Elecsys HE cobas e 801

Transkript

1 V cobas e 8 Norsk Systeminformasjon Kort navn HE4 2 Viktig ACN (applikasjonskodenummer) Den målte HE4-verdien på en pasientprøve kan variere avhengig av analysemetode. Laboratorieresultater bør derfor alltid inneholde en opplysning om den brukte HE4-analysemetode. HE4-verdier målt på pasientprøver ved hjelp av forskjellige analysemetoder er derfor ikke direkte sammenlignbare og kan gi feilaktige medisinske tolkninger. Hvis HE4-analysemetoden endres under terapeutisk monitorering, skal de oppnådde HE4-verdiene ved skifte til den nye metoden bekreftes ved parallelle målinger med begge metodene. Tilsiktet bruk Immunologisk analyse til kvantitativ bestemmelse av HE4 i humant serum og plasma. Analysen brukes som en hjelp ved monitorering av residiverende eller progressiv sykdom hos pasienter med epitelial eggstokkreft. Gjentatt analysering av HE4 hos pasienter skal sees i sammenheng med andre kliniske undersøkelser brukt til monitorering av eggstokkreft. Analysen er videre ment til å bli brukt sammen med Elecsys CA 25 IIanalysen som en hjelp ved vurdering av risikoen for epitelial eggstokkreft hos premenopausale og postmenopausale kvinner med tumor i bekkenet. Resultatene skal sees i sammenheng med andre metoder i overensstemmelse med standard kliniske retningslinjer. Electrochemiluminescence immunoassay ECLIA brukes på det immunologiske analyseinstrumentet cobas e 8. Sammendrag Det humane epididymal protein 4 (HE4, også kjent som WFDC2) tilhører familien av WFDC (whey acidic four-disulfide core)-proteiner med antatt trypsin inhibitoriske egenskaper.,2 I sin modne glykosylerte form har proteinet en molekylvekt på ca kda og består av et enkeltkjedet peptid inneholdende to WFDC-domener. 3,4 HE4 uttrykk var opprinnelig beskrevet til å være speisifikk for epididymis. 4,5 Nyere funn viser at HE4 har lavt uttrykk i epiteler i respiratorisk og reproduktivt vev, men høyt uttrykk i eggstokkreftvev. Høye utskilte nivåer kan også finnes i serum fra eggstokkreftpasienter. 7 Eggstokkreft er den syvende vanligste årsaken til kreftrelatert død hos kvinner globalt. 8 Det er den mest dødelige formen for gynekologisk kreft, men den kan potensielt helbredes, hvis den diagnostiseres tidlig 9 og behandles av kirurger med god kjennskap til behandling av eggstokkreft. 9, Symptomene på eggstokkreft er ofte vage og uspesifikke. På grunn av dette oppdages de fleste tilfeller av eggstokkreft på et sent stadium, og 5 års overlevelsesrate for pasienter synker fra 9 i stadium I til under 2 i stadium IV. Som enkeltmarkør har HE4 høy sensitivitet for eggstokkreft, spesielt i stadium I av sykdommen, det tidlige ikke-symptomatiske stadium. Kombinasjonen CA 25 og HE4 har den høyeste sensitivitet på 7.4 ved en spesifisitet på 95. 2,3 Kombinasjonen av CA 25 og HE4 kan være til hjelp når det skal avgjøres om en tumor i bekkenet er godartet eller ondartet hos pre- og postmenopauale kvinner. Kombinasjonen av de to markørene CA 25 og HE4 er en mer nøyaktig prediktor for en ondartet sykdom enn en av de to alene. 2 Huhtinen et al. rapporterte en sensitivitet på 78. ved en spesifisitet på 95 ved eggstokkreft sammenlignet med endometriotiske cyster. 4 Moore et al. rapporterte en nøyaktighet på 94 ved identifisering av ondartet versus godartet bekkentumor når CA 25- og HE4-verdier kombineres i en algoritme kalt (Risk of Ovarian Malignancy Algorithm). 