NO/EP244283 (12) Oversettelse av europeisk patentskrift (11) NO/EP 244283 B1 (19) NO NORGE (1) Int Cl. A61L 1/32 (06.01) A61L 1/42 (06.01) A61L 1/8 (06.01) Patentstyret (21) Oversettelse publisert 1.0.11 (80) Dato for Den Europeiske Patentmyndighets publisering av det meddelte patentet 14.12. (86) Europeisk søknadsnr 737484. (86) Europeisk innleveringsdag.06.16 (87) Den europeiske søknadens Publiseringsdato 12.04.2 () Prioritet 09.06.16, US, 18776 P (84) Utpekte stater AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO SE SI SK SM TR (73) Innehaver Baxter International Inc, One Baxter Parkway, Deerfield, IL 6001, US-USA Baxter Healthcare SA, Thurgauerstrasse 1, 812 Glattpark (Opfikon), CH-Sveits (72) Oppfinner HOEFINGHOFF, Joris, Guglgasse 8/2/38, A-11 Vienna, AT-Østerrike HEDRICH, Hans, Christian, Engerthstrasse 171/18, A- Vienna, AT-Østerrike (74) Fullmektig Tandbergs Patentkontor AS, Postboks 170 Vika, 0118 OSLO, Norge (4) Benevnelse HEMOSTATISK SVAMP (6) Anførte publikasjoner EP-A1-0 68 334 EP-A1-1 462 123 EP-A1-1 690 3 WO-A1-03/089022 WO-A1-08/074331 WO-A2-08/016983 US-A- 6 063 061 US-A- 6 066 32 US-A1-06 193 846
NO/EP244283 1 Beskrivelse 1 2 3 Oppfinnelsens område [0001] Den foreliggende oppfinnelsen vedrører området hemostatiske svamper, en fremgangsmåte for fremstilling av svampene og deres anvendelser i hemostase. Oppfinnelsens bakgrunn [0002] Biologiske lim basert på koagulasjonsfaktorer av human eller animalsk opprinnelse har lenge vært kjent. En fremgangsmåte for fremstilling av vevsklebemidler basert på fibrinogen og faktor XIII er blitt beskrevet i US 4 362 67, US 4 298 98 og US 4 377 72. Vevsklebemidlene påføres vanligvis sammen med en separat komponent som inneholder trombin, som opptrer enzymatisk på fibrinogen for å danne fibrin, og på faktor XIII for å danne den aktive faktoren XIIIa, som tverrbinder fibrinet for å oppnå et stabilt fibrinkoagulat. [0003] Kollagenputer har vært anvendt i mange år for å bedre sårtilheling eller for å stoppe blødning. Deres virkningsmekanisme i hemostase er basert på blodplateaggregering og aktivering, dannelsen av trombin på overflaten av aktiverte blodplater og dannelsen av et hemostatisk fibrinkoagulat ved den katalytiske virkningen av trombin på fibrinogen. For å forbedre den hemostatiske virkningen av kollagenputer eller -ark har det blitt foreslått å inkludere faktorer av hemostase innenfor slike puter. [0004] I US 4 600 74 beskrives et vevsklebemiddel basert på kollagen kombinert med fibrinogen og faktor XIII. Dette materialet tilveiebringes i lyofilisert form, klar til bruk. Fibrinogenet og faktor XIII kombineres med kollagenet ved impregnering av det kollagene flate materialet med en løsning omfattende fibrinogen og faktor XIII, og lyofilisering av materialet. [000] WO 97/37694 offentliggjør en hemostatisk svamp basert på kollagen og en aktivator eller proaktivator av blodkoagulasjon homogent fordelt i denne. Denne svampen tilveiebringes i en tørr form, som kan lufttørkes eller lyofiliseres. Imidlertid inneholder den fremdeles et vanninnhold på minst 2 %. [0006] US 614 87 omhandler bioklebemiddelsammensetninger omfattende kollagen tverrbundet ved hjelp av en multifunksjonelt aktivert syntetisk hydrofil polymer, så vel som fremgangsmåter for anvendelse av slike sammensetninger for å bevirke adhesjon mellom en første overflate og en andre overflate, der minst én av de første og andre overflatene kan være en naturlig vevsoverflate. [0007] Kollagenholdige sammensetninger som er blitt mekanisk oppbrutt for å endre deres fysikalske egenskaper er beskrevet i US 428 024, US 32 71 og US 4 382. Disse patentene vedrører generelt fibrillære og uoppløselige kollagener. En injiserbar kollagensammensetning er beskrevet i US 4 803 07. En
NO/EP244283 2 1 2 3 injiserbar ben/brusk-sammensetning er beskrevet i US 16 32. En kollagenbasert leveringsmatriks omfattende tørre partikler i størrelsesområdet fra µm til 80 µm, som kan suspenderes i vann og som har en bestemt overflateladningstetthet er beskrevet i WO 96/3919. Et kollagenpreparat som har en partikkelstørrelse fra 1 µm til 0 µm nyttig som en aerosolspray for å danne en sårbandasje er beskrevet i US 196 18. Andre patenter som beskriver kollagensammensetninger inkluderer US 672 336 og US 36 614. [0008] WO08/016983 offentliggjør hemostatiske kollagenputer belagt med en forseglingsblanding av tverrbundne gelatinpartikler og fornettbare