Directigen Flu + For differensiert, direkte påvisning av influensa - og -antigener L006712J Se liste over symboler nederst i bilaget. 2006/09 U Norsk RUKSOMRÅDE Directigen Flu +-testen er en hurtig in vitro-immunanalysemembrantest for direkte og kvalitativ påvisning av influensa - og -virusantigener fra nasofaryngeal vask, nasofaryngealt aspirat, nasofaryngeal penselprøve, nedre nasal penselprøve, halspenselprøve og bronkoalveolare utskyllingsprøver fra symptomatiske pasienter. Directigen Flu +-test er en differensiert test, og derfor kan influensa -virusantigener skilles fra influensa -virusantigener i én prøve. Testen skal brukes som et hjelpemiddel ved diagnostiseringen av influensa - og -virusinfeksjoner. lle negative testresultater skal bekreftes med cellekultur fordi negative resultater ikke utelukker influensavirusinfeksjon, og de skal ikke brukes som eneste grunnlag for behandling eller andre behandlingsbeslutninger. Directigen Flu +testen er ikke beregnet på påvisning av influensa C. SMMENDRG OG FORKLRING Influensa er en akutt virussykdom med sesongbetont forekomst. Sykdommen presenteres klassisk med brå feber, frysninger, hodepine, myalgi og tørrhoste. Kliniske manifesteringer gir seg vanligvis innen en uke med mindre det utvikles komplikasjoner. Influensa - eller -virus fører til de fleste klinisk signifikante sykdommer, mens influensa C-virus bare er ansvarlig for mild sykdom, hovedsakelig i de øvre luftveiene. Pasienter som det mistenkes er rammet av influensa, kan ha fordel av behandling med antivirusagens. mantadin 1 og rimantadin 1 finnes både for forebygging og behandling av kun influensa -sykdom. Zanamivir 1 og oseltamivir 1 finnes for behandling av både influensa - og -sykdom. Hos voksne kan behandling med disse agensene redusere alvoret og varigheten av sykdom hvis de gis innen de første 48 timene etter at pasienten fikk sykdommen. Siden behandlingsalternativene er utvidet til å omfatte alternativer for behandlingen av influensa -sykdom, er det viktig å skylle influensa raskt fra influensa for at leger skal kunne velge selektiv antivirusintervensjon. Siden bare amantadin og rimantadin har indikasjoner for influensaprofylakse, er det viktig å avgjøre om influensa fører til symptomatisk sykdom i en bestemt institusjon (for eksempel sykehjem) eller lokalsamfunn, slik at riktig forebyggende tiltak kan iverksettes for utsatte individer. Følgelig er det viktig ikke bare å finne ut raskt om influensa foreligger, men også hvilken type influensavirus som forekommer. Prosedyrer brukt til å diagnostisere influensatype - og -infeksjoner inkluderer hurtig immunanalyse, direkte prøveimmunfluorescerende analyse, omvendt transkripsjonspolymerasekjedereaksjon (RT-PCR), serologisk analyse og kulturisolasjon med bekreftelse. 2-8 Immunfluorescerende analyser innebærer farging av prøver immobilisert på mikroskopobjektglass med fluorescens-merkede antistoffer observasjon med fluorescensmikroskopi. 4,9,10 Kulturmetoder benytter initiell virusisolasjon i cellekultur, etterfulgt av hemadsorpsjonshemming, immunfluorescens eller nøytraliseringsanalyser for å bekrefte forekomst av influensaviruset. 10-12 Directigen Flu +antigenpåvisningstesten er en immunmembranfilteranalyse for å påvise influensa - eller -antigener ekstrahert fra egnede prøver fra symptomatiske pasienter. Total testtid er mindre enn 15 minutter, med reaksjon bestemt av visuell fargeutvikling. ntigendrift er ikke noe problem med Directigen Flu +-test, fordi målantigenene er nukleoproteinene, som er typespesifikke og svært godt konservert. 13-15 Hastigheten og arbeidsflyten til Directigen EZ Flu + gjør den aktuell som en STT -influensa - og - antigenpåvisningstest som gir hurtig, relevant informasjon for å bistå i diagnostiseringen av influensa. ruken av Directigen Flu + til å skille mellom influensa og influensa -infeksjon kan gi muligheten for større selektivitet av antivirusinfeksjon. PROSEDYREPRINSIPPER Directigen Flu +-testen begynner med ekstraksjonen av influensa - eller -virusantigener fra respiratoriske prøver. Den ekstraherte prøven utstøtes gjennom et filter i hver av to brønner av en ColorPC-testenhet. Influensa - eller -antigener fra levedyktige eller ikke-levedyktige viruspartikler som finnes i prøven, er ikke-spesifikt bundet i en trekantform til membranoverflaten i - og -brønner når prøven passerer gjennom flytkontrolleren. Påvisning av antigen fanget på membranen initieres etter et membranvasketrinn. Monoklonale antistoffkonjugater (2) som er spesifikke for influensa -nukleoproteinantigen er testenhetens øvre -brønn. Monoklonale antistoffkonjugater som er spesifikke for influensa -nukleoproteinantigen er testenhetens nedre -brønn. De monoklonale antistoffkonjugatene er bundet til fanget antigen etter tilsetningen til ColorPC-membranen. Kromogenet tilsettes deretter etter vask av membranen og inkuberes i fem minutter. Tilsetning av en reagens for å stoppe ytterligere fargeutvikling gir tid der resultater kan tolkes. Utviklingen av en lilla trekant på membranen enten i -brønnen eller -brønnen på testenheten indikerer en positiv test for henholdsvis influensa eller influensa. Dannelse av et lilla kontrollpunkt uten synlig trekantdannelse indikerer en negativ test.