5 I tillegg, korrelerer HE4-nivåer med klinisk respons på behandling og residiverende status hos kvinner med diagnosen eggstokkreft påvist ved CT-skanning. HE4 kan dermed bli en viktig tidlig indikator for residiverende sykdom. Analyseprinsipp Sandwichprinsipp. Analysens totale varighet: 8 minutter.. inkubasjon: µl prøve, et biotinylert monoklonalt HE4 spesifikt antistoff og et monoklonalt HE4 spesifikt antistoff merket med et ruteniumkompleks a) reagerer og danner et sandwichkompleks. 2. inkubasjon: Etter tilsetning av streptavidin-coatede mikropartikler blir komplekset bundet til fast fase via interaksjon mellom biotin og streptavidin. Reaksjonsblandingen suges opp i målecellen hvor mikropartiklene fanges magnetisk på elektrodens overflate. Ubundne stoffer fjernes deretter med ProCell II M. Ved å sette spenning til elektroden induseres deretter kjemiluminescensemisjon som måles med en fotomultiplikator. Resultatet bestemmes via en kalibreringskurve som lages instrumentspesifikt med 2 punktkalibrering og en masterkurve, som er lest inn via cobas link. a) Tris(2,2'-bipyridyl)rutenium(II)-kompleks (Ru(bpy) ) Reagenser - arbeidsløsninger cobas e pack er merket som HE4. M R R2 Streptavidin-coatede mikropartikler, flaske, 5.8 ml: Streptavidin-coatede mikropartikler.72 mg/ml; konserveringsmiddel. Anti-HE4-As~biotin, flaske,.3 ml: Biotinylert monoklonalt anti HE4 antistoff (mus).75 mg/l; fosfatbuffer mmol/l, ph.5; konserveringsmiddel. Anti-HE4-As~Ru(bpy), flaske,.3 ml: Monoklonalt anti HE4 antistoff (mus) merket med ruteniumkompleks.5 mg/l; fosfatbuffer mmol/l, ph 7.4; konserveringsmiddel. Forholdsregler og advarsler Til in vitro-diagnostisk bruk. Ta de vanlige forholdsregler som er nødvendig ved håndtering av alle laboratoriereagenser. Fjerning av alle avfallsmaterialer skal følge lokale retningslinjer. HMS-Datablad er tilgjengelig på forespørsel. Unngå skumdannelse i alle reagenser og prøvematerialer (prøver, kalibratorer og kontroller). Reagenshåndtering Reagensene i kittet er samlet i en klar til bruk enhet som ikke kan deles. All påkrevet informasjon for korrekt bruk er tilgjengelig via cobas link. Oppbevaring og holdbarhet Oppbevares ved 2 8 C. Må ikke fryses. Oppbevar cobas e pack stående for å sikre fullstendig tilgjengelighet til mikropartiklene under den automatiske blandingen før bruk. Holdbarhet: uåpnet ved 2 8 C på cobas e 8 analyseinstrumentet inntil den oppførte utløpsdato uker Prøvetaking og -forberedelse Kun de nedenfor oppførte prøvematerialer er analysert og funnet akseptable. Serum fra standard prøvetakingsrør eller rør som inneholder separasjonsgel. Li heparin-, K 2 EDTA- og K 3 EDTA-plasma. Li heparinplasmarør som inneholder separasjonsgel kan brukes. Kriterium: Slope.9., korrelasjonskoeffisient , V. Norsk /

2 V. Holdbar i 5 timer ved 2 25 C, 2 dager ved 2 8 C, 2 uker ved 2 C (± 5 C). Prøvene kan fryses to ganger. De oppførte prøvetypene ble analysert med et utvalg prøvetakingsrør som var kommersielt tilgjengelige på analysetidspunktet, dvs. ikke alle tilgjengelige rør fra alle produsenter ble analysert. Prøvetakingssystemer fra forskjellige produsenter kan inneholde ulike materialer som i visse tilfeller kan påvirke analyseresultatene. Dersom prøver analyseres i primærrør (prøvetakingssystemer), skal instruksjonene fra produsenten av disse rør følges. Sentrifuger prøver som inneholder utfellinger før utførelse