polyetylenglykoler. Oppsummering av oppfinnelsen [0009] Gjenstanden for oppfinnelsen er en hemostatisk porøs svamp ifølge krav 1. Det har blitt funnet at foregående puter av fibrøse biomaterialer, særlig kollagenputer, for sårheling ikke klarte å indusere hemostase ved forhold med nedsatt hemostase (f.eks. etter heparinisering). Den nye anvendelsen av et partikkelformig materiale i en matriks av kollagen forbedrer hemostase i forhold til hemostase uten væskeabsorberende partikkelformig materiale. Uten å være begrenset til en bestemt teori, viser det seg at ved anvendelse av partikler med en høy evne til å absorbere væsker, kan det oppnås en høy konsentrasjon av koagulasjonsfaktorer til stede i blodet som favoriserer hemostase. Det er vanskelig å påføre slike partikler direkte på det blødende såret fordi partiklene har en tendens til å flyte bort med blodstrømmen. Inkorporeringen av slike partikler i en hemostatisk svamp tillater en lokal fiksering av slike partikler, og forbedrer den hemostatiske virkningen av svampen ytterligere. [00] Et ytterligere aspekt vedrører en fremgangsmåte for fremstilling ifølge krav 12 av en hemostatisk porøs svamp omfattende tilveiebringelse av en væske fra et fibrøst biomateriale og suspenderte partikler av et væskeabsorberende partikkelformig materiale, og tørking av væsken med de suspenderte partiklene, for derved å oppnå en hemostatisk porøs svamp omfattende en matriks av et fibrøst biomateriale og partikler fra et væskeabsorberende partikkelformig materiale klebet til matriksmaterialet. En hemostatisk porøs svamp som kan oppnås ved denne fremgangsmåten omfattes av den foreliggende oppfinnelsen. Uttrykket "væske" ifølge den foreliggende oppfinnelsen inkluderer en løsning, en suspensjon eller en gel. [0011] Det tilveiebringes også et sett for fremstilling av et sårdekke, omfattende en svamp offentliggjort i dette dokumentet og farmasøytisk aktive stoffer. Dette settet og dets komponenter er spesielle for fremstillingen av en medisinsk svamp for behandling av en skade. [0012] Fagmannen på området vil lett forstå at alle foretrukne utførelsesformer er beskrevet i det følgende er eksempler på spesifikke utførelsesformer, men begrenser ikke nødvendigvis det generelle nye konsept. Videre kan alle spesielle utførelsesformer
NO/EP244283 3 leses på alle oppfinneriske aspekter og utførelsesformer i hvilken som helst kombinasjon, om ikke gjensidig utelukkende. 1 2 3 Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen [0013] Formålet med oppfinnelsen er en hemostatisk svamp basert på et fibrøst biomateriale med forbedrede hemostatiske egenskaper. Dette målet oppnås ved å tilveiebringe et væskeabsorberende partikkelformig materiale klebet til svampen. Det fibrøse biomaterialet kan støtte hemostatiske handlinger eller blodkoagulasjonshandlinger. Denne effekten kan styrkes av det nye partikkelformige materialet. Disse partiklene klebes til det fibrøse biomaterialet for å tilveiebringe en tilstrekkelig sterk fiksering av partiklene, øke holdbarheten og øke holdbarheten under anvendelse, spesielt som sårdekke der mekaniske spenninger kan gi uønsket løsgjøring av partiklene. Uttrykket "klebet" ifølge den foreliggende oppfinnelsen betyr at partiklene fordeles i eller innleires i eller innfanges i det fibrøse biomaterialet. Partiklene kan holdes i matriksmaterialet i hvilken som helst ordnet eller uordnet tilstand, fortrinnsvis fordeles homogent i denne. Svampen er et porøst nettverk av et fibrøst biomateriale i stand til å absorbere kroppsvæsker når det anvendes på en skade. Videre er svampen vanligvis fleksibel og egnet for påføring på forskjellige vev og steder med forskjellige former. [0014] Uttrykkene "svamp" og "pute" anvendes om hverandre i henhold til betydningen ifølge den foreliggende oppfinnelsen. [001] Fortrinnsvis er det fibrøse biomaterialet kollagen, et protein, en biopolymer eller et polysakkarid. [0016] Kollagen som anvendes i den foreliggende oppfinnelsen kan være fra hvilket som helst egnet kollagen for å danne en gel, inkludert et materiale fra flytende, pastalignende, fibrøse eller pulveraktige kollagenholdige materialer som kan bearbeides til en porøs eller fibrøs matriks. Fremstillingen av en kollagengel for fremstilling av en svamp er f.eks. beskrevet i EP 0891193 (innført i dette dokumentet ved referanse), og kan inkludere surgjøring inntil geldannelse inntreffer og etterfølgende ph-nøytralisering. For å