KITKOMPONENTER OG REGENSER Følgende er inkludert i Directigen Flu +-testkittet: ColorPC-enheter 20 Hver enhet med flytkontrollerenhet som inneholder kontrollpunkter med rekombinant influensa (H1N1)- og (Lee 40)-antigener midt i den respektive - og -brønnmembranen i en foliepose med tørkemiddel. Ekstraksjonsreagens E 9,9 ml Ekstraksjon, 1,6 % mukolyttisk agens og 7,4 % rengjøringsmidler, med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Vaskereagens 1 5,1 ml Vask, 50 mm Tris- og kanin-igg med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Påvisningsreagens 2 2,3 ml Påvisning, anti-influensa--monoklonale antistoffer (mus, kloner 84 og 85)- alkalisk fosfatasekonjugat, med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Påvisningsreagens 3 2,3 ml Påvisning, anti-influensa -monoklonalt antistoff (mus, klon.9)-alkalisk fosfatasekonjugat, med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Vaskereagens 4 6,5 ml Vask, 5 % butanol, 2 M urea og 100 mm hepes med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Vaskereagens 5 10,5 ml Vask, 50 mm Tris, 150 mm NaCI og 16 mm inhibisjonsagens med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Substratreagens 6 5,8 ml Substrat, 0,73 mm kromogen. Stoppreagens 7 4,1 ml Stopp, 150 mm sitronsyre. Control +/- 2,0 ml Influensa -positiv og influensa -negativ kontroll, influensa -antigen (inaktivt rekombinant nukleoprotein, H1N1) med 0,1 % natriumazid (konserveringsmiddel). Control +/- 2,0 ml Influensa -positiv og influensa -negativ kontroll, influensa -antigen (inaktivt rekombinant nukleoprotein, Lee 40) med 0,1 % natriumazid (konserveringsmiddel). DispensTube-rør 20 Rør for prøveuttak og prøvelevering i enheter. DispensTube Tips 20 Spisser for filtrering av prøve når levert i enheter. dvarsler og forsiktighetsregler: Ved in vitro-diagnostisk bruk. 1. Hvis det er mistanke om influensa -virus basert på gjeldende kliniske og epidemiologiske screeningkriterier anbefalt av Folkehelsa, skal prøver tas med riktige infeksjonskontrollforholdsregler for smittsomme influensaviruser og sendes til lokale helseavdelinger for testing. Virus skal ikke dyrkes i slike tilfeller med mindre en SL 3+-fasilitet er tilgjengelig for å motta og dyrke prøver. 2. Patogene mikroorganismer, blant annet hepatittvirus, humant immunsviktvirus og hittil ukjente influensavirus, kan være til stede i kliniske prøver. Standard forsiktighetsregler 16-19 og institusjonelle retningslinjer skal følges ved håndtering, oppbevaring og avfallsbehandling av alle elementer som er kontaminert med blod og andre kroppsvæsker. Før avfallsbehandling, steriliser beholdere og andre kontaminerte materialer med autoklavering. 3. Forskjeller i utførelse kan observeres når denne testen benyttes på prøver fra voksne i motsetning til barn, men spesifikke forskjeller er ikke kjent. 4. Reagenser skal ikke brukes etter utløpsdatoen. 5. Ikke blant reagenser fra forskjellige kit-lotnumre eller bland reagensflaskekorker. 6. Ikke bruk enheten ColorPC flere ganger. ndre inkubasjonstider og temperaturer enn de som er spesifisert, kan gi feilaktige resultat. 7. Hold reagensflasker vertikalt (omtrent 2,5 cm fra ColorPC-membranoverflaten eller røret), mens du forsiktig dispenserer én dråpe om gangen i rask rekkefølge for å sikre riktig dråpelevering. 8. Unngå kontakt mellom reagenser og hud og slimhinner. Hvis reagenser kommer i kontakt med disse områdene, skyll med vann og ta kontakt med lege. 9. Reagenser inneholder natriumazid, som er skadelig ved innånding, svelging eller i kontakt med huden. Kontakt med syrer frigir svært giftig gass. Dersom det kommer i kontakt med huden, vask umiddelbart med rikelige mengder vann. Natriumazid kan reagere med bly- og kobberrør for å danne sterkt eksplosive metallazider. Ved avfallsbehandling, skyll med rikelig med vann for å forhindre azidansamling. 10. ruk pensler med polyester- eller rayonspisser med aluminiumswire til nasofaryngeale prøver. Det er fastslått at kalsiumalginatpensler ikke kan brukes med Directigen Flu +. 11. Kontroll-+/- og kontroll-+/-reagenser er tillagd fra rekombinante cellekulturer, ikke fra viruskulturer. Ikke bruk kitet hvis kontroll-+/- og kontroll-+/-reagenser ikke gir riktige resultater. 12. Ta ut ColorPC-enheten fra folieposen like før bruk. Må ikke brukes hvis tørkemiddelet mangler fra posen. Oppbevaring og håndtering: Oppbevares ved omgivelses- eller kjøletemperaturer (2 25 ºC). SKL IKKE FRYSES. PRØVEINNSMLING OG HÅNDTERING Transport og oppbevaring av prøver Transporter ferske prøver til laboratoriet så hurtig som mulig i et egnet væsketransportsystem som ligger på is eller er nedkjølt ved 2 8 C. ehandle prøver så snart som mulig etter at de er tatt. Om nødvendig, kan prøver oppbevares ved 2 8 ºC i opptil 72 timer eller -20 ºC i opptil 7 dager fra tidspunktet for innsamling. Ferske prøver er å foretrekke fremfor frosne prøver, siden det kan forekomme redusert sensitivitet. Unngå flere fryse-tinesykluser. Ikke oppbevar prøvene i selvtiningsfryser. Det er avgjørende at prøver tas og klargjøres på riktig måte. Ikke sentrifuger prøver før bruk med Directigen Flu +, siden fjerning av cellemateriale vil påvirke testens sensitivitet på en negativ måte. Prøver som tas tidlig i sykdomsforløpet, inneholder de høyeste virustitreringene. 2
