2 / , V 4. orsk

3 ms_6969v4. etter måned (28 dager) ved bruk av samme reagenslot etter 7 dager (ved bruk av det samme reagenskit på instrumentet) ved behov: f.eks. kvalitetskontrollresultater utenfor de definerte grensene Kvalitetskontroll Bruk PreciControl Lung Cancer eller PreciControl til kvalitetskontroll. I tillegg kan andre egnede kontrollmaterialer brukes. Kontroller for de forskjellige konsentrasjonsnivåer bør analyseres individuelt minst en gang i døgnet når analysen er i bruk, en gang pr. reagenskit og etter hver kalibrering. Kontrollintervallene og -grensene bør tilpasses hvert enkelt laboratoriums individuelle krav. Oppnådde kontrollverdier skal ligge innenfor definerte grenser. Hvert laboratorium bør innføre korrigerende tiltak dersom verdier faller utenfor de definerte grensene. Følg gjeldende offentlige forskrifter og lokale retningslinjer for kvalitetskontroll. Viktig: Kontrollene er ikke strekkodemerkede og skal derfor analyseres som eksterne kontroller. Alle verdier og aksepterte grenser for avvik legges inn manuelt. Viser til avsnittet "QC" i brukermanualen eller Online Help i softwaren til instrumentet. Ikke-strekkodemerkede kontroller: Det kan kun tastes inn en målverdi og en akseptert grense for avvik for hvert kontrollnivå i analyseinstrumentet. De reagenslotspesifikke målverdiene skal tastes inn hver gang det brukes et spesifikt reagenslot med forskjellige kontroll-målverdier og aksepterte grenser for avvik. Det er ikke mulig å bruke to reagenslotnumre med forskjellige kontroll-målverdier og aksept grense for avvik parallelt i samme kjøring. De nøyaktige lotspesifikke målverdiene og akseptert grense for avvik er oppført i verdiskjemaet som følger med reagenskittet eller PreciControl kit (eller som er elektronisk tilgjengelig). Kontroller at de korrekte verdier brukes. Beregning Analyseinstrumentet beregner automatisk analyttkonsentrasjonen i hver prøve i. Begrensninger - interferens Effekten av følgende stoffer og medikamenter med tanke på ytelse av analysen ble testet. Interferens ble målt opp til de nevnte konsentrasjonene og det ble ikke observert noen innvirkning på resultatene. Kriterium: Gjenfinning ± 6 av opprinnelig verdi 6 og innen ± av opprinnelig verdi > 6. Stoffer Forbindelse Albumin Bilirubin Biotin Hemoglobin IgA IgG IgM Intralipid Revmatoide faktorer Analysert konsentrasjon 2 g/l µmol/l eller 66 mg/dl ng/ml.62 mmol/l eller. g/dl g/l 7 g/l 2.9 g/l 2 mg/dl opp til 4 IU/mL Det bør ikke tas prøver fra pasienter som behandles med høye biotindoser (> mg/dag), før minst 8 timer etter siste biotininntak. Det er ingen høy dose hook-effekt ved -konsentrasjoner opp til. Det er utført in vitro-analyser på 6 alminnelig brukte medikamenter. Alminnelig brukte medikamenter Medikamenter Acetaminofen Analysert konsentrasjon 2 µg/ml Medikamenter Acetylcystein Acetylsalisylsyre Ampicillin-a Askorbinsyre Cefoksitin Cyklosporin Doksysyklin Heparin Ibuprofen Levodopa Metyldopa Metronidazol Fenylbutazon Rifampicin Teofyllin Spesielle medikamenter som brukes i kreftbehandlingen Medikamenter Avastin Karboplatin Cisplatin Cyclofosfamid Deksametason Docetaksel Doksorubicin Epoetin Erlotinib Etoposid Gefitinib Gemcitabin hydroklorid Ifosfamid Lomustin Metotreksat Metoclopramid eupogen Paklitaksel Topotekan hydroklorid Vinkristin sulfat Vinorelbin tartrat Analysert konsentrasjon µg/ml µg/ml µg/ml µg/ml 2 µg/ml µg/ml µg/ml U/L µg/ml 2 µg/ml 2 µg/ml 2 µg/ml 4 µg/ml 6 µg/ml µg/ml Analysert