Ny IGRA. Anne-Marte Bakken Kran Førsteamanuensis, overlege Mikrobiologisk avd OUS Ullevål

Transkript

1 Ny IGRA Anne-Marte Bakken Kran Førsteamanuensis, overlege Mikrobiologisk avd OUS Ullevål

2 Hva er IGRA? IGRA: Interferon-γ release assay TB-IGRA: Immunologiske blodtester for diagnostikk av latent tuberkulose - Identifisere de som skal ha profylaktisk behandling - Som ledd i smitteoppsporing

3 IGRA: Interferon-γ release assays T-SPOT. TB EliSPOT, måler antall IFNg produserende celler QuantiFERON-Tb-Gold in tube ELISA, måler mengde IFNg QuantiFERON-Tb-Gold-Plus ELISA, måler mengde IFNg

4 Plan for de neste minuttene Testprinsipp Litt om Quantiferon TB Gold InTube (QFT GIT) Testvariabilitet Litt mer om Quantiferon TB Gold Plus Publiserte studier Tolkning av svar

5 IGRA: Interferon-γ release assay Hva er interferon gamma? Interferon-γ Produseres av bl.a. T celler når de aktiveres Aktivering av T celler: Spesifisitet og hukommelse

6 IGRA: Måler spesifikk cellemediert immunologisk hukommelse Tidligere sensitisert celle Antigener: ESAT-6, CFP-10, (TB7.7) Finnes i : - M. tuberculosis, M. bovis, M. africanu - 4 atypiske mykobakt: M. kansasii, M. szulgai, M. marinum Finnes ikke i BCG

7 QuantiFERON-Tb-Gold in tube Positiv kontroll (mitogen) TB antigen Negativ kontroll

8 Funksjonelle assays mange kilder til variabilitet VIKTIGSTE kilder til variabilitet Pai M. et al. Clin Microbiol Rev :3 20.

9 Variabilitet Stor grad av variabilitet (biologisk og testvariasjon) Standardisere best mulig, men tilfeldig variasjon kan ikke unngås Kun praktisk betydning ved verdier omkring cutoff Spesiell oppfølging ved verdier omkring cutoff Innføre gråsone Repetere Kontrollprøve Anbefalinger fra strategimøte i bakteriologi 2016

10 NY TEST 2016 (innføres i.l.a. 2017)

11 QuantiFERON-Tb-Gold-Plus

12 QuantiFERON-Tb-Gold-Plus Hva er nytt? Antigen: ESAT-6 og CFP-10 (ikke lenger TB7.7) Totalt 4 rør: To ulike antigen-rør TB-Ag1: Peptider utformet for å fremkalle respons fra CD4+ T celler TB-Ag2: Peptider utformet for å fremkalle respons fra både CD4+ og CD8+ T celler

13 Hvorfor ny test? Ønske om å bedre sensitivitet og spesifisitet CD4+ T celler har avgjørende betydning for immunologisk kontroll av tuberkulose Men hvorfor inkluderes nå måling av CD8+ T cellerespons?

14 Måle spesifikk CD8+ T cellerespons: Hvorfor? CD8+ T-celler viktig i immunforsvar mot MTB Produksjon av IFNg og andre cytokiner Aktivere makrofager Drap av infiserte celler Intracellulær lysering av mikrobe CD8+ T cellerespons trolig sterkere ved Aktiv TB enn LTB (?) Mer nylig eksponering (?) Aktiv TB og samtidig HIV-infeksjon (?) Små barn med TB-sykdom (?) Annen immunsvikt (?)

15 Ny test: Praktiske konsekvenser For laboratoriene Praktisk overgang til 4 rør Tekniske/datatekniske vanskeligheter Cutoff og gråsoner Tolkning og besvarelse For klinikere Praktisk prøvetaking Tolkning, klinisk betydning av resultater Bedre sensitivitet i spesielle pasientgrupper? To antigenrør gir: - Flere svarmuligheter - Større rom for tolkning - Større rom for usikkerhet Helsemyndigheter/smittevern/administrativt Påvirkes anbefalinger og retningslinjer?

16 TOLKNING AV RESULTATER

17 Tolkning av QFT-Plus resultater Fra pakningsvedlegget

18 Publiserte studier Nokså lik sensitivitet Diskrepans særlig for prøver med IFNg resultat IU/mL Hoffmann et al. Clin Microbiol Infect Aug;22(8): doi: /j.cmi Epub 2016 May 13. Equal sensitivity of the new generation QuantiFERON-TB Gold plus in direct comparison with the previous test version QuantiFERON- TB Gold IT. Moon HW, Gaur RL, Tien SS, Spangler M, Pai M, Banaei N. J Clin Microbiol Mar 15. [Epub ahead of print] Evaluation of QuantiFERON -TB Gold-Plus in Healthcare Workers in a Low-Incidence Setting CD8+ respons mer assosiert med aktiv TB Characterization of the CD4 and CD8 T-cell response in the QuantiFERON-TB Gold Plus kit. Petruccioli E, Chiacchio T, Pepponi I, Vanini V, Urso R, Cuzzi G, Barcellini L, Palmieri F, Cirillo DM, Ippolito G, Goletti D. Int J Mycobacteriol Dec;5 Høyere konversjonsrate for QFT plus Knierer J, Gallegos Morales EN, Schablon A, Nienhaus A, Kersten JF. J Occup Med Toxicol Jan 5;12:1. QFT-Plus: a plus in variability? - Evaluation of new generation IGRA in serial testing of students with a migration background in Germany. Venter på kliniske studier som evaluerer sensitivitet hos immunsupprimerte

19 QFT-Plus: a plus in variability? J Occup Med Toxicol. 2017; 12: 1. Published online 2017 Jan 5.

20 QFT-Plus: a plus in variability? TBAg2 IFNg TBAg1 IFNg J Occup Med Toxicol. 2017; 12: 1. Published online 2017 Jan 5.

21 QFT-Plus: a plus in variability? J Occup Med Toxicol. 2017; 12: 1. Published online 2017 Jan 5.

22 Usikkerhet kan ikke unngås men den kan forstås og beskrives

23 Svarrapportering Ønske om enhetlig utsvaring nasjonalt Tuberkulosekomiteen arbeider nå med anbefalinger for hvordan testen bør besvares Foreløpig forslag: Kvantitativt svar for både TBAg1 og TBAg2 Samlet vurdering: Konklusjon og kommentar Positiv i minst ett rør = Positiv test Gråsone/Grenseverdi for verdier omkring cutoff Lave mitogenverdier kommenteres

24 Oppsummering Overgang til Quantiferon-TB-Gold Plus skjer NÅ Husk: IGRA er funksjonelle, immunologiske T celle-analyser med stor variabilitet Usikkerhet ved verdier omkring cutoff Diskusjon omkring tolkning pågår, mer data er på vei Ved sterk mistanke om smitte eller reell risiko og svekket immunforsvar: Henvises til spesialist selv ved negativ IGRA

25