Diagnostikk av HIV-infeksjon Anne-Marte Bakken Kran Førsteamanuensis, konst. overlege Mikrobiologisk avd. OUS, Ullevål
HIV diagnostikk Primærdiagnostikk: Hvilke tester har vi og når skal de brukes? Analysestrategier Hva bør almenpraktikere kunne om HIVdiagnostikk og hvorfor?
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk og hvorfor? Husk å teste for HIV! Hva når en prøve ikke er negativ? Ha en plan for informasjon og henvisning Kjenne til tilgjengelig test-tilbud
HIV diagnostikk i Norge Ca 130 000 HIV tester/år på klinisk indikasjon Screening av ca 65 000 gravide/år Screening av ca 100 000 blodgivere/år Av ca 300 000 analyserte primærprøver: 200-300 nye tilfeller pr år Falske negative Falske positive: Uspesifikke reaksjoner
Hensiktsmessig diagnostikk Trinn 1: Screeningtest Høyt antall analyser (rask, rimelig, lite arbeidskrevende) Hovedmål: Få falske negative «Bivirkning»: En del falske reaktive Trinn 2: Konfirmasjonstest God spesifisitet Kan være dyrere og mer arbeidskrevende
Antall analyser pr år (Ullevål): Ca 70 000 Antall reaktive: ca 300 (ca 0.4%)
HIV diagnostikk Hvilke tester har vi og når skal de brukes?
Klinisk forløp ubehandlet HIV-infeksjon Fauci, A. S. et. al., Ann Intern Med 1996;124:654-663
Diagnostikk: tidslinje for antigen og antistoff www,depts.washington.edu: University of Washington 2007
Aktuelle analyser Diagnostikk av ny infeksjon EIA/CMIA (Ag/As påvisning) Antistoff konfirmasjonstester (Western Blot, rekombinante immunoblot assay el.l.) ELISA antigenpåvisning med nøytralisasjon Nukleinsyrepåvisning (kvalitativ), for eksempel provirus Hurtigtester Erkjent HIV-infeksjon (klinisk oppfølging) HIV-1 RNA RT-PCR (kvantitativ) Resistensundersøkelse Kvantitering av CD4+ T celler
Antistoffpåvisning Virusantigen bundet til overflate
HIV kombinasjonstest (EIA/CMIA): Påviser antigen OG antistoff HIV-1 og HIV-2 antigener HIV-1 antistoff
EIA/ELISA/CMIA Kombinasjonstester (Ag / As) p24 Ag IgM og IgG mot ulike env Ag, både HIV- 1 og HIV-2 Reaktiv etter smitte (tidligst) ca: 10 dager -3 uker (kan gå opptil 2-3 mnd) Prøvemateriale: Serum (evt plasma) Frikjent : Negativ Ag/As-undersøkelse 3 mnd etter eksponering
Aktuelle analyser Diagnostikk av ny infeksjon EIA/CMIA (Ag/As påvisning) Antistoff konfirmasjonstester (Western Blot) Nukleinsyrepåvisning (kvalitativ), for eksempel provirus Hurtigtester? Erkjent HIV-infeksjon (klinisk oppfølging) HIV-1 RNA RT-PCR (kvantitativ) Resistensundersøkelse Kvantitering av CD4+ T celler
BioRad
Western blot
Utvikling av viruskomponenter og antistoffer
Diagnostikk av HIV-infeksjon >2-3 mnd etter smitteeksponering HIV Combo-test (Ag/As): REAKTIV Konfirmasjonstest (Western Blot): POSITIV Tidlig diagnostikk: HIV Combo-test (Ag/As): REAKTIV Kan bli reaktiv allerede 2-3 uker etter smitte Konfirmasjonstest (Western Blot): INKONKLUSIV/NEGATIV MÅ AVKLARES! HIV ELLER USPESIFIKK REAKSJON?
Avklare inkonklusiv WB Rene Ag tester (med nøytralisasjon) Påviser p24 Prøvemateriale: Serum (evt plasma) Kan gjøres i samme serumprøve som WB Provirus Bedre sensitivitet Prøvemateriale EDTA fullblod (Må ta ny prøve) Kontrollprøve (WB) etter 2-3 uker vil alltid * avklare! Kan ikke utelukke HIV-infeksjon * Nesten alltid
Avklare inkonklusiv WB Rene Ag tester (med nøytralisasjon) Påviser p24 Prøvemateriale: Serum (evt plasma) Kan gjøres i samme serumprøve som WB Provirus Bedre sensitivitet Prøvemateriale EDTA fullblod (Må ta ny prøve) Kontrollprøve etter 2-3 uker vil alltid * avklare! * Nesten alltid
HVA ER HIV PROVIRUS?
HIV-1 DNA PCR (Provirus) Påvise HIV integrert i infiserte celler (proviralt DNA ) Prøvemateriale: EDTA blod (holdbar 3 døgn) Indikasjoner: Avklare inkonklusive western blot Tidlig diagnostikk Kan påvises selv ved ikke påvisbart HIV RNA i plasma Avklare vertikal smitte KUN SPESIELLE INDIKASJONER
HIV-1 RNA kvantitering Oppfølging av erkjent HIV-infeksjon Måler virusmengde i plasma Verktøy i klinisk oppfølging IKKE PRIMÆRDIAGNOSTIKK!!
Hurtigtester Svar med en gang Må være forberedt på å håndtere svaret der og da Dårligere sensitivitet enn serologi NB vindusfase! Ta alltid serumprøve i tillegg! Best prediktiv verdi når testene anvendes på risikogrupper Prosjekter i gang: Olafiaklinikken, Brynsenglegene (kveldstilbudet), Sjekkpunkt (tilbud utenfor ordinært helsevesen)
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk og hvorfor? Husk å teste for HIV! Hva når en prøve ikke er negativ? Ha en plan for informasjon og henvisning Risikogrupper Gravide Symptomer Alminneliggjøring Lav terskel redusere stigma? Test and treat
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk og hvorfor? Husk å teste for HIV! Hva når en prøve ikke er negativ? De fleste reaktive viser seg å være uspesifikke! Utvidet testing - som regel også kontrollprøve Endelig avklaring kan ta 3 uker (etter ny prøve) Telefonkontakt med laboratoriet er nyttig Forklare! Forklare! Forklare! Pasienten blir engstelig.
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk og hvorfor? Husk å teste for HIV! Hva når en prøve ikke er negativ? Ha en plan for informasjon og henvisning
Hva hvis prøven er positiv? Vi ringer dere om svaret! Innkalle pasienten, informere Henvise infeksjonsmedisinsk avd. Ring og avtal tid. Får time veldig raskt! Smitteoppsporing Ny serumprøve (utelukke prøveforbytting) Prøve til resistens (MSIS overvåkning)
Oppsummert: Serumprøve for diagnostikk EIA (Ag/As) kombinasjonstest Høy sensitivitet (NB! Diagnostisk vindu) Mange uspesifikke reaksjoner Hvis reaktiv: Konfirmasjonstest Hvis inkonklusiv: Kontrollprøve etter 2-3 uker avklarer! Ring laboratoriet ved spørsmål!
Bokanbefaling: Forfatter: Overlege Åse Haugstvedt ved Olafiaklinikken