Anti-HCV system no Anti-HCV 6C37 B6C37N 49-0302/R3 Les markerte endringer Revidert oktober 2009 Ytterligere produktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. Dette pakningsvedlegget må leses nøye. Hvis instruksjonene i dette pakningsvedlegget ikke følges, kan ikke analyseresultatenes pålitelighet garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer Medisinsk utstyr til in vitro-diagnostikk Utløpsdato Lotnummer Oppbevares ved 2 8 C Serienummer Kyvetter Prøvekopper Septum Ekstra skrukorker Se pakningsvedlegg Kontrollnummer Produsent Reagenslot Utfyllende forklaring av de enkelte reagenssymbolene finnes under REAGENSER. ABBOTT Diagnostics Division 1
NAVN ARCHITECT Anti-HCV BRUKSOMRÅDE ARCHITECT Anti-HCV er en immunkjemisk kjemiluminescensmikropartikkel analyse (CMIA) for kvalitativ påvisning av antistoff mot hepatitt C-virus (anti-hcv) i humant serum og plasma. SAMMENDRAG OG ANALYSEFORKLARING ARCHITECT Anti-HCV-analysen brukes til å påvise antistoffer mot hepatitt C-virus (HCV). Immunkjemiske kjemiluminescensanalyser er en variant av prinsippet for de enzymatiske immunkjemiske analysene (EIA). Fastfase-EIA ble først beskrevet tidlig på 1970-tallet og benytter antigener og/eller antistoffer på en overfl ate til å binde komplementære analytter. 1 Den bundne analytten påvises av en rekke reaksjoner mellom antigen og antistoff. EIA-metoder identifi serer antigener og antistoffer forbundet med infeksjon av hepatittvirus. Sluttreaksjonen i ARCHITECT Anti-HCV-analysen bruker bundre akridiniumester konjugater til å generere et kjemilumescerende signal. HCV er et virus som transporteres i blodet. 2,3 Serologiske studier som benytter EIA til påvisning av antistoffer mot rekombinante HCV-antigener, har fastslått at HCV er årsaken til de fl este forekomster av non-a-, non-b-hepatittinfeksjoner som er overført via blod 4-9 eller pådratt fra omgivelsene 10. Forekomst av anti-hcv indikerer at en person kan ha blitt smittet med HCV, kan ha latent smittsom HCV og/eller kan smitte andre med HCV-infeksjon. 11 Selv om de fl este smittede personene er asymptomatiske, kan HCV-infeksjon utvikle seg til kronisk hepatitt, cirrhose og/eller økt risiko for hepatocellulær karsinom. 12-15 Innføringen av testing av blodgivere for anti-hcv med EIA har ført til markert lavere risiko for hepatittsmitte via blodoverføring. 16,17 ARCHITECT Anti-HCV er utviklet for å påvise antistoffer mot HCVgenomets antatte strukturelle og ikke-strukturelle proteiner. Forholdet mellom de rekombinante HCV-proteinene i ARCHITECT Anti-HCV og HCV-genomets antatte strukturelle og ikke-strukturelle proteiner fremstilles nedenfor. 18 HCr43: HCr43-proteinet er uttrykt i escherichiacoli (E. coli) og består av to ikke-tilgrensende kodingsregioner for HCV-genomsekvensen. Den første regionen representerer aminosyrer 1192 til 1457 (33c) i HCV-sekvensen. Den andre av de to regionene representerer aminosyrer 1 til 150 (kjerne) av HCV-sekvensen. På grunn av likheten i fl avi virusenes genome organisasjon, foreslås det at den første sekvensen er fra NS3-kodingsregionen og den andre sekvensen er fra HCV-ens kjernekodingsregion. c100-3: c100-3-antigenet er et rekombinant HCV-protein uttrykt i sac-charomyces cerevisiae (sopp). Flavivirusenes genome organisasjon tyder på at den klonede sekvensen ligger i HCVs antatt ikke-strukturelle (NS3 og NS4) regioner. c100-3-proteinet er et kimerisk fusjons protein med 154 aminosyrer av humant superoksid dismutase (hsod), fem aminosyrelenker, aminosyre nummer 1569 til 1931 av HCV-polyprotein og ytterligere fem aminosyre lenker ved carboksylterminus. Hepatitt C-antigenene HCr43 og c100-3 er fremstilt på lisens i USA av Chiron Corporation etter avtale om delt produksjon. ARCHITECT Anti-HCV-analysen er produsert i henhold til kontraktavtale fra Ortho Diagnostic Systems og Chiron Corporation. ANALYSEPRINSIPPER ARCHITECT Anti-HCV-analysen er en to-trinns immunkjemisk analyse basert på teknologien for immunkjemisk kjemiluminescens mikropartikkelanalyse (CMIA) til kvalitativ påvisning av anti-hcv i humant serum og plasma. I det første trinnet blandes prøvemateriale, rekombinant HCV-antigenbelagte paramagnetiske mikropartikler og fortynningsløsning. Anti-HCV i prøvematerialet bindes til de HCV-belagte mikropartiklene. Etter vasking tilsettes et antihumant akridinmerket konjugat i trinn to. Etter enda en vaskesyklus tilsettes reaksjonsblandingen pretrigger- og triggerløsning. Den påfølgende kjemiluminescensreaksjonen måles i relative lysenheter (RLU). Mengden av anti-hcv i prøven og mengden av RLU målt av optikken i ARCHITECT i* System, er direkte proporsjonale. Om det er anti-hcv til stede i prøven bestemmes ved å sammenligne det kjemiluminescerende signalet i reaksjonsblandingen med cutoffsignalet fra en tidligere ARCHITECT Anti-HCV-kalibrering. Hvis det kjemiluminescerende signalet i prøven er større enn eller likt cutoffsignalet, betraktes prøven som reaktiv for anti-hcv. Ytterligere informasjon om system- og analyseteknologi fi nnes i ARCHITECT-brukerhånboken, kapittel 3. * i = immunkjemisk analyse REAGENSER Reagenspakke, 100 tester / 4 x 100 tester / 4 x 500 tester MERK: Enkelte pakningsstørrelser er ikke tilgjengelige i alle land eller til bruk på alle ARCHITECT i Systems. Ta kontakt med Abbott kundeservice. ARCHITECT Anti-HCV Reagent Kit (6C37) 1 eller 4 fl asker (6,6 ml per fl aske med 100 tester / 27,0 ml per fl aske med 500 tester) HCV (E. coli, gjærsopp, rekombinant) antigenbelagte mikropartikler i MES-buffer. Minimums konsentrasjon: 0,14 % tørrstoff. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. 1 eller 4 fl asker (5,9 ml per fl aske med 100 tester / 26,3 ml per fl aske med 500 tester) konjugat: murint akridinmerket anti-igg/anti-igm-konjugat i MES-buffer. Minimumskonsentrasjon: (IgG) 8 ng/ml / (IgM) 0,8 ng/ml. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. 1 eller 4 fl asker (10,0 ml per fl aske med 100 tester / 50,9 ml per fl aske med 500 tester) anti-hcv-fortynningsløsning som inneholder TRIS-buffer med proteinstabilisatorer. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Pretriggerløsning som inneholder 1,32 % (w/v) hydrogenperoksid. ARCHITECT i Trigger Solution Triggerløsning som inneholder 0,35 N natriumhydroksid. ARCHITECT i Wash Buffer Vaskebuffer som inneholder fosfatbufret saltvannsløsning. Konserveringsmiddel: antimikrobielle midler. 2
VIKTIGE FORHOLDSREGLER Til bruk ved in vitro-diagnostikk. Forholdsregler VIKTIG: Dette produktet krever håndtering av humane prøver. Det anbefales at alt materiale av human opprinnelse anses som potensielt smittefarlig og håndteres i samsvar med relevant praksis for biosikkerhet. Sikkerhetsdatablad er tilgjenglig på forespørsel for produkt som ikke er klassifisert som farlig i henhold til EU-direktiv 1999/45/EF med tillegg. Forholdsregler ved bruk Reagenspakken må ikke brukes etter utløpsdatoen. Ikke bland reagenser fra samme eller pakke eller fra andre reagenspakker. Før ARCHITECT Anti-HCV-reagenspakken plasseres i systemet første gang, skal fl asken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha bunnfalt under transport. Ytterligere informasjon om blanding av mikropartikler fi nnes under PROSEDYRE, Analyseprosedyre i dette pakningsvedlegget. Septum SKAL brukes for å unngå fordampning og kontaminering av reagenser og for å sikre reagensenes holdbarhet. Testresultatenes pålitelighet kan ikke garanteres hvis ikke septum brukes som beskrevet i dette pakningsvedlegget. Bruk rene hansker for å unngå kontaminering når septum settes på en åpen reagensflaske. Skift hansker ved håndtering av fl asker med konjugat hvis hanskene har vært i kontakt med humant plasma eller serum, fordi humant IgG/IgM vil kunne nøytralisere konjugatet. Etter at septumet er satt på reagensfl asken, må ikke flasken vendes. Det kan føre til at reagens lekker ut, noe som kan påvirke analyseresultatene. Over tid kan væske som ligger på septum, tørke inn. Dette er inntørkede salter som ikke har noen betydning for