B Directigen EZ RSV For direkte påvisning av respiratorisk syncytial-virus (RSV)

Transkript

1 B Directigen EZ RSV For direkte påvisning av respiratorisk syncytial-virus (RSV) L009004JAA 2008/12 U Norsk BRUKSOMRÅDE Directigen EZ RSV-testen er en rask kromatografisk immunanalyse for direkte og kvalitativ påvisning av respiratorisk syncytialvirusantigen (RSV) i nasofaryngeal vask, nasofaryngeale aspirater, nasofaryngeale penselprøver og nasofaryngeale penselprøver/vask fra pasienter som mistenkes å ha respiratorisk virusinfeksjon. Denne testen er beregnet på in vitro-diagnostisk bruk til å bistå i diagnosen av respiratorisk syncytialvirus (RSV)- infeksjoner hos neonatale og pediatriske pasienter under 20 år. Det anbefales at negative testresultater bekreftes med cellekultur. SAMMENDRAG OG FORKLARING Luftveisvirusinfeksjoner er ansvarlige for utbredt sykdom. Respiratorisk syncytialvirus (RSV) er en av de viktigste årsakene til infeksjoner i nedre luftveier hos små barn i den kalde årstiden. 1 RSV har også vært involvert i alvorlige respiratoriske infeksjoner hos eldre og de som har svekket immunforsvar. 2,3 I den senere tid er RSV identifisert som årsaken til 20 % av influensalignende sykdom hos mennesker i alderen år. 4 Tradisjonelle metoder for påvisning av respiratoriske viruser har inkludert cellekultur og direkte fluorescerende antistoff (DFA). 5-7 I den senere tid har PCR vist klinisk anvendelighet for påvisning av respiratorisk virus, inkludert RSV. 8 Enzymimmunanalyse (EIA) og raske manuelle systemer er tilgjengelige for spesifikke virus som influensa A/B og RSV. Med raske tester kan det foretas hurtig diagnose slik at pasienter kan isoleres etter behov og behandles for å forhindre nosokomial spredning av infeksjoner til medpasienter med nedsatte hjertefunksjoner, respiratoriske funksjoner eller immunfunksjoner. 9 I tillegg hjelper hurtige tester med valg av egnet antivirusterapi. De vanligste prøvene som er tatt for RSV-testing, inkluderer nasofaryngeal vask, nasofaryngeale aspirater og nasofaryngeale penselprøver. Nasofaryngeal vask og aspirater har vist seg å være bedre enn penselprøver og foretrekkes som prøver. 10 Directigen EZ RSV-antigenpåvisningstesten er en kromatografisk analyse for å påvise RSV-antigener ekstrahert fra forskjellige prøver fra symptomatiske pasienter. Hastigheten og arbeidsflyten til Directigen EZ RSV-testen gjør den aktuell som en STAT RSV-antigenpåvisningstest og gir hurtig, aktuell informasjon for å bistå i antivirusintervensjon og andre kliniske avgjørelser eller støtteavgjørelser. PRINSIPPER FOR PROSEDYREN Directigen EZ RSV-testen er en kromatografisk analyse for å påvise RSV-antigen kvalitativt i prøver som er ekstrahert fra respiratoriske prøver. Når ekstraherte prøver er tilsatt testenheten, binder RSV A- og/eller B-antigener til antistoff-kolloidal gullkonjugatet i teststripsen og utgjør et antigenantistoffkompleks. Dette komplekset migrerer over teststripsen til reaksjonsområdet og fanges opp av RSV-antistoffstreken på membranen. Overflødig konjugat bindes til en ny strek bestående av inaktivert RSV-antigen som fungerer som en funksjonskontroll. Et positivt resultat indikeres med to rødlilla streker i avlesingsvinduet, en strek ved siden av test T og den andre ved siden av kontroll C. Hvis ikke det vises noen rødlilla strek ved