forbedre de geldannende evnene eller løseligheten kan kollagenet (delvis) hydrolyseres eller modifiseres, så lenge egenskapen for å danne en stabil svamp etter tørking ikke svekkes. [0017] Kollagenet eller gelatinet av svampmatriksen er fortrinnsvis av animalsk opprinnelse, fortrinnsvis storfe eller hest. Men også humant kollagen kan anvendes i tilfelle en overfølsomhet hos pasienten mot xenogene proteiner. De ytterligere komponentene i svampen er fortrinnsvis av human opprinnelse, noe som gjør svampen spesielt egnet for påføringen til et menneske. [0018] I en foretrukket utførelsesform utgjør matriksmaterialet i den fibrøse biokompatible polymeren som danner det porøse nettverket av svampen mellom
NO/EP244283 4 1 2 3 1-0 vekt-%, 1- vekt-%, eller rundt 3 vekt-% av den tørkede porøse svampen. [0019] Det partikkelformige materialet er generelt ikke løselig, spesielt ikke vannløselig. Det forblir partikkelformig i vann. Men partiklene kan være porøse og/eller hygroskopiske og får lov til å svelle. "Væskeabsorberende" skal anses som den fysiske prosessen for å holde væsker ved kontakt som kan eller ikke kan fremkalle hevelse av partiklene. Fortrinnsvis kan partiklene holde en mengde av en væske, særlig blod, av minst 1 gang, minst 2 ganger, minst 4 ganger eller minst ganger og/eller opptil 0 ganger, opptil ganger eller opptil ganger av tørrvekten til svampen. Det partikkelformige materialet ifølge den foreliggende oppfinnelsen kan ta opp væsker, selv under trykk. For å forbedre stabiliteten og justere svelleegenskapene, kan det partikkelformige materialet tverrbindes. [00] Det partikkelformige materialet er et hemostatisk materiale og sørger for den hemostatiske virkningen av svampen alene eller i kombinasjon med svampmatriksen. Hemostase eller hvilken som helst koagulasjonsaktivitet kan induseres ved å aktivere det hemostatiske systemet i et individ. Den hemostatiske svampen kan øke hastigheten av hemostatiske reaksjoner i forhold til hemostase uten behandling. Denne aktiveringen kan baseres på en rekke reaksjoner, men inkluderer vanligvis katalytiske prosesser av blod eller serumproteiner eller oksidative prosesser. Etter initiering forløper individets hemostatiske system vanligvis med en sterk enzymatisk kaskade som fører til koagulasjon. En slik katalyse eller annen hemostatisk aktivitet kan initieres av matriksmaterialet eller det partikkelformige materialet. Det er selvfølgelig også mulig å tilveiebringe ytterligere reagenser eller katalysatorer med den nye svampen, så som en aktivator eller proaktivator av blodkoagulasjonen, inkludert fibrinogen, trombin eller trombinforløper. [0021] Det partikkelformige materialet er en tverrbundet polymer. For å lette utvinningen av skaden (særlig i tilfellet av innvendig kirurgi der fjerning av eventuelt gjenværende fremmede materiale kan kreve tilsetning av kirurgi) er det foretrukket å anvende et bioresorberbart partikkelformig materiale. [0022] Det partikkelformige materialet, matriksmaterialet eller svampen som en helhet kan være biologisk nedbrytbar, og egnet for biologisk nedbrytning in vivo, eller bioresorberbar, dvs. i stand til å resorberes in vivo. Full resorpsjon betyr at ingen vesentlige ekstracellulære fragmenter forblir. Et biologisk nedbrytbart materiale skiller seg fra et ikke-biologisk nedbrytbart materiale ved at et biologisk nedbrytbart materiale kan brytes ned biologisk i enheter som enten kan fjernes fra det biologiske systemet og/eller kjemisk innlemmes i det biologiske systemet. I en foretrukket utførelsesform kan det partikkelformige materialet, matriksmaterialet eller svampen som et hele brytes ned i et individ, spesielt et menneske, i løpet av mindre enn 6 måneder, mindre enn 3 måneder, mindre enn 1 måned, mindre enn 2 uker. [0023] Partiklene kan f.eks. være gelatin, gelatinderivater, kjemisk derivatisert gelatin,