av analysen. Bruk ikke varme inaktiverte prøver. Ikke bruk prøver og kontroller stabilisert med azid. Prøvene og kalibratorene må ha en temperatur på, 2 25 C før analysering. På grunn av mulig fordampningseffekt bør prøver og kalibratorer på instrumentet analyseres/måles innen to timer. Medfølgende materialer Vennligst se avsnittet "Reagenser - arbeidsløsninger" med hensyn til reagenser. Nødvendige (men ikke medfølgende) materialer , HE4 CalSet, til 4 x. ml , PreciControl HE4, til 4 x. ml 72999, Diluent MultiAssay, 45.2 ml prøvediluent Alminnelig laboratorieutstyr cobas e 8 analyseinstrumenter Til risikovurdering av epitelial eggstokkreft med (Risk of Ovarian Malignancy Algorithm): , CA 25 II, analyser , CA 25 II CalSet, 4 x ml , PreciControl Tumor Marker, til 4 x 3 ml , Diluent Universal, 2 x ml prøvediluent eller , Diluent Universal, 2 x 3 ml prøvediluent Tilbehør til cobas e 8 analyseinstrument: , ProCell II M, 2 x 2 L systemløsning , CleanCell M, 2 x 2 L vaskeløsning for måleceller , Reservoir Cups, 8 kopper til ProCell II M og CleanCell M , PreClean II M, 2 x 2 L vaskeløsning 59432, Assay Tip/Assay Cup-brett, magasiner x magasiner holder x 5 pipettespisser og 5 reaksjonskopper, 3 wasteliners (avfallsesker) , Liquid Flow Cleaning Cup, 2 adaptorkopper til ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean for Liquid Flow Cleaning Detection Unit , PreWash Liquid Flow Cleaning Cup, adaptokopp til ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean for Liquid Flow Cleaning PreWash Unit 29853, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x ml system-vaskeløsning Analyse For en optimal ytelse av analysen skal anvisningene for det aktuelle analyseinstrument følges. Vennligst se den aktuelle brukermanualen for instrumentspesifikke analyseinstruksjoner. Rekonstitusjon av mikropartiklene skjer automatisk før bruk. Plasser den avkjølte (lagret ved 2 8 C) cobas e pack på reagent manager. Unngå skumdannelse. Systemet regulerer automatisk reagenstemperaturen på og åpning/lukking av cobas e pack. Kalibrering Sporbarhet: Denne metoden er standardisert opp mot HE4 EIA-metoden fra Fujirebio Diagnostics, Inc. Den predefinerte masterkurve tilpasses instrumentet ved hjelp av gjeldende CalSet. Kalibreringsintervall: Kalibrering skal utføres en gang pr. reagenslot med nytt reagens (høyst 24 timer etter at cobas e pack ble registrert på analyseinstrumentet). Fornyet kalibrering anbefales som beskrevet: etter 2 uker ved bruk av samme reagenslot etter 28 dager ved bruk av den samme cobas e pack på analyseinstrumentet ved behov: f.eks. kvalitetskontrollresultater utenfor de definerte grensene Kvalitetskontroll Bruk PreciControl HE4 til kvalitetskontroll. I tillegg kan andre egnede kontrollmaterialer brukes. Kontroller for de forskjellige konsentrasjonsnivåer bør analyseres individuelt minst en gang i døgnet når analysen er i bruk, en gang pr. cobas e pack og etter hver kalibrering. Kontrollintervallene og -grensene bør tilpasses hvert enkelt laboratoriums individuelle krav. Oppnådde kontrollverdier skal ligge innenfor definerte grenser. Hvert laboratorium bør innføre korrigerende tiltak dersom verdier faller utenfor de definerte grensene. Gjenta målingen av de aktuelle prøvene om nødvendig. Følg gjeldende offentlige forskrifter og lokale retningslinjer for kvalitetskontroll. Beregning Analyseinstrumentet beregner automatisk