analyseresultatene. Ytterligere informasjon om forholdsregler ved betjening av systemet fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 7. Oppbevaring ARCHITECT Anti-HCV-reagenspakken, -kalibratoren og -kontrollene skal oppbevares ved 2 8 C i loddrett stilling og kan brukes med det samme de er tatt ut fra oppbevaring ved 2 8 C. Reagensene er holdbare til utløpsdatoen når de oppbevares og håndteres som foreskrevet. ARCHITECT Anti-HCV-reagenspakken kan oppbevares i ARCHITECT i System i maksimum 30 dager. Etter 30 dager skal reagenspakken kastes. Informasjon om styring av reagensholdbarhet i systemet fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 5. Reagensene kan oppbevares i eller utenfor ARCHITECT i System. Hvis reagensene fjernes fra systemet, skal de oppbevares ved 2 8 C (med septum og ny skrukork) i loddrett stilling. Hvis reagensene oppbevares utenfor systemet, bør oppbevares i sine opprinnelige esker for å sikre at de holder seg loddrett. Hvis flasken med mikropartikler ikke står loddrett (med septum) til kjøling utenfor systemet, skal reagenspakken kastes. Når reagensene tas ut av systemet, må det startes en reagensskanning for å oppdatere systemets holdbarhetstidsmåler. Indikasjoner på nedsatt reagenskvalitet Når en kontrollverdi ligger utenfor det angitte konsentrasjonsområdet, kan dette tyde på nedsatt reagenskvalitet eller prosedyrefeil. Tilhørende testresultater er ugyldige og prøvene skal analyseres på nytt. Rekalibrering kan være påkrevd. Informasjon om feilsøking fi nnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 10. INSTRUMENTPROSEDYRE ARCHITECT Anti-HCV-analysefi len skal installeres på ARCHITECT i System fra ARCHITECT i Assay CD-ROM før testen utføres. Ytterligere informasjon om installering av analysefi len og om visning og endring av analyseparametere fi nnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 2. Informasjon om utskrift av analyseparametere fi nnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 5. Ytterligere informasjon om systemprosedyrer fi nnes i ARCHITECTbrukerhåndboken. 3 PRØVETAKING OG FORBEREDELSE TIL ANALYSERING Til ARCHITECT anti-hcv-analysen kan det brukes humant serum (inkludert serum tatt i serumseparatorglass) eller plasma fra glass med kalium-edta, litiumheparin, natriumheparin, natriumcitrat, ACD, CPDA-1, CPD, CP2D eller kaliumoksalat. Ingen andre antikoagulanter er blitt validert til bruk med ARCHITECT Anti-HCVanalysen. Følg glassprodusentens bruksanvisning for serum- og plasmaprøvetakingsglass. System kan ikke verifi sere hvilket prøvemateriale som benyttes. Det er brukerens ansvar å kontrollere at riktig prøvemateriale brukes til ARCHITECT Anti-HCV-analysen. Analysen er ikke validert for post mortem-prøver eller andre kroppsvæsker bortsett fra humant serum og plasma. Vær forsiktig ved håndtering av pasientprøver for å unngå krysskontaminering. Det anbefales å bruke engangspipetter eller -pipettespisser. Denne analysen er utviklet og validert til bruk med humant serum eller plasma fra individuelle pasient- og donorprøver. Sammenslåtte prøver må ikke brukes, siden nøyaktigheten til slike testresultater ikke er godkjent. Ikke bruk varmeinaktiverte prøver. Ikke bruk kraftig hemolyserte prøver. Kontroller at det ikke er bobler i prøvene, slik at resultatene blir best mulig. Fjern bobler med en rørepinne før analyseringen startes. Bruk en ny rørepinne til hver prøve for å unngå krysskontaminering. For å oppnå optimale resultater bør serum- og plasmaprøver ikke inneholde fibrin, røde blodlegemer og utfellinger, da dette kan medføre feil resultater. Slike prøver skal overføres til et sentrifugeglass og sentrifugeres ved minst 10 000 relativ sentrifugalkraft (RCF) i 10 minutter. Kontroller at serumprøvene er fullstendig koagulert før sentrifugering. Enkelte prøver kan ha forlenget koagulasjonstid, spesielt hvis de er tatt fra pasienter i antikoagulantbehandling eller trombolyttisk behandling. Hvis prøven sentrifugeres før fullstendig koagulasjon, kan