NO/EP244283 1 2 3 kollagen, fibrin, proteiner, polysakkarider eller hvilken som helst blanding av disse, men også andre typer organisk materiale som kan anvendes i tillegg. Det er fortrinnsvis vannuløselig, biologisk nedbrytbart og bioresorberbart. Naturlig gelatin er billig og bredt tilgjengelig og kan oppnås fra mange kilder. Gelatin er et hydrolysat av kollagen. Praktiske animalske kilder av gelatin og kollagen inkluderer kylling, kalkun, storfe, svin, hest, eller humane kilder. Kollagenet kan også være kunstig eller rekombinant kollagen. Gelatin tverrbindes for å hindre full løselighet. Tverrbindingen kan oppnås ved ufullstendig hydrolysering av kollagen eller kjemisk tverrbinding ved hjelp av tverrbindingsmidler så som formaldehyd eller toverdige aldehyder. [0024] Partiklene ifølge den foreliggende oppfinnelsen er fortrinnsvis mikropartikler som er i størrelsesområdet mikrometer. I foretrukne utførelsesformer er partikkelstørrelsen (gjennomsnittlig diameter i tørr tilstand) 00 µm eller lavere. Enda mindre partikler kan anvendes, f.eks. med en gjennomsnittlig størrelse under 00 µm, eller under 0 nm. Hvilket som helst størrelsesområde innenfor disse grensene er også mulig, f.eks. en gjennomsnittlig diameter på fra 0 nm til 00 µm i tørr tilstand. [002] Eksempler på slike partikler er f.eks. beskrevet i US 6 063 061 og US 6 066 32. [0026] Etter tørking kan svampen ha et vanninnhold på minst 0, (prosenter er gitt i vekt/vekt her). I visse utførelsesformer kan svampen frysetørkes eller lufttørkes. [0027] Fortrinnsvis omfatter svampen en aktivator eller proaktivator av blodkoagulasjonen, inkludert fibrinogen, trombin eller trombinforløper, som f.eks. beskrevet i US 714 370. Trombin eller forløperen av trombin forstås som et protein som har trombinaktivitet, og som induserer trombinaktivitet når det henholdsvis bringes i kontakt med blod eller etter påføring til pasienten. Dens aktivitet uttrykkes som trombinaktivitet (NIH-enhet) eller trombinekvivalent aktivitet som utvikler den tilsvarende NIH-enheten. Aktiviteten i svampen kan være 00 til 000. I det følgende forstås trombinaktivitet som å omfatte både aktiviteten til trombin eller en tilsvarende aktivitet. Et protein med trombinaktivitet kan velges fra gruppen bestående av alfatrombin, meizotrombin, et trombinderivat eller et rekombinant trombin. En egnet forløper velges eventuelt fra gruppen bestående av: protrombin, faktor Xa eventuelt sammen med fosfolipider, faktor IXa, aktivert protrombinkompleks, FEIBA, hvilken som helst aktivator eller en proaktivator av den indre eller ytre koagulasjonen eller blandinger av disse. [0028] Den hemostatiske svampen ifølge oppfinnelsen kan anvendes sammen med ytterligere fysiologiske stoffer. For eksempel omfatter svampen fortrinnsvis flere farmakologisk aktive stoffer, blant dem antifibrinolytiske midler, så som en plasminogenaktivatorhemmer eller en plasminhemmer eller en inaktivator av fibrinolytika. Et foretrukket antifibrinolytisk middel velges fra gruppen bestående av aprotinin eller et aprotininderivat, alfa2-makroglobulin, en hemmer eller inaktivator av
NO/EP244283 6 1 2 3 protein C eller aktivert protein C, et susbtrat som etterligner binding til plasmin som virker kompetitivt med naturlige stoffer, og en antistoffhemmende fibrinolytisk aktivitet. [0029] Som et ytterligere farmakologisk aktivt stoff kan et antibiotikum, så som et antibakterielt eller antimykotisk middel anvendes sammen med svampen ifølge oppfinnelsen, fortrinnsvis som en komponent som er homogent fordelt i svampen. Flere bioaktive stoffer så som vekstfaktorer og/eller smertestillende midler kan være til stede i den nye svampen. En slik svamp kan være nyttig i f.eks. sårtilheling. Flere kombinasjoner foretrekkes med spesifikke enzymer eller enzymhemmere, som kan regulere, dvs. akselerere eller hemme, resorpsjonen av svampen. Blant disse er kollagenase, dets forsterkere eller hemmere. Dessuten kan et egnet konserveringsmiddel anvendes sammen med svampen eller kan inneholdes i svampen. [00] Selv om en foretrukket utførelsesform vedrører anvendelsen av den hemostatiske svampen som inneholder aktivatoren eller proaktivatoren av blodkoagulasjon som den eneste aktive komponenten, kan det omfattes flere stoffer som påvirker hastigheten av blodkoagulasjon, hemostase og kvaliteten av tetningen, så som strekkstyrken, styrken av produktet til vevet og varigheten. [0031] Prokoagulanter som øker eller forbedrer den indre eller ytre koagulasjonen, så som faktorer eller kofaktorer av blodkoagulasjon, faktor XIII, vevsfaktor, protrombinkompleks, aktivert protrombinkompleks, eller deler av kompleksene, et protrombinasekompleks, fosfolipider og kalsiumioner, kan anvendes. I tilfelle av en kirurgisk prosedyre der en nøyaktig tetning er nødvendig, kan det være å foretrekke å forlenge arbeidsperioden etter at den hemostatiske svampen festes til pasienten og før koagulasjonen utføres. Forlengelsen av den koagulerende reaksjonen vil sikres, hvis svampen ifølge