analyttkonsentrasjonen i hver prøve i. Begrensninger - interferens Effekten av følgende endogene stoffer og farmasøytiske preparater med tanke på ytelse av analysen ble testet. Interferens ble målt opp til de nevnte konsentrasjonene og det ble ikke observert noen innvirkning på resultatene. Endogene substanser Forbindelse Bilirubin Hemoglobin Intralipid Biotin Revmatoide faktorer Analysert konsentrasjon 3 µmol/l eller mg/dl.2 mmol/l eller mg/dl 2 mg/dl 25 nmol/l eller 5 ng/ml 5 IU/mL Kriterium: Gjenfinning innen ± 3 av opprinnelig verdi for prøver 3 og innenfor ± av opprinnelig verdi for prøver > 3. Det bør ikke tas prøver fra pasienter som behandles med høye biotindoser (> 5 mg/dag), før minst 8 timer etter siste biotininntak. Det er ingen høy dose hook-effekt ved HE4-konsentrasjoner opp til 4. Farmasøytiske substanser Det er utført in vitro-analyser på 8 alminnelig brukte medikamenter. Det er ikke funnet interferens med analysen. I tillegg ble følgende spesielle kreftmedikamenter testet. Det er ikke funnet interferens med analysen. Spesielle kreftmedisiner Medikament Konsentrasjon (µg/ml) Karboplatin Cisplatin 8 Cyclofosfamid 5 Deksametason 2 Doksorubicin 2 Leukovorin 75 Melfalan 5 Metotreksat dinatrium Paklitaksel 25 2 / 2-9, V. Norsk

3 V. Medikament Konsentrasjon (µg/ml) Fluorouracil 9 Bevacizumab (Avastin) 75 Erlotinib (Tarceva) 5 Rituximab (MabThera) 75 Trastuzumab (Herceptin) I sjeldne tilfeller kan interferens oppstå på grunn av ekstremt høye titre av antistoff mot analytt spesifikke antistoffer, streptavidin eller rutenium. Disse effektene er minimert av et egnet analysedesign. Til diagnostiske formål skal resultatene alltid sees i sammenheng med pasientens anamnese, kliniske undersøkelser og andre resultater. Grenser og akseptert grense for avvik Måleområde 5 5 (definert ved deteksjonsgrensen samt masterkurvens maksimum). Verdier under deteksjonsgrensen utgis som < 5. Verdier over måleområdet utgis som > 5 (eller opp til 3 for prøver som er fortynnet 2 ganger). Nedre grense for måleområdet Blankverdigrense, deteksjonsgrense og kvantiteringsgrense Blankverdigrense = 5 Deteksjonsgrense = 5 Kvantiteringsgrense = 2 Blankverdigrensen, deteksjonsgrensen og kvantiteringsgrensen ble bestemt i overensstemmelse med kravene til CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP7 A2. Blankverdigrensen er 95 persentil-verdien av n målinger av analyttfrie prøver i flere uavhengige serier. Blankverdigrensen tilsvarer den konsentrasjon hvor analyttfrie prøver finnes med en sannsynlighet på 95. Deteksjonsgrensen bestemmes på grunnlag av blankverdigrensen og standardavvik for prøver med lav konsentrasjon. Deteksjonsgrensen svarer til den laveste analyttkonsentrasjon som kan påvises (verdi over blankverdigrensen med en sannsynlighet på 95 ). Kvantiteringsgrensen er den laveste analyttkonsentrasjon som kan måles reproduserbart med en variasjonskoeffisient for den intermediære presisjon CV på 2. Det ble utført en intern studie basert på veiledning fra CLSI, protokoll EP7 A2. Blankverdigrense og deteksjonsgrense ble beregnet til å være: Blankverdigrense = 3.2 Deteksjonsgrense = 3.44 For kvantiteringsgrensen ble 4 humane serumprøver målt over 5 dager med 5 replikater på analyseinstrument. Med en intermediær presisjon CV på 2 var kvantiteringsgrensen.75. Fortynning Prøver med HE4-konsentrasjoner over måleområdet kan fortynnes med Diluent MultiAssay. Den