Publisering eller bruk av dette materialet kan kun skje etter avtale med Øystein Brorson eller Sverre- Henning Brorson

Spesifikke Borrelia burgdorferi immunkomplekser En årsak til seronegativitet og symptomer En mulig aktivitetsmarkør Publisering eller bruk av dette materialet kan kun skje etter avtale med Øystein Brorson eller Sverre- Henning Brorson

Spesifikke Borrelia burgdorferi immunkomplekser En årsak til seronegativitet og symptomer En mulig aktivitetsmarkør

Lyme borreliose; den nye store sykdomsimitator

Problemer med Borrelia serologi Sen antistoffutvikling Den enkeltes immunapparat er variabelt Seronegativitet (skjulte antigen, intracellulær, bakteriens manipulering av immunapparatet) Sirkulerende immunkomplekser ELISA og Western blot tester baserer seg vanligvis på en genospecies og genotype Borrelia-hetrogenitet, geografisk variasjon) Sensitiviteten i systemet Vedvarende antistoff positive friske Hvordan måle behandlingsrespons?

Digeon et al. 1977Journ of Imm. Methods PEG- Natriumborat isolering av immunkompleks ved Hep-B antigen-antstoff negative Stabilt i serum opptil 9 dager 4 uker; 12-60% stigning Synker ved økende temp; 37 ºC 20-50% fall Varmeinaktivering; 56 ºC 30 min 15-60% fall (Fryse-tining x 1; ingen invirkning) Maks utfelling etter 2 t ved 4ºC Unngå lipemisk serum

Fremgangsmåte ved felling av 7% PEG-Na-borat buffer ph 8.4 + like deler serum Over natt i kjøleskap (2 timer) Sentrifugering 8320g 15 min Sug av supernatant Vask 500ul 3.5% Peg-Na-borat buffer 2x m/ sentrifugering 8320g Løses i Na-borat ph 10.2 (som serum volum)

Immunkomplekser ved; Bakterielle sykdomer: Syfilis, Yersinia, Cystisk fibrose, Lepra, Chlamydia pneumonia, Mycoplasma pneumonia, noen glomerulonefritter, bakteriell subakutt endokarditt, meningokokk infeksjon, disseminert gonore, streptokokk infeksjoner, Borrelia Parasitter: Malaria, trypanosoma, schistosoma, filariasis, toxoplasma Virus: HIV, CMV, EBV, Dengue feber, SSPE, (subakutt skleroserende panencephalitt), Hep-B,C Autoimmun sykdom: SLE, sklerodermi, sjøgrens disease, MCTD, reumatoid artritt, Felty`syndrom, periarteritis nodosa, systemisk sklerose Andre tilstander: MS, cøliaki, ulcerøs colitt, crohns disease, sarcoidose, ALS, ankyloserende spondylitt, myasthenia gravis, graviditet... Neoplastiske sykdommer

Hardin, Steere,Malawista New Engl Journ of Med des 1979, en av de tidligste immunologiske fenomener som ble beskrevet ved LB Av 78 EM pasienter hadde 95% C1q bindende aktivitet Forbigående artritt; negative lavt titer etter 3 mnd. Det isolerte identifisert som IgG ikke RF IgG/M Affiserte ledd, -leddveske; alltid høyt nivå Vedvarende høyt nivå ved hjerte og nevrologisk infeksjon

Schutzer et. Al The Lancet 1990 PEG-Na-borat 22 sero positive med aktiv inf; 21 positive 10 sero negative med EM; alle positive 4 av 12 med mulig LD, men uten EM, positive Konklusjon, tidlig serologisk parameter Mengde korrelerte med sykdomsgrad Følge behandling om recidiv

Immunkompleks - patogenese Når er av en størrelse og kvantitet som ikke fjernes av det retikulo-endoteliale system; deponering i vev og organer Synergisme LOS og IL-1-, IL-6 og TNF- Aktivering av komplement Kan føre til lokal vevs destruksjon Vaskulær sykdom Kan føre til defekt Fc receptor, slik at opsoniserte B.b ikke fjernes av monocytter finnes i serum, spinalveske, leddveske og i og rundt blodårer