oppfinnelsen videre omfatter hemmere av blodkoagulasjon i passende mengder. Hemmere, så som antitrombin III, eventuelt sammen med heparin, eller hvilken som helst annen serinproteasehemmer, er foretrukket. [0032] Det er også foretrukket å få slike additiver, spesielt trombinet eller en forløper av trombin jevnt fordelt i materialet for å forebygge lokal ustabilitet eller hyperkoagulerbarhet av materialet. Selv med et visst vanninnhold er trombinaktiviteten overraskende stabil, sannsynligvis på grunn av den intime kontakten mellom trombin og kollagen i den homogene blandingen. Likevel kan det anvendes trombinstabilisatorer fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av et polyol, et polysakkarid, et polyalkylenglykol, aminosyrer eller blandinger av disse ifølge oppfinnelsen. Den eksempelvise anvendelsen av sorbitol, glyserol, polyetylenglykol, polypropylenglykol, mono- eller disakkarider så som glukose eller sakkarose eller sukker eller sulfonert aminosyre i stand til å stabilisere trombinaktivitet er foretrukket. [0033] Et klebemiddellag festes til den nye svampen for å forbedre klebingen av svampen til et vev eller sår. Slike klebemiddelmaterialer egnet for en svamp for
NO/EP244283 7 1 2 3 anvendelse som et hemostat er f.eks. offentliggjort i WO08/016983. Slike klebemidler medierer ekstra hemostase av seg selv, og kan være egnet til mekanisk å tette lekkasjeområder. I flere utførelsesformer er klebemidlet resorberbart og/eller biokompatibelt og kan brytes ned av et individ, spesielt et menneske, i løpet av mindre enn 6 måneder, mindre enn 3 måneder, mindre enn 1 måned eller mindre enn 2 uker. [0034] "Klebemiddel" skal forstås på den måten at det kleber eller binder seg til et biologisk vev, og kan eller kan ikke binde til andre materialer. Klebemiddellaget omfatter en første tverrbindbar komponent, en andre tverrbindbar komponent som tverrbinder med den første tverrbindbare komponenten under reaksjonsmuliggjørende forhold, der den første og andre tverrbindbare komponenten tverrbinder for å danne en porøs matriks som har små mellomrom. Klebemiddellaget kan videre omfatte en hydrogeldannede komponent, som er i stand til å hydratiseres for å danne en hydrogel for å fylle minst noen av de små mellomrommene. Et slikt klebemiddelmateriale er offentliggjort i WO 08/016983. Den første tverrbindbare komponenten kan inkludere flere nukleofile grupper, og den andre tverrbindbare komponenten kan inkludere flere elektrofile grupper. Ved kontakt med en biologisk væske, eller i andre reaksjonsmuliggjørende forhold, tverrbinder de tverrforbundne første og andre komponentene for å danne en porøs matriks som har de små mellomrommene. Den hydrogeldannende komponenten kan være f.eks. en polymer, spesielt en biopolymer inkludert polysakkarider eller proteiner. Den hydrogeldannende komponenten velges fortrinnsvis fra materiale som er i stand til å hydratiseres for å danne en biokompatibel hydrogel som omfatter gelatin og vil absorbere vann når den leveres til en fuktig vevmålside. En slik hydrogeldannende komponent er f.eks. det partikkelformige materialet av svampen. I noen aspekter inkluderer den første tverrbindbare komponenten av klebemidlet et multi-nukleofilt polyalkylenoksid som har nukleofile grupper, og den andre tverrbindbare komponenten inkluderer et multi-elektrofilt polyalkylenoksid. Det multi-nukleofile polyalkylenoksidet kan inkludere to eller flere nukleofile grupper, for eksempel NH 2, -SH, -H, -PH 2 og/eller -CO-NH-NH 2. I noen tilfeller inkluderer det multi-nukleofile polyalkylenoksidet to eller flere primære aminogrupper. I noen tilfeller inkluderer det multi-nukleofile polyalkylenoksidet to eller flere tiolgrupper. Det multi-nukleofile polyalkylenoksidet kan være polyetylenglykol eller et derivat av dette. I noen tilfeller inkluderer polyetylenglykolet to eller flere nukleofile grupper, som kan inkludere en primær aminogruppe og/eller en tiolgruppe. Det multi-elektrofile polyalkylenoksidet kan inkludere to eller flere elektrofile grupper så som CO 2 N(COCH 2 ) 2, -CO 2 H, -CHO, -CHOCH 2, -N=C=O, -SO 2 CH=CH 2, N(COCH) 2, og/eller -S-S- (C H 4 N). Det multi-elektrofile polyalkylenoksidet kan inkludere to eller flere suksinimidylgrupper. Det multi-elektrofile polyalkylenoksidet kan inkludere to eller flere maleimidylgrupper. I noen tilfeller kan det multi-elektrofile polyalkylenoksidet være et polyetylenglykol eller et derivat av dette.