anbefalte fortynningen er :2 (enten automatisk av analyseinstrumentet eller manuelt). Konsentrasjonen i fortynnet prøve skal være > 75. Etter manuell fortynning skal resultatet multipliseres med fortynningsfaktoren. Ved fortynning av analyseinstrumentet tar programvaren automatisk høyde for fortynningen ved beregning av prøvekonsentrasjonen. Referanseintervaller En studie i et klinisk senter i Tyskland med -analysen på sera fra 358 antatt friske kvinner ga følgende resultater: HE4 () Alder (år) N Median 95 persentil < HE4 () Alder (år) N Median 95 persentil Fordelingen i prosent () av HE4-analyseverdiene funnet ved to kliniske sentre i Spania og Tyskland med -analysen på 89 prøver fra kvinner er oppsummert i tabellen under: Antatt friske Premenopausale 9 7 -verdier () > 5 (84.4 ) Postmenopausale 3 Godartete tilstander (59.4 ) Premenopausale 77 (9.4 ) Postmenopausale 2 2 (.8 ) Graviditet 5 5 Ikke-gynekologisk sykdom ( ) 35 (45.7 ) CHF b) 23 9 Kreft Eggstokkreft Premenopausale Eggstokkreft Postmenopausale (39. ) 39 2 (3.8 ) 97 (.3 ) Livmorkreft 49 8 (3.7 ) Brystkreft Gastrointestinalkreft (4.8 ) 4 9 (4.3 ) Lungekreft 23 5 (2.7 ) Blærekreft 2 3 (25. ) N (prosentfordeling) 3 (4.4 ) 4 (37.7 ) (9. ) 3 (3.4 ) (. ) (7. ) (47.8 ) 7 (7.9 ) 9 (9. ) 2 (4.8 ) 9 (4.4 ) 2 (43.5 ) 7 (3.4 ) 4 (33.3 ) (. ) 3 (2.8 ) (. ) 9 (8.8 ) (. ) (7. ) 3 (3. ) 3 (33.3 ) 34 (35. ) 9 (8.4 ) 5 (. ) (3. ) (43.5 ) 4 (33.3 ) (. ) (. ) (. ) (. ) (. ) 7 (2. ) (. ) 5 (2.8 ) 28 (28.9 ) (2. ) (2. ) (2.2 ) (4.3 ) (8.3 ) (. ) (. ) (. ) (. ) (. ) (. ) (. ) 2 (5. ) (.2 ) (2. ) (. ) (. ) (. ) (. ) b) CHF = kongestiv hjerteinsuffisiens I denne studien hadde 84 av de antatt friske premenopausale kvinner en verdi med -analysen på 7 eller under, og 97 av de antatt friske postmenopausale kvinner en verdi med -analysen på 4 eller under. I denne studien var 95 persentilene til de antatt friske pre og postmenopausale kvinnene (alle aldre) hhv. 92. og 2. Hvert enkelt laboratorium bør undersøke om referanseintervallene kan overføres til egne pasientgrupper og om nødvendig fastsette egne referanseintervaller. Monitorering av sykdomsstatus hos pasienter diagnostisert med eggstokkreft Effektiviteten av -analysen som en hjelp ved monitorering av sykdomsstatus hos pasienter med eggstokkreft ble bestemt ved å vurdere endringer i HE4-konsentrasjonen i serielle serumprøver fra pasienter sammenlignet med endringer i sykdomsstatus. En studie med totalt 375 observasjonspar ble utført med 3 blodprøver per pasient. En positiv endring i HE4 ble definert som en stigning i verdien, minst 2 større enn den forrige verdien av testen. 58. (29/5) av pasientprøvene med en 2-9, V. Norsk 3 /

4 V. positiv endring korrelerte med sykdomsutviklingen, mens 84. (273/325) av de serielle pasientprøvene uten signifikant endring i HE4-verdien korrelerte med ingen sykdomsutvikling. Den totale overensstemmelse var 8.5 (32/375). Tabellen under viser dataene i et 2 x 2 format. Stigning i HE4-konsentrasjonen Endring i sykdomsstatus pr. sekvensielt par Sykdomsutvikling Ingen utvikling Total > Total Risikovurdering hos pasienter med tumor i bekkenet Effektiviteten av -analysen i kombinasjon med Elecsys CA 25 II-analysen til vurdering av risikoen for epitelial eggstokkreft hos pasienter med tumor i bekkenet, ble bestemt i en internasjonal klinisk multisenterstudie på prøver tatt ved en tidligere anledning. En algoritme ( = Risk