(12) Oversettelse av europeisk patentskrift

Transkript

1 (12) Oversettelse av europeisk patentskrift (11) NO/EP B1 (19) NO NORGE (1) Int Cl. C07D 27/02 (06.01) A61K 49/ (06.01) Patentstyret (21) Oversettelse publisert (80) Dato for Den Europeiske Patentmyndighets publisering av det meddelte patentet (86) Europeisk søknadsnr (86) Europeisk innleveringsdag (87) Den europeiske søknadens Publiseringsdato (30) Prioritet , DE, (84) Utpekte stater AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR (73) Innehaver Bayer Intellectual Property GmbH, Alfred-Nobel-Strasse, Monheim, Tyskland (72) Oppfinner PLATZEK, Johannes, Grottkauer Str., Berlin, Tyskland TRENTMANN, Wilhelm, Gasselstiege 419, 4819 Münster, Tyskland (74) Fullmektig Tandbergs Patentkontor AS, Postboks 170 Vika, 0118 OSLO, Norge (4) Benevnelse Fremgangsmåte for fremstilling av calcobutrol (6) Anførte publikasjoner EP-A PLATZEK J ET AL: "Synthesis and Structure of a New Macrocyclic Polyhydroxylated Gadolinium Chelate Used as Contrast Agent for Magnetic Resonance Imaging", INORGANIC CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, EASTON, US, vol. 36, no. 26, 1 January 1997 ( ), pages , XP , ISSN: , DOI: DOI:.21/IC970123T cited in the application

2 1 Beskrivelse Oppfinnelsens område [0001] Den foreliggende oppfinnelse gjelder en fremgangsmåte for fremstilling av kalsiumkomplekset av -(2,3-dihydroksy-1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,- tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre, også betegnet calcobutrol Oppfinnelsens bakgrunn [0002] Calcobutrol er et tilsetningsstoff i de galeniske utformingene av gadobutrol og løser problemet å forhindre frigjøring av fritt gadolinium i utformingene (løsningene). Gadobutrol er et gadoliniumholdig kontrastmiddel for kjernespinntomografi og har vært tillatt i Tyskland siden 00 som Gadovist for indikasjonen kontrastforsterkning ved kranial og spinal magnetisk resonanstomografi (MRT) (EP B1, EP B1, EP B1, EP B1 og CA-patent ). Gadobutrol er et ikke-ionisk kompleks som består av gadolinium(iii) og den makrosykliske liganden -(2,3-dihydroksy-1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,-tetraazasyklodekan- 1,4,7-trieddiksyre (butrol). Gadovist selges som en 1 M vandig løsning og har følgende bestanddeler i utformingen: Gadobutrol, calcobutrol-natriumsalt, trometamol, saltsyre og vann for injeksjon. [0003] Det har blitt funnet at det for de fleste gadoliniumholdige kontrastmidler er en fordel å benytte et overskudd av den kompleksdannende liganden i utformingen i form av kalsiumkomplekset (EP B2). Kalsiumkompleksets rolle er å forhindre frigjøring av fritt gadolinium i utformingen (f. eks. ved lagring over flere år, ny kompleksdannelse med fremmede ioner fra glasset). [0004] Syntesen av kalsiumkomplekset (calcobutrol) er beskrevet i detalj i Inorg. Chem. 1997, 36, Fremgangsmåten som beskrives der tilveiebringer imidlertid ikke calcobutrol med den renhet som myndighetene krever. En eksakt reproduksjon av fremgangsmåten ifølge reaksjonsskjema 3 (side ) fører til et materiale med en renhet på bare 94 %, målt ved HPLC (stasjonær fase: Hypersil fenyl ( μm) fra SHANDON, mobil fase: acetonitril/boratbuffer (ph 8) i forholdet /0 (vol/vol), deteksjon: UV-detektor (0 nm), injeksjonsvolum: μl). Liganden som tilveiebringes ved syntesen av gadobutrol (butrol) har ikke den høye renhet som er nødvendig for direkte overføring til kalsiumkomplekset. En videre rensing av liganden er vanskelig, grunnet ligandens zwitterion-egenskaper. I motsetning til ligandene BOPTA, DTPA og DOTA, som krystalliserer ved en ph på 1,7-1,8 (ifølge US 9714) er det ikke mulig å krystallisere butrol ved noen ph (se sammenligningseksempel nedenfor), og det er således ikke mulig å rense stoffet ved krystallisering. Uten ønske om å være bundet til en bestemt teori, tilskrives forskjellen i evne til å krystallisere dihydroksy-hydroksymetyl-propyl-sidekjeden i butrol, som ikke foreligger i verken BOPTA, DTPA eller DOTA. Det er sannsynlig at den manglende krystalliser-