Transportmedier: ruk av følgende transportmedier er testet og påvist å være i samsvar med Directigen Flu +testen: Normal saltløsning Sukrosefosfat Fosfatbufret saltløsning (PS) Tryptikase-soyavekstmedium + 0,5 % S PS pluss 0,5 % gelatin Tryptikase-soyavekstmedium + 0,5 % gelatin PS pluss 0,5 % bovint serumalbumin (S) Earle s Minimum Essential Media (EMEM) Kalveinfusjonsvekstmedium EMEM med 0,5 % S VIP pluss 0,5 % S EMEM med 1 % S Virus-Culturette EMEM med 0,5 % laktalbumin-hydrolysat M4-medium EMEM med 1,0 % laktalbumin-hydrolysat M5-medium Stuarts medium CultureSwab (se Tilgjengelighet ) artels medium Flytende mies-medium CultureSwab (se Tilgjengelighet ) ndre transportmedier kan anvendes hvis det utføres en egnet kvalifiseringsøvelse. Som forholdsregel skal alle transportmedier kvalifiseres med Directigen Flu + før bruk. For å kvalifisere transportmedier, kan alikvoter av medier utsås med et kjent positivt materiale (annet enn kit-kontrollen +/- eller kontroll +/-) og et kjent negativt materiale, og testes med analysen. Riktige resultater må oppnås. Prøvesamling og klargjøring kseptable prøver inkluderer nasofaryngeal vask, nasofaryngeale aspirater, nasofaryngeale pensler, penselprøver fra nedre nasalgang (turbinat), halspenselprøver og bronkoalveolære utskyllinger. Utilstrekkelig prøveinnsamling, feil prøvehåndtering og/eller transport kan gi et falskt negativt resultat. Derfor anbefales opplæring i prøvetaking på det sterkeste på grunn av betydningen av prøvens kvalitet for nøyaktige testresultater. MERK: Prøver med for mye mukoid kan av og til ha vanskelig for å absorberes gjennom ColorPC-membranen eller kan gi resultater som ikke kan tolkes. Disse prøvene kan enten fortynnes 1:4 med 0,9 % saltløsning eller virustransportmedium, eller tilpasses til en McFarland-standard 1,0, godt blandet, og et 200 µl alikvot testet på nytt. Prosedyre til bruk med nasofaryngeale vasker og bronkoalveolære utskyllinger 1. Vask- eller utskyllingsvolumer på 2 3 ml anbefales. 2. Overflødige volumer av vask eller utskylling kan resultere i lavere testsensitivitet. 3. ehandle prøven som beskrevet i Testprosedyre. Prosedyre til bruk med nasofaryngeale aspirater 1. Nasofaryngeale aspiratprøver på mindre enn 0,5 ml i volum må blandes ut i 2 ml transportmedium eller saltløsning før behandling. 2. spiratprøver på mer enn 0,5 ml krever et transportmedium eller saltløsningsvolumtilsetning på minst 4 ml. 3. ehandle prøven som beskrevet i Testprosedyre. Prosedyre til bruk med nasofaryngeal-, nedre nasal- eller halspenselprøver 1. Halspenselprøver kan behandles uten fortynning i transportmedium med direkte ekstraksjon som beskrevet i Testprosedyre. Halspenselprøver kan også tilsettes 1 2 ml transportmedium eller saltløsning umiddelbart etter innsamling. 2. Nasofaryngeale og nedre nasale penselprøver skal legges i 1 2 ml transportmedium eller saltløsning umiddelbart etter at de er tatt. 3. land penselprøven godt i transportmediet eller saltløsningen. 4. Fjern så mye væske fra penselprøven som mulig. 5. Kast penselprøven i egnet beholder. 6. ehandle prøven som beskrevet i Testprosedyre. PROSEDYRER Materialer som følger med: Se Kit-komponenter og -reagenser for materialer som følger med. Nødvendige materialer som ikke følger med: Nødvendig utstyr og laboratoriemateriale til transport, oppbevaring, håndtering og tildeling av prøver. Vortexmixer. Testutførelse: Les DVRSLER OG FORHOLDSREGLER, PRØVEINNSMLING OG -HÅNDTERING og TOLKNING V RESULTTER. Reagenser, prøver og ColorPC-enheter må holde romtemperatur (15 30 C) når brukt. TESTPROSEDYRE Legg et DispensTube i det designerte området av arbeidsstasjonen.. Klargjøring av en ColorPC-enhet Ta ut en ColorPC-enhet fra folieposen umiddelbart før bruk. Trykk ned for å forsikre at flowkontrolleren sitter godt i begge brønner av ColorPC-enheten. 3
E лииeller E. Prøveekstraksjon lle prøver, bortsett fra halspenselprøver uten transportmedier: land forsiktig Reagens E, og dispenser 8 dråper Reagens E i et DispensTube. land prøven godt. Pipetter 200 µl av prøven i DispensTube. Halspenselprøver uten transportmedium: land forsiktig Reagens E, og dispenser 16 dråper Reagens E i DispensTube. Legg penselprøven i DispensTube. eveg penselen med penselprøven samtidig som du klemmer den gjennom veggene til DispensTube i 15 30 sekunder. Ta ut penselen samtidig som du klemmer på den for å fjerne overflødig væske. MERK: Kvalitetskontroll Kontroll +/- eller kontroll +/- kan brukes i stedet for pasientprøver med henblikk på kvalitetskontroll. Dispenser 8 dråper Reagens E i DispensTube, etterfulgt av 4 dråper godt blandet kontroll +/- eller kontroll +/-. land godt. Følg testprosedyren for å dispensere ekstrahert kontroll +/- slik at det pipetteres dråper vekselvis i begge brønnene til en testenhet til engangsbruk. Kontroll +/- fungerer som den positive for kontroll-influensa så vel som den negative kontrollen for influensa. Gjenta prosedyren i en separat enhet med Kontroll +/-. Kontroll +/fungerer som den positive kontrollen for influensa så vel som den negative kontrollen for influensa. Sett inn et DispensTubespiss i Dispensrøret. Vortex eller bland grundig. MERK: Ikke bruk spisser fra andre Directigenprodukter. Snu DispensTube og hold røret i øvre halvdel, borte fra spissen, og klem forsiktig. MERK: Hvis du klemmer på røret ved spissen, kan det føre til at spissen støtes ut og innholdet lekker. Dråpe Капка 1 3 5 7 2 4 6 8 Pipetter den ekstraherte prøven én dråpe om gangen (unngå for mye bobler), med enkeltdråper vekselvis mellom - og -testbrønnene til 4 dråper er tilsatt hver brønn på ColorPCtestenheten. Dermed tilsettes totalt 8 dråper fra hver ekstraherte prøve til en enkelt testenhet. Nå de ekstraherte kontrollene testes, må den ekstraherte kontrollen +/- tilsettes begge brønner av en enkelt ColorPC-testenhet. På samme måte må den ekstraherte kontrollen +/- tilsettes begge brønner av en enkelt ColorPC-testenhet. La prøven absorbere helt. Hvis prøven ikke absorberes i enheten innen fem minutter, fortynn som beskrevet i avsnittet Prøveinnsamling og forberedelse og test på nytt. C. Fargeutvikling Ta bort flowkontrolleren. Kast som biologisk farlig materiale. 1 Reagens 1 bland forsiktig. Tilsett 2 dråper i hver brønn. La absorbere helt. 4
2 Reagens 2 bland forsiktig. Tilsett 2 dråper kun i brønn. Fortsett straks med å tilsette Reagens 3. 3 Reagens 3 bland forsiktig. Tilsett 2 dråper kun i brønn. La reagensene i - og -brønnene absorberes helt. La stå i 2 minutter. 4 Reagens 4 bland forsiktig. Tilsett 3 dråper i hver brønn. La absorbere helt. 5 Reagens 5 bland forsiktig. Tilsett 3 dråper i hver brønn. La absorbere helt. 6 Reagens 6 bland forsiktig. Tilsett 3 dråper i hver brønn. La absorbere helt (MERK: Membranen kan bli gul). La stå i 5 minutter. 7 Reagens 7 bland forsiktig. Tilsett 2 dråper i hver brønn. La absorbere helt. TOLKNING V RESULTTER Les av testen på et godt opplyst sted og registrer resultatene. Resultatene kan om nødvendig leses av opptil 9 timer etter at Reagens 7 (stoppreagensen) er tilsatt. Et positivt resultat skal rapporteres som positivt for nærvær av influensa - og/eller -antigen. Et negativt resultat skal rapporteres som antatt negativt for nærvær av influensa /-antigenet. 5