siden av T eller en rødlilla strek ved siden av C, tyder det på et negativt resultat. Testen anses som umulig å tolke hvis det ikke er none synlig rødlilla strek ved siden av C. REAGENSER Følgende er inkludert i Directigen EZ RSV-kittet: BD RSV-enheter 30 Hver enhet som inneholder en kontrollstrek med inaktivert RSV-antigen og en teststrek med monoklonalt RSV-antistoff på membranen. Ekstraksjonsreagens E 4,0 ml Ekstraksjon, mukolyttisk agens og rengjøringsmiddel, med 0,2 % natriumazid (konserveringsmiddel). Kontroll + 2,0 ml Positiv kontroll, rengjøringsmiddelbehandlet RSV-infiserte celler med 0,1 % natriumazid (konserveringmiddel). Kontroll 2,0 ml Negativ kontroll, rengjøringsmiddelbehandlet uinfiserte celler med 0,1 % natriumazid (konserveringmiddel). DispensTube-rør 30 Rør for prøveekstraksjon og prøvetilførsel i enhet. DispensTube-spisser 30 Spisser for filtrering av prøve når tilført i enhet. Nødvendige materialer som ikke følger med: Pipette (kan levere 250 µl), timer, vortex og transportmedier (se Prøveinnsamling og håndtering). Advarsler og forsiktighetsregler: Ved in vitro-diagnostisk bruk. 1. RSV-kontroll + reagenset og kontrollstreken på BD RSV-enheten er fremstilt av RSV-infisert vevkulturceller som er inaktivert av behandling med rengjøringsmiddel og sonikering, deretter testet med bioanalyseprosedyrer. 2. Ikke bruk kitet hvis Kontroll + og Kontroll ikke gir riktige resultater. 3. Patogene mikroorganismer, blant annet hepatittvirus og humant immunsviktvirus, kan være til stede i kliniske prøver. Standard forsiktighetsregler og institusjonelle retningslinjer skal følges ved håndtering av alt materiale kontaminert med blod og andre kroppsvæsker. 4. Kitkomponenter skal ikke brukes etter utløpsdato. 5. IKKE bland reagenser fra forskjellige kitlotnumre. Ikke bruk enheten flere ganger.

2 6. Reagenser som inneholder natriumazid, som er skadelig ved innånding, svelging eller i kontakt med huden. Kontakt med syrer frigir svært giftig gass. Dersom det kommer i kontakt med huden, vask umiddelbart med rikelige mengder vann. Natriumazid kan reagere med bly- og kobberrør for å danne sterkt eksplosive metallazider. Ved avfallsbehandling, skyll med rikelig med vann for å forhindre azidansamling. Oppbevaring og håndtering: Kitene kan lagres ved 2 30 ºC. SKAL IKKE FRYSES. Reagenser og BD RSV-enheter må holde romtemperatur (15 30 C) når brukt til testing. Prøveinnsamling og klargjøring Transport og oppbevaring av prøver: Transporter ferske prøver til laboratoriet så raskt som mulig i et egnet væsketransportsystem. Behandle prøvene så snart som mulig etter at de er samlet inn. Om nødvendig, kan prøvene oppbevares ved 2 8 C i opptil 72 timer eller ved 20 C i opptil syv dager etter at de er tatt. Det er avgjørende at prøver samles inn og klargjøres på riktig måte. Ikke sentrifuger prøver før bruk med Directigen EZ RSV-testen, siden fjerning av cellemateriale vil påvirke testens sensitivitet på en negativ måte. Transportmedier: Følgende transportmedier er testet og påvist å være i samsvar med Directigen EZ RSV-testen: Normal saltløsning Trypticase Soy Broth + 0,5 % gelatin* Fosfatbufret saltløsning (PBS) Trypticase Soy Broth + 0,5 % BSA PBS + 0,5 % gelatin* Earle s Minimal Essential Medium (EMEM) PBS + 0,5 % bovint serumalbumin (BSA) EMEM + 0,5 % BSA Kalveinfusjonsvekstmedium (VIB) EMEM + 1 % BSA VIB + 0,5 % BSA EMEM + 0,5 % laktalbuminhydrolysat Hanks basale saltløsning EMEM + 1,0 % laktalbuminhydrolysat M4 Media* Modified Stuart s (liquid) CultureSwab M4-RT Media* Amies (liquid) CultureSwab M5 Media Starplex Multitrans* Bartels ViraTrans Media BD universelt virustransportmedium* Sukrosefosfat (2-SP) *Mediet inneholder gelatin. Prøveinnsamling og klargjøring: Nasofaryngeal vask og aspirater har vist seg å være bedre enn nasofaryngeale penselprøver og er prøvene som foretrekkes. 9,10 Akseptable prøver for testing med Directigen EZ RSV-testen inkluderer nasofaryngeal vask, nasofaryngeale aspirater, nasofaryngeale penselprøver og nasofaryngeale penselprøver/vask. MERK: For nasofaryngeale penselprøver, anbefales pensler med polyester- eller rayonspisser med aluminiumswire. Veluriserte (flocked) vattpinner er testet analytisk og påvist å være i samsvar med Directigen EZ RSV-testen. 15 Vattpinner med kalsiumalginatspisser godtas ikke for innsamling av virusprøver. 16 Prosedyre for nasofaryngeal vask og nasofaryngeale penselprøver/vask: 1. Prøvevolumer på 2 3 ml anbefales. 2. For store mengder vask eller utskylling skal unngås, siden det kan føre til redusert testsensitivitet. 3. Behandle prøven som beskrevet i Testprosedyre. Prosedyre for nasofaryngeale penselprøver: 1. Penselprøver kan tilsettes 350 µl 2 ml transportmedier. 2. Roter penselprøven og transportmedier. 3. Fjern så mye væske fra penselprøven som mulig. Merk: Penselprøven kan også bli liggende i røret. 4. Kast penselprøven i egnet beholder. 5. Behandle prøven som beskrevet i Testprosedyre. Prosedyre for nasofaryngeale aspirater: 1. Prøver kan blandes ut i 1 3 ml transportmedium eller saltløsning før behandling. 2. Behandle prøven som beskrevet i Testprosedyre. FRAMGANGSMÅTE Testprosedyre MERKNADER: Reagenser, prøver og BD RSV-enheter må holde romtemperatur (15 30 C) når brukt til testing. Bland godt alle prøver før en alikvot tas ut for ekstrahering. Ikke sentrifuger prøver før bruk med Directigen EZ RSV-testen, siden fjerning av cellemateriale vil påvirke testens sensitivitet på en negativ måte. For å sikre riktig levering, må DispensTube-rørene og reagensflaskene holdes vertikalt (omtrent 2,5 cm fra BD RSV-enhetens prøvebrønn eller DispensTube), samtidig som du forsiktig disp enserer en dråpe om gangen, i rask rekkefølge. 1. Ta en BD RSV-enhet ut av folieposen umiddelbart før bruk. 2. Merk en BD RSV-enhet og en DispensTube-rør for kontrollen eller prøven som skal testes. 3. Sett den merkede DispensTube i det designerte området på arbeidsstasjonen eller stativet. 2

3 4. Bland ekstraksjonsreagens E forsiktig ved invertering. Dispenser 3 dråper i DispensTube. Hold reagensflasken vertikalt (omtrent 2,5 cm fra DispenseTube) når du dispenserer dråper. 5. Bland prøven eller kontrollen godt og behandle som angitt nedenfor: a. For prøver: 1. Vortex eller bland prøven grundig. Skal ikke sentrifugeres. 2. Pipetter 250 µl av prøven i DispensTube. b. For kontroller: 1. Bland forsiktig flaskene med kontroll + og kontroll. 2. Tilsett 6 dråper kontroll + i riktig DispensTube. 3. Tilsett 6 dråper kontroll - i riktig DispensTube. 6. Sett inn en DispensTube-spiss i hver DispensTube. MERK: Ikke bruk spisser fra andre Directigen-produkter. 7. Vortex eller bland grundig. 