system no Total -hcg 7K78 B7K78N G2-7066/R04 Les markerte endringer Revidert juni 2012 Total -hcg Kundeservice: Ytterligere kontaktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice eller på www.abbottdiagnostics.com. Dette pakningsvedlegget må leses nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr for in vitro-diagnostikk Lotnummer Utløpsdato Kyvetter Prøvekopper Septum Oppbevares ved 2 8 C Ekstra skrukorker Se pakningsvedlegg Reagenslot Produsent Serienummer Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. 1
NAVN ARCHITECT Total β-hcg BRUKSOMRÅDE ARCHITECT Total β-hcg-analysen er en immunkjemisk kjemi luminescensmikropartikkelanalyse (CMIA) til kvantitativ og kvalitativ bestemmelse av betahumant choriongonadotropin (β-hcg) i humant serum og plasma for tidlig påvisning av graviditet. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING Humant choriongonadotropin (hcg) er et sialoglykoprotein med en molekylvekt på ca. 46 000 dalton. 1 HCG utskilles initialt av livmorens trofo blastiske celler kort tid etter at det befruktede egget er festet til livmor veggen. 2,3 Den hurtige stigningen i hcg-serumnivåer etter unnfangelse gjør det til en utmerket markør for tidlig bekreftelse og kontroll av graviditet. Fysiologisk sett virker det som om hcg opprettholder det gule legemet og dermed tillater syntese av progesteron og østrogener som støtter endometriet. Etter hvert som en ukomplisert graviditet utvikles, overtar placenta produksjonen av disse hormonene. Serumets hcg-nivåer øker til maksimums konsentrasjon, reduseres deretter og jevnes ut. HCG sirkulerer som det intakte molekylet i serumet hos friske kvinner med ukomplisert graviditet. Under enhetene spaltes raskt og skilles ut gjennom nyren. 4 Placentahormonet, hcg, ligner på det luteiniserende hormonet (LH), det follikkel stimulerende hormonet (FSH) og det tyreoideastimulerende hormonet (TSH). Alle er glykoproteiner bestående av to ikkekovalentbundne ulike underenheter, kalt alfa og beta, med tilknyttede karbohydrat sidekjeder. Disse glykoproteinenes alfa-underenheter er svært like. Derimot bestemmer beta-underenhetene de biologiske og immunkjemiske spesifisitetene. 5,6 Beta-underenhetene til hcg og LH viser betydelig likhet i aminosyreinnhold. Aminosyrerester som er spesifikke for hcgs beta-underenhet bestemmer den immunkjemiske spesifisiteten. 7 Når sensitive, kvantitative analyser til måling av β-hcg i serum er blitt tilgjengelige, har det vist seg at hcg-nivåer kan være nyttige til prediksjon av spontanaborter 8,9 og som en hjelp til påvisning av ektopisk graviditet 8,10,11 og svangerskap med flere fostre. 8 ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT Total β-hcg-analysen er en totrinns immunkjemisk analyse for å bestemme forekomst av β-hcg i humant serum og plasma ved bruk av teknologien for immunkjemisk kjemiluminescens mikropartikkelanalyse (CMIA) med fleksible analyseprotokoller som kalles Chemiflex. I det første trinnet blandes prøven og anti-β-hcg-belagte para magnetiske mikropartikler. β-hcg som finnes i prøven, bindes til de anti-β-hcgbelagte mikropartiklene. Etter vasking tilsettes i trinn to akridinmerket antiβ-hcg-konjugat. Pretrigger- og triggerløsning tilsettes deretter reaksjonsblandingen. Kjemiluminescensreaksjonen som oppstår, måles i relative lysenheter (RLU). Mengden av β-hcg i prøven og mengden av RLU målt av optikken i ARCHITECT i System er direkte proporsjonale. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 3. REAGENSER Reagenspakke, 100 tester / 500 tester MERK: Reagenspakkene har ulikt antall tester avhengig av bestilling. MERK: Noen pakningsstørrelser er ikke tilgjengelig i alle land eller til bruk på alle Architect i Systems. Ta kontakt med Abbott kundeservice. ARCHITECT Total β-hcg Reagent Kit (7K78) 1 eller 4 flasker (6,6 ml / 27,0 ml) anti-β-hcgbelagte (mus, monoklonal) mikropartikler i TRIS-buffer med proteinstabilisatorer (bovine). Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. 1 eller 4 flasker (2,1 ml / 7,4 ml) akridinmerket (mus, monoklonal) anti-β-hcg-konjugat i MES-buffer med proteinstabilisatorer (bovine). Minimumskonsentrasjon: 2,9 µg/ml. Konserverings middel: antimikrobielt middel. Fortynningsløsning ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT i Wash Buffer MERK: Flaske og mengde varierer avhengig av bestilling. Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk Dette pakningsvedlegget må leses nøye. Hvis instruksjonene i dette paknings vedlegget ikke følges, kan ikke analyse resultatenes pålitelighet garanteres. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig, og at alt materiale som inneholder eller kan inneholde smittefarlige stoffer, håndteres i overensstemmelse med gjeldende sikkerhetsforskrifter for biologisk materiale. 12-15 Sikkerhetsdatablader er tilgjengelige på www.abbottdiagnostics.com eller kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. En detaljert beskrivelse av forholdsregler ved drift av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 8. Forholdsregler ved bruk Reagenspakken skal ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra ulike reagenspakker. Før ARCHITECT Total β-hcg-reagenspakken plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som har bunnfalt under transport. Informasjon om blanding av mikropartikler finnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordamping og kontaminering av reagenser og for å sikre reagensenes holdbarhet. Testresultatenes pålitelighet kan ikke garanteres hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når et septum settes på en åpen reagensflaske. Når et septum er plassert på en åpen reagensflaske, må ikke flasken vendes. Dette vil føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septumet, tørke inn. Dette vil vanligvis være tørkede salter, som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved betjening av systemet finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 7. Oppbevaring ARCHITECT Total β-hcg-reagenspakken skal oppbevares ved 2 8 C og kan brukes straks den er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT Total β-hcg-reagenspakken kan oppbevares i ARCHITECT i System i maksimalt 30 dager. Etter 30 dager skal reagenspakken kastes. Informasjon om styring av reagens holdbarhet i systemet finnes i brukerhåndboken for Reagenser kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT i System. Hvis reagensene fjernes fra systemet, bør de oppbevares ved 2 8 C (med septum og nye skrukorker) i loddrett stilling. Reagenser som oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i de opprinnelige eskene for å sikre at de holder seg loddrett. Hvis flasken med mikro partikler ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Etter at reagensene er tatt ut av systemet skal det bestilles en reagensskanning for å oppdatere systemets stabilitetstidsmåler. 2
Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Når en kontrollverdi ligger utenfor det angitte området, kan dette tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige og prøvene skal analyseres på nytt. Rekalibrering kan være påkrevd. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 10. INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT Total β-hcg-rutineprotokollen (analysenummer 651) må installeres på ARCHITECT i2000 fra ARCHITECT i Assay CD ROM før analysen utføres. Analysefilene for rutineprotokollen (analysenummer 651) og/eller STAT-protokollen (analysenummer 030) for ARCHITECT Total β-hcg må installeres på ARCHITECT i System med STAT-protokoll fra ARCHITECT i Assay CD-ROM før analysen utføres. Informasjon om installering av analysefiler finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 2. ARCHITECT Total β-hcg-rutineprotokollen (to-trinns 18-4) er tilgjengelig for bruk med ARCHITECT i Systems. ARCHITECT Total β-hcg STAT-protokollen (to-trinns 4-4) er tilgjengelig for bruk med ARCHITECT i System med STAT-protokoll. Informasjon om utskrift av analyseparametre finnes i brukerhåndboken for Ytterligere informasjon om systemprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet. Standard benevning for ARCHITECT Total β-hcg-analysen er miu/ml. En alternativ benevning, IU/l, kan velges for resultatrapportering ved å endre analyseparameteren "Result concentration units" til "IU/L". Systemet bruker omregningsfaktoren 1. PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Humant serum (inkludert serum tatt i serumseparatorglass) eller plasma tatt i litiumheparin, natriumheparin eller kalium-edta kan brukes i ARCHITECT Total β-hcg-analysen. Ingen andre antikoagulanter er godkjent til bruk med ARCHITECT Total β-hcganalysen. Følg glassprodusentens instruksjoner for behandling av serum- og plasmaprøvetakingsglass. System kan ikke verifisere hvilket prøvemateriale som benyttes. Det er operatørens ansvar å kontrollere at riktig prøvemateriale brukes til ARCHITECT Total β-hcg-analysen. Utilstrekkelig sentrifugering eller forekomst av fibrin eller utfellinger i prøven kan gi feilaktig resultat. Abbott Laboratories anbefaler bruk av plasma til STAT-testing. Da plasma ikke krever den samme koaguleringstiden som serum, er det mindre sannsynlig at det vil forekomme fibrin eller andre utfellinger. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver for å unngå krysskontaminering. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser. Kontroller det ikke er bobler i prøvene slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analysering. Bruk en ny rørepinne til hver prøve for å unngå krysskontaminering. For å oppnå optimale resultater bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer og utfellinger. Kontroller at fullstendig koagulering i serumprøver har funnet sted før sentrifugering. Enkelte prøver kan ha forlenget koaguleringstid, spesielt hvis de er tatt fra pasienter i antikoagulantbehandling eller trombolyttisk behandling. Hvis prøven sentrifugeres før fullstendig koagulering, kan forekomst av fibrin medføre feil resultater. Hvis det vil gå mer enn 24 timer før testing utføres, skal serum eller plasma fjernes fra koagelet, serumseparatoren eller røde blodlegemer. Prøver kan oppbevares i opptil 7 dager ved 2 8 C før de blir testet. Hvis det vil gå mer enn 7 dager før prøven testen, skal den fryses ved -10 C eller kaldere. Prøver som var oppbevart ved -10 C eller kaldere i 12 måneder viste ingen forskjell i yteevne. Unngå gjentatt frysing/opptining av prøvemateriale. Etter opptining skal fryst prøvemateriale blandes GRUNDIG enten ved LAV hastighet på en prøveblander eller ved at glassene vendes forsiktig. De skal dessuten sentrifugeres før bruk for å fjerne røde blodlegemer eller utfellinger for å sikre optimale resultater. Ved forsendelse skal prøvematerialet pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale forskrifter for transport av klinisk prøvemateriale og smittefarlige komponenter. Prøver kan sendes ved termisk kontrollert kjøleskapstemperatur eller frosne (tørris). Før forsendelse anbefales det å separere prøvematerialet fra koagelet, serumseparatoren eller de røde blodlegemene PROSEDYRE Reagenspakken inneholder 7K78 ARCHITECT Total β-hcg Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System ARCHITECT Total β-hcg-analysefilen, som kan hentes fra: System e-assay CD-ROM som ligger på www.abbottdiagnostics.com Assay CD-ROM 7K78-01 ARCHITECT Total β-hcg Calibrators 7K78-10 ARCHITECT Total β-hcg Controls 7D82-50 ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 9. Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) til pipettering av mengdene som er angitt i pasientprøve- eller kontrollbestillingsskjermbildet. Analyseprosedyre Før ARCHITECT Total β-hcg-reagenspakken plasseres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som har bunnfalt under transport: Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Kontroller at mikropartiklene er resuspendert i flasken. Hvis det fremdeles er mikropartikler på bunnen av flasken, skal flasken vendes flere ganger til mikropartiklene er fullstendig resuspendert. Når mikropartiklene er resuspendert, skrus lokket av og kastes. Bruk rene hansker og ta et septum ut av posen. Sett septumet forsiktig på flaskeåpningen. Hvis mikropartiklene ikke er resuspendert, MÅ IKKE REAGENSET BRUKES. Kontakt Abbott kundeservice. Bestill testene. Plasser ARCHITECT Total β-hcg-reagenspakken i ARCHITECT i System. Kontroller at alle nødvendige reagenser er til stede. Kontroller at alle reagensflasker er utstyrt med septum. Minimumsvolumet i en prøvekopp beregnes av systemet og fremgår av bestillingsutskriften (Orderlist report). Det kan maksimalt utføres 10 replikater fra samme prøvekopp. For å redusere virkningen av fordamping, må det sjekkes at det er nok prøvemateriale i prøvekoppen før testen analyseres. Prioritert: 75 µl for den første Total β-hcg-testen pluss 25 µl for hver ekstra Total β-hcg-test fra den samme prøvekoppen. 3 timer i systemet: 150 µl for den første Total β-hcg-testen pluss 25 µl for hver ekstra Total β-hcg-test fra den samme prøvekoppen. > 3 timer i systemet: Mer prøvevolum er påkrevd. Informasjon om fordamping av prøver og volumer finnes i brukerhåndboken for Det bør alltid sjekkes at det er nok prøvemateriale i primær- og sekundærglassene. For å oppnå anbefalt mengde for ARCHITECT Total β-hcg Calibrators og Controls, bør flaskene holdes loddrett og 4 dråper av hver kalibrator eller 3 dråper av hver kontroll fordeles i de respektive prøvekoppene. Sett inn prøvene. Informasjon om plassering av prøver finnes i brukerhåndboken for 3