of Ovarian Malignancy Algorithm) ble utviklet for vurdering av risikoen for epitelial eggstokkreft. Algoritmen tar hensyn til HE4- og CA 25-verdiene samt pasientens menopausale status. Algoritmen beregner en prediktiv sannsynlighet for å finne epitelial eggstokkreft ved kirurgisk inngrep. Beregning av prediktiv indeks (PI) 7 En predektiv indeks beregnes separat for premenopausale og postmenopausale pasienter ved bruk av ligning () og (2) under. For å beregne PI, settes analyseverdiene som ble funnet med Elecsys HE4-analysen og Elecsys CA 25 II-analysen inn i ligningene under, avhengig av kvinnenes menopausale status. () Premenopausale: PI = *LN[HE4] +.2*LN[CA25] (2) Postmenopausale: PI = *LN[HE4] +.732*LN[CA25] hvor, LN = Naturlig logaritme. Ikke bruk LOG = Log. Beregning av -verdi 7 For å beregne -verdien (dvs. den prediktive sansynlighet), sett inn den beregnende verdien for PI i ligning (3): (3) -verdi () = exp(pi) / [ + exp(pi)] * hvor, exp(pi) = e PI VIKTIG: Disse ligningene ble brukt til beregning av -verdier med -analysen fra og med Elecsys CA 25 IIanalysen fra.42 5 U/mL. Eksemplene under skal brukes for å validere beregningene av PI og, før rapportering av pasientresultatene: Menopausal status Premenopausale Postmenopausale HE4 () Elecsys-verdier CA 25 II (U/mL) (2.38*3.24) PI-beregning PI + (.2*4.3) (2.38*5.957) + (.2*3.82) (.4*4.2) + (.732*2.425) (.4*5.948) + (.732*3.22) Stratifisering i lavrisiko- og høyrisikogrupper I en studie som inkluderte 384 pasientprøver ble den prediktive sannsynligheten for eggstokkreft, samt muligheten for å inndele prøvene i en lavrisiko- og en høyrisikogruppe basert på -verdier bestemt. En algoritme for risiko for ondartethet i eggstokker ble brukt til å stratifisere kvinner i risikogrupper for å finne epitelial eggstokkreft. Følgende grenseverdier ble brukt til å bestemme et spesifisitetsnivå på 75 for analysekombinasjonen og Elecsys CA 25 II: Premenopausale kvinner -verdi.4 = høy risiko for å finne epitelial eggstokkreft -verdi <.4 = lav risiko for å finne epitelial eggstokkreft Postmenopausale kvinner -verdi 29.9 = høy risiko for å finne epitelial eggstokkreft -verdi < 29.9 = lav risiko for å finne epitelial eggstokkreft Risikostratifisering av alle 384 pasientene (94 pre- og 9 postmenopausale) med tumor i bekkenet ved bruk av -verdier for analysekombinasjonen og Elecsys CA 25 II er vist i følgende tabell: Pasientgrupper med tumor i bekkenet Premenopausale pasienter N <.4 Stadium I-II EOC c) (37.5 ) Stadium I-IIIC 2 7 EOC d) (33.3 ) Stadium I-IV EOC Stadium III-IV EOC Ikke inndelt stadium EOC 25 7 (28. ) 9 (. ) 2 2 (.7 ) Godartet 57 8 (75.2 ) c) EOC = epitelial eggstokkreft.4 (2.5 ) 4 (.7 ) 8 (72. ) 8 (88.9 ) (83.3 ) 39 (24.8 ) N Postmenopausale pasienter < 29.9 (37.5 ) 34 9 (2.5 ) 53 (8.9 ) 37 4 (.8 ) 44 2 (4.5 ) 93 7 (7.3 ) 29.9 (2.5 ) 25 (73.5 ) 43 (8. ) 33 (89.2 ) 42 (95.5 ) 22 (23.7 ) d) Stadium I-IIIB og stadium I-IIIC (negative for omentum, positive for lymfeknuter) EOC Sensitiviteten for stratifisering av pasienter med stadium I IV epitelial eggstokkreft i høyrisikogruppen var 84.3 ved den fastsatte spesifisitet på 75, slik at 75. av kvinnene med godartet tumor i bekkenet ble klassifisert i lavrisikogruppen. De positive og negative prediktive verdier var henholdsvis 4.9 og 9. AUC (95 CI): Premenopausale kvinner =.858 ( ) Postmenopausale kvinner =.923 ( ) Følgende må tas i betraktning