8. Inverter DispensTube. Mens du holder røret i øvre halvdel, ikke i spissen, klemmer du forsiktig ut tre (3) dråper av den ekstraherte prøven i den aktuelle merkede BD RSV-prøvebrønnen. MERK: Hvis du klemmer på røret ved spissen, kan det føre til at spissen støtes ut og innholdet lekker. 9. Les av resultater etter 15 minutter eller opptil 60 minutter. Positive resultater kan rapporteres så tidlig som etter 5 minutter, så lenge test- og kontrollstreken er synlige. MERK: Hvis du bruker et transportmedium som inneholder gelatin, må resultatene leses etter 15 min. Se Begrensninger for prosedyren. 10. Les av på et godt opplyst sted og noter testresultatet. Kvalitetskontroll: Kvalitetskontroll må utføres i henhold til lokale og/eller nasjonale retningslinjer eller akkrediteringskrav og ditt laboratoriums standard kvalitetskontrollprosedyrer. Det anbefales at brukeren leser CLSI (tidligere NCCLS) EP12-A 17 og 42 CFR (c) 18 for veiledning om riktig kvalitetskontrollpraksis. Hver BD RSV-enhet inneholder innebygde kontroller. Innebygde kontrollegenskaper inkluderer: Intern kontroll: En rødlilla kontrollstrek gir en intern antigenkontroll (positiv internkontroll) som fungerer som reagenskontroll for konjugatet og fanger antistoffet i tillegg til å sikre at det har vært tilstrekkelig kapillarstrømning. Fravær av denne streken indikerer en test som ikke kan tolkes. Testmembrankontroll (negativ internkontroll): Den ikke-reagerende membranoverflaten som omgir de positive internkontroll- og teststrekene er i kontrast med en positiv reaksjon og fungerer derfor som bakgrunnsreferanse for å tolke reaksjonsfarge. Eksterne positive og negative kontroller: Flytende positive (kontroll +) og negative (kontroll ) kontroller leveres også med hvert kit. Disse kontrollene leveres som en tilleggskvalitetskontroll for å angi en positiv eller negativ reaksjon. De eksterne kontrollene skal kjøres som en kvalitetskontrollprosedyre for hvert nye lot eller forsendelse som er mottatt. Dannelsen av den rødlilla streken i vinduet ved siden av T når kontroll + benyttes, indikerer også at membranens RSVantigenbindende egenskap fungerer. Ikke rapporter resultatene hvis enten kontroll + eller kontroll ikke gir riktige resultater. 3

4 De flytende kontrollene kan også brukes til å demonstrere en svakt positiv reaksjon. En svakere positiv reaksjon kan demonstreres ved å fortynne både kontroll + og kontroll sammen i den samme DispensTube (3 dråper kontroll + og 3 dråper kontroll ). Ikke rapporter pasientresultatene hvis forventede kontrollresultater ikke oppnås. Ta kontakt med din lokale BDrepresentant eller teknisk service for hjelp. TOLKNING AV RESULTATER Positiv test (antigen til stede) En synlig rødlilla strek vises i vinduet ved siden av test T og en rødlilla strek ved siden av kontroll C. Dette viser at RSV-antigenet ble påvist i prøven. Bakgrunnsområdet skal være hvitt til lyst rosa. Negativ test (antigen ikke påvist) Ingen rødlilla strek er synlig ved siden av test T. Dette viser at RSV-antigenet ikke kunne påvises i prøven. En rødlilla strek ved siden av kontroll C indikerer riktig utførelse av testprosedyren og reagensene. Bakgrunnsområdet skal være hvitt til lyst rosa. Test som ikke kan tolkes Testen kan ikke tolkes hvis ikke en rødlilla strek vises ved siden av kontroll C eller bakgrunnsfargen forstyrrer tolkningen av testen eller