Preanalytiske forhold ved analyse av glukose Kristin Moberg Aakre Norsk Klinisk-kjemisk kvalitetssikring Haukeland universitetsjukehus 45 (46) laboratorier besvarte undersøkelsen 43 laboratorier hadde komplett besvarelse 1
Diagnostikk av diabetes HbA1c er anbefalt som førstevalg (sidan sept 2012) Glykosylering av den N-terminale enden av beta kjeden i hemoglobin Diagnostisk cut off for diabetes 6,5% Tilfredsstillande analytisk kvalitet Tillat totalfeil ± 5,4 % ± 0,1 % -poeng HbA 1c Innan laboratorie CV (intern kvalitetskontroll) < 2% Glukosebasert diagnostikk er eit unntak! Gravide HbA1c kan brukast for å diagnostisere «vanlig» diabetes (som var tilstades før graviditeten), men ikkje for svangerskapsdiabetes (rask utvikling) Pasientar med unormal levetid av erytrocyttar Hemoglobinvariantar Anemi Malaria Etter blodtransfusjon Hyppig årelating (ikkje normal blodgiving) Berg, JP??? 2
Glukosebaserte testar, helsedir 2009 Diabetes mellitus fastende P-glukose og/eller 2 timer etter inntak av 75 g glukose og/eller tilfeldig P-glukose i kombinasjon med symptomer Nedsatt glukosetoleranse Fastende P-glukose og 2 timer etter inntak av 75 g glukose (1,75g/kg kroppsvekt inntil 75 g) > 7,0 mmol/l > 11,1 mmol/l Gravide > 7,8 mmol/l > 11,1 mmol/l < 7,0 mmol/l > 7,8 og <11,1 mmol/l Kva betyr preanalytisk handtering Heparin plasma Serum Endring Referanse Oppbevart 30 minutt i isvann før seperasjon Oppbevart 30 minutt i romtemperatur før seperasjon (sentrifugert og pipettert av eller sentrifugerte gelglass) -0,76 til -0,57 mmol/l Gambino et al, 2009 Oppbevart 30 minutt i isvann før seperasjon Oppbevart 60 minutt i romtemperatur før pipettert av -0,2 mmol/l Stahl et al, 2001 3
Plasma eller serum? Gambino et al, 2009 Hvilke prøvemateriale(r) benytter laboratoriet til vanlige ikke-fastende glukose målinger? Svarprosent Svartelling kun plasma kun serum begge benyttes 2,2% 1 43,5% 20 54,3% 25 besvart spørsmål 46 spørsmål som ble hoppet over 0 4
Hvorfor har dere valgt serum som prøvemateriale til ikke-fastende glukosemålinger? Svarprosent Svartelling logistiske forhold i laboratoriet 85,7% 18 preanalytiske forhold 14,3% 3 kostnader 4,8% 1 nasjonale/internasjonale anbefalinger for diagnostikk av diabetes, vennligst spesifiser i 0,0% 0 kommentarfeltet egne forsøk 9,5% 2 andre grunner, vennligst spesifiser i kommentarfeltet 28,6% 6 besvart spørsmål 21 spørsmål som ble hoppet over 25 Hvorfor har dere valgt å bruke både serum og plasma som prøvemateriale til ikke-fastende glukosemålinger? Svarprosent Svartelling logistiske forhold i laboratoriet 75,0% 18 preanalytiske forhold 29,2% 7 kostnader 0,0% 0 nasjonale/internasjonale anbefalinger for diagnostikk av diabetes, vennligst spesifiser 0,0% 0 i kommentarfeltet egne forsøk 4,2% 1 andre grunner, vennligst spesifiser i kommentarfeltet 25,0% 6 besvart spørsmål 24 spørsmål som ble hoppet over 22 5
Hvor raskt skal prøver til glukosemåling ifølge laboratoriets prosedyrer sentrifugeres? Angi tid for de alternativene som passer Serumrør sentrifugeres og serum pipetteres av (hvis uten gel) innen: Heparin plasmarør sentrifugeres og plasma pipetteres av (hvis uten gel) innen: Natrium fluorid / Kalium oxalat rør Natrium fluorid og EDTA rør Natrium fluorid og heparin rør Natrium fluorid, EDTA og citrat rør (terumorør) sentrifugeres og avpipetteres innen: 10 minutter 30 minutter 60 minutter 120 minutter Svartelling 0 8 13 16 37 4 3 6 3 16 besvart spørsmål 38 spørsmål som ble hoppet over 8 1/3 av laboratoriene kunne skille fastende prøver fra øvrige: Et laboratorium endrer tid til sentrifugering når prøven er tatt for fastande glukosemålinger: Hvor raskt skal prøver til fastende glukosemåling ifølge laboratoriets prosedyrer sentrifugeres? Angi tid for de alternativene som passer 30 minutter Svartelling Serumrør sentrifugeres og plasma pipetteres av (hvis uten gel) innen: 1 (60 min) 1 6