HE4-nivået kan ikke brukes som et sikkert tegn på at pasienten har eller ikke har en malign sykdom, og -analysen må ikke brukes som en kreftscreeninganalyse. -resultatene skal alltid brukes sammen med andre kliniske data, f.eks. symptomer, anamnese osv. Hvis -resultatene ikke stemmer overens med kliniske funn, anbefales ytterligere analyser for å bekrefte resultatet. Det må ikke veksles mellom -resultatene og andre produsenters metoder til bestemmelse av HE4. Det må ikke veksles mellom Elecsys CA 25 II-resultater og andre produsenters metoder til bestemmelse av CA 25 ved beregningen. Pasienter med bekreftet eggstokkreft kan ha verdier med Elecsys HE4-analysen i samme område som friske kvinner. Visse histologiske typer av eggstokkreft (f.eks. mucinøse tumorer eller germinale celletumorer) uttrykker sjeldent HE4, derfor er bruk av Elecsys HE4-analysen ikke anbefalt til monitorering av pasienter med kjente mucinøse tumorer eller germinale celletumorer i eggstokkene. Omvendt, kan forhøyede konsentrasjoner av HE4-antigen være til stede hos personer med nyre-, lever- og ikke-maligne sykdommer. 4 / 2-9, V. Norsk

5 V. er ikke validert for følgende pasientgrupper: pasienter som tidligere er behandlet for malignitet, pasienter som behandles med kjemoterapi og pasienter som er under 8 år. Hvis Elecsys HE4-analysen og/eller Elecsys CA 25 II-analysen ikke fungerer som angitt, eller hvis det er feil i beregningen av resultatene, kan dette føre til unøyaktige risikovurderinger og en feilaktig behandling av pasienten. Spesifikt, kan et falskt lavt resultat med analysen(e) resultere i en vurdering som indikerer at pasienten har lav risiko for å ha epitelial eggstokkreft, som igjen kan føre til at pasienten får en mindre spesialisert behandling. Spesifikk ytelsesevne Representativ ytelsesevne på instrumentet er oppført under. Resultatene kan variere fra laboratorium til laboratorium. Presisjon Presisjonen ble fastsatt ved hjelp av Elecsys reagenser, humane serapool og kontroller ifølge en protokoll (EP5 A3) fra CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 kjøringer pr. dag som dobbeltbestemmelse i 2 dager (n = 84). Følgende resultater ble oppnådd: Prøve cobas e 8 analyseinstrument Middel Repeterbarhet SD CV Intermediær presisjon SD Humant serum Humant serum Humant serum Humant serum Humant serum PreciControl HE PreciControl HE Metodesammenligning En sammenligning av -analysen, (cobas e 8 analyseinstrument; y) og -analysen, (cobas e analyserinstrument; x) ga følgende korrelasjoner (): Antall målte prøver: 4 Passing/Bablok 8 Lineær regresjon y =.99x +.43 y =.997x +.9 τ =.988 r =. Konsentrasjonen i prøvene lå mellom ca..4 og 478. Analytisk spesifisitet Det ble funnet følgende kryssreaktivitet ved analysering med HE4-konsentrasjoner på 5 og 55 : Proteiner (WFDC-familien) Konsentrasjoner analysert Kryssreaktivitet Elafin e) /SKALP f) SLPI g) e) Elafin = elastase-spesifikk inhibitor f) SKALP = antileukoproteinase avledet fra hud g) SLPI = sekretorisk leukocytt protease inhibitor Referanser Israeli O, Goldring-Aviram A, Rienstein S, et al. In silico chromosomal clustering of genes displaying altered expression patterns in ovarian cancer. Cancer Genet Cytogenet 25;: Bouchard D, Morisset D, Bourbonnais Y, et al. Proteins with wheyacidic-protein motifs and cancer. Lancet Oncol 2;7:7-74. CV 3 Bingle L, Singleton V, Bingle CD. The putative ovarian