konsentrasjon 7 µg/ml 6 µg/ml 8 µg/ml µg/ml 2 µg/ml 2. µg/ml 72 µg/ml 2 mu/l µg/ml µg/ml 2 µg/ml µg/ml 24 µg/ml 72. µg/ml µg/ml 7. µg/ml.9 µg/ml µg/ml 2.2 µg/ml. µg/ml. µg/ml I sjeldne tilfeller kan interferens oppstå på grunn av ekstremt høye titre av antistoff mot analytt spesifikke antistoffer, streptavidin eller rutenium. Disse effektene er minimert av et egnet analysedesign. Til diagnostiske formål skal resultatene alltid sees i sammenheng med pasientens anamnese, kliniske undersøkelser og andre resultater. Grenser og akseptert grense for avvik Måleområde.- (definert ved deteksjonsgrensen samt masterkurvens maksimum). Verdier under deteksjonsgrensen utgis som <.. Verdier over måleområdet utgis som > (eller opp til for prøver som er fortynnet ganger). edre grense for måleområdet 26-6, V 4. orsk / 8

4 ms_6969v4. Blankverdigrense (LoB (Limit of Blank)), deteksjonsgrense (LoD (Limit of Detection)) og kvantiteringsgrense (LoQ (Limit of Quantitation)) Elecsys -analysen er beregnet til å ha følgende nedre grense for måleområdet: Blankverdigrense = 2. Deteksjonsgrense =. Kvantiteringsgrensen = 7. med en total tillatt feilmargin på Blankverdigrensen, deteksjonsgrensen og kvantiteringsgrense ble bestemt i overensstemmelse med CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP7 A. Blankverdigrensen er 9 persentil-verdien av n 6 målinger av analyttfrie prøver i flere uavhengige serier. Blankverdigrensen tilsvarer den konsentrasjon hvor analyttfrie prøver finnes med en sannsynlighet på 9. Deteksjonsgrensen bestemmes på grunnlag av blankverdigrensen og standardavvik for prøver med lav konsentrasjon. Deteksjonsgrensen svarer til den laveste analyttkonsentrasjon som kan påvises (verdi over blankverdigrensen med en sannsynlighet på 9 ). Kvantiteringsgrensen er definert som den laveste analyttkonsentrasjon i en prøve, som kan kvantitetsbestemmes nøyaktig med en total tillatt relativ feil på. En studie ble gjennomført basert på veiledningen fra CLSI, protokoll EP7 A2, ved å bruke fortynnende serumprøver fra hest og fortynnende humane plasmaprøver for henholdsvis LoB og LoD. Prøvene ble analysert i 6 kjøringer over dager på 2 analyseinstrumenter, som ga n = 6 verdier. LoB og LoD ble beregnet til henholdsvis.6 og 2.2. For LoQ ble humane plasmaprøver fortynnet og målt i 6 kjøringer over dager på 2 analyseinstrumenter. Med en total tillatt feilmargin på var LoQ.99. Linearitet Elecsys -analysen er lineær i hele måleområdet fra.. Prøvene ble forberedt i henhold til CLSI EP6 A ved å fortynne serum- og plasmaprøver med Diluent MultiAssay i flere trinn i området fra > ned til LoB. Fortynning Prøver med -konsentrasjoner over måleområdet kan fortynnes med Diluent MultiAssay. Det anbefalte fortynningsforholdet er : (enten automatisk på MODULAR AALYTICS E7, Elecsys 2 eller cobas e analyseinstrumenter eller manuelt). Konsentrasjonen i fortynnet prøve skal være >. Etter manuell fortynning skal resultatet multipliseres med fortynningsfaktoren. Ved fortynning av instrumentet tar softwaren på MODULAR AALYTICS E7, Elecsys 2 og cobas e automatisk høyde for fortynningen ved beregning av prøvekonsentrasjonen. Referanseintervaller En studie i Europa og Kina med Elecsys -analysen på 8 prøver fra antatt friske voksne (67 kvinner, 478 menn) i alderen mellom 2 og 79 år ga følgende resultater (Roche studie nr. RD2 og RD788). Siden nyresvikt er kjent for å øke -nivåene, 2 ble kun pasienter med en egfr (estimated Glomerular Filtration Rate) beregnet i henhold til CKD-EPI (Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration) formelen 2 tatt høyde for i denne studien. -verdier i serum og plasma (Europa og Kina kombinert): Serum n = Li-heparinplasma n = 698 Li-heparinplasma n = 844 b) CI = konfidensintervall persentil Median () 9 persentil (9 CI b) ) ( ) ( ) (.8-6.4) 97. persentil (9 CI) 77.7 ( ) 77. (7.