Trykk på RUN. ARCHITECT i System utfører følgende funksjoner: Flytter prøven til aspireringsposisjonen. Setter inn en kyvette (RV) i analyseringsbanen. Aspirerer og overfører prøvematerialet til kyvetten. Flytter kyvetten én posisjon fram og overfører mikropartikler til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter konjugat til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter pretrigger- og triggerløsning. Måler emisjonen av kjemiluminescens for å påvise forekomst og mengde av β-hcg i prøvematerialet. Aspirerer innholdet i kyvetten til flytende avfall og overfører kyvetten til beholderen for fast avfall. Beregner resultatet. Informasjon om bestilling av pasientprøver, kalibratorer og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer finnes i brukerhåndboken for For å oppnå optimal yteevne, er det viktig å følge vedlikeholdsprosedyrene slik de er beskrevet i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, følges disse prosedyrene. Fortynningsprosedyre Prøvemateriale med en Total β-hcg-verdi som overstiger 15 000,00 miu/ml, er merket med koden ">15,000.00" og kan fortynnes enten med den automatiske fortynningsprotokollen eller den manuelle fortynningsprosedyren. Hvis den automatiske fortynningsprotokollen brukes, utfører systemet en 1:15-fortynning av prøven og regner automatisk ut konsentrasjonen av den fortynnede prøven og rapporterer resultatet. Manuelle fortynninger skal utføres på følgende måte: Anbefalt fortynning for Total β-hcg er 1:15. Det anbefales at fortynningen ikke overstiger 1:75. For å få en 1:15-fortynning tilsettes 20 µl av pasientprøven til 280 µl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). Operatøren må taste inn fortynningsfaktoren i pasient- eller kontrollbestillingsskjermbildet. Systemet bruker denne fortynningsfaktoren til automatisk utregning av prøve konsentrasjonen før fortynning. Dette vil være resultatet som rapporteres. Resultatet (før utregning med fortynnings faktoren) skal være større enn 467,00 miu/ml. Hvis operatøren ikke oppgir fortynningsfaktoren, vil det rapporterte resultatet være det samme som den fortynnede prøven. Dette resultatet (før utregning med fortynningsfaktoren) skal være større enn 467,00 miu/ml. MERK: Hvis et resultat på < 7000,00 miu/ml (1:15 automatisk fortynningsprotokoll) vises på skjermen eller skrives ut, betyr det at prøven må testes på nytt ved lavere fortynning eller ufortynnet. Resultatet og tolkingen skal ikke rapporteres. Ytterligere informasjon om bestilling av fortynninger finnes i brukerhåndboken for Kalibrering En ARCHITECT Total β-hcg-kalibrering utføres ved at kalibrator A, B, C, D, E og F testes i duplikat. Én prøve av alle nivåer av Total β-hcgkontroller må testes for å evaluere kalibreringen. Kontrollverdiene skal ligge innenfor områdene som er angitt i pakningsvedlegget. Kalibratorene bør behandles som prioriterte prøver. Kalibratorområde: 0,00 15 000,00 miu/ml. Rutine- og STAT-protokoller krever separate kalibreringer men bare én reagenspakke. Når en ARCHITECT Total β-hcg-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten ytterligere kalibrering med mindre: Det brukes en reagenspakke med et nytt lotnummer. Kontrollene ligger utenfor angitt område. Ytterligere informasjon om hvordan en kalibrering utføres finnes i bruker håndboken for ARCHITECT-systemet, kapittel 6. PROSEDYRE FOR KVALITETSKONTROLL Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT Total β-hcg-analysen er at én prøve av hver kontroll testes 1 gang daglig. Hvis laboratoriets prosedyrer for kvalitetskontroll krever hyppigere bruk av kontroller for å verifisere testresultater, følges laboratoriets prosedyrer. Kontrollverdiene skal ligge innenfor konsentrasjonsområdene som er angitt i pakningsvedlegget. På grunn av variasjon i analyttsammensetning og/eller matrikser, kan det hende at eksternt kvalitetskontrollmateriale ikke gir identiske resultater ved alle hcg-analyser. Kvalitetskontrollmateriale som ikke er levert av Abbott kan inneholde store mengder frie beta-underenhet hcgmolekyler. Kvalitetskontrollmateriale som ikke er levert av Abbott kan gi forskjellige resultater ved sammenligning av Total-hCG-analyse med en total β-hcg-analyse. Det enkelte laboratoriet må avgjøre egnetheten til hvert kontrollmateriale for spesifikke immunkjemiske analyser og validere materialet før bruk. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Mer informasjon om fremgangsmåte for verifisering av analysens dokumenterte egenskaper finnes i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, vedlegg B. ARCHITECT Total β-hcg-analysen tilhører metodegruppe 1. RESULTATER ARCHITECT Total β-hcg-analysen bruker en 4-parameters logistisk datareduksjonsmetode (4PLC, Y-vektet) for å generere en kalibreringskurve. Alternativ benevning Standard benevning for ARCHITECT Total β-hcg-analysen er miu/ml. Når den alternative benevningen, IU/l, er valgt, bruker systemet omregningsfaktor 1. Omregningsformel: (konsentrasjon i miu/ml) x (1) = IU/l Flagg Noen resultater kan ha informasjon i flaggfeltet. Nærmere beskrivelse av flaggene som kan vises i dette feltet, finnes i brukerhåndboken for Tolking av resultater Ved kvalitativ tolking av ARCHITECT Total β-hcg testresultater vil prøvemateriale med β-hcg-nivåer som er lavere enn eller lik 5,00 miu/ml, bli rapportert som "NEGATIVE" i feltet "INTERPRETATION" i testresultatskjermbildet eller på utskriften. Prøvemateriale med β-hcg-nivåer som er større enn eller lik 25,00 miu/ml, vil bli rapportert som "POSITIVE". Prøve materiale med β-hcg på mer enn 5,00 miu/ml og mindre enn 25,00 miu/ml vil bli rapportert kun med konsentrasjoner. Ingen tolking vil bli rapportert for disse resultatene. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER Denne analysen kan påvise Total-hCG (intakt) så vel som frie β-hcgunderenheter. For å stille en diagnose skal hcg-resultater alltid brukes i sammen heng med andre data, f.eks. pasientens medisinske historikk, symptomer, resultater av andre prøver, kliniske utredninger osv. Svangerskap utenfor livmoren kan ikke skilles fra normal graviditet med hcgmålinger alene. 10,11 Resultatene av denne eller andre diagnostiske tester skal brukes og tolkes kun i sammenheng med det generelle kliniske bildet. Hvis hcg-nivået ikke samsvarer med eller ikke støttes av kliniske utredninger, skal resultatene bekreftes med en alternativ hcg-metode. Dette kan inkludere kvalitativ testing av urin. 29 Fravær av hcg i urinen kan tyde på et falskt forhøyet serumresultat. Resultater kan også bekreftes ved å utføre seriefortynninger av prøven. Prøvene som inneholder interfererende komponenter viser vanligvis, men ikke alltid, ikke-lineære resultater ved fortynning. ARCHITECT Total β-hcg-analysen er validert til bruk kun ved tidlig påvisning av graviditet. Den er ikke godkjent til noen annen bruk som f.eks. svulstmarkørscreening, svulstmarkørovervåking osv. og bør ikke benyttes til annen bruk. I sjeldne tilfeller kan hcg-nivåer fremstå som konsekvent forhøyet. Dette kan skyldes, men er ikke begrenset til, forekomst av følgende: 20,21,28,29,31,32 - heterofile antistoffer - ikke-spesifikk proteinbinding - hcg-lignende komponenter - trofoblastiske eller ikke-trofoblastiske neoplasmer 4
I likhet med alle immunkjemiske reaksjoner, kan ukjente interferenser fra medikamenter eller endogene komponenter påvirke resultatene. Forhøyede hcg-nivåer er forbundet med enkelte patologiske tilstander (f.eks. trofoblastiske og ikke-trofoblastiske neoplasmer) 16,17 og resultatene av denne testen skal ikke brukes ved diagnostisering av disse unormale tilstandene. Det har vært rapportert om personer som har fått unødvendig medisinsk behandling og kirurgiske inngrep, inkludert kjemoterapi og hysterektomi, når hcg-resultatene ble benyttet ved diagnostisering av unormale tilstander. Interfererende komponenter (som f.eks. heterofile antistoffer, ikkespesifikke proteiner eller hcg-lignende komponenter) kan gi falskt for lave eller falskt for høye resultater. Disse interfererende komponentene kan gi falske resultater i hele analysens område, ikke bare ved lave nivåer, og kan indikere forekomst av hcg når det ikke foreligger. Påvisning av svært lave nivåer av hcg utelukker ikke graviditet. 21 Lave nivåer av hcg kan forekomme hos tilsynelatende friske, ikke-gravide personer. 