FLAGG OG MELDINGER FRA CELLDYN SAPPHIRE, ABBOTT Olgunn S. Lid, seksjonsleder Seksjon for hematologi- og koagulasjonsanalyser Haukeland universitetssykehus
Seksjon for hematologi- og koagulasjonsanalyser Analyserer ca 1600-2000 prøver pr.dag. 4 instrumenter 3 CellDyn Sapphire 1 Advia 2120 Ikke autovalidering i dag «semi-autovalidering» av prøver uten diff.telling På prøver med diff.telling blir plott vurdert
Hva er hensikten med flagg og meldinger på CellDyn? Hva ønsker vi å oppdage? Patologi- morfolgisk patologi Umodne celler/blaster Kjerneholdige erytrocytter Høye/lave tallverdier. Oppdage interferens/forhindre å utgi feil svar Trombocyttaggregering Store trombocytter Små erytrocytter Fragmenter fra erytrocytter/leukocytter ( blastfragment) Tpk satelisme Kryoglobuliner/ kryofibrinogen lipider Kuldeagglutininer Koagel Hemolyse
MAPSS Multi Angel Polarised Scatter Separation 0 lystap- STØRRELSE 7 lysspredning-kompleksitet 90 lysspredning- KJERNESEGMENTERING 90 depolarisert lysspredning- GRANULARITET
Flagg og Meldinger SIM- System Initierte Meldinger System tilstander Potensielle/faktiske maskinvarefeil feks tomt for reagens, skriver ikke tilgjengelig Systemfeil Genererer flagg for upålitelige parametre som gjør data ugyldige. feks problemer med trykk/vacuum el en sprøyte mm Overskridelse av bakgrunnsgrenser og grenser i kvalitetsprogram feks X-B, moving average DATA Flagg Flagg for upålitelig parameter ( * ved tallsvar) Flagg for mistenkelig populasjon( s ved tallsvar)
Oversikt over noen flagg og meldinger BLAST IG/BAND VARLYMF Rst RBC NRBC FP? Pltclump nvwbc ASYM IR CD 61 agglutination Short Sample Clot detected duringaspiration
KI 0.7 vurdert sammen med totaltall blaster Blast melding Konfidensindeks (KI) 0.5-0.9 Signifikant blastmelding KI 0.7 sammen med annen patologi Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016 CELL-DYN Sensitivitet 89* Spesifisitet 92* *Hotton J et al.am J Clin Pathol 2013;140:845-852
VARLYMF Variant Lymph flagg Signifikant varlymf melding KI 0,7 Smudge celler Hårceller Lymfoblaster Plasmaceller Atypiske lymfocytter Disse cellene viser varierende morfologi i forhold til normale lymfocytter. Varierer fra veldig få til veldig mange celler. CELL-DYN Sensitivitet 26* Spesifisitet 94* *Hotton J et al.am J Clin Pathol 2013;140:845-852 Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
IG/BAND IG og BAND celler viser en klar differanse i egenskaper for å reflekterer lys sammenlignet med normalt modne nøytrofile granulocytter. Normal BAND IG Vi rapporter ikke IG eller BAND CELL-DYN Sensitivitet 20* Spesifisitet 90* *Hotton J et al.am J Clin Pathol 2013;140:845-852 Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Plt.clump-trombocyttaggregering TPK besvares som: TPK > xxx 10*9/L, nøyaktig svar kan ikke utgis pga trombocyttaggregering Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Short sample Utgir ikke svar fra analysering med «short Olgunn S.Lid, sample» NKK-møte 2016 melding! Må finne årsaken!