Positiv test for Flu (antigen til stede) En lilla trekant (av hvilken som helst intensitet) vises i -brønnen på ColorPC-membranen og indikerer at influensa -antigenet kunne påvises i prøven. Dette resultatet viser ingen spesifikk influensa -virusundertype. akgrunnsområdet skal ha lysegul til lys lilla i farge. Et lilla kontrollpunkt skal synes midt i trekanten hvis ikke det skjules av en intens positiv reaksjon. Flu -positiv Flu -negativ Positiv test for influensa (antigen til stede) En lilla trekant (av en hvilken som helst intensitet) vises i -brønnen på ColorPC-membranen og indikerer at influensa -antigenet kunne påvises i prøven. akgrunnsområdet skal ha lysegul til lys lilla i farge. Et lilla kontrollpunkt skal synes midt i trekanten hvis ikke det skjules av en intens positiv reaksjon. Flu -positiv Flu -negativ Negativ Flu eller Flu Flu og som ikke kan tolkes Negativ test for Flu eller Flu (ikke noe antigen ble påvist i respektiv[e] brønn[er]) Ingen lilla trekant er synlig verken i -brønnen, -brønnen eller begge brønner. Det tyder på at verken influensa -antigenet eller influensa -antigenet, eller begge kunne påvises i prøven. Disse resultatene utelukker ikke influensavirusinfeksjon. Et lilla kontrollpunkt vises enten i -brønnen, -brønnen eller i begge brønner på ColorPC-membranen og viser riktig utførelse av testprosedyrer og reagenser. akgrunnsområdet skal ha lysegul til lys lilla i farge. Test som ikke kan tolkes Testen kan verken tolkes for Flu, for Flu, eller for både Flu og Flu, hvis ikke noe lilla punkt eller en lilla trekant er synlig i respektiv(e) brønn(er). En trekant som ikke er heltrukken skal også anses som en test som ikke kan tolkes. Testen må gjentas hvis den ikke kan tolkes. Testresultater kan heller ikke tolkes verken for Flu, Flu eller både Flu og Flu hvis en hvit trekant vises på ColorPC-membranen og hele den omkringliggende bakgrunnsmembranen er lilla. Et dempet kontrollpunkt kan være synlig midt på den hvite trekanten. Videre kan ikke testresultatet tolkes hvis hele membranområdet er lilla og det ikke er observert noe kontrollpunkt. For å rette opp disse problemene, fortynn prøven 1:4 eller i 0,9 % saltløsning eller i transportmedie og gjenta testen. Prøver med for mye mukoid kan ha vanskelig for å absorberes gjennom ColorPC-membranen eller kan gi resultater som ikke kan tolkes. Disse prøvene kan fortynnes 1:4 med saltløsning, blandes godt og testes på nytt. Kvalitetskontroll: Hver Directigen Flu + ColorPC-enhet inneholder både positive og negative interne prosedyrekontroller: Dannelsen av et lilla kontrollpunkt i - og -brønnene gir en intern positiv prosedyrekontroll som validerer enhetens immunlogiske integritet, riktig reagensfunksjon og gir sikkerhet om at riktig testprosedyre er fulgt. Merk: Kontrollpunktintensiteten kan variere mellom - og -brønnene. Membranområdet som omgir trekanten, er enhetens interne negative prosedyrekontroll. Mangelen på betydelig fargeutvikling i dette bakgrunnsområdet for å skjule trekanten eller kontrollpunktet viser at testen er utført på riktig måte. Flytende positiv kontroll +/-- og kontroll +/--kitkontroller leveres også med hvert kit. Disse kontrollene leveres som en tilleggskvalitetskontroll for å angi en positiv eller negativ reaksjon. De flytende kontrollene skal i det minste kjøres som en kvalitetskontrollprosedyre for hvert nye lot av hver forsendelse som er mottatt. Dannelsen av en lilla trekant på membranen i ColorPC-enhetens -brønn når kontroll-+/- testes og i enhetens -brønn når kontroll- +/- benyttes, indikerer videre at membranens influensaantigenbindende egenskaper fungerer. Dannelsen av bare et lilla kontrollpunkt i ColorPC-enhetens -brønn når kontroll-+/- benyttes er et riktig Flu -negativt kontrollresultat som indikerer riktig reagensfunksjon og at riktig testprosedyre ble fulgt. På samme måte indikerer dannelsen av bare et lilla kontrollpunkt i -brønnen når kontroll-+/- benyttes, riktig Flu -negativt kontrollresultat. Ikke bruk kitet hvis kontroll-+/- og kontroll-+/- ikke gir riktige resultater. De flytende kontrollene kan også brukes til å demonstrere en lavt positiv reaksjon. En svakere positiv reaksjon kan demonstreres ved å fortynne både kontroll-+/- og kontroll-+/- sammen i den samme DispensTube (2 dråper kontroll-+/- og 2 dråper kontroll-+/- tilsettes 10 dråper ekstraksjonsreagens E). Utførelse av reagenser og teknikk kan også evalueres ved å bruke prøver som er kjent for å være positive eller negative. Kvalitetskontroll må utføres i henhold til lokale og/eller nasjonale retningslinjer eller akkrediteringskrav og ditt laboratoriums standard kvalitetskontrollprosedyrer. Det anbefales at brukeren refererer til aktuelle CLSI-retningslinjer (tidligere NCCLS) og CLI-bestemmelser for egnede kvalitetskontrollprosedyrer. PROSEDYRENS EGRENSNINGER Etiologien av respiratorisk infeksjon forårsaket av andre mikroorganismer enn influensa - eller -viruser, vil ikke bli fastslått med denne testen. Directigen Flu +-testen kan påvise både levedyktige og ikke-levedyktige influensa - og -viruspartikler. Directigen Flu +-testutførelse beror på antigenmengden og vil kanskje ikke samsvare med cellekultur utført på den samme prøven. Lave nivåer av virusavgivelse kan gi et falskt negativt resultat. Et negativt testresultat eliminerer dermed ikke helt muligheten for influensa, influensa, eller både influensa - og -infeksjon. I likhet med alle diagnostiske prosedyrer, skal resultatene som er oppnådd med Directigen Flu +-test benyttes i sammenheng med annen klinisk informasjon som legen har tilgang til. 6