forekomst av fi brin medføre feilaktige resultater. Prøver fra pasienter som får heparinbehandling, kan være delvis koagulert, og forekomsten av fi brin kan gi feilaktige resultater. For å forhindre dette, bør prøven tas før heparinbehandlingen. Gravitasjonsseparasjon er ikke tilstrekkelig til klargjøring av prøver. Prøver må skilles fra koagelet eller røde blodlegemer ved hjelp av sentrifugering i samsvar med bruksanvisningen for prøvetakingsglass. Prøver kan oppbevares uten å avpipetteres fra koagelet og røde blodlegemer i inntil 7 dager ved 2 8 C. Hvis det vil gå mer enn 7 dager før analyseringen kan utføres, bør serum og plasma fjernes fra koagelet, serumseparatoren eller de røde blodlegemene og oppbevares i frossen tilstand (-20 C eller kaldere). Etter opptining skal fryste prøver blandes GRUNDIG ved LAV hastighet på en prøveblander. Sentrifugerte prøver med et lipidlag på toppen skal overføres til en prøvekopp eller et sekundærglass. Vær forsiktig slik at bare den klare delen av prøven, og ikke det lipemiske materialet, overføres. Det er ikke observert kvalitative forskjeller mellom eksperimentelle kontroller og de 25 ikke-reaktive eller 25 berikede reaktive prøvene som ble frosset/tint 6 ganger. Gjentatte nedfrysinger og opptininger bør likevel unngås. Ved forsendelse skal prøvene pakkes og merkes i samsvar med gjeldende nasjonale og internasjonale regler for transport av prøver og smittefarlige komponenter. Prøvene kan sendes ved romtemperatur, på is ved 2 8 C eller ved -20 C eller kaldere (tørris). Det bør ikke avvikes fra disse oppbevaringsreglene. Før prøver sendes anbefales det at de separeres fra koagelet, serumseparatoren eller de røde blodlegemene. Det er ikke observert kvalitative forskjeller i yteevne mellom eksperimentelle kontroller og de 23 ikke-reaktive eller 23 berikede reaktive prøvene som er blitt testet med forhøyede nivåer av bilirubin ( 20 mg/dl), hemoglobin ( 500 mg/dl), triglyserider ( 3000 mg/dl), eller protein ( 12 g/dl). Det er ikke observert kvalitative forskjeller i yteevne mellom eksperimentelle kontroller og de 25 ikke-reaktive eller 25 berikede reaktive prøvene som ble testet med røde blodlegemer ved 0,4 % v/v. ARCHITECT Anti-HCV-kalibrator og -kontroller bør blandes forsiktig før de tas i bruk.
PROSEDYRE Reagenspakken inneholder 6C37 ARCHITECT Anti-HCV Reagent Kit Nødvendig tilbehør og utstyr System 6C37-01 ARCHITECT Anti-HCV Calibrator 6C37-10 ARCHITECT Anti-HCV Controls Pipetter eller pipettespisser (valgfritt) til pipettering av mengdene som er spesifi sert på pasientprøve- eller kontrollbestillingsskjermen. Informasjon om nødvendig utstyr til vedlikeholdsprosedyrer fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 9. Analyseprosedyre Før ARCHITECT Anti-HCV-reagenspakken plasseres i systemet første gang, skal fl asken med mikropartikler blandes for å resuspendere mikropartikler som kan ha bunnfalt under transport: Vend flasken med mikropartikler 30 ganger. Se på fl asken og kontroller at mikropartiklene er resuspendert. Hvis det fremdeles ligger mikropartikler i bunnen av fl asken, skal den vendes fl ere ganger til mikropartiklene er fullstendig resuspendert. Når mikropartiklene er resuspendert, skrus lokket av og kastes. Bruk rene hansker og ta et septum ut av posen. Sett septumet forsiktig på fl askeåpningen. REAGENSET MÅ IKKE BRUKES hvis mikropartiklene ikke er resuspendert. Kontakt Abbott kundeservice. Bestill kalibrering hvis det er nødvendig. Bestill testene. Informasjon om bestilling av pasientprøver, kalibrator og kontroller og om generelle betjeningsprosedyrer fi nnes i ARCHITECTbrukerhåndboken, kapittel 5. Sett ARCHITECT Anti-HCV-reagenspakken inn i ARCHITECT i System. Kontroller at alle nødvendige reagenser er på plass. Kontroller at det er septum på alle reagensfl askene. Minimumsvolumet i prøvekoppen for å utføre én anti-hcv-test på ARCHITECT i System, er 150 μl for den første anti-hcv-testen pluss 20 μl for hver ekstra anti-hcv-test fra samme prøvekopp. Det