3 ingen skyldes en forskjell i polaritet eller i evnen til å danne hydrogenbindinger. Endelig kan en annen mulig grunn være den såkalte glyseroleffekten fra dihydroksyhydroksymetyl-propyl-sidekjeden, dvs. glyserols evne til å forhindre krystallisering av vann ved 0 C, ved at hydrogenbindinger i vannkrystallene brytes opp. [000] Mens det nøytrale gadoliniumkomplekset (gadobutrol) kan renses i en ionebytterkolonne (for eksempel Amberlite IRC 0, Amberlite FPC300 eller Amberlite IRA 67) og deretter erholdes med svært høy renhet (> 99,7 %) ved en svært effektiv krystallisering (f. eks. fra etanol, fortrinnsvis med mindre enn 0 ppm vann), er dette ikke mulig for calcobutrol, grunnet den ekstra syregruppen. En rensing av kalsiumkomplekset var ikke vellykket, siden det selv ved preparativ HPLC var en urenhet svært nær hovedtoppen som ikke kunne separeres. Flere forskjellige måter å separere calcobutrol ved HPLC ble forsøkt (ved å variere mobile faser, gradienter osv.), men ingen av dem førte til separasjon. [0006] Den termodynamiske stabilitetskonstanten for calcobutrol og syredissosiasjonskonstanten har blitt bestemt ved ph-potensiometriske likevektstitreringer av liganden (butrol) i nærvær av Ca 2+ -ioner (ved 2 C i 0,1 N KCl) med forskjellige forhold mellom Ca 2+ og ligand. Resultatene er: log (K CaL- ) = 14,67 ± 0,02 K CaL- = [CaL - ]/Ca 2+ ][L 3- ] pk a = 3,39 ± 0,12 K a = [CaL - ][H + ]/[CaLH] [0007] Basert på disse målte verdiene kan fordelingen av kalsium mellom fritt kalsiumion, nøytralt kompleks (calcobutrol, liganden har to negative ladninger) og anionisk kompleks (liganden har tre negative ladninger) beregnes for forskjellige phverdier. Resultatene vises i Figur 1. Det er åpenbart at det nøytrale komplekset ikke utgjør mer enn % av alle kalsiumholdige molekyler ved noen ph. Grunnet denne likevekten mellom de kalsiumholdige molekylene, vil preparative fremgangsmåter i vandig løsning føre til noen urenheter. [0008] Mens det anioniske komplekset er det dominerende molekylet ved høyere phverdier, er dette ikke spesielt anvendbart for rensingsformål. Saltene av dette komplekset (f. eks. natriumsaltet) er ikke egnet for opparbeidelse. Natriumsaltet av komplekset er et svært hygroskopisk, glassaktig materiale som ikke kan håndteres i noen anvendbar skala. Ved fremstillingen av Gadovist-løsningen fremstilles derfor natriumsaltet in situ ved tilsetning av natriumhydroksid til calcobutrol. [0009] Den store forskjellen i stabilitet mellom gadobutrol og calcobutrol er det som først og fremst gjør calcobutrol anvendbar i Gadovist-utformingen, dvs. at den store forskjellen i stabilitet mellom gadoliniumkomplekset og kalsiumkomplekset betyr at

