Legionellaseminar Kristiansund Prøvetaking, analysemetoder og svartid v/ Anne Kristin Gussiås, fagansvarlig analytiker mikrobiologi

Størrelse: px

Begynne med side:

Download "Legionellaseminar Kristiansund Prøvetaking, analysemetoder og svartid v/ Anne Kristin Gussiås, fagansvarlig analytiker mikrobiologi"

Børre Mathisen
7 år siden
Visninger:

1 Legionellaseminar Kristiansund Prøvetaking, analysemetoder og svartid v/ Anne Kristin Gussiås, fagansvarlig analytiker mikrobiologi

2 Akkrediteringsprosess Kystlab akkreditert etter ISO , Water quality- Detection and enumeration of Legionella - Direct membrane filtration method for waters with low bacterial counts Parallellkjøring med annet akkreditert laboratorium Analyse av referansemateriale Deltagelse i SLP, sammenlignende laboratorieprøvinger Søknad til NA, Norsk Akkreditering Bedømming, gjennomgang av metoden av teknisk bedømmer Godkjenning og analysen akkreditert

3 Hvilke prøvepunkt velger man? Man bør foreta en risikovurdering og finne de punktene der det er størst sannsynlighet for oppvekst av Legionella F.eks i nærheten av blindrør, tappepunkt som ikke eller sjelden er i bruk Dusjer som sjelden er i bruk kan være - i lærergarderobe, gjestelugar, ødelagte dusjer, nøddusjer Tappepunkt lengst unna varmtvannsbereder Osv

4 Prøvetaking vannprøver Utstyr: steril vannprøveflaske m/natriumtiosulfat, helst 1000 ml Dusj/servantbatteri: Still termostat på det varmeste Fyll opp flasken uten å la vannet renne først Ikke berør kork eller flaske innvendig

5 Varmtvannsbereder/-beholder: Ta prøve gjennom tappe- eller sikkerhetsventil Prøv å få med slamholdig vann fra bunnen av beholderen Kjøletårn: Tas fortrinnsvis fra toppen av kjøletårnet Hvis ikke i drift, tas vannet fra bassenget i bunnen OBS! bruk maske med filter, beskyttelsesklasse P3

Prøvetaking biofilm Utstyr: Steril svaberpinne Skru av dusjhodet og ta prøve av synlig grums/belegg vha svaberpinnen Dersom synlig grums/belegg ikke finnes,

6 Prøvetaking biofilm Utstyr: Steril svaberpinne Skru av dusjhodet og ta prøve av synlig grums/belegg vha svaberpinnen Dersom synlig grums/belegg ikke finnes, føres svaberpinnen med roterende bevegelser over de indre flatene av f. eks dusjhodet/-slangen Etter prøvetaking stikkes svaberpinnen ned i et rør med transportmedium

7 Transport/levering av prøven: Prøven(e) leveres raskes mulig til laboratoriet Tid fra uttak til analysestart: snarest mulig, helst innen 1 døgn Oppbevaring/transport: Kjølig, 5 C ± 3 C, unngå sollys Varmtvannsprøver kjøles ned etter uttak

Analysemetoder Dyrkningsmetoden ISO 11731 og ISO 11731-2 Vannprøver filtreres, 10-1000 ml, vanligvis 500 ml Syrebehandle filteret for å hemme uønsket

8 Analysemetoder Dyrkningsmetoden ISO og ISO Vannprøver filtreres, ml, vanligvis 500 ml Syrebehandle filteret for å hemme uønsket vekst Overføre filteret til en agarskål Agarskålen inkuberes ved C i inntil 10 døgn Avlesning første gang etter 3-4 døgn Sekundær dyrkning, verifisering

9 Fordeler - Dyrkningsmetode Påviser levende bakterier Kan identifisere spesifikk legionellaart/serogruppe Bedre referansegrunnlag mht tolking av analyseresultat Ulemper - Dyrkningsmetode Bekreftet svar tar lang tid (Men; vekst etter 3-4 dager på positive prøver) Tap av bakterier ved filtrering Andre bakterier undertrykker legionellavekst