kan maksimalt utføres 10 replikater fra samme prøvekopp. Kontroller at prøvekoppen inneholder minstevolumet før testen utføres. Minstevolumet for prøvekoppen beregnes av systemet og vises på pasient-, kalibrator- og kontrollbestillingsskjermbildene og på Orderlist-rapporten. Hvis en prøve er satt inn som prioritert og det er bestilt 3 eller færre replikater, kan det brukes et mindre volum i prøvekoppen enn det som vises på ordreskjermbildet. I dette tilfellet er minimumsvolumet i prøvekoppen 70 μl for den første anti-hcvtesten pluss 20 μl for hver ekstra replikat. Ytterligere informasjon om prioritert plassering fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 5. For å begrense virkningene av fordampning må alle prøver (pasientprøver, kalibrator og kontroller) testes innen 3 timer etter at de er plassert i ARCHITECT i System. Hvis prøven står i systemet i mer enn 3 timer, må den byttes ut med ferskt prøvemateriale. Ytterligere informasjon om prøvefordamping og -volumer fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 5. Kontroller alltid at det er nok prøvemateriale i primær- og sekundærglassene. Bland ARCHITECT Anti-HCV-kalibrator og -kontroller ved å vende dem forsiktig før bruk. For å oppnå nødvendige mengder ARCHITECT Anti-HCV-kalibrator og -kontroller holdes fl askene loddrett, og 5 dråper kalibrator eller 6 dråper av hver kontroll fylles i de respektive prøvekoppene. Plasser prøver i prøveholderen og plasser prøveholderen i området for prøveinnlasting. Trykk på RUN. ARCHITECT i System utfører følgende funksjoner: Flytter prøvebeholderen til området for prøveinnlasting. Setter inn en kyvette i analyseringsområdet. Aspirerer og overfører prøvematerialet til kyvetten. Flytter kyvetten én posisjon fram og tilsetter mikropartikler og fortynningsløsning til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter konjugat til kyvetten. Blander, inkuberer og vasker reaksjonsblandingen. Tilsetter pretrigger- og triggerløsning. Måler emisjonen av kjemiluminescens for å påvise forekomst av anti-hcv i prøvematerialet. Aspirerer innholdet i kyvetten direkte til avløpet, mens kyvetten overføres til beholderen for fast avfall. Beregner resultatet. For å oppnå optimal yteevne er det viktig å følge vedlikeholdsrutinene slik de er beskrevet i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 9. Hvis laboratoriets prosedyrer krever hyppigere vedlikehold, følges disse prosedyrene. Fortynningsprosedyre Prøvene til ARCHITECT Anti-HCV-analysen kan ikke fortynnes. Kalibrering For å utføre en ARCHITECT Anti-HCV-kalibrering, skal kalibrator 1 testes i 3 replikater. Én prøve av begge anti-hcv-kontrollene må testes for å evaluere kalibreringen. Kontrollverdiene skal ligge innenfor områdene som er spesifi sert i pakningsvedlegget for kontrollene. Kalibrator skal være prioritert prøve. Når en ARCHITECT Anti-HCV-kalibrering er godkjent og lagret, kan alle påfølgende prøver testes uten videre kalibrering, med mindre det brukes en reagenspakke med nytt lotnummer kontrollene ligger utenfor spesifi sert område Ytterligere informasjon om hvordan en analysekalibrering skal utføres fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 6. PROSEDYRE FOR KVALITETSKONTROLL MERK: Det anbefales å verifi sere kalibreringen ved å analysere den positive og den negative ARCHITECT Anti-HCV-kontrollen. Det anbefalte kontrollkravet for ARCHITECT Anti-HCV-analysen er at én enkelt prøve av begge ARCHITECT Anti-HCV-kontrollene testes én gang daglig. Hvis laboratoriets prosedyrer for kvalitetskontroll krever hyppigere bruk av kontroller for å verifi sere testresultater, følges laboratoriets egne prosedyrer. Kontrollverdiene skal ligge innenfor områdene som er spesifi sert i pakningsvedlegget for kontrollene. Verifisering av analysens dokumenterte egenskaper Mer informasjon om fremgangsmåte for verifi sering av analysens dokumenterte egenskaper fi nnes i ARCHITECT-brukerhånboken, vedlegg B. ARCHITECT Anti-HCV-analysen tilhører metodegruppe 5. 4