NO/EP244283 8 1 2 3 [003] Den første og/eller andre tverrbindbare komponenten er polyetylenglykoler (PEG) eller derivater av disse. Polymeren kan være et derivat av PEG omfattende aktive sidegrupper egnet for tverrbinding og klebingen til et vev. Fortrinnsvis omfatter klebemidlet suksinimidyl-, maleimidyl- og/eller tiolgrupper. I en oppstilling av topolymerer, kan en polymer ha suksinyl- eller maleimidylgrupper og en andre polymer kan ha tiolgrupper som kan festes til gruppene av den første polymeren. Disse eller flere grupper av klebemidlet kan lette klebingen til et vev. [0036] Klebemiddellaget kan belegges kontinuerlig eller diskontinuerlig på minst en side av svampen. Imidlertid, for å tillate kontakt med kroppsvæsker ved en skade med hovedsvampmaterialet, dvs. det fibrøse biomaterialet og det partikkelformige materialet, er det foretrukket å plassere klebemiddellaget på svampen på en diskontinuerlig måte, det er f.eks. mulig å plassere et gitter eller hvilken som helst annen maske på svampen, og bare fylle de små mellomrommene med klebemiddelmaterialet og deretter fjerne gitteret, og etterlate tilgjengelige områder til kollagensvampmatriksen. Sammenhengende belegg kan være å foretrekke for administrering i lave blødningsforhold. [0037] I et ytterligere aspekt av oppfinnelsen er det også mulig å tilveiebringe et støttelag med større strekkstyrke enn matriksmaterialet på minst en side av svampen. Fortrinnsvis er støttelaget på den motsatte siden av klebemiddellaget. Når det anvendes møter ikke støttelaget skaden og kan eller kan ikke være et aktivt hemostatisk lag. I prinsippet kan det være av hvilket som helst materiale som tilveiebringer fysisk motstand mot svampen. Det kan velges fra lignende materialer som f.eks. matriksmaterialet eller det partikkelformige materialet. Likevel kan det være fordelaktig dersom støttelaget omfatter en bioresorberbar polymer, som med alle andre lag, spesielt dersom hele svampen skal være bioresorberbar. [0038] Støttelaget kan omfatte kollagen eller gelatin, særlig tverrbundet gelatin eller kollagen. For å forbedre strekkstyrken og mekanisk støtte av svampmatriksen er det foretrukket at støttelaget er av større tetthet enn matriksmaterialet. [0039] Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer også et sårdekke omfattende en svamp ifølge oppfinnelsen. Svampen og alle de ekstra lagene kan tilveiebringes i et sårdekke klar for anvendelse i egnede dimensjoner. Svampen og/eller dekket har fortrinnsvis en tykkelse på minst 1 mm eller minst 3 mm eller minst mm og/eller opptil mm, avhengig av indikasjonen. Når den forholdsvis tykke fleksible svampen påføres et sår er det viktig at blod og fibrinogen kan absorberes gjennom svampen før fibrin dannes som kan fungere som en barriere for absorpsjonen av ytterligere sårsekret. [0040] Et annet aspekt ved oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for fremstilling ifølge krav 12 av en hemostatisk porøs svamp omfattende tilveiebringelse av en væske fra et fibrøst biomateriale og suspenderte partikler av et væskeabsorberende,
NO/EP244283 9 1 2 3 partikkelformig materiale, og tørking av væsken med de suspenderte partiklene, for derved å oppnå en hemostatisk porøs svamp omfattende et matriksfibrøst biomateriale og partikler av et væskeabsorberende, partikkelformig materiale klebet til matriksmaterialet. Tørkingen kan inkludere frysetørking eller lufttørking, og omfatter fjerning av de flyktige komponentene i væsken. [0041] ph-en til væsken, særlig i tilfellet av vandige løsninger, kan være minst 6, opptil 9. Foretrukne ph-områder er nøytrale, fortrinnsvis mellom 6 og 9, eller mellom 7 og 8. Likeledes er det foretrukket at det partikkelformige materialet forblir phnøytralt i kontakt med et vandig løsningsmiddel. [0042] En fordel med de nye partiklene, er at, etter at de dannes av ph-nøytrale løsninger, vil et svampmateriale også reagere på en ph-nøytral måte i kontakt med et vandig løsningsmiddel. "ph-nøytral" anses for å øke, eller alternativt også redusere ph-verdien ved ikke mer enn 1, fortrinnsvis ikke mer enn 0,. For en slik test kan det f.eks. anvendes like mengder (masse) partikler og vann, fortrinnsvis uten bufferstoffer. [0043] I foretrukne utførelsesformer er løsningsmidlet vandig, dvs. inneholder vann eller rent vann, dvs. at ikke noe annet flytende løsningsmiddel er til stede. Løsningsmidler kan omfatte vann, alkohol, inkludert metanol, etanol, propanol, butanol, isopropanol, ketoner, så som aceton, DMSO osv. Løsningsmidlet kan eller kan ikke videre omfatte ytterligere forbindelser så som additiver, emulgatorer, vaskemidler og fuktemidler. Dersom slike forbindelser anvendes, er det foretrukket at de kan fjernes med vann og ikke danner stabile, og gjenværende komplekser med den fibrøse svampmatriksen eller det partikkelformige