kontrollstrekene. Hvis en test ikke kan tolkes, må den gjentas ved å ta en ny prøve og teste på nytt, eller prøven må sendes til det kliniske laboratoriet for kulturisolasjon. Kan ikke tolkes Rapportering av RESULTATER Positiv Positiv for nærvær av RSV-antigen. Et positivt resultat kan forekomme i fravær av levedyktig virus. Negativ Negativ for nærvær av RSV-antigen. Infeksjon på grunn av RSV kan ikke utelukkes fordi antigenet som finnes i prøven kan være under grensen for påvisning. Kulturbekreftelse av negative prøver anbefales. PROSEDYRENS Begrensninger 1. Directigen EZ RSV-testen kan påvise både levedyktige og ikke-levedyktige RSV-partikler. Directigen EZ RSVtestutførelse beror på antigenmengden og vil kanskje ikke samsvare med vevkultur utført på den samme prøven. Etiologien av respiratorisk infeksjon som er forårsaket av andre mikroorganismer enn respiratorisk syncytialvirus kan ikke fastslås med denne testen. 2. Utilstrekkelig prøveinnsamling, feil prøvehåndtering/-transport eller små mengder virusavgivelse kan gi et falskt negativt resultat. Et negativt testresultat utelukker følgelig ikke muligheten for en RSV-infeksjon. I likhet med alle diagnostiske prosedyrer, skal resultatene som er oppnådd med Directigen EZ RSV-test benyttes i sammenheng med annen klinisk informasjon som legen har tilgang til. 3. I kromatografiske immunanalyser er det mest sannsynlig at svakt synlige streker er falskt positive enn sterkt synlige streker. I likhet med alle diagnostiske prosedyrer, skal resultatene som er oppnådd med Directigen EZ RSV-test benyttes i sammenheng med annen klinisk informasjon som legen har tilgang til. 4. Gyldigheten til Directigen EZ RSV-testen er ikke påvist for identifisering/bekreftelse av vevkulturisolater og skal ikke anvendes i denne egenskapen. 5. Innhold i transportmediet som brukes, skal gjennomgås nøye for å avgjøre om det inneholder gelatin. Hvis det brukes et transportmedium som inneholder gelatin, må resultatene leses etter 15 minutter. Hvis det ventes utover 15 minutter med å lese verdien, kan det føre til at det vises svake streker i testposisjonen (T) i avlesningsvinduet. 6. Amies Gel CultureSwab Plus-medium er ikke kompatibelt med Directigen EZ RSV-testen. Hvis prøver oppbevares i dette mediet over tid, kan det føre til et potensielt falskt negativt resultat. 7. Kryssreaksjon av denne analysen med humant metapneumovirus er ikke studert. 8. Monoklonale antistoffer vil kanskje ikke påvise alle antigene varianter eller nye stammer av RSV. 9. Directigen EZ RSV-testen er ikke blitt evaluert med et tilstrekkelig antall lavere luftveisprøver, nedre nasale prøver, nese-/halspenselprøver og faryngeale penselprøver for å anslå egenskaper ved prøveutførelsen med disse prøvetypene. FORVENTEDE VERDIER Frekvensen av positivitet som er observert ved RSV-testing varierer avhengig av prøvetakingsmetode, benyttet håndterings-/transportsystem, påvisningsmetoden som er brukt, tidspunktet på året, pasientens alder, geografisk sted, og viktigst av alt, lokal sykdomprevalens. Prevalensen som er observert med kulturen under den kliniske studien varierte fra 4,2 til 46,5 %. EGENSKAPER VED PRØVEUTFØRELSEN Egenskapen ved prøveutførelsen for Directigen EZ RSV-testen ble etablert i en flersenterstudie utført ved syv kliniske sentre i RSV-årstiden i De kliniske sentrene lå i Canada og geografisk forskjellige områder i USA. 4