RESULTATER ARCHITECT i System beregner gjennomsnittlig kjemiluminescenssignal for Anti-HCV-kalibrator 1 ut fra tre kalibrator 1-replikater og lagrer resultatet. Beregning ARCHITECT Anti-HCV-analysen beregner et resultat basert på S/CO. Cutoff-beregning: gjennomsnittlig RLU-verdi x 0,074 = cutoff-rlu-verdi for kalibrator 1 S/CO = prøvens RLU-verdi/cutoff-RLU-verdi Tolkning av resultater Prøver med S/CO-verdier < 1,00 betraktes som ikke-reaktive med ARCHITECT Anti-HCV-analysen og skal ikke testes ytterligere. Prøver med S/CO-verdier 1,00 betraktes som reaktive med ARCHITECT Anti-HCV-analysen. Alle initialt reaktive prøver bør testes på nytt i duplikat. Hvis begge duplikattestene er ikke-reaktive, skal prøven betraktes som ikkereaktiv for anti-hcv. Hvis bare én er reaktiv, skal prøven betraktes som reaktiv for anti-hcv ved gjentatt testing ifølge kriteriene for ARCHITECT Anti-HCV. Prøver som er reaktive for anti-hcv ved gjentatt testing skal undersøkes nærmere gjennom supplerende testing med f.eks. andre HCV-spesifi kke immunkjemiske analyser og immunoblotanalyser eller med begge analysene og/eller NAT-tester. MERK: Ytterligere informasjon om konfi gurering av ARCHITECT i System når det gjelder tolking av gråsoneprøver og prøver med høye reaktive verdier fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 2. Tolking av gråsoneprøver og prøver med høye reaktive verdier styres av en redigerbar parameter som bør brukes i henhold til sluttbrukerens behov. Flagg Noen resultater kan ha informasjon i fl aggfeltet. Nærmere beskrivelse av fl aggene som kan vises i dette feltet, fi nnes i ARCHITECT-brukerhåndboken, kapittel 5. PROSEDYRENS BEGRENSNINGER Falskt positive resultater kan forekomme med alle analysepakker. Omfanget av falskt reaktive prøver er avhengig av analysens spesifi sitet, prøvematerialets kvalitet og forekomsten av HCVantistoffer i populasjonen som undersøkes. Hvis ARCHITECT Anti-HCV-resultatene ikke stemmer overens med den kliniske utredningen, anbefales det å utføre supplerende testing for å få bekreftet resultatet. Resultatene bør ses i sammenheng med pasienthistorikk og andre hepatittmarkører for at diagnosen akutt eller kronisk infeksjon skal kunne stilles. Prøver som inneholder utfellinger eller røde blodlegemer, skal sentrifugeres før analysering. Analysen er ikke validert for post mortem-prøver eller andre kroppsvæsker bortsett fra humant serum og plasma. Ikke bruk varmeinaktiverte prøver. Prøver fra pasienter som får heparinbehandling, kan være delvis koagulert, og forekomsten av fi brin kan gi feilaktige resultater. For å forhindre dette, bør prøven tas før heparinbehandlingen. SPESIFIKKE EGENSKAPER MERK: Representative ytelsesdata vises. Resultatene i de enkelte laboratoriene og for ulike populasjoner kan variere. Presisjon Presisjonen til ARCHITECT Anti-HCV ble målt ved hjelp av 3 reagensloter. Et panel med 4 prøver ble testet i replikater på 4 med hver reagenslot 1 gang daglig i 5 dager på 3 laboratorier. De daglige seriene omfattet også den positive ARCHITECT-kontrollen som ble testet i duplikat først og sist i serien. Standardavvik (SD) og prosentvis variasjonskoeffi sient (% CV) innen-serie og mellom-serie ble bestemt med variasjonskomponentanalyse 19 for en randomisert effektmodell 20 (tabell I). TABELL I ARCHITECT Anti-HCV-analysens presisjon Gjennomsnittlig Innen-serie Mellom-serie a (S/CO) Totalt antall replikater Totalt b Panelprøve SD % CV SD % CV SD % CV 1 180 7,39 0,351 4,7 0,395 5,3 0,447 6,0 2 180 3,92 0,138 3,5 0,169 4,3 0,209 5,3 3 180 1,50 0,056 3,7 0,067 4,4 0,095 6,4 4 180 0,08 0,005 5,6 0,007 8,4 0,011 13,4 Positiv kontroll 180 3,27 0,127 3,9 0,147 4,5 0,166 5,1 a Mellom-serie-variabilitet inkluderer innen serie-variabilitet. b Analysens totale variabilitet omfatter innen-serie-, mellom-serie-, innen-laboratorie- og mellom-laboratorie-variabilitet. Spesifisitet Totalt 8942 serum- og plasmaprøver fra frivillige blod- og plasmaferesegivere ble evaluert. Prøvene fra frivillige blodgivere ble tatt fra europeiske blodsentre og plasmafereseprøvematerialet fra blodsentre i USA (tabell II). Totalt 59 prøver var reaktive ved gjentatt testing. Etter supplerende testing med en anti-hcv-immunoblotanalyse var 28 prøver anti-hcv-positive (reaktive for to eller fl ere genprodukter), 15 var ubestemte (reaktive for ett genprodukt) og 16 var negative (ingen genprodukter påvist). 