materialet. De ytterligere forbindelsene kan være sure, fortrinnsvis nøytrale eller basiske. [0044] Fremstillingen av suspensjonen og/eller det fibrøse biomaterialet (f.eks. en kollagengel) kan utføres ved romtemperatur, men også ved lavere (nær 0 C) eller høyere temperaturer (nær 40 C) og hvilket som helst temperaturområde mellom disse samt enda lavere eller høyere temperaturer. I foretrukne utførelsesformer utføres dermed hvilket som helst av fremgangsmåtetrinnene mellom 0 og 40 C, eller mellom 1 og C. [004] Ethvert ytterligere lag, f.eks. klebemiddellaget eller støttelaget kan festes til den tørkede matriksen. Men det er også mulig å ko-tørke det ekstra laget, og dermed oppnå en komposittsvamp, f.eks. hvis støttelaget kan utgjøres av en væske eller gel av en polymer, f.eks. et fibrøst biomateriale som kollagen som ligner på matriksmaterialet. Matriksen av svampen med de suspenderte partiklene kan plasseres på støttematerialevæsken (eller omvendt), og begge væskene kan tørkes i et trinn. Hvis konsentrasjonen av polymeren i væsken for støttematerialet er større enn for den fibrøse matriksen kan man vanligvis oppnå et lag med større tetthet. Fortrinnsvis har kollagenvæsken for svampmatriksen en konsentrasjon på fra 0,1 til vekt-%, fortrinnsvis mellom 0,1 til 1 vekt-%, mest foretrukket rundt 0,2 vekt-%. Konsentrasjonen av
NO/EP244283 1 polymeren, spesielt kollagen, på støttelaget kan være f.eks. fra 0, til vekt-%, fortrinnsvis 0, til 2 %, mest foretrukket mellom 1 til 2 %. For å holde disse lagene separert er det mulig først å påføre en første væske inn i en egnet beholder, fryse væsken og påføre en andre væske osv. En slik beholder kan deretter frysetørkes for å oppnå den faste svampen. [0046] I et ytterligere aspekt tilveiebringer den foreliggende oppfinnelsen en hemostatisk porøs svamp som kan oppnås av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen beskrevet ovenfor. Alle foretrukne utførelsesformer nevnt ovenfor for en hemostatisk svamp kan også leses på denne oppnåelige svampen. [0047] Den foreliggende oppfinnelsen tilveiebringer også en fremgangsmåte for behandling av en skade omfattende administrering av en hemostatisk porøs svamp omfattende en matriks av fibrøst biomateriale og et væskeabsorberende, partikkelformig materiale klebet til matriksmaterialet til skadestedet. Denne behandlingen er særlig egnet for væskeinneslutning. Behandlingen kan omfatte forsegling av skaden for å hindre ytterligere væskelekkasje. Skaden kan omfatte et sår, en blødning, skadet vev, blødende vev og/eller en lekkasje av kroppsvæsker. [0048] Det tilveiebringes også et sett for fremstilling av et sårdekke, omfattende en svamp som beskrevet i dette dokumentet og farmasøytisk aktive stoffer. Dette settet og dets komponenter er særlig for fremstillingen av en medisinsk svamp for behandling av en skade nevnt ovenfor. [0049] Den foreliggende oppfinnelsen eksemplifiseres ytterligere av de følgende eksemplene uten å være begrenset til disse. Eksempler: 2 Referanseeksempel 1: Kollagensvamp som inneholder tverrbundne gelatinpartikler: [000] En homogen suspensjon inneholdende 80 mg/ml tverrbundne gelatinpartikler og 2,1 mg/ml kollagen ble fremstilt ved omrøring. Denne suspensjonen ble fylt i en skuff (lagtykkelse 3, mm) og frysetørket. Det ble oppnådd en kollagensvamp som inneholder de innesperrede tverrbundne gelatinpartiklene. 3 Eksempel 2: Kollagensvamp som inneholder tverrbundne gelatinpartikler diskontinuerlig belagt med et klebemiddellag. [001] En kollagensvamp inneholdende tverrbundne gelatinpartikler ble fremstilt ifølge eksempel 1. Etter frysetørking ble et gitter lagt på det oppnådde produktet. 14 mg/cm 2 av en 1:1 (vekt/vekt) pulverblanding av to tverrbindbare polyetylenglykolpolymerer (PEG-A og PEG-B) ble påført over gitteret på puten. Bare hullene i gitteret ble dekket av pulverblandingen. Pulveret ble festet på puten ved kort (2- min)
NO/EP244283 11 1 2 3 oppvarming ved en temperatur som er høyere enn smeltepunktet for PEGkomponentene. Gitteret ble fjernet og en pute med et diskontinuerlig reaktivt PEGbelegg ble oppnådd. PEG-A er et PEG-suksinimidylpulver, PEG-B er et PEGtiolpulver. [002] Eksempel 3: Hemostatisk pute bestående av sammensetningen beskrevet i eksempel 2, fremtvunget av et ytterligere støttende kollagenlag. Et 3, mm tykt lag av en mg/ml kollagensuspensjon ble fylt på et brett og frosset ved - C i 1 time. Det frosne kollagenlaget ble belagt med et 3, mm lag av blandingen beskrevet i eksempel 3. De to lagene ble deretter frysetørket, og det øvre laget belagt diskontinuerlig med de fornettbare PEG-komponentene som beskrevet i eksempel 2. Den oppnådde lagdelte puten har mer mekanisk robusthet enn putene som beskrives i eksemplene 1 og 2. Eksempel 4: Hemostase med produktet fremstilt ifølge eksempel 1. [003] En