-.) 67. ( ) -verdier (serum og plasma kombinert) i følge studieregionen: Kina n = 46 Europa n = 99 persentil Median () 9 persentil (9 CI) ( ) ( ) 97. persentil (9 CI) 74.4 (6.2-7.) 77.7 ( ) Hvert enkelt laboratorium bør undersøke om referanseintervallene kan overføres til egne pasientgrupper og om nødvendig fastsette egne referanseintervaller. -verdier i antatt friske individer og ulike typer godartede og ondartede sykdommer Fordelingen i prosent av -analyseverdiene funnet ved 4 kliniske sentre i Europa og 2 kliniske sentre i Kina med Elecsys -analysen på 2767 serumprøver er oppsummert i tabellen under: Antatt friske Elecsys -verdier () Total < > 2 Røykere 92 Tidligere røykere 74 Har aldri røykt 68 Godartet tilstand Godartede lungesykdommer yresykdommer 9 Andre godartede sykdommer c) Kreft 4 SCLC 26 SCLC 8 SCLC/SCLC blandet 8 Mesoteliom 28 Medullært thyreoid euroendokrine karsinomer 22 Bryst 2 Eggstokk 6 Prostata (79.7) 7 (77.) 474 (76.7) 76 (76.) (.6) (79.) (.) 69 (72.6) 2 (2.) 2 (89.) 2 (.) 9 (4.9) 4 (76.9) 2 (69.4) 8 (8.) 9 (2.) 6 (2.6) 6 (22.) 2 (2.) (.) 28 (9.6) 2 (9.7) 29 (24.) 2 (2.) (.7) (6.7) (22.7) 2 (2.) 9 (2.) 9 (29.) (.4) 8 (.) (.) (.) 2 (.4) 9 (9.2) 2 (.4) (.6) (2.8) 4 (2.9) 6 (66.) (.) 4 (.) 2 (8.) (22.7) (2.8) 4 / , V 4. orsk

5 ms_6969v4. Elecsys -verdier () Total < > 2 Kolorektal 64 Andre kreftformer d) 46 (7.9) 86 (74.8) (2.4) 2 (2.7) (4.7) 4 (.) c) Andre godartede sykdommer slik som lever-, metabolske-, autoimmune- og inflammatoriske sykdommer. Godartede lungesykdommer slik som lungebetennelse, astma, KOLS og tuberkulose. d) Andre kreftformer slik som tumorer i nyre, lever, pankreas, gastrointestinal, mage, samt livmorhalskreft, og lymfomer. Bruk av for den primære differensialdiagnose ved lungekreft sin evne til å skille SCLC fra SCLC ble undersøkt i en studie på 9 pasienter i sentere i Europa og Kina (26 SCLC og 8 SCLC), og -nivåene ble korrelert med bevist histologi fra biopsi. Fordelingen av verdiene er vist i boksplottet og i 2 x 2 tabellen under: y x = : SCLC, Kina (n = ), 2: SCLC, Europa (n = 748), : SCLC, Kina (n = 7), 4: SCLC Europa (n = 69) y = serum () 8. > 8. 8 (8. ) 2 4 x SCLC SCLC (8.8 ) (9.2 ) 26 (9. ) 9 ( ) Cutoff-verdien for spesifisiteten på 9 (basert på SCLC) var 8.. Korrelasjonen mellom Elecsys -verdier og stadium for 89, 8, pasienter med respektivt SCLC, SCLC og godartet lungesykdom er vist i tabellen under: Klinisk tilstand persentil Stadium I-II SCLC Stadium III SCLC Median 9 persentil Klinisk tilstand persentil Stadium IV SCLC Stadium I-IV SCLC Median 9 persentil Godartet lungesykdom Sensitiviteten til hos pasienter med stadium I-IV SCLC kontra SCLC og kontra godartede lungesykdommer ved den forhåndssatte spesifisitet på 9 så vel som areal under kurven (AUC) verdier er vist i tabellen under. SCLC kontra SCLC SCLC kontra godartede lungesykdommer SCLC kontra andre ondartede kreftformer Cutoff Sensitivitet AUC (9 CI) ( ) ( ) ( ) Oppfølging av behandlingsrespons hos pasienter diagnostisert med SCLC ytteverdien av Elecsys analyse som en hjelp i oppfølging av behandlingsrespons i pasienter med SCLC ble bestemt i en klinisk studie i 6 sentere i Europa og Kina som involverte en total av 29 blodprøver fra 4 pasienter i første- og andrelinjebehandling (hovedsaklig platina-doublet regimer og topotekan respektivt). Billeddiagnostikk (CT-scan) ble utført i henhold til lokale standarder. -nivåer ble målt rundt tiden for hver billeddiagnostikk. -nivåer fra før behandling startet ble korrelert med -nivåer oppnådd ved tid for maksimal tumorrespons sett på bilder.