Verifisering av PCR baserte metoder

Transkript

1 Verifisering av PCR baserte metoder Hilde Ulvatne Marthinsen Validering Bekreftelse ved undersøkelse og fremskaffing av objektive bevis, på at de spesielle krav for et spesifisert antatt bruk, er tilfredsstilt Objektive bevis: Informasjon som kan bevises sann, basert på fakta fremskaffet ved observasjoner, målinger, forsøk eller på andre måter 1

2 Validering (forenklet definisjon) å vurdere en metodes brukbarhet for den analyseoppgaven som skal utføres eller å fremskaffe bevis for at metoden måler det du hevder den måler Hvem kan validere en metode? En produsent av et kommersielt kit Et valideringsorgan Forskningsmiljø med fagfellevurdering Laboratoriet selv ISO

3 Verifisering Forenklet definisjon: En bekreftelse på at laboratoriet behersker en validert metode Hvor skal man begynne? Valideringsrapporten! Scope omfang av valideringen Agens Matriks Måleområde Gjennomføring Anrikning PCR-systemet Konfirmering 3

4 Hvor finner man dette? Sertifikat og rapport 4

5 Verifiseringen Verifiseringsplan Nødvendig utstyr Kompetanse Tidsrom Interne og eksterne kontroller Hva skal verifiseres? Kundens behov Agens, matriks og måleområde (deteksjonsgrense) Verifiseringen Gjennomføringen Trenger IKKE repetere hele valideringen Relevante matrikser Relevant måleområde Målbakterie: Referansemateriale eller - stammer? Reelle prøver? Spika prøver? SLP 5

6 Verifiseringen Rapporten Vis samsvar med plan Vis samsvar med valideringsrapporten Ta med kritiske detaljer Skal være tilgjengelig i 3 år etter at metoden er tatt ut av det akkrediterte omfanget Andre hensyn for akkreditering Kompetanse Organisering av arbeidet Kontrollregimet PCR kontroller Prosesskontroller Inhibisjonskontroller Ekstraksjonskontroller SLP Kalibrering og kontroll av utstyr Temperatur Volum 6

7 Gjeldende standarder og veiledere ISO/TS 20836, Microbiology of food and animal feeding stuffs Polymerase chain reaction (PCR) detection of food-borne pathogens Performance testing rmal cyclers ISO 20837, Microbiology of food and animal feeding stuffs Polymerase chain reaction (PCR) detection of food-borne pathogens Requirements for sample preparation for qualitative detection ISO 20838, Microbiology of food and animal feeding stuffs Polymerase chain reaction (PCR) detection of food-borne pathogens Requirements for amplification and detection for qualitative methods ISO 22118, Microbiology of food and animal feeding stuffs Polymerase chain reaction (PCR) detection and quantification of food-borne pathogens Performance characteristics ISO 22119, Microbiology of food and animal feeding stuffs Real-time polymerase chain reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens General requirements and definitions ISO 22174, Microbiology of food and animal feeding stuffs Polymerase chain reaction (PCR) detection of food-borne pathogens General requirements and definitions Takk for oppmerksomheten 7