Har dere mulighet for å skille prøver til oral glukosebelastningstest fra andre glukosemålinger? Svarprosent Svartelling nei, disse prøvene behandles som alle andre glukosemålinger ja, dette markeres ved rekvisisjon (tilgjengelig for alle rekvirenter) ja, dette utføres etter avtale med enkelte rekvirenter (evt. rekvirentgrupper) ved diagnostikk av diabetes vi gjenkjenner prøver til oral glukosebelastning på annet vis, vennligst spesifiser i kommentarfeltet 4,7% 2 69,8% 30 4,7% 2 20,9% 9 besvart spørsmål 43 spørsmål som ble hoppet over 3 9 laboratorier endrer tid til sentrifugering når prøven er tatt for oral glukosebelastningstest: Hvor raskt skal prøver til oral glukosebelastning ifølge laboratoriets prosedyrer sentrifugeres? Angi tid for de alternativene som passer 10 minutter 20 minutter 30 minutter Svartelling Serumrør sentrifugeres og serum avpipetteres (hvis uten gel) innen: Heparin plasmarør sentrifugeres og plasma avpipetteres (hvis uten gel) innen: Natrium fluorid / kalium oxalat rør 1 1 3 5 6 0 1 7 1 0 0 1 7
Kva er den kliniske effekten av riktig av preanalytisk behandling ved analyse av glukose? Antall diagnostiserte diabetikarar av totalt n =539 undersøkte: Analyse av glukose i serum utan kjøling (60 minuttar) Fastande verdi 7 mmol/l 2 timars verdi 11,1 mmol/l Målt i serum Differanse ved korrekt preanalyse + 0,76 mmol/l Differanse ved korrekt preanalyse + 0,20 mmol/l 60 139 78 59 71 65 Totalt antal 84 (15,5%) 154 (28,6%) 102 (18,9%) Vil diagnostisera ein stad mellom 3,5% til 13,1% fleire diabetikarar ved korrekt preanalytisk prøvebehandling 8
Klinisk betydning for gravide Antall diagnostiserte svangerskapsdiabetikarar; av totalt n =108 undersøkte. Analyse i plasma innan 10 minutt: Utgongsverdi, plasma Differanse feil preanalyse - 0,76 mmol/l Differanse feil preanalyse - 0,20 mmol/l To timars verdi 7,8 mmol/l 15 (13,9%) 7 (6,5%) 13 (12,0%) Vil diagnostisera ein stad mellom 1,9% til 7,4% færre diabetikarar dersom vi skiftar frå plasma til serum ved analyse av glukose. Hvor raskt skal prøver til glukosemåling ifølge laboratoriets prosedyrer sentrifugeres? Angi tid for de alternativene som passer Serumrør sentrifugeres og serum avpipetteres (hvis uten gel) innen: Heparin plasmarør sentrifugeres og plasma avpipetteres (hvis uten gel) innen: Natrium fluorid / Kalium oxalat rør Natrium fluorid og EDTA rør Natrium fluorid og heparin rør Natrium fluorid, EDTA og citrat rør (terumorør) sentrifugeres og avpipetteres innen: 10 minutter 30 minutter 60 minutter 120 minutter Svartelling 0 8 13 16 37 4 3 6 3 16 besvart spørsmål 38 spørsmål som ble hoppet over 8 9
9 laboratorier endrer tid til sentrifugering når prøven er tatt til oral glukosebelastningstest: Hvor raskt skal prøver til oral glukosebelastning ifølge laboratoriets prosedyrer sentrifugeres? Angi tid for de alternativene som passer 10 minutter 20 minutter 30 minutter Svartelling Serumrør sentrifugeres og serum avpipetteres (hvis uten gel) innen: Heparin plasmarør sentrifugeres og plasma avpipetteres (hvis uten gel) innen: Natrium fluorid / kalium oxalat rør 1 1 3 5 6 0 1 7 1 0 0 1 Kun 8/43 laboratorier har optimal praksis mtp sentrifugeringstid ved OGTT 2/43 laboratorier brukar terumorør ved OGTT 11/43 laboratorier kjører oral glukosebelastningstest i serum og sentrifugerer etter 120 minutter 6 laboratorier manglar prosedyrar for sentrifugering Ingen brukar is 10
Interferens- hemolyse Nordic interference study 1999: serum 219 nordiske laboratorier deltok 11
Interferens - bilirubin Nordic interference study 2001: 206 nordiske laboratorier deltok Glukosemålingar (serum) blei lite påverka av interferens frå konjugert og ukonjugert bilirubin 12
Blir prøver til analyse av glukose undersøkt for optisk interfererende substanser Svaralternativer Svarprosent Svartelling nei 21,7% 10 ja, alle prøver inspiseres med tanke på optisk interferens (manuell prosedyre) ja, alle prøver blir undersøkt for hemoglobin (kvantitiv måling) ja, alle prøver blir undersøkt for bilirubin (kvantitiv måling) ja, alle prøver blir undersøkt for triglycerider/lipemi (kvantitiv måling) ja, ENKELTE prøver blir undersøkt for hemoglobin (kvantitiv måling) ja, ENKELTE prøver blir undersøkt for bilirubin (kvantitiv måling) ja, ENKELTE prøver blir undersøkt for triglycerider/lipemi (kvantitiv måling) 30,4% 14 41,3% 19 37,0% 17 41,3% 19 15,2% 7 15,2% 7 17,4% 8 Konklusjon Riktig preanalytisk håndtering av glukosemålingar er klinisk viktig, men komplisert å få til Norske laboratorier har eit forbedringspotensiale Riktig indikasjon Sentrifugering ila kort tid / terumorør 13