4 3 kalsiumkomplekset vil fange opp eventuelt frie gadoliniumioner under dannelse av gadoliniumkomplekset. [00] Det er et formål med den foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe svært rent calcobutrol i høyest mulig utbytte, fortrinnsvis i krystallinsk form Kort beskrivelse av figurene [0011] Figur 1 viser fordelingen av kalsiumholdige molekyler som funksjon av ph for calcobutrolkomplekset og assosierte forbindelser. Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen [0012] Det har overraskende blitt funnet at det er mulig å fremstille calcobutrol på en effektiv måte ved å starte med svært rent Gadobutrol. Gadolinium fjernes ved å bryte opp komplekset gadobutrol for erholdelse av liganden med høy renhet, og deretter dannes et kompleks mellom liganden og Ca 2+ -ioner. [0013] Oppbrytning av gadoliniumkomplekser med oksalsyre ved tilsetning av en mineralsyre (fortrinnsvis saltsyre) er beskrevet i litteraturen for ligander forskjellige fra butrol. Det beskrives i US 9714 hvordan gadolinium, så vel som fri ligand, kan gjenvinnes ved oppbrytning med oksalsyre/saltsyre fra det gadoliniumholdige kontrastmiddelet. Anvendelse av fremgangsmåten for fremstilling av kalsiumsalter er ikke beskrevet i US [0014] Den foreliggende oppfinnelse gjelder en fremgangsmåte for fremstilling av kalsiumkomplekset av -(2,3-dihydroksy-1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,- tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre (calcobutrol), hvori a) gadoliniumkomplekset av -(2,3-dihydroksy-1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,- tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre (gadobutrol) brytes opp med et kompleksbrytende middel, b) det utfelte gadoliniumsaltet fjernes, c) den frie liganden i løsningen som er resultatet fra b) bindes til et surt ionebytterresin, d) resinet elueres med en vandig alkalisk løsning, e) eluatet behandles med et surt ionebytterresin, og f) liganden kompleksbindes til Ca 2+ -ioner og krystalliseres. 3 [001] Begrepet kompleksbrytende middel er i forbindelse med den foreliggende oppfinnelse ment å bety et reagens som kan danne Gd-salter som bare er litt løselige i vann. Eksempler på kompleksbrytende reagenser er kilder for oksalationer, for eksempel oksalsyre, og kilder for fosfationer, for eksempel fosforsyre, som danner uløselige gadoliniumoksalat- henholdsvis gadoliniumfosfatsalter. Foretrukne kompleksbrytende midler er oksalsyre og fosforsyre, mest foretrukket oksalsyre.

5 [0016] Oppbrytningen av komplekset skjer spesielt godt i vann ved en temperatur fra 7 C til 0 C, for eksempel fra 80 til 9 C, for eksempel fra 87, til 92, C, fortrinnsvis ved tilnærmet 90 C. [0017] Etter frigjøring av liganden (butrol) følger behandlingen med surt ionebytterresin, fortrinnsvis ved en ph-verdi fra 3,6 til 3,80, fortrinnsvis ved tilnærmet 3,72. Amberlite 22 C eller Amberlite IR 1 er eksempler på anvendbare ionebytterresiner. [0018] Foretrukne vandige alkaliske reagenser for elueringsmiddelet er baser som kan fjernes fra en vandig løsning ved destillasjon. Fordelen med slike reagenser er at de vil fjernes fra det ligandholdige eluatet ved avdamping av vann. De vandige alkaliske reagensene kan være ammoniakk eller flyktige aminer. I den foreliggende sammenheng er begrepet flyktig amin ment å bety hvilket som helst primært, sekundært eller tertiært alifatisk amin, uavhengig med 1 til 4 karbonatomer i alkylkjeden som er bundet til det sentrale nitrogenatomet, og som har et kokepunkt ved atmosfærisk trykk på 9 C eller lavere, for eksempel 80 C eller lavere, 70 C eller lavere, 60 C eller lavere, 0 C eller lavere, 40 C eller lavere, fortrinnsvis 30 C eller lavere eller 1 C eller lavere. Eksempler på flyktige aminer er metylamin, etylamin, n-propylamin, isopropylamin, dimetylamin, dietylamin, trietylamin, trimetylamin, di-n-propylamin, diisopropylamin, n-butylamin, sec-butylamin, 1-amino-2,2-dimetylpropan, 2-amino-2- metylbutan, 2-amino-3-metylbutan, 2-aminopentan og 3-aminopentan. I en for tiden foretrukket utførelse er det alkaliske reagenset for elueringsmiddelet ammoniakk, dimetylamin, metylamin, etylamin, trimetylamin, isopropylamin eller blandinger av disse, mest foretrukket ammoniakk eller dimetylamin eller blandinger av disse, mest foretrukket ammoniakk. [0019] I en utførelse får den frie liganden danne kompleks med Ca 2+ direkte etter behandling med ionebytterresinet, dvs. uten at liganden først isoleres. I en annen utførelse isoleres den frie liganden først ved frysetørring, før kompleksdannelse med Ca 2+ -ioner. [00] Kalsiumkarbonat, kalsiumoksid eller kalsiumhydroksid er foretrukne kilder for Ca 2+ -ioner for kompleksdannelse. Kompleksdannelsen utføres fortrinnsvis i vandig løsning ved en temperatur fra 7 C til 0 C, for eksempel fra 80 til 9 C, for eksempel fra 87, til 92, C, fortrinnsvis ved tilnærmet 90 C. [0021] Det ble overraskende funnet at tilsetning av mineralsyre, som beskrevet i US 9714, ikke er nødvendig for kompleksbrytning. Dersom svært rent gadobutrol får reagere direkte i vann med en støkiometrisk mengde av kompleksbrytende middel, for eksempel oksalsyre, erholdes en fargeløs løsning av butrol i vann med utmerket kvalitet og renhet etter kvantitativ kompleksbrytning og frafiltrering av gadoliniumoksalat. I en utførelse tilsettes således det kompleksbrytende middel, for eksempel oksalsyre, til gadobutrol ved en ph høyere enn 2, for eksempel ved en ph høyere enn 3, f. eks. en ph høyere enn 4, fortrinnsvis en ph høyere enn 4,.