5 Alle prøver som ble samlet inn og transportert til laboratoriet i henhold til det enkelte laboratoriets prosedyre. Hver prøve ble evaluert med Directigen EZ RSV-testen, cellekulturen og laboratoriets rutinemetode (dvs., DFA, EIA). Enhver gjenværende prøve ble arkivert ved eller under 20 ºC. For cellekultur, ble en del av prøven inokulert i de aktuelle cellelinjene for respiratorisk viruskultur i henhold til det enkelte laboratoriets prosedyre. Celler ble undersøkt for synlige cytopatiske effekter. Infiserte celler ble bekreftet for RSV ved immunfluorescerende farging. Prøver som var negative for cytopatiske effekter etter 14 dager, ble farget for negativ bekreftelse med artsspesifikk immunfluorescerende farging. Totalt prøver, bestående av nasofaryngeal vask, nasofaryngealt aspirat, nasofaryngeal cellepørve og nasofaryngeal penselprøve/vask, fra pasienter mistenkt for å ha RSV ble evaluert med Directigen EZ RSV-testen. Klinisk utførelse: For alle de evaluerte prøvene var den helhetlige sensitiviteten og spesifisiteten til Directigen EZ RSV-testen for RSV henholdsvis 80 % og 91 % ved sammenligning med kultur. Den generelle andelen som ikke kunne tolkes var 0 %. Egenskapene ved prøveutførelsen til Directigen EZ RSV sammenlignet med cellekultur for hver prøvetype vises i tabell 1. Egenskapene ved prøveutførelsen sammenlignet med cellekultur etter klinisk laboratorium vises i tabell 2. Tabell 1: Sammendrag av utførelsen av Directigen EZ RSV (EZ)-testen sammenlignet med kultur for alle prøvetyper Kultur/EZ Prøvetype n +/+ /+ a +/ / Sensitivitet (%) (95 % CI) Nasofaryngeal vask (NPW) ,2 (80,7 92,1) Nasofaryngeale aspirater (NPA): Nasofraryngeal penselprøve/vask (NPW) Nasofaryngeal penselprøve (NPS) ,9 (68,2 84,2) ,8 (55,1 85,0) ,7 (47,2 82,7) Spesifisitet (%) (95 % CI) 85,5 (79,8 90,1) 91,6 (87,7 94,5) 95,0 (89,7 98,2) 91,6 (87,3 94,8) (+) = RSV-positiv ( ) = RSV-negativ a PCR-metoden som ble brukt til å teste kulturen negativt, Directigen EZ RSV-positive prøver er ikke godkjent av FDA. Det var 79 prøver som var kulturnegative, Directigen EZ RSV-testpositiv. PCR-testing ble utført på 73 av de 79 prøvene. Totalt 46 av de 73 prøvene var positive med PCR. Tabell 2: Sammendrag av utførelsen av Directigen EZ RSV (EZ)-testen sammenlignet med kultur fra klinisk laboratorium Kultur/EZ Sted Prøvetype n +/+ /+ +/ / Sensitivitet (%) (95 % CI) Laboratium 1 50 % NPW 45 % NPA 5 % NPS (71,5 100) Laboratium % NPW ,9 (67,6 87,7) Laboratium 3 59 % NPA ,9 37 % NPW (77,1 92,3) 4 % NPS Laboratium % NPS ,4 (13,7 78,8) Laboratium 5 73 % NPSW 24 % NPS 2 % NPW 1 % NPA ,4 (62,7 85,5) Laboratium % NPW ,2 (76,3 98,1) Laboratium % NPA ,4 (57,8 82,7) Spesifisitet (95 % CI) 92,6 (83,8 99,4) 82,4 (73,6 89,2) 76,7 (67,3 84,5) 91,4 (86,6 94,9) 94,9 (90,3 97,8) 100 (91,8 100) 95,3 (91,5 97,7) (+) = RSV-positiv ( ) = RSV-negativ Directigen EZ RSV-positive testresultater var fordelt over et område av svakt synlige til sterkt synlige streker. Av de 70 Directigen EZ RSV-positive prøvene med svakt synlig streker, var 39 kulturpositive og totalt 58 var positive med en eller flere metoder (dvs. kultur, DFA, EIA eller PCR a ). Av de 170 Directigen EZ RSV-positive prøvene med synlig streker, var 130 kulturpositive og totalt 166 var positive med en eller flere metoder (dvs. kultur, DFA, EIA eller PCR a ). Av de 106 Directigen EZ RSV-positive prøvene med sterkt synlig streker, var 98 kulturpositive og totalt 106 var positive med en eller flere metoder (dvs. kultur, DFA, EIA eller PCR a ). a PCR-metoden som ble brukt til å teste kulturen negativt, Directigen EZ RSV-positive prøver er ikke godkjent av FDA. Reproduserbarhet: Reproduserbarheten til Directigen EZ RSV-testen ble evaluert på fire steder. Reproduserbarhetspanelet besto av 12 simulerte RSV-prøver og inkluderte fire svakt positive replikater (nær 5

6 påvisningsgrensen [LOD]) og fire replikater på moderat positivt nivå av RSV-antigen utsådd i den negative kontrolldiluenten. Panelet inkluderte også fire simulerte RSV-negative prøver som var den ikke-utsådde negative kontrolldiluenten. Den generelle reproduserbarheten for Directigen RSV-EZ-testen var 99,1 %. Analytiske studier Analytisk sensitivitet (påvisningsgrense [LOD]) Påvisningsgrensen [LOD] for Directigen EZ RSV-testen ble etablert for totalt fem RSV-stammer, to RSV-A- og tre RSV-B-stammer. Type RSV-virusstamme LOD (TCID 50 )* A RSV (lang) 3,95 x 10 3 A RSV (A-2) 7,9 x 10 3 B RSV (9320) 4,05 x 10 2 B RSV (Washington) 7,03 x 10 3 B RSV (vill type) 5,56 x 10 2 * TCID 50 = Vevkulturinfeksjonsdose der 50 % av cellene er lysert. Analytisk spesifisitet Directigen EZ RSV-testen ble evaluert med totalt 99 mikroorganismer (58 bakterier, to gjærsopptyper og 39 virus). Bakterier og gjærsopp ble testet ved konsentrasjoner på 10 8 CFU/mL. Mycoplasma orale ble testet ved >10 7 CFU/mL. Mycoplasma pneumoniae var testet ved >10 6 CCU/mL (CCU color changing units [fargeendringsenheter]). Mycobacterium tuberculosis ble testet ved 7,0 x 10 6 CFU/mL. Virusisolater ble testet ved titreringer på mellom 10 3,5 og 10 9,5 TCID 50 /0,20 ml. Influensavirus ble testet ved titreringer på 10 3,5 til 10 9,5 CEID 50 **/0,20 ml. Ingen av mikroorganismene som er oppført, ga positivt resultat i Directigen EZ RSV-testen. ** CEID 50 = Chick Embryo Infectious Dose ved 50 % av kyllingembryoer infisert. Bakterie- og gjærsoppanel Acinetobacter baumannii Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis (calcoaceticus) Lactobacillus casei Proteus vulgaris Actinobacillus suis Lactobacillus fermentum Pseudomonas aeruginosa Bacteriodes fragilis Lactobacillus plantarum Salmonella choleraesuis Bordetella pertussis Legionella pneumophila subsp minnesota Candida albicans Listeria monocytogenes Serratia marcescens Candida glabrata Moraxella catarrhalis Staphylococcus aureus Cardiobacterium hominis Mycobacterium avium Staphylococcus aureus- Chlamydia psittaci Mycobacterium intracellulare Cowan Chlamydia trachomatis LGVII Mycobacterium tuberculosis Staphylococcus epidermidis Corynebacterium diphtheriae Mycoplasma orale Streptococcus bovis II Eikenella corrodens Mycoplasma pneumoniae Gruppe D Enterococcus faecalis Neisseria gonorrhoeae Streptococcus mutans Enterococcus gallinarum Neisseria meningitidis Streptococcus oralis Escherichia coli Neisseria mucosa Streptococcus pneumoniae Fusobacterium nucleatum Neisseria sicca Streptococcus pyogenes Gardnerella vaginalis Neisseria subflava Gruppe A Haemophilus aphrophilus Peptostreptococcus Streptococcus sanguis Haemophilus influenzae anaerobius Streptococcus sp. Gruppe B Haemophilus parainfluenzae Porphyromonas Streptococcus sp. Gruppe C Haemophilus paraphrophilus asaccharolyticus Streptococcus sp. Gruppe F Kingella kingae Prevotella oralis Streptococcus sp. Gruppe G Veillonella parvula 6