Egenskaper ved prøveutførelsen for influensa ble etablert mens influensa /H3- og /H1 var de dominerende influensa -virusene i omløp. Når andre influensa -viruser dukker opp, kan egenskaper ved prøveutførelsen variere. arn har tendens til å avgi virus over lengre tid enn voksne, noe som kan føre til forskjeller i sensitivitet mellom voksne og barn. Positive og negative prediktive verdier er sterkt avhengige av prevalens. Falskt positive testresultater oppstår oftere under perioder med lav influensaaktivitet når prevalens er moderat til lav. Gyldigheten til Directigen Flu + er ikke påvist for identifisering/bekreftelse av cellekulturisolater og skal ikke anvendes i denne egenskapen. Utførelse av testen er ikke etablert for overvåking av antivirusbehandling av influensa. FORVENTEDE VERDIER Frekvensen av positivitet som er observert ved influensatesting varierer avhengig av prøvetakingsmetode, benyttet håndterings-/transportsystem, påvisningsmetoden som er brukt, tidspunktet på året, pasientens alder, geografisk sted, og viktigst av alt, lokal sykdomsprevalens. Prevalensen av influensa varierer fra år til år. Prevalensen de siste 3 årene i US har variert fra 28 til 34 %. 20 Forekomsten av influensa -infeksjon er mer sporadisk enn influensa -infeksjon. I 1999 til 2000 var prevalensen i US av influensa i de pasientene som var diagnostisert med influensa, 99,6 % sammenlignet med en prevalens på 0,4 % for influensa. 20 asert på kulturmetode varierte prevalensen observert i US under den kliniske forsøksperioden for dette produktet fra 0 % til 33,9 % for influensa og 0 % til 16,2 % for influensa. Gjennomsnittsprevalens observert i det kliniske Directigen Flu +-forsøksstudiet var 17,9 % for influensa og 2,6 % for influensa. EGENSKPER VED PRØVEUTFØRELSEN Utførelsen av Directigen Flu +-testen ble bestemt i en flersenterstudie utført på seks kliniske sentre og to legelaboratorier i influensasesongen 1999 2000. De kliniske sentrene lå i Canada, Hongkong og geografisk forskjellige områder i US. Totalt 1262 prøver, bestående av nasofaryngealt aspirat, nasofaryngeal vask, nasofaryngeal penselprøve, nedre nasal penselprøve/halspenselprøve, og bronkoalveolare utskyllingsprøver fra 1046 influensa-symptomatiske pasienter ble evaluert med Directigen Flu +-testen. På ett klinisk laboratorium ble det tatt både nasofaryngeale penselprøver og nedre nasale penselprøver fra hver av 216 pasienter. Prøvepopulasjonene inkluderte 58 frosne arkiverte prøver bestående av forhåndsvalgte influensa -positive, influensa -positive og influensa /-negative prøver. Distribusjonen av disse frosne prøvene er designert for hver datatabell som står nedenfor. Prøvene som er evaluert i studien, ble innsamlet og transportert til laboratoriet i henhold til det enkelte laboratoriets prosedyre. Følgende tester ble utført på hver prøve: Directigen Flu +, cellekultur og direkte prøve-df. Enhver gjenværende prøve ble arkivert ved eller under -20 ºC. Metoder Cellekultur: For cellekultur ble en del av prøven inokulert i Rhesus-apenyre- eller Madin-Darby-hundenyreceller. Celler ble undersøkt for synlige cytopatiske effekter. Infiserte celler ble bekreftet for influensa eller ved direkte fluorescerende antistoff-farging. Prøver som var negative for cytopatiske effekter etter 14 dager, ble farget for negativ bekreftelse med fluorescerende antistoff-farging. Direkte prøve fluorescerende antistoff-farging: For direkte prøvetesting med fluorescerende antistoff-farging ble det brukt en del av hver prøve for å forberede en penselprøve for undersøkelse av direkte fluorescerende antistoff for influensa og. RT-PCR: RT-PCR ble utført på alle tilgjengelige prøver som var kulturnegative og direkte prøve-df-positive. I tillegg ble et undersett av prøver med andre resultatkombinasjoner evaluert med RT-PCR. Klinisk nøyaktighet For alle prøver som ble evaluert var den samlede sensitiviteten til Directigen Flu +-testen for influensa 86,2 % sammenlignet med kultur og 80,8 % for influensa. Den samlede spesifisiteten for influensa sammenlignet med kultur var 90,7 % og 99,5 % for influensa. For influensa var det 96 prøver som var kulturnegative, Directigenpositive. Direkteprøve-DF var positiv for 77 av de 96 prøvene. RT-PCR ble utført på 86 av de 96 prøvene med totalt 78 prøver positive med RT-PCR. Den utolkbare frekvensen for Directigen Flu +-testen var 0,08 % for både influensa - og influensa -resultatene. Nasofaryngeale aspirater (NP): n=350 (ett utolkbart Directigen-resultat er ikke inkludert i tabellen eller i estimering av egenskaper ved prøveutførelsen) Cellekulturresultater 95 % C.I +/- -/+ -/- Influensa Sensitivitet 95,7 % 44/46 85,2 99,5 Directigen Flu + +/- 44 0 26* Spesifisitet 91,4 % 277/303 87,6 94,3 -/+ 0 28 6** Influensa Sensitivitet 87,5 % 28/32 71,0 96,5 -/- 2 4 239 Spesifisitet 98,1 % 311/317 95,9 99,3 *v de 26 prøvene var 20/26 positive med DF og 23/25 var positive med RT-PCR. **v de 6 prøvene var 6/6 negative med DF og 5/5 var negative med RT-PCR. 7
Nasofaryngeal prøve (NP) inkluderer: Nasofaryngeal vask og/eller nasofaryngeal penselprøve n=512 Cellekulturresultater 95 % C.I. +/- -/+ -/- Influensa Sensitivitet 88,5 % 100/113 81,1 93,7 Directigen Flu + +/- 100 0 41* Spesifisitet 89,7 % 358/399 86,3 92,5 -/+ 0 12** 0 Influensa Sensitivitet 70,6 % 12/17 44,0 89,7 -/- 13 5** 341 Spesifisitet 100 % 495/495 99,3 100 *v de 41 prøvene var 32/41 positive med DF og 30/35 var positive med RT-PCR. ** Frosne (arkiverte) prøver for influensa. Merk: v de 50 frosne arkiverte prøvene som var testet, var 10/13 kulturpositive prøver positive og 37/37 kulturnegative prøver var negative for influensa med Directigen Flu +-testen. For influensa var 12/17 kulturpositive prøver positive og 33/33 kulturnegative prøver var negative når testet med Directigen Flu +-testen. Nese-/halsprøver inkluderer: Halspenselprøver og/eller nedre nasale penselprøver n=389 Cellekulturresultater 95 % C.I. +/- -/+ -/- Influensa Sensitivitet 76,7 % 56/73 65,4 85,8 Directigen Flu + +/- 56 0 29* Spesifisitet 90,8 % 287/316 87,1 93,8 -/+ 0 0 0 Influensa Sensitivitet 0,0 % 0/1 0,0 97,5 -/- 17 1** 286 Spesifisitet 100 % 388/388 99,1 100 *v de 29 prøvene var 25/29 positive med DF og 25/26 var positive med RT-PCR. ** Frosne (arkiverte) prøver for influensa. Merk: v de 5 frosne arkiverte prøvene som var testet, var 3/3 kulturpositive prøver positive og 2/2 kulturnegative prøver var negative for influensa med Directigen Flu +-testen. For influensa var 0/1 kulturpositive prøver positive og 4/4 kulturnegative prøver var negative når testet med Directigen Flu +-testen. ronkoalveolar utskylling: n=11 Cellekulturresultater 95 % C.I. +/- -/+ -/- Influensa