6 Calcobutrolkomplekset kan fremstilles direkte fra butrolløsningen etter ytterligere et rensetrinn. [0022] For å sikre at det ikke foreligger fritt gadolinium i butrolløsningen sendes den gjennom en behandling med ionebytting. For å fjerne eventuelt gjenværende ioner plasseres butrolløsningen på en ionebytterkolonne og vaskes grundig med vann. Deretter elueres liganden med et vandig alkalisk middel, for eksempel ammoniakkvann, og den vandige eluatløsningen inndampes forsiktig under vakuum. Restmaterialet fortynnes med vann. Etter behandling med aktivt karbon justeres ph-verdien til 3,7 ved tilsetning av surt ionebytterresin. Ionebytterresinet frafiltreres, hvoretter løsningen frysetørres. [0023] Fosforsyre kan anvendes i stedet for oksalsyre. I dette tilfelle felles gadoliniumfosfat (GdPO 4 ) ut. Liganden kan opparbeides på analog måte. [0024] Det er i prinsippet mulig å fortsette direkte og utføre kompleksdannelsen med et kalsiumsalt. Det har imidlertid blitt funnet at det er mulig å isolere liganden ved hjelp av forsiktig frysetørring, og på denne måten erholdes en gunstig lagringsform. [002] Den endelige reaksjonen til calcobutrol utføres ved å kompleksbinde butrol med en støkiometrisk mengde kalsiumkarbonat i vann under oppvarming. CaO og Ca(OH) 2 kan imidlertid også anvendes. [0026] For å fjerne partikler og kjerner anvendes behandling med aktivt karbon og påfølgende filtrering. Filtratet inndampes under vakuum i størst mulig grad og bringes til krystallisering ved tilsetning av etanol. For dette benyttes oppvarming med refluks og påfølgende avkjøling. Det utfelte krystallinske produktet frafilteres og vaskes med litt etanol. Deretter tørkes det ved 70 C i et vakuumkammer. Det har blitt funnet at krystallisering også utføres fra aceton eller isopropanol, men etanol er det foretrukne løsemiddelet. [0027] Uten ønske om å være bundet til en gitt teori har det blitt funnet at krystallisering av calcobutrol i etanol eller andre egnede løsemidler driver likevekten i vandig løsning mellom frie kalsiumioner og ligander på den ene siden og calcobutrolkompleks på den andre siden (illustrert i Figur 1) over mot det stabile, krystalliserte komplekset. M ed støkiometriske mengder av kalsiumioner og butrol ved begynnelsen av kompleksdanningstrinnet forblir således kun komplekset etter krystallisering. Det har imidlertid også blitt funnet at rent butrol må anvendes for kompleksdanningsprosessen for å det skal oppnås rent calcobutrol. Dersom anvendt butrol ikke er ren, vil det erholdte calcobutrol inneholde et tilsvarende nivå av urenheter. Dette ble observert for fremgangsmåten ifølge Inorg. Chem. 1997, 36, [0028] I en utførelse gjelder oppfinnelsen en fremgangsmåte i hvilken gadoliniumkomplekset av -(2,3-dihydroksy-1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,-tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre (gadobutrol) brytes opp med oksalsyre eller fosforsyre i vann under oppvarming, det utfelte gadoliniumoksalat/-fosfat filtreres bort, den frie liganden