( beste respons ; n = 2 pasienter). Den følgende tabell gir en oversikt over demografiske variabler i denne analysen: Variabel Europa Kina Alle steder Alder Kjønn Etnisitet Røykevaner Middel Min/Maks 6/8 27/8 27/8 Kvinner Menn 78 2 Kaukasisk Kinesisk 7 7 Røyker nå 6 4 Tidligere røykere Har aldri røykt Ingen spesifikasjoner , V 4. orsk / 8

6 ms_6969v4. Variabel Europa Kina Alle steder 2. linjebehandling Behandlingslinje ved beste respons. linjebehandling. linjebehandling eller annen behandling En negativ endring i ble definert som en prosentvis nedgang ved tidspunkt for beste respons sammenlignet med nivåer før behandling. Den følgende tabellen viser respektivt sensitivitet og spesifisitet ved bruk av varierende cutoff-nivåer for prosent nedgang i. Ikkeresponderende er definert som pasienter med tumorprogresjon sett på bilder, i motsetning til pasienter med tumor kontroll ("responderende"). Cutoff e) Sensitivitet f) Spesifisitet g) PPV h) PV i) e) Endring fra grunnlinje til beste respons f) Korrekt oppdagede ikkeresponderende g) Potensielt sparte CT-scan hos responderende h) PPV = positiv prediktiv verdi i) PV = negativ prediktiv verdi PV og PPV er basert på prevalensen til responderende og ikkeresponderende observert i denne kliniske studien. Den følgende graf viser endring i -nivåer fra tid før behandling til tid for maksimal respons. Den grå linjen representerer middelendringen for alle inkluderte pasienter. Responderende, n = 86 y 7 9 x = oppfølgingsbesøk, y = () Ikkeresponderende, n = 29 x y 7 9 x = oppfølgingsbesøk, y = () Oppfølgingsmåling av primært behandlede SCLC pasienter ytteverdien av Elecsys -analysen som en hjelp i oppfølgingsmåling etter kjemoterapi vist med et eksempel under. Grafen viser -verdier fra en pasient over tid gjennom førstelinjebehandling (karboplatin/etopsid-regime) og videre oppfølging. Kvinnelig pasient, 72 år UICC (Union Internationale Contre le Cancer) stadium: IV, TM (klassifisering av maligne tumorer) stadium: T4 Mb y V V2 V PR V4 V o V2 o x V o PD x = dager, y = () V = besøk, PR = delvis remisjon, = stabil sykdom, PD = progressiv sykdom = førstelinjebehandling, o = oppfølging Følgende må tas i betraktning Hvis -resultatene ikke stemmer overens med kliniske funn, anbefales ytterligere analyser for å bekrefte resultatet. Til diagnostiske formål, bør resultatene sees i sammenheng med andre data, f.eks, symptomer, resultater fra andre analyser, kliniske evalueringer osv. Rapporter resultatene i samsvar med prøvemateriale. Forhøyede konsentrasjoner av er sett hos pasienter med nedsatt nyrefunksjon. Det er en signifikant korrelasjon mellom serum -nivåer og serumkreatininkonsentrasjoner hos pasienter med nedsatt nyrefunksjon. 2 Evaluering av serumkreatininnivåer bør vurderes i tilfeller av høye -nivåer som ikke er forenlig med diagnostiske og kliniske kjennetegn ved pasienten. x 6 / , V 4. orsk