Sensitivitet N/** N/** N/** Directigen Flu + +/- 0 0 0 Spesifisitet 100 % 11/11 71,5 100 -/+ 0 2* 0 Influensa Sensitivitet 100 % 2/2 15,8 100 -/- 0 0 9 Spesifisitet 100 % 9/9 66,4 100 *Frosne (arkiverte) prøver for influensa. **N/ = Ikke tilgjengelig Merk: v de 3 frosne arkiverte prøvene som var testet, var 3/3 kulturnegative prøver negative for influensa med Directigen Flu +-testen. For influensa var 2/2 kulturpositive prøver positive og 1/1 kulturnegative prøver var negative når testet med Directigen Flu +-testen. Sammenlignede prøveanalyser: På ett klinisk laboratorium ble det tatt både nasofaryngeale penselprøver og nedre nasale penselprøver fra hver av 216 pasienter. lle prøvene fra denne siden var negative for influensa med både kultur og Directigen Flu +testen. Det var ingen statistisk signifikante forskjeller påvist mellom prøvetypene for verken Directigen Flu +-testen eller cellekulturen. Directigen Flu + nasofaryngeal penselprøve + nedre nasal penselprøve + 53 5 5 153 % samsvar = 206/216 = 95,4 % Cellekultur nasofaryngeal penselprøve + nedre nasal penselprøve + 25 9 7 175 % samsvar = 200/216 = 92,6 % 8
nalytisk spesifisitet og kryssreaksjon Directigen Flu +-testen ble evaluert med totalt 90 mikroorganismer (58 bakterier, to gjærsopper og 30 viruser). akterie- og gjærsoppisolater ble testet ved konsentrasjoner på 10 7 til 10 8 CFU/mL. M. pneumoniae ble testet ved en konsentrasjon på > 10 8 CCU/mL. Virusisolater ble testet ved titreringer på mellom 10 4 til 10 10 TCID 50 /ml. Influensa C ble testet med en titrering på 1,6 X 10 10 CEID 50 /ml. Ingen av mikroorganismene eller virusene oppgitt nedenfor ga et positivt resultat i Directigen Flu +-testen. Mikroorganismepanel cinetobacter baumannii Kingella kingae Prevotella oralis ctinobacillus suis Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis acteroides fragilis Lactobacillus casei Proteus vulgaris ordetella pertussis Lactobacillus fermentum Pseudomonas aeruginosa Candida albicans Lactobacillus plantarum Salmonella choleraesuis sub. minnesota Candida glabrata Legionella pneumophila Serratia marcescens Cardiobacterium hominis Listeria monocytogenes Staphylococcus aureus Chlamydia psittaci Moraxella catarrhalis Staphylococcus aureus-(cowen 1) Chlamydia trachomatis Mycobacterium avium Staphylococcus epidermidis Corynebacterium diphtheriae Mycobacterium intracellulare Streptococcus bovis II Gruppe D Eikenella corrodens Mycobacterium tuberculosis Streptococcus mutans Enterococcus faecalis Mycoplasma orale Streptococcus oralis Enterococcus gallinarum Mycoplasma pneumoniae Streptococcus pneumoniae Escherichia coli Neisseria gonorrhoeae Streptococcus pyogenes Gruppe Fusobacterium nucleatum Neisseria meningitidis Streptococcus sanguis Gardnerella vaginalis Neisseria mucosa Streptococcus sp. Gruppe Haemophilus aphrophilus Neisseria sicca Streptococcus sp. Gruppe C Haemophilus influenzae Neisseria subflava Streptococcus sp. Gruppe F Haemophilus parainfluenzae Peptostreptococcus anaerobius Streptococcus sp. Gruppe G Haemophilus paraphrophilus Porphyromonas asaccharolyticus Veillonella parvula Viruspanel denovirus Type 3 HSV Type 2 denovirus Type 5 Influensa C/Taylor/1233/47 denovirus Type 7 Meslingevirus Edmonston denovirus Type 18 Kusmavirus Koronavirus Parainfluensa Type 1 Coxsackievirus Type 9 (Griggs) Parainfluensa Type 2 Coxsackievirus Type 5 (Faulkner) Parainfluensa Type 3 Coxsackievirus Type 6 (Schmitt) Rhinovirus Type 1 Coxsackievirus Type 21 (Kuykendall) Rhinovirus Type 2 Coxsackievirus Type 9 P.. (ozek) Rhinovirus Type 13 Cytomegalovirus D-169 Rhinovirus Type 16 Echovirus Type 2 Rhinovirus Type 37 Echovirus Type 3 RSV Echovirus Type 6 RSV HSV Type 1 VZV Forstyrrende stoffer Følgende stoffer ble testet i Directigen Flu +-testen og ingen interferens ble observert i analysen for noe substans på de testede nivåene: helblod (2 %), 4 nesesprayer (25 %), acetylsalicylsyre (20 mg/ml), 3 munnvasker (25 %), ibuprofen (10 mg/ml), oseltamivir (0,5 mg/ml), zanamivir (1 mg/ml), klorfeniramin-maleat (5 mg/ml), 4 halsdråper (25 %), guaifenesin (20 mg/ml), difenhydraminhydroklorid (5 mg/ml), dekstrometorfanhydrobromid (10 mg/ml), pseudoefedrinhydroklorid (20 mg/ml), acetaminofen (216 mg/ml), klemastinfumarat (0,35 mg/ml), fenylpropanolaminhydroklorid (20 mg/ml). 9
nalytisk sensitivitet Den analytiske sensitiviteten ble etablert for totalt 13 influensastammer, 7 influensa - og 6 influensa -stammer. Influensavirusstamme Type Påvisningsgrense (CEID 50 ) /PR/8/34 (H1N1) 8,2 X 10 3 1/FM/1/47 (H1N1) 5,9 X 10 2 /NWS/33 (H1N1) 1,6 X 10 2 1/Denver/1/57 (H1N1) 6,5 X 10 1 /Port Chalmers/1/73 (H3N2) 2,9 X 10 2 /Victoria/3/73 (H3N2) 3,3 X 10 4 /New Jersey/8/76 (H1N1) 2,1 X 10 2 /Lee/40 1,2 X 10 6 /llen/45 1,8 X 10 2 /Maryland/1/59 4,6 X 10 1 /GL/1739/54 2,5 X 10 3 /Taiwan/2/62 6,6 X 10 2 /Hong Kong/5/72 2,3 X 10 3 Reaktivitet og spesifisitet for influensa - og -stammer Directigen Flu +-testen ble evaluert med totalt 62 influensastammer. lle humane influensa -stammene og dyre-influensa -stammene ga positive testresultater for Flu og negative testresultater for Flu. lle de humane influensa -stammene ga positive testresultater for Flu og negative testresultater for Flu. lle kjente influensa -hemagglutinin- og nevraminidaseundertyper representeres nedenfor. Influensavirus, humant isolat Virustype Influensavirus, humant isolat Virustype /PR/8/34 (H1N1) /Human/HongKong/481/97 (H5N1) 1/FM/1/47 (H1N1) /Human/HongKong/482/97 (H5N1) /NWS/33 (H1N1) /Human/HongKong/228156/97 (H5N1) 1/Denver/1/57 (H1N1) /Human/HongKong/229540/97 (H5N1) /New Jersey/8/76 (Hsw N1) (H1N1) /Human/HongKong/242095/97 (H5N1) /HongKong/9821/2000 (H1N1) /Human/HongKong/1073/99 (H9N2) /HongKong/2997/98 (H1N1) /Human/HongKong/1074/97 (H9N2) /HongKong/5405/2000 (H1N1) /Lee/40 /HongKong/6611/2000 (H1N1) /llen/45 /HongKong/15946/2000 (H1N1) /GL/1739/54 /HongKong/16051/2000 (H1N1) /Taiwan/2/62 /Port Chalmers/1/73 (H3N2) /Maryland/1/59 /Victoria/3/73 (H3N2) /HongKong/5/72 /HongKong/114313/2000 (H3N2) /Hong Kong/28637/2000 /HongKong/117393/2000 (H3N2) /Hong Kong/27254/2000 /HongKong/114591/2000 (H3N2) /Hong Kong/28636/2000 /HongKong/119563/2000 (H3N2) /Hong Kong/29130/2000 /HongKong/120277/2000 (H3N2) /Hong Kong/29276/2000 /Hong Kong/68012/2000 (H3N2) /Hong Kong/35952/2000 Influensavirus, dyreisolat Virustype Influensavirus, dyreisolat Virustype /Turkey/Kansas/4880/80 (H1N1) /Turkey/Ontario/6118/67 (H8N4) /sia/57 (H2N2) /Chicken/HongKong/G9/97 (H9N2) /Mallard/New York/6750/78 (H2N2) /Swine/HongKong/9/98 (H9N2) /swine/hongkong/5212/99 (H3N2) /Turkey/Wisconsin/66 (H9N2) /Turkey/England/69 (H3N2) /Quail/HongKong/G1/97 (H9N2) /Duck/HongKong/477/78 (H4N6) /Duck/HongKong/865/80 (H10N3) /Chicken/labama/75 (H4N8) /Chicken/Germany/N/49 (H10N7) /Turkey/Wisconsin/68 (H5N9) /Duck/Memphis/546/74 (H11N9) /Goose/HongKong/38/79 (H6N1) /Duck/lberta/60/76 (H12N5) /Turkey/Canada/63 (H6N8) /Gull/MD/704/77 (H13N6) /Turkey/Oregon/71 (H7N3) /Mallard/Gurjev/263/82 (H14N5) /Duck/HongKong/47/76 (H7N2) /Shearwater/W/2576/79 (H15N6) MERK: Egenskaper ved prøveutførelsen for påvisning av influensa -virus fra humane prøver når ikke-/h3- og ikke- /H1-influensa -virusundertyper dukker opp som humane patogener, er ikke etablert. Reproduserbarhet Reproduserbarheten av Directigen Flu +-testen ble evaluert med et 20-prøvepanel som inkluderte to nivåer (lav positiv og høy positiv) influensa, to nivåer (lav positiv og høy positiv) influensa og negative kontroller. De lavt positive prøvene for både influensa og influensa var ved eller nær den laveste visuelle påvisningsgrensen for Directigen Flu +-testen. Den helhetlige nøyaktigheten av Directigen Flu +-testen var 95 % for influensa og 98 % for influensa. Reproduserbarhet ved legelaboratorium En evaluering av Directigen Flu +-testen ble utført av fem personer på tre legelaboratorier med det samme 20-prøvepanelet som er beskrevet i forrige reproduserbarhetsavsnitt. To teknikere, en flebotomist, en resepsjonist 10
og medisinsk assistent utførte selve testingen. Panelet ble evaluert på tre etterfølgende dager. Den helhetlige nøyaktigheten var 93 % for influensa og 92 % for influensa. TILGJENGELIGHET Kat. nr. eskrivelse 256010 Directigen Flu + (Influensa - og -virus)-kit, 20 målinger. 220099 L CultureSwab, enkeltpenselprøve, flytende Stuart, pakke med 50. 220093 L CultureSwab, enkeltpenselprøve, flytende mies, pakke med 50. REFERNSER 1. Walsh, Paul, et al. 2000. Physician s Desk Reference, Medical Economics Company, Inc., Montvale, NJ. 2. Kaiser, L., Couch, R.., Galasso, G.J., Glezen, W.P., Webster, R.G., Wright, P.F., and Hayden, F.G. 1999. First international symposium on influenza and other respiratory viruses: summary and overview Kapalua, Maui, Hawaii, December 4-6, 1998. ntiviral Res., 42:149-176. 3. Cox, N.J., and ender, C.. 1995. The molecular epidemiology of influenza viruses. Virology, 6:359-370. 4. Todd, S.J., Minnich, L., and Waner, J.L. 1995. Comparison of rapid immunofluorescence procedure with TestPack RSV and Directigen Flu for diagnosis of respiratory syncytial virus and influenza virus. J. Clin. Microbiol. 33:1650-1651. 5. McElhaney, J.E., Gravenstein, S., Krause, P., Hooton, J.W., Upshaw, C.M., and Drinka, P. 1998. ssessment of markers of the cell-mediated immune response after influenza virus infection in frail older adults. Clin. Diag. Lab. Immunol. 5:840-844. 6. Fan, J., Henrickson, K.J., and Savatski, L.L. 1998. Rapid simultaneous diagnosis of infections with respiratory syncytial viruses and, influenza viruses and, and human parainfluenza virus types 1, 2, and 3 by multiplex quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction-hybridization assay (hexaplex). Clin. Infect. Diseases 26:1397-1402. 7. Wright, K.E., Wilson, G..R., Novosad, D., Dimock, C., Tan, D., and Weber, J.M. 1995. Typing and subtyping of influenza viruses in clinical samples by PCR. J. Clin. Microbiol. 33:1180-1184. 8. Kendal,.P. 1985. Influenza viruses. p.341-357. In H. Lennette, (ed.), Laboratory Diagnosis of Viral Infections. Marcel Dekker, Inc., New York. 9. McQuillen, J., Madeley, C.R., and Kendal,.P. 1985. Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of influenza and virus infections by immunofluorescence. Lancet. ii:911-914. 10. Guenthner, S. H., and Linnemann, C.C., Jr. 1988. Indirect immunofluorescence assay for rapid diagnosis of influenza virus. Laboratory Medicine 19:581-583. 11. Minnick, L.L., and Ray, C.G. 1986. Early testing of cell cultures for detection of hemadsorbing viruses. J. Clin. Microbiol. 25:421-422. 12. Schmidt, N.J., Ota, M., Gallo, D., and Fox, V.L. 1982. Monoclonal antibodies for rapid, strain specific identification of influenza virus isolates. J. Clin. Microbiol. 16:763-765. 13. Shu, L.L., ean, W.J., and Webster, R.G. 1993. nalysis of the evolution and variation of the human influenza virus nucleoprotein gene from 1933 to 1990. J. Virol. 67:2723-2729. 14. Dowdle, W.R., Kendal,.P., and Noble, G.R. 1980. Influenza Virus, p. 836-884. In Lennette, et. al. (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 3rd ed., merican Society for Microbiology, Washington, D.C. 15. Kendal,.P., and Dowdle, W.R. 1986. Influenza Virus, p. 515-520. In Lennette et. al. (ed.), Manual of Clinical Laboratory Immunology, 3rd ed., merican Society for Microbiology, Washington, D.C.. 16. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2001. pproved Guideline M29-2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, Pa. 17. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices dvisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80. 18. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. iosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC) 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 19. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of rticle 16(1) of Directive 89/31/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 20. Covalciuc K., Webb K., and Carlson C. 1999. Comparison of four clinical specimen types for detection of influenza and virus by optical immunoassay (FLU OI TEST) and cell culture methods. J.Clin. Microbiol. 37: 3971-3974. 11