NRBC-kjerneholdige erytrocytter Rapporteres alltid som en kommentar til HB svaret. Kjerneholdige erytrocytter i perifert blod= x,x 10*9/L Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016 CELL-DYN Sensitivitet 45* Spesifisitet 98* *Hotton J et al.am J Clin Pathol 2013;140:845-852
rstrbc-lyseresistente erytrocytter Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
nvwbc- nonviable WBC WVF white viable fraction- fraksjon på levedyktige leukocytter. nvwbc- ikke levedyktige leukocytter Flagget utløses ved WVF <0,9 Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
FP? Oftest vil NRBC bli skilt fra ikke-levedyktige WBC i optisk scatter. Noen prøver som inneholder atypiske degenererte lymfoide celler kan bli dårlig skilt fra NRBC. I disse tilfellene vil Sapphire klassifisere cellene som lymf og gi FP?flagg. Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Standardiserte kommentarer. Ønsker minst mulig bruk av fri tekst Nr. L101 L103 L108 L113 L114 L110 L111 L121 L124 L137 L141 L142 L143 L132 Nr. L125 L130 Nr. L133 L136 Beskrivelse Maskinell diff. kan ikke utgis pga lavt antall leukocytter. Maskinell diff. kan ikke utgis pga høyt antall leukocytter. Store mononuklære celler = x,x 10^9/L Instrumentet varsler umodne celler. Instrumentet varsler atypiske lymfocytter. B-TPK er >xx 10^9/L. Nøyaktig resultat kan ikke utgis pga trombocyttaggregater. B-TPK er kontrollert i mikroskop. Tpk analysert med CD61. B-tpk er analysert i citrat-blod. Kjerneholdige erytrocytter i perifert blod = x,x 10^9/L Maskinell diff. kan ikke utgis da instrumentet ikke kan skille mellom nøytrofile og monocytter Maskinell diff. kan ikke utgis da instrumentet ikke kan skille mellom lymfocytter og monocytter. Maskinell diff kan ikke utgis da instrumentet ikke kan skille mellom de ulike subpopulasjonene. Store aktiverte mononukleære celler som ved viral infeksjon. Beskrivelse Maskinell differensialtelling og plott er normale, blodutstryk vil ikke bli vurdert av hematolog. Dersom rekvirerende lege likevel mener at det er indikasjon for blodutstryk, må det sendes intern henvisning til hematologisk seksjon. Blodutstryk må samtidig rekvireres på nytt og det må anmerkes i feltet "Merknad fra rekvirent" at henvisning til hematologisk seksjon er sendt. Blodutstryk er ikke vurdert grunnet manglende indikasjon. + navn på hematolog Beskrivelse Normalt hematologisk cytogram blodutstryk ikke vurdert. Ikke påvist patologi i leukocyttrekken blodutstryk ikke indisert.
Korrekt flagg setting Nødvendig med optimal gain setting ( justering) Dvs at cellepopulasjonen har korrekt posisjon i scattergrammet Over tid er det noe drift i cellepopulasjonene Støv i optikk Endringer i temperatur Tilfeldige forskjeller på reagens Laser eldes Detektorer eldes Flytting av instrument Optisk signatur Referanse til flaggsetting Utføres ved installasjon av instrumentet. Hvert instrument har sin egen optiske signatur Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Hvordan får vi info om kvaliteten på Moving average program flagg analyseringen? Kvalitetskontroll program som kan gi informasjon på om de forskjellige komponentene fungerer optimalt. 20 pasientprøver gir en batch( sealed batch) og programmet viser en oversikt over mange sealed batches med definerte grenseverdier. Avvik større enn definerte grenseverdier vil gi alarm Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Retningslinjer for blodutstryk Interne blodutstryk Hemolyse Normocytær anemi der årsaken fortsatt er uklar etter innledende klinisk og biokjemisk evaluering. Granulocytose uten sikker årsak etter innledende klinisk og biokjemisk evaluering Mistanke om leukemi etter klinisk evaluering eller ut fra vurdering av maskinell celletelling/differensialtelling i perifert blod. Eksterne blodutstryk Blastmelding fra hematologiinstrument LUC > 10 % og patologi i mer enn en cellerekke Patologi i alle tre cellerekker Leukocytter > 20 x 109/L Mistanke om lavgradig lymfoproliferativ sykdom; i.e.: absolutt lymfocytose > 6,0 x 109/L hos person > 40 år Vi utfører ca 1-5 eksterne utstryk pr dag/vurd av lab.lege Ca 2-10 interne utstryk pr dag/vurd av hematolog Olgunn S.Lid, NKK-møte 2016
Utfordringer/ forbedringer: Ikke svar på diff.telling:ca 4-5 % av maskinell diff.telling fra kreftavd. blir ikke besvart pga instrumentene klarer ikke skille mellom de ulike subpopulasjonene. Optimalisere /autovalidere mer av analyseringen. Mer tid til kvalitetsforbedringer og vurdering av prøvesvar Mindre tid brukes til manuelle arbeidsoppgaver som arkivering og forflytning av prøver, Behov for digital morfologi/ kompetanseheving innen morfologi
Referanser: Hotton J et al.am J Clin Pathol 2013;140:845-852 Kang SH et al. Int J Lab Hematol 2007