Osp`: ytre membran proteiner Frigjøres fra bakterier og cyster, binder seg til antistoff. Immun escape

Felling av immunkompleks

Artrosesmerter kan tenkes å være borreliarelaterte Kombinasjonsterapi: doxy-20d,metro-20d-doxy-20d-metro-20d God terapirespons WB IgG: p-100, VlsE, p-41, p-39, OspC, p-18a Infeksjon i stadium III Virulent afzelii stamme, laminin og dekorin bindende 6/1-09 4/3 ferdig beh Premi er IgG/ M C6 IgG/ M Enz IgG Enz IgM Premi er IgG/ M C6 IgG/ M Enz IgG Enz IgM 209% >857% >290 U + 259% 1070% 4794% 301% 18/3 170 >810 260 Sv+ 106 330 3463 106 4/8 89 590 62 gr 25 69 814 55

Akutte vertigoplager i ca 7 mnd. Spv neg Flåtteksponert xn Ikke EM 8 hjernenerveaffeksjon, muskulære sympt. 20d doxy+20 d metro God terapirespons WB IgM: OspC, p-41 Premi er IgG/ M C6 IgG/ M Enz IgG Enz IgM Premi er IgG/ M C6 IgG/ M Enz IgG Enz IgM Des-07 32% 29% - - 52% 42% 0% 600% Feb-08 36 94 - gr 64 51 0 153 Aug-08 34 33 - - 64 38 4 0

Borreliose, litt diffus symptomatologi, forløp over noen år, fatigue, muskeloskeletale sympt. Sept-07 ktr 4 u ceftriax. Nov-07 ferdig med 80 d doxy/metro. Non responder WB IgG: p-100, VlsE, p-41, OspC, p-18a Infeksjon i stadium III Virulent afzelii stamme, laminin bindende Premier IgG/M C6 IgG/M Enz IgG Enz IgM Premier IgG/M C6 IgG/M Enz IgG Enz IgM Aug-07 236% >793% >400-189% 1200% 6120 % 28% Sept-07 246 >789 >270-157 1817 6788 45 Nov-07 245 723 >370-188 1114 6970 25 Feb-08 160 >731 >260-223 1233 7592 14 Mai-08 191 >833 >280-222 1615 5401 0 Sept-08 Non respond 151 >857 330-188 1475 5415 12

Flåttbitt 6 uker siden, senere radikulære smerter i alle ekstremiteter og v-sidig facialisparese iv. Pcl fra 29/10-10/11 Spv Premier IgG/M IgG/M fritt ab 29/10 1303 % 978% 10/11 1639 179

Neuroborreliose-studie Siv spinalvæske N: 74 Fritt antistoff Premier IgG/M: 40 (54%) C6 IgG/M : 30 (40%) Index Daco IgG/M : 40 (54%) PCR pos: 11 (15%) Immunkompleks Premier pos: 14 (19%) En pasient var Elisa serum negativ Alle WB positive serum

Sammenheng mellom C6 IgG/M og Daco Index IgG/M Fritt antistoff N:74 Index - + C6-32 12 + 2 28 30 40 4 2

Sammenheng mellom PCR og Immunkompleks spv N: 74 PCR - + Premier IgG/M - 57 3 + 6 8 14 11 17

Erytema migrans 2007 N: 80 Enz Premier C6 WB IgG IgM IgG/M IgG/M IgG/M 31(38%) 23(28.7%) 11(13.7%) 29(36.2%) 59(73.7%) 39(48.7%) 30 26 33 22 ab+ 45(56.2%) 35(43.7%) 32(40%)

Konklusjon immunkompleks Tidlig positiv parameter Enkelte har bare immunkompleks Korrelerer ofte med sykdomsgrad Fritt antistoff kan bestå i lang tid Immunkompleks faller raskt ved vellykket behandling Indirekte antigentest Immunkompleks passerer ikke blod-hjerne barriere