Manufacturer / Výrobce / Producent / Fabrikant / Tootja / Valmistaja / Fabricant / Hersteller / ÊáôáóêåõáóôÞò / Gyártó / Ditta produttrice / Gamintojas / Producent / Fabricante / Výrobca / Tillverkare / Производител / Producãtor / Üretici Use by / Spotøebujte do / nvendes før / Houdbaar tot / Kasutada enne / Viimeinkäyttöpäivä / utiliser avant / Verwendbar bis / Çìåñïìçßá ëþîçò / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Naudokite iki / rukes før / Stosowaæ do / Utilizar em / Použite do / Usar antes de / nvänd före / Използвайте до / se utiliza pânã la / Son kullanma tarihi YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec mìsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) / JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) -KK-PP / -KK (KK = kuu lõpp) VVVV-KK-PP / VVVV-KK (kuukauden loppuun mennessä) -MM-JJ / -MM (MM = fin du mois) / JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) / ÅÅÅÅ-ÌÌ-ÇÇ / ÅÅÅÅ-ÌÌ (ÌÌ = ôýëïò ôïõ ìþvá) / ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) -MM-GG / -MM (MM = fine mese) / MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mënesio pabaiga) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesi¹ca) -MM-DD / -MM (MM = fim do mês) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) aaaa-mm-dd / aaaa-mm (mm = fin del mes) / ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet på månaden) / ГГГГ-ММ-ДД / ГГГГ-ММ (ММ = края на месеца) / -LL-ZZ / -LL (LL = sfârºitul lunii) / YYYY--GG / YYYY- ( = ayın sonu) Catalog number / Katalogové èíslo / Katalognummer / Catalogusnummer / Kataloogi number / Tuotenumero / Numéro catalogue / estellnummer / Áñéèìüò êáôáëüãïõ / Katalógusszám / Numero di catalogo / Katalogo numeris / Numer katalogowy / Número do catálogo / Katalógové èíslo / Número de catálogo / Каталожен номер / Numãr de catalog / Katalog numarası uthorized Representative in the European Community / utorizovaný zástupce pro Evropskou unii / utoriseret repræsentant i EU / Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Valtuutettu edustaja Euroopan yhteisössä / Représentant agréé pour la C.E.E. / utorisierte EG-Vertretung / ÅîïõóéïäïôçìÝíïò áíôéðñüóùðïò óôçí ÅõñùðáúêÞ Êïéíüôçôá / Hivatalos képviselet az Európai Unióban / Rappresentante autorizzato nella Comunità europea / Ágaliotasis atstovas Europos endrijoje / utorisert representant i EU / utoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej / Representante autorizado na União Europeia / utorizovaný zástupca v Európskom spoloèenstve / Representante autorizado en la Comunidad Europea / uktoriserad representant i EU / Оторизиран представител в ЕU / Reprezentant autorizat în Uniunea Europeanã / vrupa Topluluğu Yetkili Temsilcisi In Vitro Diagnostic Medical Device / Lékaøské zaøízení urèené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Lääkinnällinen in vitro -diagnostiikkalaite / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medizinisches In-vitro-Diagnostikum / In vitro äéáãíùóôéêþ éáôñéêþ óõóêåõþ / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medico diagnostico in vitro. / In vitro diagnostikos prietaisas / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urz¹dzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Dispositivo médico de diagnóstico in vitro / Medicinsk anordning för in vitro-diagnostik / Медицински уред за диагностика ин витро / paraturã medicalã de diagnosticare in vitro / In Vitro Diyagnostik Tıbbi Cihaz Temperature limitation / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperatuurlimiet / Temperatuuri piirang / Lämpötilarajoitus / Température limite / Zulässiger Temperaturenbereich / ¼ñéï èåñìïêñáóßáò / Hõmérsékleti határ / Temperatura limite / Laikymo temperatûra / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limitação da temperatura / Ohranièenie teploty / Limitación de temperatura / Temperaturbegränsning / Температурни ограничения / Limitare de temperaturã / Sıcaklık sınırlaması Control / Kontrola / Kontrol / Controle / Kontroll / Kontrolli / Contrôle / Kontrolle / ëåã ïò / Controllo / Kontrolë / Controlo / / Etalon / atch Code (Lot) / Kód (èíslo) šarže / atch kode (Lot) / Chargenummer (lot) / Partii kood / Eräkoodi (LOT) / Code de lot (Lot) / Chargencode (Chargenbezeichnung) / Êùäéêüò ðáñôßäáò (Ðáñôßäá) / Tétel száma (Lot) / Codice del lotto (partita) / Partijos numeris (Lot) / atch-kode (Serie) / Kod partii (seria) / Código do lote (Lote) / Kód série (šarža) / Código de lote (Lote) / Satskod (parti) / Код (Партида) / Numãr lot (Lotul) / Parti Kodu (Lot) Contains sufficient for <n> tests / Dostateèné množství pro <n> testù / Indeholder tilstrækkeligt til <n> test / Voldoende voor <n> tests / Küllaldane <n> testide jaoks / Sisältöon riittävä <n> testejä varten / Contenu suffisant pour <n> tests / usreichend für <n> Tests / ÐåñéÝ åé åðáñêþ ðïóüôçôá <n> åîåôüóåéò / <n> teszthez elegendõ / Contenuto sufficiente per <n> test / Pakankamas kiekis atlikti <n> testø / Innholder tilstrekkelig for <n> tester / Zawiera iloœæ wystarczaj¹c¹ do <n> testów / Contémo suficiente para <n> testes / Obsah vystaèí na <n> testov / Contenido suficiente para <n> pruebas / Räckertill <n> antal tester / Съдържанието е достатъчно за <n> теста / Conþine suficient pentru <n> teste / <n> testleri için yeterli miktarda içerir Consult Instructions for Use / Prostudujte pokyny k použití / Læs brugsanvisningen / Raadpleeg gebruiksaanwijzing / Lugeda kasutusjuhendit / Tarkista käyttöohjeista / Consulter la notice d emploi / Gebrauchsanweisung beachten / Óõìâïõëåõôåßôå ôéò ïäçãßåò ñþóçò / Olvassa el a használati utasítást / Consultare le istruzioni per l'uso / Skaitykite naudojimo instrukcijas / Se i bruksanvisningen / Zobacz instrukcja u ytkowania / Consulte as instruções de utilização / Pozri Pokyny na používanie / Consultar las instrucciones de uso / Se bruksanvisningen / Направете справка в инструкциите за употреба / Consultaþi instrucþiunile de utilizare / Kullanım Talimatları na başvurun 12
m ecton, Dickinson and Company ENEX Limited 7 Loveton Circle ay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Sparks, Maryland 21152 US Shannon, County Clare, Ireland 800-638-8663 Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46 D, D Logo, L, ColorPC, Culturette, Directigen, DispensTube and Trypticase are trademarks of ecton, Dickinson and Company. CultureSwab is a trademark of Difco Laboratories, Inc., a subsidiary of ecton, Dickinson and Company. 2006 D