tumour marker gene HE4 (WFDC2), is expressed in normal tissues and undergoes complex alternative splicing to yield multiple protein isoforms. Oncogene 22;2: Kirchhoff C. Molecular characterization of epididymal proteins. Rev Reprod 998;3: Kirchhoff C, Habben I, Ivell R, et al. A major human epididymis-specific cdna encodes a protein with sequence homology to extracellular proteinase inhibitors. Biol Reprod 99;45: Drapkin R, von Horsten HH, Lin Y, et al. Human epididymis protein 4 (HE4) is a secreted glycoprotein that is overexpressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas. Cancer Res 25;5: Hellström I, Raycraft J, Hayden-Ledbetter M, et al. The HE4 (WFDC2) protein is a biomarker for ovarian carcinoma. Cancer Res 23;3: Ferlay J, Soerjomataram I, Ervik M, et al. GLOBOCAN 22 v., Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC CancerBase No. [Internet] Lyon, France: International Agency for Research on Cancer; 23.Available from: accessed on day/month/year. 9 Earle CC, Schrag D, Neville BA, et al. Effect of surgeon specialty on processes of care and outcomes for ovarian cancer patients. J Natl Cancer Inst 2;98:72-8. Engelen MJ, Kos HE, Willemse PH, et al. Surgery by consultant gynecologic oncologists improves survival in patients with ovarian carcinoma. Cancer 2;: Clarke-Pearson, DL. Clinical practice. Screening for ovarian cancer. NEJM 29;3(2): Moore RG, Brown AK, Miller MC, et al. The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass. Gynecol Oncol 28;8: Moore RG, Brown AK, Miller MC, et al. Utility of a novel serum tumor biomarker HE4 in patients with endometrioid adenocarcinoma of the uterus. Gynecol Oncol 28;: Huhtinen K, Suvitie P, Hiissa J, et al. Serum HE4 concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts. Br J Cancer 29;: Moore RG, Miller MC, Disilvestro P, et al. Evaluation of the Diagnostic Accuracy of the Risk of Ovarian Malignancy Algorithm in Women With a Pelvic Mass. Obstet Gynecol 2;8(2,Part): Anastasi E, Marchei GG, Viggiani V, et al. HE4: a new potential early biomarker for the recurrence of ovarian cancer. Tumor Biol 2;3: Moore RG, McMeekin DS, Brown AK, et al. A novel multiple marker bioassay utilizing HE4 and CA25 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass. Gynecol Oncol 29;: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 988 Nov;2(): For ytterligere opplysninger bruk manualen til det aktuelle analyseinstrumentet, de relevante applikasjonsskjemaene, produktinformasjonen og metodearkene til alle nødvendige komponenter (hvis tilgjengelig i ditt land). Et punktum (punktum/stopp) brukes alltid i dette metodearket som desimalskilletegn for å skille mellom heltalls- og fraksjonsdelen av et desimaltall. Skilletegn for tusengrupper brukes ikke. er et registrert varemerke tilhørende Fujirebio Diagnostics, Inc. HE4-antigener og antistoffer brukt i Roche HE4-produkter er lisensiert av Fujirebio Diagnostics, Inc. Symboler Roche Diagnostics bruker følgende symboler og tegn i tillegg til de som er listet opp i ISO standarden 5223 : 2-9, V. Norsk 5 /

6 V. GTIN Pakningsinnhold Analyseinstrumenter hvor reagensene kan brukes Reagens Kalibrator Volum etter rekonstitusjon eller blanding Artikkelnummer for global handel Tilføyelser, slettinger eller endringer er merket med en strek i margen. 2, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse, D-835 Mannheim / 2-9, V. Norsk