HØGSKOLEN I B ERGEN. Avdeling for ingeniørutdanning. Kalkulator Millimete rpapir

Transkript

1 HØGSKOLEN I B ERGEN Avdeling for ingeniørutdanning EKSAMEN I BIO 0 13 Biokjem iske analysemetoder 2 KLASSE 3Bio DATO Torsdag 13. desember 2007 ANTALL OPPGAVE R 4 ANTALL SIDER 7 HJELPEMIDLER Det periodiske system Kalkulator Millimete rpapir TID MALFORM Bokmål (4 timer) FAGLÆRERE Ove Kvamm en (Oppgave I) Astrid-Mette Husøy (Oppgave 2) Anders Halvorsen (Oppgave 3) Marit S. Sylte (Oppgave 4) MERKNADER Hver oppgave føres på eget/egne ark. Hver oppgave teller 25% av totalen Lykke til Adresse. Postboks Bergen Bcsek sadr.: Nyg årdsgt. 112 Telefon : Fax:

2 Oppgave 1 a) Gitt følgende krets: i(l; O'w AA < -'--- e = ; Beregn den strømmen som vil gå gjennom multi meteret (anta at multimete ret har null indre motstand). Beregn også spenningen over motstanden på 600 Ohm. b) Gitt følgende krets: l ----V\!'v~---_+_--~V\!'vr--- A B Bruk Thcvcnins teorem til å beregne den strømmen som vil gå gjennom en motstand på 300 Ohm som koples inn mellom A og B. 2

3 c) Forklar kort virkem åten til et oscilloskop ved å ta utgangspunkt i den prinsipie lle oppbyggingen til katodestrålerøret som er vist på følgende tegning:,,. B '.... I l - '(~ g ~(+f.rfi"\ d6- - \ / I T _ I I,,. ::c lb.., 1.: Gløde lr:id 2 Glasskolb e 3 Katode 4 = Gluer h( )~ d ektj ode) S = FokuseringselelLlrodt (a no Ge) 6 = Aeode 7 "" Horisontale Rvbs)niol S?tatfr 8 l"t rtihle I.\'bøyniop;pla te: 9 = Skjerm 3

4 Oppgave 2 a) Flervalgsoppgave. Kun et alternativ er rikt ig. Et poen g for hver oppgave. Skriv tall og bokstav som er riktig. l. Immunokj emiske metoder kan bruke ulike merkestoffer eller signalstoffer. Hvilke signalstoff er mest sensitive? a. Radioaktive isotoper b. Enzym c. Fluoresens d. Kj emiluminisens 2. Hvilken metode er ikke utsatt for bakgrunnssignal? a. RIA metoden b. ELISA metode n c. Fluoresens metoder d. Kjem iluminisens metoder 3. Westmblot kan brukes til å påvise ulike proteiner. Kun en av påstandene er riktig. a. Ved Western blot påvises både molekylvekt og ladningen til proteinet b. Ved Western blot påvises både proteinet (ep itopen) og molekylvekt til proteinet c. Ved Western blot teknikken separeres proteinene ved kj emil um inisens d. Western blot tek nikken er en homogen metode 4. Nellometriske metoder er en annen metode til å påvise for eksempel proteiner. Kun en av påstandene er riktig. a. Neflomctris ke imm unokjcmiske metoder måler direkte transmitert lys b. Neflome triske immunokjemiske metoder benytte r sandwi ch prinsippe t c. Neflometriske immunokjcmiske metoder bruk er fluorosens som sig nalsto ff d. Ncflometriske immunokj em iskc metoder måler spredning av det innsendte lyset 5. Mange faktorer påvirker bindingen mellom antigen og antistoff. Kun en av påstandene er riktige. a. Temperaturen påvirker ikke likev ekten i en immunokjemisk reak sjon b. God plass i mikrotiterbrønnen er viktig for at det skal bli likevekt i reaksjonene c. Ved antige noversk udd påvirkes likevekten d. Kun epitopen påvirkes av ph endringer b) En kvinne får følgende analysesvar (se tabell labora torium l ) etter konsultasjon hos fastlegen. Fastlcgen sendte pasiente n til utredning hos cn spes ialist som tok nye blodprøver. Disse ble analysert på et annet labo ratorium (2) som ikke benytter en immunokjem isk metod e. Se resultater i tabell under. Intern og ekstern kvalitetskontroll var tilfred sstillende ved begge laboratoriene. l. Forklar hva som kan være årsaken til at analysevcrdicne er forskjellige på de to laboratoriene. 2. Hvordan kan en unngå denne typen interferens? 3. Hvilke andre typer for interferens er vanlig ved immunokjemiske teknikker? 4

5 Laboratorium 1 Laboratorium 2 Referanseverdier Tyroksin 180 nmolll 186 nmolll nmolll Frin T4 19,3 pmoul 18,6 pmolll 9,0-24,5 pmol!! TSH 15 Ull. 4,0 UlL 0,5-5,0 UlL c) ELISA l. Forklar kon analyseprinsippet til ELISA metoden? 2. Redegjør kort for fordeler/ulemper ved sandwich metoden. 5

6 Oppgave 3 a) Van Decmter likningen kan forenklet skrives på den ne måten: H ~ A + BI" +C" Hva beskrive r Van Deemter likningen? Forklar Eddy di ffusjo n. Hvordan påvirkes Eddy diffusjon av partikkelstørreise og tlowhastighet? Ut fra Van Deemter likningen kan man tegne Van Deemter plott. Skisser en slik kurve, og forklar hva man kan lese ut av slike kurver. b) Forklar forskjellen på wal l-coated a pen tubular (WCOT), support coated apen tub ular (SCOT) og porous layer apen tubular (PI.OT) kolonner i kapillær GC. Bruk gjeme skisser. Tre vanlige injeksjonstype r i GC er split, split-less og on-column. Fork lar forskjellen på disse, og i hvilke tilfell er man bruker de forskjell ige injeksjonstypene. c) Under utvikling av en metode i omvendt fase væskekromatog rafi (RP-HPLC) for analyse av fem forskjellige stoffe r, ble det kjørt to injeksjoner aven blanding av disse stoffene. Kromatogrammct for disse injeksjonene er vist under. I krornatogram A var mobilfasen 20% metanol i vann og i kromatogram B var mobilfasen 70% metanol i vann, ellers var betinge lsene identiske. I begge tilfeller var mobilfasen konstant og runt iden var 30 minu tter. A: 20% MeOH B: 70% MeOH Ingen av disse kromatogramrnene gir ideell separasjon. Forkl ar hva som er svakheten ved kromatogrammene. Foreslå en enkel måte å forbedre separasjonen der man beholder samme mobilfaseflo w og kolonne. I omvendt fase væskek romatografi, hvilken elusjo nsrekkefø lge vil de fem forbindelsene unde r ha. Begrunn svaret. Y0 0< y:tr0 < HO o' "'- I <ov, o' ~~ ::-o, n: I - :: t:;.uoh ~ ~ c- o- Cyanid in Delphinid in Malvindin Pela rgonidin Pel udin Hva menes med isokrati sk- og gradienteluering? 6

7 Oppgave 4 a) Presisj on og kvalitetskon troll liva er intern kvalitetskontro ll og hvordan kan presisjonsberegninger utføres? b) Riktighet og sporba rhet Forklar begrepet spo rbar het. Hvordan kan analysemetodens riktighet bestemmes? c) Stati stikk Fork lar kort hvordan lineær regre sjon, ditteran seplot og paret l-test kan bruke s ved metod e-verifi sering. 7