7 6 1 bindes til et surt ionebytterresin, resinet elueres med en vandig ammoniakkløsning, løsningen inndampes og ph justeres til 3,6-3,8 med surt ionebytterresin, løsningen frysetørres, liganden kompleksbindes med Ca 2+ -ioner under oppvarming, komplekset krystalliseres fra etanol etter fullstendig reaksjon og krystallene tørkes under vakuum etter isolering. [0029] Calcobutrol isolert på denne måten særpreges ved en svært høy kvalitet. Produktet er fargeløst og løselig i vann og har en renhet på 99,0 % eller mer, i noen porsjoner 99,4 % eller mer (renhet vurdert ved HPLC, 0 % metode). Hele prosessen fra gadobutrol til calcobutrol særpreges ved høy reproduserbarhet og anvendelighet. Totalutbyttet på 91,2 % er svært godt. Produktet er lagringsstabilt og kan anvendes for utforming av Gadovist-løsninger. Natriumsaltet av calcobutrol erholdes ved tilsetning av en støkiometrisk mengde natriumhydroksid in situ. Gadovist-løsninger fremstilt på denne måten er stabile i flere år og gir sikkerhet for at toksisk gadolinium aldre vil frigjøres til løsningen. [0030] Det har således lyktes å oppfylle ønskene til myndigheter og utøvere og tilveiebringe calcobutrol med høy renhet ved lave kostnader, og produktet kan anvendes direkte for videre prosessering og fremstilling av Gadovist. [0031] Videre beskrives anvendelsen av kalsiumkompleksets -(2,3-dihydroksy-1- (hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,-tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre for fremstilling av kommersielle galeniske utforminger av gadobutrol. Eksempler HPLC, 0 % metode [0032] 2 Stasjonær fase: Hypersil ODS, 3 µm, eller ekvivalent pakkemateriale 12 x 4.6 mm Mobil fase: Elueringsmiddel A: Elueringsmiddel B: Fremstill en løsning med 2,0 g pr. liter oktansulfonsyrenatriumsalt-monohydrat i Vann. Juster ph-verdien til 2,0±0,1 med svovelsyre. Acetonitril for kromatografi Gradientskjema: Tid [min] Elueringsmiddel A [% (vol/vol)] Elueringsmiddel B [% (vol/vol)]

8 Elueringshastighet: UV deteksjonsbølgelengde: Prøvekonsentrasjon: 1,0 ml/min 197 nm Injeksjonsvolum: µl 7 mg/1 ml elueringsmiddel A Sammenligningseksempel [0033] Det er ikke mulig å anvende fremgangsmåten som er beskrevet i US 9714 for fremstilling av calcobutrol. Gadobutrol røres som beskrevet i US-patentskriftet med saltsyre, og så oksalsyre, i vann (ph 0,8) ved C i tilnærmet 6 timer, og utfelt gadoliniumoksalat filtreres fra. Filtratet deles i flere porsjoner, og ph-verdien justeres ved tilsetning av % vandig natriumhydroksid. Siden det ikke er kjent ved hvilken ph-verdi liganden vil krystallisere, analyseres flere løsninger, med en ph-forskjell mellom dem på 0,1. Resultatet av krystalliseringsforsøkene gis i tabellen nedenfor: ph-verdi Etter 24 timer Etter 1 uke Etter 1 måned 0,8 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 0,9 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,0 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,1 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,2 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,3 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,4 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1, Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,6 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,7 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 1,8 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller

9 8 ph-verdi Etter 24 timer Etter 1 uke Etter 1 måned 1,9 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,0 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,1 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,2 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,3 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,4 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2, Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,6 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,7 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,8 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 2,9 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,0 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,1 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,2 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,3 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,4 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3, Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,6 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,7 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,8 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 3,9 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller 4,0 Ingen krystaller Ingen krystaller Ingen krystaller [0034] Forsøk på å krystallisere liganden ifølge retningslinjene i US-patentskriftet har ikke vært vellykkede. HPLC-undersøkelser viste at det under de svært sure betingelsene opptrer nye forurensinger som fører til redusert kvalitet av liganden. Det observeres videre at den opprinnelig fargeløse liganden blir gul etter 6 timer, og forurensningen kan ikke fjernes. Fremgangsmåten fra US-patentskriftet som er beskrevet ovenfor er derfor ikke egnet for fremstilling av calcobutrol, siden videre

10 9 1 opparbeiding av denne liganden kun fører til farget calcobutrol med 93 % renhet (HPLC, 0 % metode). [003] Det har imidlertid overraskende blitt funnet at isolering ved krystallisering ikke er nødvendig. Det har blitt funnet betingelser som er så milde at det er mulig å fjerne gadolinium fra komplekset, slik at den svært rene liganden i løsningen kan få reagere direkte eller kan isoleres ved frysetørring. Eksempel 1: Fremstilling av butrol [0036] 26,2 kg gadobutrol (vanninnhold 4,78 %, renhet > 99 % sikret ved ionebytting og krystallisering) og,8 kg oksalsyre-dihydrat (fast stoff, 99 %) helles i en beholder med rører, 17 liter avmineralisert vann tilsettes, og blandingen omrøres ved 90 C i timer. Blandingen avkjøles til C (ph-måling gir verdier fra 3,1 til 3,). Utfelt gadoliniumoksalat suges opp og vaskes to ganger med 0 l vann. Filtratet settes på en kationbytterkolonne fylt med l Amberlite 22 C, hvoretter kolonnen vaskes med vann. [0037] Produktet elueres fra kolonnen med en blanding av l avmineralisert vann og 12 l 2 % ammoniakk og samles opp i 13 fraksjoner. Eluatfraksjon Volum i l ph TLC-resultat ,4 Intet produkt 2 0 4,6 Intet produkt 3 4 4,4 Intet produkt 4 4 3,9 Intet produkt 3,6 Produkt ,7 Produkt ,7 Produkt 8 2 4,9 Produkt 9,4 Produkt 4,9 Produkt ,2 Intet produkt ,3 Intet produkt ,3 Intet produkt 1 Det fastslås ved TLC (tynnskiktskromatografi) hvorvidt en fraksjon inneholder produkt

11 1 [0038] Eluatfraksjon til inndampes i en rotasjonsevaporator ved 70 C vannbadstemperatur under vakuum til tilnærmet 3 l. ph-verdien i konsentratet er 6,7. [0039] Det oljeaktige restmaterialet overføres til 12 l avmineralisert vann, og 3,7 kg aktivt karbon (Norit SX PLUS, først grundig vasket med vann) tilsettes, og løsningen oppvarmes så til en indre temperatur på 90 C i 1 time. Den varme løsningen filtreres for fjerning av det aktive karbon, og karbonet vaskes tre ganger, hver gang med 2 l vann med en temperatur på 70 C. [0040] Blandingen avkjøles til C, ph justeres til ph 3,72 ved tilsetning av surt ionebytterresin (Amberlite IR 1, resinet tilsettes i porsjoner på 6, l i alt 4, l, det ble tatt en prøve på 0 ml ytterligere resin endret ikke ph). Ionebytterresinet filtreres fra og vaskes 4 ganger, hver gang med 2 l avmineralisert vann. Filtratet inndampes sammen med vaskevannet i en rører med oppvarming til 70 C under vakuum til et volum på tilnærmet 0 l. Løsningen avkjøles til C og frysetørres så i en frysetørrer. [0041] Utbytte: 18,1 kg (17,69 kg = 9 % av teoretisk utbytte, justert for vann) fargeløst, amorft pulver. [0042] Vanninnhold (Karl-Fischer): 2,60 % [0043] Elementæranalyse (korrigert for vann): Element C H N O Beregnet 47,99 7,61 12,44 31,96 Funnet 47,77 7,73 12,38 32,04 [0044] HPLC-renhet (0 % metode): > 99 % 2 30 Eksempel 2: Fremstilling av calcobutrol [004] I alt 3,36 kg kalsiumkarbonat (99,3 %) tilsettes porsjonsvis til 1,39 kg butrol (vanninnhold: 2,6 %) løst i 1 l avmineralisert vann og omrøres i 1 time ved en indre temperatur på 90 C. Blandingen avkjøles så til C, og 1, kg aktivt karbon (Norit SX PLUS, karbonet er først vasket grundig med vann) tilsettes. Blandingen omrøres i 1 time ved C, og karbonet filtreres så fra. Karbonet vaskes tre ganger, hver gang med 1 l vann. [0046] Deretter inndampes filtratet sammen med vaskevannet i en rører med oppvarming ved 80 C under vakuum til en olje, som fortsatt kan omrøres og som tilsvarer 1,4 ganger den opprinnelige butrol. l etanol tilsettes til oljen, og blandingen kokes så under refluks i 3 timer. Blandingen avkjøles til C og den utfelte krystallsuspensjonen filtreres fra. Krystallene vaskes to ganger, hver gang med 1 l etanol.