99 av de 1500 prøvene som ble tatt fra sykehuspasienter, var reaktive ved gjentatt testing. Av disse var 88 anti-hcv-positive, 5 ubestemte og 6 negative ved gjentatt testing. Av 65 prøver fra personer med sykdommer uten sammenheng med HCV-infeksjon og prøver som inneholdt potensielt interfererende komponenter, var 3 prøver reaktive ved gjentatt testing, og alle var anti-hcv-positive ved supplerende testing. TABELL II ARCHITECT Anti-HCV-analysens reaktivitet i prøver fra blodgivere, plasmaferesegivere, sykehuspasienter, personer med sykdommer uten sammenheng med HCV-infeksjon og prøvemateriale som inneholder potensielt interfererende komponenter Antall testet IR (% av total) RR (% av total) Antall positive ved supplerende testing a (% av reaktive ved gjentatt testing) Kategori Frivillige blodgivere Serum b 3000 14 (0,47) 12 (0,40) 0 Plasma 2508 11 (0,44) 11 (0,44) 0 Plasmaferesegivere 3434 37 (1,08) 36 (1,05) 28 (77,78) Givere i alt 8942 62 (0,69) 59 (0,66) 28 (47,46) Sykehuspasienter 1500 100 (6,67) 99 (6,60) 88 (88,89) Sykdommer uten sammenheng med HCV-infeksjon og potensielt interfererende komponenter c 65 3 (4,62) 3 (4,62) 3 (100,00) IR = Initialt reaktive, RR = Gjentatt reaktive a Et positivt resultat ble defi nert som reaktivt for to eller fl ere genprodukter med immunblotanalyse. b Inkluderer et subsett av 500 komplementære serum-/ plasmapar. Kun serumresultatene ble tatt med i spesifi sitetsberegningen. c Kategorien inkluderte følgende: anti-cmv-positive (5), anti-ebvpositive (5), anti-hav-positive (5), HBsAg-positive (5), anti-hiv-1- positive (5), syfi lis (5), revmatoid faktor (5), alkoholisk leversykdom (5), anti-hbc-positiv (5), anti-htlv-i-positiv (5), humant anti-mus-antistoff-positive (10) og infl uensavaksinerte (5). 5
Sensitivitet Totalt 117 prøver fra 50 personer med kronisk HCV-infeksjon, 42 personer som var anti-hcv- og HCV RNA-positive og 25 personer med økt risiko for HCV-infeksjon ble testet. Av de 117 prøvene var 100 reaktive ved gjentatt testing og anti-hcv-positive ved supplerende testing (tabell III). TABELL III ARCHITECT Anti-HCV-analysens reaktivitet i utvalgte populasjoner med kronisk HCV-infeksjon, anti-hcv/hcv RNA-positive og økt risiko for HCV-infeksjon Antall reaktive ved gjentatt testing (% av total) Antall positive ved supplerende testing a (% av reaktive ved gjentatt testing) Kategori Antall testet Kronisk HCV-infeksjon 50 50 (100,00) 50 (100,00) Anti-HCV/ HCV RNApositive 42 42 (100,00) 42 (100,00) Økt risiko for HCV-infeksjon b 25 8 (32,00) 8 (100,00) TOTALT 117 100 (85,47) 100 (100,00) a Et positivt resultat ble defi nert som reaktivt for to eller fl ere genprodukter med immunblotanalyse. b Kategorien inkluderte følgende: sprøytenarkomane (5), hemofi lipasienter (10), menn som har sex med menn (5) og kvinnelige prostituerte (5). Generell spesifisitet og sensitivitet Den generelle spesifi siteten og sensitiviteten ble beregnet basert på resultatene av 10 624 serum- og plasmaprøver som er oppsummert i tabell II og III. Den generelle spesifi siteten var 99,60 % (10 361/10 403) med 95 %- konfi densintervall på 99,45 % til 99,71 %. Spesifi siteten observert ved forskjellige laboratorier variererte fra 99,20 % (496/500) til 99,70 % (1994/2000). Sensitiviteten var 99,10 % med 95 %-konfi densintervall på 96,77 % til 99,89 %. Serokonversjon ARCHITECT Anti-HCV-analysens evne til å påvise anti-hcv ble evaluert ved å teste 20 HCV-serokonversjonspaneler fra blod og plasmaferesegivere som serokonverterte i løpet av sin donasjonshistorikk. Panelene ble også testet med en godkjent analyse. ARCHITECT Anti-HCV-analysen påviste anti-hcv 3 dager (én tapping) tidligere enn sammenligningsanalysen i 1 av de 20 panelene. Sammenligningsanalysen påviste anti-hcv 5 til 6 dager (én tapping) tidligere enn ARCHITECT Anti-HCV i 3 av de 20 panelene. Begge analysene viste lik påvisning av anti-hcv i 16 av de 20 panelene. REFERANSELISTE 1. Engvall E, Perlman P. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Quantitative Assay of Immunoglobulin G. Immunochemistry 1971;8:871-4. 2. Choo QL, Kuo G, Weiner AJ, et al. Isolation of a cdna Clone Derived from a Blood-Borne Non-A, Non-B Viral Hepatitis Genome. Science 1989;244:359-62. 3. Kuo G, Choo QL, Alter HJ, et al. An Assay for Circulating Antibodies to a Major Etiologic Virus of Human Non-A, Non-B Hepatitis. Science 1989;244:362-4. 4. Alter HJ, Purcell RH, Shih JW, et al. Detection of Antibody to Hepatitis C Virus in Prospectively Followed Transfusion Recipients with Acute and Chronic Non-A, Non-B Hepatitis. N Engl J Med 1989;321:1494-500. 5. Esteban JI, Viladomiu L, González A, et al. Hepatitis C Virus Antibodies Among Risk Groups in Spain. Lancet 1989;ii:294-7. 6. Van der Poel CL, Lelie PN, Choo QL, et al. Anti-Hepatitis C Antibodies and Non-A, Non-B Post-Transfusion Hepatitis in the Netherlands. Lancet 1989;ii:297-8. 7. Esteban JI, González A, Hernández JM, et al. Evaluation of Antibodies to Hepatitis C Virus in a Study of Transfusion-Associated Hepatitis. N Engl J Med 1990;323:1107-12. 8. Miyamura T, Saito I, Katayama T, et al. Detection of Antibody Against Antigen Expressed by Molecularly Cloned Hepatitis C Virus cdna: Application to Diagnosis and Blood Screening for Posttransfusion Hepatitis. Proc Natl Acad Sci USA 1990;87:983-7. 9. Aach RD, Stevens CE, Hollinger FB, et al. Hepatitis C Virus Infection in Post-Transfusion Hepatitis: An Analysis with First- and Second- Generation Assays. N Engl J Med 1991;325:1325-9. 10. Alter MJ, Hadler SC, Judson FN, et al. Risk Factors for Acute Non-A, Non-B Hepatitis in the United States and Association with Hepatitis C Virus Infection. JAMA 1990;264:2231-5. 11. Choo QL, Weiner AJ, Overby LR, et al. Hepatitis C Virus: The Major Causative Agent of Viral Non-A, Non-B Hepatitis. Br Med J 1990;46:423-41. 12. Dienstag JL. Non-A, Non-B Hepatitis. I. Recognition, Epidemiology, and Clinical Features. Gastroenterology 1983;85:439-62. 13. Gitnick G. Non-A, Non-B Hepatitis: Etiology and Clinical Course. Ann Rev Med 1984;35:265-78. 14. Wick MR, Moore S, Taswell HF. Non-A, Non-B Hepatitis Associated with Blood Transfusion. Transfusion 1985;25:93-101. 15. Hollinger FB. Non-A, Non-B Hepatitis Viruses. In: Fields BN, Knipe DN, editors. Virology. New York: Raven Press, 1990:2239-73. 16. Japanese Red Cross Non-A, Non-B Hepatitis Research Group. Effect of Screening for Hepatitis C Virus Antibody and Hepatitis B Virus Core Antibody on Incidence of Post-Transfusion Hepatitis. Lancet 1991;338:1040-1. 17. Donahue JG, Muñoz A, Ness PM, et al. The Declining Risk of Post- Transfusion Hepatitis C Virus Infection. N Engl J Med 1992;327: 369-73. 18. Bukh J, Miller RH, Purcell RH. Genetic Heterogeneity of Hepatitis C Virus: Quasispecies and Genotypes. Seminars in Liver Disease 1995;15:41-63. 19. Box GEP, Hunter WG, Hunter JS. Statistics for Experimenters: An Introduction to Design, Data Analysis, and Model Building. New York: John Wiley & Sons, Inc, 1978:510-39, 571-83. 20. SAS Institute Inc. The MIXED Procedure. In: SAS Technical Report P-229, SAS/STAT Software: Changes and Enhancements, Release 6.07. Cary, NC: SAS Institute Inc, 1992:289-366. Følgende patenter gjelder for ARCHITECT i System eller dets komponenter i USA. Det fi nnes andre slike patenter og patentsøknader i USA og i resten av verden. 5 468 646 5 543 524 5 545 739 5 565 570 5 669 819 5 783 699 Alle varemerker tilhører sine respektive eiere. Ytterligere produktinformasjon kan fås ved å kontakte Abbott kundeservice. ABBOTT Max-Planck-Ring 2 65205 Wiesbaden Germany +49-6122-580 Oktober 2009 1999, 2009 Abbott Laboratories 0088 6