leveroverflateslitasjemodell for hemostase i hepariniserte (2x ACT) griser ble anvendt for å teste de hemostatiske egenskapene til putene fremstilt i eksempel 1. Med et flatt, rundt, roterende sliteverktøy ble det skapt et sirkulært blødende sår på overflaten av de hepariniserte grisene. En pute (3 x 3 cm) ble påført tørr på de blødende sårene og holdt på plass ved å trykke lett med saltløsningsfuktet gasbind i 2 min. Etter 2 min ble blødningen stoppet. I løpet av det neste 1 min ble det ikke observert noen ny blødning. Blodkoagulasjonen inne i puten ble observert. Etter 3 min ble puten fjernet fra påføringsstedet ved hjelp av en pinsett. Det ble bare observert en liten klebing til påføringsstedet. Eksempel : Hemostase med produktet fremstilt ifølge eksempel 2. [004] Puten beskrevet i eksempel 2 ble påført i den samme dyrehemostasemodellen, og på samme måte som beskrevet i eksempel 4, der det diskontinuerlige reaktive PEGbelegget vender mot såret. Det ble ikke observert noen blødning 2 og 3 min etter påføringen. Blod kommer inn i puten av de ikke-belagte områdene og koagulerer innenfor puten. Det er ikke mulig enkelt å fjerne puten 3 min etter påføringen fra påføringsstedet uten å forstyrre den hemostatiske forseglingen. Klebingen forårsaket av det reaktive PEG-belegget er sterkere enn den indre strekkstyrken til puten. Eksempel 6: Hemostase med produktet fremstilt ifølge eksempel 3. [00] Puten beskrevet i eksempel 3 ble påført i den samme dyrehemostasemodellen og på samme måte som beskrevet i eksempel 4, der det diskontinuerlige reaktive PEGbelegget vender mot såret. Hemostase ble oppnådd på samme måte som beskrevet i eksempel. Det ytterligere kollagenlaget dekker det hemostatiske kollagen/tverrbundne gelatinlaget som et glatt ark. Klebingen til såroverflaten er lik den som beskrives i eksempel.
NO/EP244283 12 P a t e n t k r a v 1. Hemostatisk porøs svamp omfattende en matriks av et fibrøst biomateriale og partikler av et væskeabsorberende partikkelformig materiale, der partiklene fordeles i eller innleires i eller innesluttes i det fibrøse matriksbiomaterialet, der det partikkelformige materialet er en hemostatisk tverrbundet polymer, og der svampen omfatter et ekstra klebemiddellag, der klebemiddellaget omfatter en første tverrbindbar komponent og en andre tverrbindbar komponent som tverrbinder med den første tverrbindbare komponenten under reaksjonsmuliggjørende forhold, der den første og/eller andre tverrbindbare komponenten omfatter PEG eller et derivat av disse. 2. Svampen ifølge krav 1, der det fibrøse biomaterialet omfatter kollagen. 1 3. Svampen ifølge krav 1, der det partikkelformige materialet omfatter gelatin, fibrin, kollagen eller hvilken som helst blanding av disse. 4. Svampen ifølge krav 1, videre omfattende trombin eller en forløper av trombin.. Svampen ifølge krav 1, der klebemiddellaget omfatter en bioresorberende polymer. 6. Svampen ifølge krav 1, der klebemidlet omfatter suksinimidyl eller maleimidyl og tiol eller aminogrupper. 2 7. Svampen ifølge krav 1, der klebemiddellaget diskontinuerlig belegges på minst en side av svampen. 8. Svampen ifølge krav 1 som er frysetørket eller lufttørket. 9. Svampen ifølge krav 1, omfattende et støttelag med større strekkstyrke enn matriksmaterialet.. Svampen ifølge krav 9, der støttelaget omfatter en bioresorberende polymer. 3 11. Svampen ifølge krav 9, der støttelaget omfatter en større tetthet enn matriksmaterialet. 12. Fremgangsmåte for fremstilling av en hemostatisk porøs svamp ifølge hvert av kravene 1 til 11 omfattende tilveiebringelse av en væske fra et fibrøst biomateriale og
NO/EP244283 13 suspenderte partikler av et væskeabsorberende, partikkelformig materiale, der det partikkelformige materialet er en hemostatisk tverrbundet polymer, og tørking av væsken med de suspenderte partiklene, for derved å oppnå en tørket porøs hemostatisk svamp omfattende en matriks av et fibrøst biomateriale og partikler av et væskeabsorberende, partikkelformig materiale, der partiklene fordeles i eller innleires i eller innesperres i det fibrøse matriksbiomaterialet, og der et klebemiddellag festes til den tørkede hemostatiske svampen, der klebemiddellaget omfatter en første tverrbindbar komponent og en andre tverrbindbar komponent som tverrbinder med den første tverrbindbare komponenten under reaksjonsmuliggjørende forhold, der den første og/eller andre tverrbindbare komponenten omfatter PEG eller et derivat av denne. 13. Hemostatisk porøs svamp ifølge hvilket som helst av kravene 1-11 som kan oppnås ved en fremgangsmåte ifølge krav 12. 1 14. Hemostatisk porøs svamp ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 11 og 13 for anvendelse i behandlingen av en skade. 1. Svampen ifølge krav 14, der skaden omfatter et sår, en blødning, skadet vev og/eller blødende vev.