26,27 Da hcg-verdier fordobles ca. hver 48. time ved normal graviditet, 21 bør det tas prøver på nytt fra pasienter med svært lave nivåer av hcg etter 48 timer. Post-menopauseprøvemateriale kan gi svakt positive resultater på grunn av lave hcg-nivåer som ikke har med graviditet å gjøre. Når det foreligger svakt positive resultater, er det god laboratoriepraksis å ta ny prøve og teste på nytt etter 48 timer, eller teste med en alternativ hcg-metode. På grunn av analysens høye grad av sensitivitet kan prøvemateriale som testet positivt de første dagene etter unnfangelse, senere vise seg å være negativt på grunn av spontanabort. Spontanabort forekommer hos 22 % av graviditetene som ikke er oppdaget klinisk og hos 31 % av alle graviditeter. 30 Det er god laboratoriepraksis å ta ny prøve og teste på nytt ved svakt positive resultater etter ytterligere 48 timer. Prøver fra pasienter som har fått preparater som inneholder musemonoklonale antistoffer for diagnostisering eller behandling, kan inneholde humane anti-museantistoffer (HAMA). Slikt prøvemateriale kan vise enten falskt for høye eller falskt for lave resultater ved testing med reagenser som benytter monoklonale antistoffer fra mus. 18,19 Dette prøvematerialet skal ikke testes med Abbott ARCHITECT Total β-hcg-analysen. Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med reagensimmunglobuliner og interferere med immunkjemiske in vitroanalyser. 20,21,32 Pasienter som rutinemessig eksponeres for dyr eller animalske serumprodukter, kan være disponert for denne interferensen, og anormale verdier kan observeres. Mer informasjon kan være påkrevd for diagnostisering. FORVENTEDE VERDIER Da hcg vanligvis syntetiseres og utskilles av celler i placenta eller dennes forløper, er det lave til upåviselige nivåer av hormonet hos friske, ikkegravide individer. 16 Konsentrasjoner av β-hcg målt i sera fra ikke-gravide individer, som rapportert i litteraturen, er < 5 miu/ml. 22 Konsentrasjonen av β-hcg i maternalt serum stiger raskt tidlig i graviditeten. β-hcg-nivåer på mellom 5 miu/ml og 25 miu/ml kan indikere tidlig graviditet. 2,23 Verdier av β-hcg når vanligvis maksimumsnivå i første trimester og synker gradvis gjennom resten av graviditeten. Prøvemateriale fra 199 gravide kvinner ble delt inn i fire intervaller basert på antall uker siden forrige menstruasjon (LMP; 1 10, 11 15, 16 22, 23 40) og testet med ARCHITECT Total β-hcg-analysen. Resultatene er oppsummert i tabellen nedenfor. Uker siden forrige menstruasjon (LMP) n Min Maks Områder 2,5 persentil 97,5 persentil 1 10 50 <1,20 417 430 202 231 000 11 15 50 16 996 247 465 22 536 234 990 16 22 49 6860 50 239 8007 50 064 23 40 50 1583 65 911 1600 49 413 Disse resultatene er representative data fra én studie. Det anbefales at det enkelte laboratorium fastsetter sine egne forventede verdier. SPESIFIKKE EGENSKAPER Presisjon ARCHITECT Total β-hcg-analysen skal ha en presisjon på < 10 % (total CV). Det ble utført en studie for ARCHITECT Total β-hcg-analysen basert på veiledning fra EP5-T2-dokumentet fra Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, tidligere NCCLS). 24 Et panel med tre prøver basert på behandlet humant serum ble analysert med to reagensloter i replikater på to ved to forskjellige tidspunkter per dag i 20 dager. Dataene fra denne studien er oppsummert i tabellen nedenfor.* automatisk fortynning β-hcg-kons. % gjenfinning = x 100 manuell fortynning β-hcg-kons. Panel- Reagenslot Instru- Gj.snittlig kons.verdi Innen-serie Totalt prøve ment n SD % CV SD % CV 1 1 1 80 21,07 0,984 4,7 1,027 4,9 1 1 2 80 24,97 0,880 3,5 1,115 4,5 1 2 1 80 25,22 1,027 4,1 1,134 4,5 1 2 2 80 24,75 0,819 3,3 1,096 4,4 2 1 1 80 735,93 14,917 2,0 18,144 2,5 2 1 2 80 772,66 12,161 1,6 14,671 1,9 2 2 1 80 750,99 13,812 1,8 16,065 2,1 2 2 2 80 754,87 11,762 1,6 12,592 1,7 3 1 1 80 5063,95 84,801 1,7 107,073 2,1 3 1 2 80 5116,40 72,066 1,4 86,052 1,7 3 2 1 80 4976,44 98,439 2,0 109,379 2,2 3 2 2 80 5052,13 59,656 1,2 79,602 1,6 * Representative data. Resultatene i de ulike laboratoriene kan avvike fra disse dataene. Gjenfinning ARCHITECT Total β-hcg-analysen skal å ha en gjennomsnittlig gjenfinning på 100 ± 10 % når prøvematerialet er beriket med kjente mengder β-hcg. En kjent konsentrasjon av hcg (1000,45 miu/ml) ble tilsatt til 8 sekundærglass med humant serum. Konsentrasjonen av β-hcg ble målt med ARCHITECT Total β-hcg-analysen og gjenfinnings prosenten