7 ms_6969v4. -nivåer, uansett verdi, skal ikke brukes som et sikkert tegn på at pasienten har eller ikke har en malign sykdom. Hos pasienter med mistanke om kreft eller kjent kreft, må andre passende analyser og prosedyrer vurderes for diagnostisering og etterfølgende behandling. Konsentrasjonen av for en gitt prøve bestemt med analyser fra forskjellige produsenter kan variere på grunn av forskjeller i de brukte analysemetoder, kalibrering og spesifisiteten til reagenset. Spesifikk ytelsesevne Representativ ytelsesevne på instrumentene er oppført under. Resultatene kan variere fra laboratorium til laboratorium. Presisjon Presisjonen ble fastsatt ved hjelp av Elecsys reagenser, prøver og kontroller ifølge en protokoll (EP A2) fra CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 kjøringer pr. dag som dobbeltbestemmelse i 2 dager (n = 84). Følgende resultater ble oppnådd: Prøve Elecsys 2 og cobas e 4 analyseinstrumenter Middel Repeterbarhet CV Intermediær presisjon Humant plasma Humant plasma Humant plasma Humant plasma Humant plasma PC j) PC j) PC = PreciControl Prøve MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 og cobas e 62 analyseinstrumenter Middel Repeterbarhet CV CV Intermediær presisjon Humant plasma Humant plasma Humant plasma Humant plasma Humant plasma PC PC Metodesammenligning En sammenligning av Elecsys -analysen på cobas e 6 analyseinstrumentet (y) med manuelt ELISA (x) ga følgende korrelasjoner: Antall målte serumprøver: Passing/Bablok 22 Lineær regresjon y =.49x y =.4x +.2 τ =.8 r =.988 Konsentrasjonen i prøvene lå mellom ca. og 484. En sammenligning av Elecsys -analysen på cobas e 6 analyseinstrumentet (y) med en automatisert -metode (x) ga følgende korrelasjoner: Antall målte K 2 EDTA plasmaprøver: 66 Passing/Bablok 22 Lineær regresjon CV y =.997x y =.x τ =.82 r =.996 Konsentrasjonen i prøvene lå mellom ca. og 468. Analytisk spesifisitet Spesifisiteten av Elecsys -analysen er beregnet til å ha kryssreaktivitet ved analysering med gastrin frigivende peptid (GRP) ved en konsentrasjon på ng/ml. En studie ble utført med Elecsys analysen basert på veiledningen fra CLSI, protokoll EP7 A2. Pipettert mengde av humant plasma, inneholdende i området 4 til 7 ble tilsatt GRP i en konsentrasjon på 4 ng/ml og analysert på. Kryssreaktiviteten til GRP ble beregnet til å være mindre enn.. k) k) Representative data; resultater fra individuelle laboratorier kan avvike fra disse dataene. Referanser Korse CM, Holdenrieder S, Zhi X-y, et al. Multicenter evaluation of a new progastrin-releasing peptide () immunoassay across Europe and China. Clin Chim Acta 2;48: Miyake Y, Kodama T, Yamaguchi K. Pro-gastrin-releasing peptide (-98) is a specific marker in patients with small cell lung carcinoma. Cancer Res 994;4: Ischia J, Patel O, Shulkes A, et al. Gastrin-releasing peptide: Different forms, different functions. Biofactors 29;: Holst JJ, Hansen M, Bork E, et al. Elevated plasma concentrations of c- flanking gastrin-releasing peptide in small-cell lung cancer. J Clin Oncol 989;2:8-88. Aoyagi K, Miyake Y, Urakami K, et al. Enzyme immunoassay of immunoreactive progastrin-releasing peptide (-98) as tumor marker for small-cell lung carcinoma: development and evaluation. Clin Chem 99;4: Yamaguchi K, Aoyagi K, Urakami K, et al. Enzyme-linked immunosorbent assay of pro-gastrine-releasing peptide for small cell lung cancer patients in comparison with neuron-specific enolase measurement. Jpn J Cancer Res 99;86: Stieber P, Dienemann H, Schalhorn A, et al. Pro-gastrin-releasing peptide () - a useful