12 11 [0047] Produktet, som fortsatt er fuktet med etanol, tørkes i en vakuumtørker innstilt til 70 C til konstant vekt. [0048] Utbytte: 16,27 kg (96 % av teoretisk utbytte) fargeløse krystaller [0049] Elementæranalyse: Element C H N O Ca Beregnet 44,34 6,41 11,49 29,3 8,22 Funnet 44,4 6,7 11,34 29,43 8,17 [000] HPLC-renhet (0 % metode): > 99,0 % [001] Eksperimenter i laboratorieskala som tilsvarer dette eksempelet ble utført med aceton og isopropanol i stedet for etanol som løsemiddel for krystalliseringen. Tilsvarende renheter ble oppnådd.

13 12 P a t e n t k r a v 1 1. Fremgangsmåte for fremstilling av kalsiumkomplekset av -(2,3-dihydroksy- 1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,-tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre (calcobutrol), hvori a) gadoliniumkomplekset av -(2,3-dihydroksy-1-(hydroksymetyl)propyl)-1,4,7,- tetraazasyklodekan-1,4,7-trieddiksyre (gadobutrol) brytes opp med et kompleksbrytende middel, hvor det kompleksbrytende middel er en kilde for oksalationer eller fosfationer og ph før tilsetning av det kompleksbrytende middel er høyere enn 2, b) utfelt gadoliniumsalt fjernes, c) den frie liganden i løsningen som erholdes i b) bindes til et surt ionebytterresin, d) resinet elueres med en vandig alkalisk løsning, e) eluatet behandles med et surt ionebytterresin, og f) liganden kompleksbindes med Ca 2+ -ioner og krystalliseres. 2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, hvor det kompleksbrytende middel i trinn a) er oksalsyre Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1 og 2, hvor reaksjonen for oppbrytning av komplekset ifølge trinn a) utføres i vann ved en temperatur fra 7 til 0 C. 4. Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1 til 3, hvor den vandige alkaliske løsningen i trinn d) er en løsning av ammoniakk eller et flyktig amin eller en blanding av disse.. Fremgangsmåte ifølge krav 4, hvor den vandige alkaliske løsningen i trinn d) er en løsning av ammoniakk, dimetylamin, metylamin, etylamin, trimetylamin, isopropylamin eller blandinger av disse Fremgangsmåte ifølge krav, hvor den vandige alkaliske løsningen i trinn d) er en løsning av ammoniakk Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1 til 6, hvor produktet som erholdes fra trinn e) isoleres ved frysetørring. 8. Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1 til 6, hvor produktet som erholdes fra trinn e) får reagere direkte med en kilde for kalsiumioner uten først å isoleres.

14 13 9. Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1 til 8, hvor kilden for kalsiumioner i trinn f) er kalsiumkarbonat, kalsiumoksid eller kalsiumhydroksid.

15 14