ble beregnet. Gjenfinningprosenten for ARCHITECT Total β-hcg-analysen varierte fra 104,1 % til 108,8 % med et gjennomsnitt på 106,7 %. Dette er representative data. Resultatene i de ulike laboratoriene kan avvike fra disse dataene. Fortynningsverifisering Nøyaktigheten til den automatiske fortynnings protokollen for ARCHITECT Total β-hcg ble evaluert med humant serum som prøvemateriale. Resultater fra prøvemateriale testet i replikater på to med 1:15 automatisk fortynnings protokoll ble sammenlignet med resultater fra det samme prøvematerialet som var fortynnet 1:15 med ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent. Resultatet ble evaluert som prosentvis gjenfinning og ble beregnet med følgende formel:* Prøvemateriale Manuell fortynning β-hcg-kons. Automatisk fortynning β-hcg-kons. % gjenfinning A 98 488,05 102 152,34 103,7 B 27 534,10 27 199,45 98,8 C 47 730,65 46 994,66 98,5 D 13 413,25 13 438,39 100,2 E 10 391,55 9463,34 91,1 * Representative data. Resultatene i de ulike laboratoriene kan avvike fra disse dataene. Analytisk sensitivitet ARCHITECT Total β-hcg-analysen skal ha en analytisk sensitivitet på 1,2 miu/ml. Analytisk sensitivitet defineres som konsentrasjonen ved to standardavvik fra den gjennomsnittlige RLU-verdien til ARCHITECT Total β-hcg Calibrator A (0,00 miu/ml) og representerer den laveste målbare konsentrasjonen av β-hcg som kan skilles fra null. 5
Spesifisitet ARCHITECT Total β-hcg-analysen skal ha en gjennomsnittlig analytisk spesifisitet på < 10 % kryssreaktivitet med FSH, LH og TSH. Sekundærglass med humant serum som inneholdt β-hcg ble tilført 150 miu/ml FSH, 250 miu/ml LH og 100 µiu/ml TSH og analysert for β-hcg. Kryssreaktiviteten ble beregnet som prosent interferens og var mindre enn 10 % for hver komponent som ble tilsatt. Carryover Carryover fra en prøve som inneholdt 1 000 000 miu/ml β-hcg til en prøve med konsentrasjon 0 miu/ml β-hcg var mindre enn 7,5 miu/ml β-hcg. MERK: Vær oppmerksom på at enkelte prøver kan vise forhøyet konsentrasjon på grunn av ansamling av proteiner på prøvepipetten. Informasjon om feilsøking finnes i brukerhåndboken for ARCHITECTsystemet, kapittel 10. Interferens ARCHITECT Total β-hcg-analysen skal å ha en potensiell interferens fra hemoglobin, bilirubin, triglyserider og protein på < 10 % ved nivåene oppgitt nedenfor. Hemoglobin - < 10 % ved 500 mg/dl Bilirubin - < 10 % ved 20 mg/dl Triglyserider - < 10 % ved 3000 mg/dl Protein - < 10 % ved 2 g/dl og 12 g/dl Nøyaktighet ved korrelasjon ARCHITECT Total β-hcg-analysen skal ha en slope på 1,0 ± 0,15 og en korrelasjonskoeffisient (r) på > 0,95 innenfor området 0 15 000 miu/ml ved sammenligning med AxSYM Total β-hcg-analysen. En studie ble utført der prøvemateriale ble testet med ARCHITECT Total β-hcg-analysen og AxSYM Total β-hcg-analysen. Data fra denne studien ble analysert med regresjonsmetodene minste kvadraters metode og Passing-Bablok 25 og er oppsummert i tabellen nedenfor.* Abbott ARCHITECT Total β-hcg sammenlignet med Abbott AxSYM Total β-hcg Metode Minste kvadraters lineær regresjon Antall prøver AxSYMområde Korrelasjons- Intercept Slope koeffisient 93 2 1000 1 3,40 1,00 0,945 192 2 15 000 2 58,34 0,89 0,980 471 2 200 000 3-672,30 0,82 0,986 Passing- 93 2 1000 1 0,48 1,08 0,945 Bablock 192 2 15 000 lineær 2 1,88 0,94 0,980 regresjon** 471 2 200 000 3 19,84 0,80 0,986 I denne evalueringen varierte serumprøver testet med ARCHITECT Total β-hcg-analysen fra: 1 1,99 til 1262,17 miu/ml, 2 1,99 til 14 934,93 miu/ml, 3 1,99 til 180 620,00 miu/ml. * Representative data. Variabler som forskjeller i prøvevolum og prøve populasjon kan virke inn på analysens korrelasjon. Derfor kan resultatene i de ulike laboratoriene avvike fra disse dataene. ** En lineær regresjonsmetode som ikke tar spesielle hensyn til fordeling av prøveresultater og målefeil. 25 REFERANSELISTE 1. Felig P, Baxter JD, Broadus AE, Frohman LA, eds. Endocrinology and Metabolism (2nd Ed.), New York: McGraw-Hill Book Co. 1987:253. 2. Braunstein GD, Rasor J, Adler D, Danzer H, Wade ME. Serum Human Chorionic Gonadotropin Levels Throughout Normal Pregnancy. Am J Obster Gynecol 1976: 126:678-81. 3. Brody S, Carlstrom G. Immunoassay of Human Chorionic Gonadotropin in Normal and Pathologic Pregnancy. J Clin Endocrinol Metab 1962;22: 564-74. 4. Lab Report For Physicians. Standardization of Human Chorionic Gonadotropin. December 1985; 7:92-4. 