H ØGSKOLEN I BERGEN. Avdeling for ingeniørutdanning. Kalkulator Millimeterpapir (4 timar)

Transkript

1 H ØGSKOLEN I BERGEN Avdeling for ingeniørutdanning EKSAMEN BIO 0 13 Biokjemiske analysemetodar 2 KLASSE 3Bio DATO To rsdag 13. desember 2007 Ar-.'TAL OPPGAVER 4 ANTAL SIDER 7 HJELP EMIDDEL Det period iske sy stem Kalkulator Millimeterpapir TID MALFOR M Nyno rsk (4 timar) FAGLÆRARAR Ove Kvammen (Oppgåve I) Astrid-Mette Husøy (Oppg åve 2) Anders Halvorsen (Oppgåve 3) Marit S. Sylte (Oppg åve 4) MERKNA DER Kvar oppgåve skal førast på eige/ei gne ark. Kvar oppgåve tel 25% av totalen Lykke til Adresse:Postboks Bergen Beseksadr.: Nygå rdsgt. 112 Telefon: Fax:

2 Oppg åve l a) Ein har fylgjande krets: 1::).) r- A -' ", ~ l--_--' ' 'VV\r-----' Rekn ut den straumen som vil gå gjen nom multimeteret (anta at multimeteret har null indre motstand). Rekn også ut spenningen over motstanden på 600 Ohm. b) Ein har fylgjande krets: v A - - -,- < v B Bruk Thevenins teorem til å berekne den straumen som vil gå gjennom ein motstand på 300 Ohm som vert kopla inn mellom A og B. 2

3 c) Forklar kort virkemåten til eit osc illoskop ved å ta utgangspunkt i den prinsipielle oppbygg inga til katodestrålerøyrct som er vist på følgjande teikni ng:. ---'---!-'--t-;i-f\ -,.(~g, :.. ~~,~Jh1 ::t-, / -+-+ i I l i Y, " '", 1 G I ~dct r:i d 2 = Gla slik ulbc' 3 Kat ode 4 = Giurr (st~' r«lek trode) 5 = Fokuseri ngselektro de (ad.od e) 6 A node 7 Ho r isontal e avb evningsp later 8 YertihJe R'Ilbøyniog zp1att f 9 = Skjerm 3

4 Oppgåve2 a) Fleirvalgsoppgåve. Kun eit alternativer riktig. Eit poeng for kver oppgåve. Skri v tal og bokstav som er riktig. 1. lmmu nokjemiske metod ar kan nytte ulike merk esto ff eller signalstoff Kva signals toff er mest sensitiv? a. Radio akti ve isotopar b. Enzym c. Fluorescns d. Kjemiluminisens 2. Kva metode er ikkje utsett for bakgrunnssignal? a. RIA metoden b. ELISA metoden c. Fluoresens rnetodar d. Kjemiluminisens metodar 3. Wcstmblot kan nyttast til å påvise ulike proteiner. Kun ein av påstandane er riktig. a. Ved Western blot påviser ein både mo lekylvckta og ladningen til proteinet b. Ved Western blot påviser ein både proteinet (epitopen) og molekylvekta til proteinet c. Ved Western blot teknikken vert proteinene scparerete ved kjemilumi niscns d. Western blot teknikk en er ein homogen metode 4. Ncfl omctriske metodar er ein annan metode til å påvise til døm es proteiner. Kun ein av påstan dene er riktig. a. Neflometriske immunokjemiske metodar måler direkte transmitert lys b. Neflometris ke immunokjerniske metodar nytta r sandwich prinsippe t c. Netlometriskc immunokjemiske metod ar brukar f1uoresens som signalstott d. Netl ometriske immunokje miske rnetodar måler spredning av det innsen dte lyset 5. Mange faktorar påverkar bindinga mellom antigen og antistoff. Kun ein av påstandane er riktig. a. Temperaturen påverkar ikkje likeve kta i cin immunokjemisk reaksjon b. God plass i mikrotiterbrønnen er viktig for at det skal verta likevekt i reak sjonen c. Ved antigenoverskudd vert likevekta påverka. d. Kun epitopen vert påverka av ph endringar b) Ei kvinne får fylgjande analy sesvar (sjå tabell laboratorium l) etter konsultasjo n hjå fastlegen. Fastlegen sendte pasienten til utredning hjå ein spesialist som tok nye blodprøvar. Disse vart analysert på eit anna laboratorium (2) som ikke nyttar cin immunokjemisk metode. Sjå resultater i tabell under. Intern og ekstern kvalitetskontroll var tilfredsstillande ved begg e laboratoria. 1. Forklar kva som kan være årsaken til at analyseverdiane er ulike på dei to laboratoria. 2. Korleis kan ein unngå denne typen interferens? 3. Kva andre typer for interferens er vanleg ved immu nokjemiske teknikkar? 4