10 Svartid - Dyrkningsmetode 5 10 dager, kan ta inntil 12 dager ved negativt svar

11 Analysemetoder PCR (Polymerase Chain Reaction) Vannprøven konsentreres (Filtrering eller sentrifugering) Alt arvestoff (DNA) i vannprøven isoleres Evt Legionella DNA påvises med PCR-teknologi

12 Fordeler - PCR Hurtig Følsom, kan påvise lave konsentrasjoner av legionellabakterier Ulemper - PCR Påviser også døde bakterier Kan ikke gi informasjon om hvilken serogruppe legionellabakterien tilhører Enkelte prøver kan inneholde stoffer som inhiberer PCR-reaksjonen Manglende erfaring med å tolke analyseresultat

13 Svartid PCR Analysetid 1-2 dager, avhenger av når på dagen prøven kommer inn til laboratoriet

14 Kimtall 36 C (totalantall bakterier og sopp) Omtalt i FHIs veileder Forebygging av legionallasmitte En veiledning Metode: NS-EN ISO 6222 Innstøpningsteknikk Analysetid: 2 døgn Gir ingen informasjon om det er legionellabakterier i systemet Kan anses som en generell hygieneparameter

15 Analyserapporten Kystlab opplever at mange kunder synes det er vanskelig å tolke resultatene Analyserapporten gir ingen opplysninger om grenseverdier eller anbefalte verdier Det finnes ingen nasjonale grenseverdier Se på hvor mange prøver det er påvist Legionella i Kunden skal danne seg et bilde over tid for hva som er normalverdier for sitt anlegg (kimtall) Ved stabile resultater over tid kan man vurdere å gå ned på antall prøver pr. år

Hva kjennetegner dusjanlegg med problemer Gjentagende påvisninger (fra 1 100 cfu/500 ml) Ingen klar sammenheng mellom påvisning av Legionella og

16 Hva kjennetegner dusjanlegg med problemer Gjentagende påvisninger (fra cfu/500 ml) Ingen klar sammenheng mellom påvisning av Legionella og høye verdier av totalantall bakterier. Gjerne langt rørstrekk etter innblanding av kaldt vatn. Ikke mulig å stille temperatur på dusjene (ca 38 C ut).

17 Erfaring fra Kystlab 2011: Funn av Legionella i 38 av 198 prøver, dvs. 19 % Fordelingen av de påviste prøvene pr. 500 ml: 0 cfu <resultat < 10 cfu: 53% 10 cfu < resultat < 100 cfu: 29% 100 cfu < resultat < 1000 cfu: 16% 1000 cfu < resultat: 3% 2012 (tom 20.5) Funn av Legionella i 16 av 69 prøver, dvs. 23 %

18 Erfaring fra Kystlab Diagram Legionella / Kimtall 36 C (jan mai 2012) Dusjvann

Erfaring fra Kystlab Bedre opplæring av prøvetakere - Metode for prøvetaking - Fokus på å utføre prøvetaking for å verifisere effekten av tiltak

19 Erfaring fra Kystlab Bedre opplæring av prøvetakere - Metode for prøvetaking - Fokus på å utføre prøvetaking for å verifisere effekten av tiltak Kunnskap om legionellabakterien - Hvordan den smitter - Hvor den kan etablere seg Kunnskap om tiltak når det påvises legionellabakterier i prøven

Like dokumenter

LEGIONELLA Prøvetaking, analysemetoder og svartid v/ Anne Kristin Gussiås, fagansvarlig analytiker mikrobiologi

Kommunalteknisk Forening, Kristiansund 21.11.2013 LEGIONELLA Prøvetaking, analysemetoder og svartid v/ Anne Kristin Gussiås, fagansvarlig analytiker mikrobiologi Hvilke prøvepunkt velger man? Man bør foreta