5. Swaminathan N, Bahl OP. Dissociation and Recombination of the Subunits of Human Chorionic Gonadotropin. Biochem Biophys Res Commun 1970; 40:422-7. 6. Human Reproduction Unit, World Health Organization, Geneva, Switzerland. Assay of Protein Hormones Related to Human Reproduction: Problems of Specificity of Assay Methods and Reference Standards. Acta Endocrinol 1972; 71:625-37. 7. Ross GT. Clinical Relevance of Research of the Structure of Human Chorionic Gonadotropin. Am J Obstet Gynecol 1977; 129:795-805. 8. Saxena BB, Landesman R. Diagnosis and Management of Pregnancy by the Radioreceptor Assay of Human Chorionic Gonadotropin. Am J Obstet Gynecol 1978; 131:97-107. 9. Manganiello PD, Nazian SJ, Ellegood JO, McDonough PG, Mahesh VB. Serum Progesterone, 17 α-hydroxyprogesterone, Human Chorionic Gonadotropin, and Prolactin in Early Pregnancy and a Case of Spontaneous Abortion. Fertil Steril 1981; 36:55-60. 10. Kadar N, DeVore G, Romero R. Discriminatory hcg Zone: Its Use in the Sonographic Evaluation for Ectopic Pregnancy. Obstet Gynecol 1981; 58:156-61. 11. Kadar N, Caldwell BV, Romero R. A Method of Screening for Ectopic Pregnancy and Its Indications. Obstet Gynecol 1981; 58:162-6. 12. US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens. 13. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December 2009. 14. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; 2004. 15. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2005. 16. Braunstein GD, Vaitukaitis JL, Carbone PP, Ross GT. Ectopic Production of Human Chorionic Gonadotropin by Neoplasms. Ann Intern Med 1973; 78:39-45. 17. Hussa RO. Clinical Utility of Human Chorionic Gonadotropin and α-subunit Measurements. Obstet Gynecol 1982; 60:1-12. 18. Primus FJ, Kelly EA, Hansen HJ, Goldenberg DM. Sandwich -Type Immunoassay of Carcinoembryonic Antigen in Patients Receiving Murine Monoclonal Antibodies for Diagnosis and Therapy. Clin Chem 1988;34:261-4. 19. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, Oldham RK, Morgan Jr AC. Human Anti-Murine Immunoglobulin Responses in Patients Receiving Monoclonal Antibody Therapy. Cancer Res 1985;45:879-85. 20. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27-33. 21. Hussa RO. The Clinical Marker hcg, Westport CT: Praeger Publishers. 1987: 77-95, 137-50. 22. Tietz NW, Clinical Guide to Laboratory Tests, 3 rd Ed. 1995. p. 134 136. 23. Lenton EA, Neal LM, Sulaiman R. Plasma Concentrations of Human Chorionic Gonadotropin from the Time of Implantation until the Second Week of Pregnancy. Fertil Steril 1982; 37:773-8. 24. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices - Second Edition; Tentative Guidelines. NCCLS Document EP5-T2. Villanova, PA: NCCLS, March 1992. 6
25. Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem Clin Biochem. 1983;21:709-20. 26. Alfthan H, Haglund C, Dabek J, Stenman U-H. Concentrations of human choriogonadotropin, its β-subunit, and the core fragment of the β-subunit in serum and urine of men and nonpregnant women. Clin Chem, 1992; 38:1981-7. 27. Borkowski A, Muquardt C. Human chorionic gonadotropin in the plasma of normal, nonpregnant subjects. N Engl J Med, 1979;301:298 302. 28. Hussa RO, Rinke ML, Schweitzer PG. Discordant human chorionic gonadotropin results: causes and solutions. Obstet Gynecol, 1985;65:211 9. 29. Cole L A. Phantom hcg and phantom choriocarcinoma. Gynecol Oncol, 1998;71:325 9. 30. Wilcox AJ, Weinberg CR, O Connor JF, Baird DD, Schlatterer JP, Canfield RE, Armstrong EG, Nisula BC. Incidence of early loss of pregnancy. N Eng J Med 319:189-194, 1988. 31. Mishalani SH, Seliktar J, Braunstein GD. Four Rapid Serum-Urine Combination Assays of Choriogonadotropin (hcg) Compared and Assessed for Their Utility in Quantitative Determinations of hcg. Clin Chem. 40/10, 1944-1949 (1994) 32. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Chorionic gonadotropin Testing: Nomenclature, Reference Preparations, Assay Performance, and Clinical Application; Approved Guideline NCCLS Document 1/LA10-A, December 1996. ARCHITECT, AxSYM og Chemiflex er varemerker for Abbott Laboratories i forskjellige jurisdiksjoner. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland +353-43-3331000 Distribueres av Abbott Laboratories Abbott Park, IL 60064 USA og ABBOTT 65205 Wiesbaden, Germany Juni 2012 2006, 2012 Abbott Laboratories 7