5 Laboratorium 1 Laborato rium 2 Referanseve rdiar Tyroksin 180 nmo lil 186 nmol/l nmo l/l Fri tt T4 19,3 pmo l/l 18,6 pmolil 9,0-24,5 pmo l/l TS H 15 UlL 4,0 UlL 0,5-5,0 UlL c) ELISA I. Forklar kort analyseprinsip pet til ELISA metoden? 2. Gjer kort greie for fordelar/u lcmpcr ved sandwich metoden 5

6 O pp gåve 3 a) Van Deemter likninga kan forenkla skrivast på denne måten: H ~ A + BI" +C" Kva beskriv Van Deemt er likninga? Forklar Eddy diffusjon. Korleis vert Eddy diffusjon påverka av part ikkelstørre ise og Ilowhastighet? Ut frå Van Dccmter likninga kan cin teikne Van Deemter plott. Skisser ei slik kurve. og forklar kva ein kan lese ut av slike kurver. b) Forklar forskjellen på wall-coatcd open tubular (WCOT), support coatcd open tubular (SCOT) og porous layer ope n tubular (PLOT) kolonner i kapillær Ge. Bruk gjeme skisser. Tre vanlege injeksjonstypar i GC er split, split-less og on-co lumn. Forklar forskjellen på disse, og i kva tilfeller ei n nyttar dei ulike injeksjo nstypane. c) Under utvikling av ein metode i omvendt fase væskekromatografi (RP-JIPLC) for ana lyse av fem ulike stoff, ven det kjørt to injeksjonar av ei bland ing av disse stoffa. Krornatogrammet for disse injeksjonene er vist under. I krornatogram A var mobilfasen 20% metanol i vatn og i kromatogram B var mobil fasen 70% metanol i vatn, ellers var betingelsane identiske. I begge tilfella var mobilfasen konstant og nmtiden var 30 minutter. A: 20% MeOH B: 70% MeOH Ingen av disse kromatogramma gjev ideell separasjo n. Forklar kva som er sva kheten ved kroma togramma. Foreslå ein enkel m åte å forbctre separasjonen der cin beheld same mobilfaseflow og kolonne. I omvendt fase væskek romatografi, kva clusjonsrekkcfølgje vil dei fem forbindclsane unde r ha. Grunngjev svaret. Cyan idin Oelphinid in Malvind in Pelargonidin ~æ æ ~ ~ y æ æ ItO "" O '" I Petudin Kva meiner ein med isokrati sk- og gradie nteluering? 6

7 O pp gåve 4 a) Presisjon og kvalitetskontroll Kva cr intern kvalitetskontroll og korleis kan presisjonsberegningar utførast? b) Riktighet og sporbarhet Forklar omgrepet sporbarhet. Korleis kan analy semetoden sin riktighet bcstemast? c) Statistikk Forklar kort korleis lineær regresjon. differanseplot og paret t-test kan nyttast ved metode-verifisering. 7