Legionella Olav B. Natås Stavanger Universitetssjukehus

Transkript

1 Legionella Olav B. Natås Stavanger Universitetssjukehus 1

2 Oppdagelsen av Legionella 58.th annual convention of the American Legion i 1976 Bellevue Stratford Hotel, Philadelphia 221 av ca deltakere ble syke 34 døde 2

3 Legionella - sykdommer Legionærsykdommen alvorlig pneumoni Pontiac feber influensaliknende sykdom 3

4 Legionella-arter 4

5 Legionella-vanligst isolerte arter 5

6 Legionella pneumophila L. pneumophila inndeles i 16 serogrupper L. pneumophila sgr 1 er årsak til 90% av alle tilfeller med legionær sykdommen i Europa og USA L. pneumophila sgr 1 er årsak til 50 % av infeksjonene i Australia og New Zealand, L. longbeachae er årsak til 30 % 6

7 Legionella sgr 1, subtyper L. pneumophila sgr 1 kan inndeles i flere subtyper med forskjellige teknikker (serologi, phenotypi, genetiske metoder) Serologisk typing Dresden panelet Subtype MAb 3/1(=Pontiac subtype =Joly monoklonal type 2 (MAb2)) utgjør 67 90% av L. pneumophila sgr 1 som isoleres ved legionærsykdommen. Patogenitetsfaktor 7

8 Legionella - utbredelse Lever fritt i ferskvann og fuktige miljøer Danner biofilm sammen med andre mikrober Formerer seg intracellulært i protozoer (og lungemakrofager, monocytter) 8

9 Legionella intracellulær formering 9

10 Legionella intracellulær formering 10

11 Legionella vekstkrav Vekstfaktorer L cystein, oppløselig jern Temperatur o C for formering 0 68 o C for overlevelse Ph ph 5,0 8,5 ph 6,9 optimalt 11

12 Legionella - smittemåte Inhalasjon av aerosoler med bakterier kjøletårn spa bad fuktere fontener innendørs m.m. Aspirasjon av vann sykehusinfeksjoner 12

13 Legionærsykdommen - symptomer Symptomer initialt: feber, kan være over 40 grader frysninger hodepine muskelsmerter Symptomer etter 2 3 dager: hoste, kort pust brystsmerter slapphet, tap av appetetitt G I syptomer: kvalme oppkast, diare forvirring, mentale forandringer 13

14 Legionellainfeksjoner -symptomer Legionnaires' disease Pontiac fever Clinical features Pneumonia: cough, fever, chest pain Flu-like illness (fever, chills, malaise) without pneumonia Radiographic pneumonia Yes No Incubation period 2-14 days after exposure hours after exposure Etiologic agent Legionella species Legionella species Attack rate* < 5% > 90% Isolation of organism Possible Virtually never Outcome Hospitalization common Case-fatality rate: 5-40%** Hospitalization uncommon Case-fatality rate: 0% * Percent of persons who, when exposed to the source of an outbreak, become ill. ** Percent of persons who die from Legionnaires' disease or Pontiac fever. 14

15 Legionærsykdommendifferensialdiagnose Annen alvorlig pneumoni Klinikk og funn er ikke typisk for legionærsykdommen Legionellapneumoni bør mistenkes ved: Høy feber Manglende ekspektorat Lavt serum natrium Høyt laktat dehydrogenase Høy CRP Lavt platetall 15

16 Legionærsykdommenantibiotikabehandling Antibiotika som gir høy intracellulær konsentrasjon må anvendes Levofloxacin mg x1iv, po Azitromycin 500 mg x 1iv, po 16

17 Legionella - risikofaktorer Eldre > 65 år Røking Nedsatt immunforsvar (AIDS, immunosupressive medikamenter, m.m) Kroniske lungesykdommer (KOLS, emfysem) Cancer, diabetes, nyresvikt 17

18 Legionella-diagnostikk Antigen test i urin (BinaxNow og Biotest ELISA pluss flere) Dyrkning (pasientprøver og miljøprøver) PCR av 16S rrna (direkte i prøvemateriale) Antistoff test 18

19 Diagnostiske tester ved legionærsykdommen CID 2003:36 19

20 Legionella dyrkning Regnes som gullstandard. Utbytte avhenger av erfaring Selektivt medium BCYE agar (buffered charcoal yeast extract) vekst med L cystein i mediet ingen vekst uten L cystein Sensitivitet avhenger av sykdommens alvorlighetsgrad mild pneumoni % alvorlig pneumoni > 90 % 20

21 Legionella pneumophila 21

22 Legionellakolonier i stereomikroskop. Cut-glass appearance 22

23 Legionellabakterier Gram-farging 23

24 Legionella - artsbestemmelse Urin antigen test positiv = L. pneumophila sgr 1 Artsbestemmelse ved vekst Agglutinasjonstest (Oxoid) L. pneumophila sgr1 L. pneumophila sgr 2 14 Legionella spp.: L. longbeachae 1 og 2, L. bozemanii 1 og 2, L. dumoffi, L. gormanii, L. jordanis, L. micdadei, L. anisa Real time PCR av 16S rrna, Sekvensering av 16S rrna Sekvensering av mip genet MALDI TOF MS 24

25 Moliner C et al. Rapid identification of Legionella species by mass spectrometry. J Med Microbiol 2010;59: humanpatogene legionella arter testet Sensitivitet genusnivå 99,2 % (235/237) Sensitivitet speciesnivå 89,9 % (213/237) Sensitiviteten variert mellom ulike arter: 100% sensitivitet på species nivå ble funnet for L. pneumophila (114/114), L. cincinnatiensis (1/1), L. erythra (14/14), L. feeleii (7/7), L. londiniensis (12/12), L. oakridgensis (5/5), L. parisiensis (8/8), L. sainthelensi (5/5) For 11 andre arter varierte sensitiviteten på speciesnivå mellom 0 og 85,7% 25

26 26

27 Legionella urin antigen test Detekterer LPS i cellevegg hos L. pneumophila sgr 1. Kan bli positiv 1. sykdomsdag EIA tester (Biotest EIA, Binax EIA) og Immunkromatografiske tester (Binax NOW) Sensitivitet % Mild sykdom % Alvorlig sykdom % Spesifisitet > 99 % 27

28 Legionella. Urin antigen test 28

29 Legionella serologi Har ingen plass ved akutt diagnostikk av legionellainfeksjoner ELISA tester IFA tester og microagglutinasjon serokonversjon eller firefolds titerstigning i IgG eller IgM antistoff % serokonversjon første sykdomsuke firefold titerstigning vanligvis etter 3 4 uker, men kan ta mer enn 10 uker. 29

30 Tilfeller av legionellose i Norge meldt MSIS etter diagnoseår og aldersgruppe Tilfeller av legionellose i Norge meldt MSIS etter diagnoseår og smittested 30

31 31

32 32

33 33

34 34

35 35

36 Legionærsykdom større utbrudd i Norge Stavanger syke, 7 døde Smittekilde kjøletårn Østfold syke, 11 døde Smittekilde skrubberanlegg Østfold syke, 2 døde Smittekilde biodam ved treforedlingsbedrift? 36

37 Legionella, oppklaring av utbrudd Typing av Legionella pneumophila sgr 1 Sekvensbasert typing SBT typing Serotyping, monoklonale antistoffer (Dresden panelet) 37

38 Wedege et al. Molecular characterization of clinical and environmental isolates of Legionella pneumophila in Norway, Scand J Infect Dis 2012;Early Online:1 6 38

39 Spørsmål? Kommentarer? 39