marker in small cell lung carcinomas. Anticancer Res 999;9: Inaji H, Komoike Y, Motomura K, et al. Demonstration and diagnostic significance of Pro-gastrin-releasing peptide in medullary thyroid carcinoma. Oncology 2;9: Yashi M, Terauchi F, ukui A, et al. Small-cell neuroendocrine carcinoma as a variant form of prostate cancer recurrence: a case report and short literature review. Urol Oncol 26;24:-7. Molina R, Augé JM, Bosch X, et al. Usefulness of serum tumor markers, including progastrin-releasing peptide in patients with lung cancer: correlation with histology. Tumor Biol 29;:2-29. Molina R, Augé JM, Alicarte J, et al. Pro-gastrin-releasing peptide in patients with benign and malignant diseases. Tumor Biol 24;2: Stieber P, Yamaguchi K. enables diagnosis of small-cell lung cancer. In: Diamandiis EP, Fritsche HA, Lilja H, et al. (eds): Tumor Markers. Physiology, Pathobiology, Technology and Clinical Applications. AACC Press, Washington, 22; pp 7-2. Molina R, Filella X, Augé JM. : a new biomarker for small cell lung cancer. Clin Biochem 24;7:-. 4 Korse CM, Taal BG, Vincent A, et al. Choice of tumour markers in patients with neuroendocrine tumours is dependent on the histological grade. A marker study of Chromogranin A, euron specific enolase, Progastrin-releasing peptide and cytokeratin fragments. Eur J Cancer 22;48: Korse CM, Taal BG, Bonfrer JMG, et al. An elevated progastrinreleasing peptide level in patients with well-differentiated neuroendocrine tumours indicates a primary tumour in the lung and predicts a shorter survival. Ann Oncol 2;22: Okusaka T, Eguchi K, Kasai T, et al. Serum levels of pro-gastrinreleasing peptide for follow-up of patients with small cell lung cancer. Clin Cancer Res 997;: , V 4. orsk 7 / 8

8 ms_6969v4. 7 Yamaguchi K, Abe K, Kameya T, et al. Production and molecular size heterogeneity of immunoreactive gastrinreleasing peptide in fetal and adult lungs and primary lung tumors. Cancer Res 98;4: Molina R. : A ew Biomarker for Small Cell Lung Cancer. EJCMO 29;: ordlund MS, Bjerner J, Warren DJ, et al. Progastrin-releasing peptide: stability in plasma/serum and upper reference limit. Tumor Biol 28;29: Kamata K, Uchida M, Takeuchi Y, et al. Increased serum concentrations of pro-gastrin-releasing peptide in patients with renal dysfunction. ephrol Dial Transplant 996;: Levey AS, Stevens LA, Schmid CH, et al. A new equation to estimate glomerular filtration rate. Ann Intern Med 29;: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 988 ov;26(): For ytterligere opplysninger bruk manualen til det aktuelle analyseinstrumentet, de relevante applikasjonsskjemaene, produktinformasjonen og metodearkene til alle nødvendige komponenter (hvis tilgjengelig i ditt land). Et punktum (punktum/stopp) brukes alltid i dette metodearket som desimalskilletegn for å skille mellom heltalls- og fraksjonsdelen av et desimaltall. Skilletegn for tusengrupper brukes ikke. -antigener og antistoffer brukt i Roche -produkter er lisensiert av Fujirebio Diagnostics, Inc. Symboler Roche Diagnostics bruker følgende symboler og tegn i tillegg til de som er listet opp i ISO standarden 22 : GTI Pakningsinnhold Analyseinstrumenter hvor reagensene kan brukes Reagens Kalibrator Volum etter rekonstitusjon eller blanding Artikkelnummer for global handel Tilføyelser, slettinger eller endringer er merket med en strek i margen. 26, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 6, D-68 Mannheim 8 / , V 4. orsk