7 Viruspanel Adenovirus, Type 3 Influensa B/GL/1739/54 Adenovirus, Type 5 Influensa B/Hongkong/5/72 Adenovirus, Type 7 Influensa B/Lee/40 Adenovirus, Type 10 Influensa B/Allen/45 Adenovirus, Type 18 Influensa B/Maryland/1/59 Koronavirus Influensa B/Taiwan/2/62 Coxsackievirus Type A9 (Griggs) Influensa C/Taylor/1233/47 Coxsackievirus Type A9 (P.B. Bozek) Meslingevirus Coxsackievirus Type B5 Kusmavirus Coxsackievirus Type B6 Parainfluensa Type 1 Coxsackievirus Type A21 Parainfluensa Type 2 Cytomegalovirus Parainfluensa Type 3 Echovirus Type 2 Rhinovirus Type 1A Echovirus Type 3 Rhinovirus Type 2 Echovirus Type 6 Rhinovirus Type 13 Echovirus Type 11 Rhinovirus Type 15 Herpes Simplex-virus Type 1 Rhinovirus Type 16 Herpes Simplex-virus Type 2 Rhinovirus Type 37 Influensa A (H1N1) Varicella-Zoster-virus Influensa A (H3N2) Forstyrrende stoffer Forskjellige stoffer ble testet i Directigen EZ RSV-testen, inkludert helblod ved 2 %, reseptfrie legemidler og reseptpliktige legemidler. Ingen interferens ble bemerket med analysen for noen av stoffene på nivåene som var testet. Reseptfrie legemidler Tre reseptfrie munnvann, 25 % Tre OTC-halsdråper, 25 % Tre OTC-nesesprayer, 10 % 4-acetamidofenol, 10 mg/ml Acetylsalicylsyre, 20 mg/ml Klorfeniraminmaleat, 5 mg/ml Dekstrometorfan ved 10 mg/ml Reseptpliktige legemidler Zanamavir, 1 mg/ml Amantadin, 500 ng/ml Rimantadin, 500 ng/ml Difenhydramin HCl, 5 mg/ml Pseudoefedrin HCl, 20 mg/ml Guaiakolglyseryleter, 20 mg/ml Ibuprofen, 10 mg/ml Oksymetazolin, 0,05 mg/ml Fenylefrin, 1 mg/ml Ribavirin, 500 ng/ml Synagis, 0,1 mg/ml Albuterolsulfat, 0,083 mg/ml TILGJENGELIGHET Kat. nr. Beskrivelse Directigen EZ RSV 30-testkit BBL CultureSwab Sterile Single Swab (steril enkeltvattpinne), pakke med BBL CultureSwab Liquid Amies (flytende Amies), bøyelig aluminiumstråd, pakke med BBL CultureSwab Liquid Stuart (flytende Stuart), bøyelig aluminiumstråd, pakke med BD Universal Viral Transport 3 ml-flaske, eske med Regular Flocked Swab (vanlig velurisert vattpinne), steril enkeltinnpakket, eske med Minitip Flocked Swab (velurisert vattpinne med minispiss), steril enkeltinnpakket, eske med Flexible Minitip Flocked Swab (bøyelig velurisert vattpinne med minispiss), steril enkeltinnpakket, eske med 100 REFERANSER 1. CDC Update: respiratory syncytial virus activity United States, season. Morbid. Mortal. Weekly Rep. 48: Falsey, A.R. and E. E. Walsh Respiratory syncytial virus infection in adults. Clin. Microbiol. Rev. 13: Englund. J.A., P. A. Peidra, A. Jewell, K. Patel, B. B. Baxter and E. Whimbey Rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infections in immunocompromised adults. J. Clin. Microbiol. 34: Crowcroft, N.S., F. Cutts and M.C. Zambon Respiratory syncytial virus: an underestimated cause of respiratory infection, with prospects for a vaccine. Commun Dis Public Health. 2: Hughes, J.D., D. A. Mann and V. V. Hamparian Detection of respiratory syncytial virus in clinical specimens by viral culture, direct and indirect immunofluorescence, and enzyme immunoassay. J.Clin. Microbiol. 226:

8 6. Ahluwalia, G.J., J. Embree, P. McNicol, B. Law and G. W. Hammond Comparison of nasopharyngeal aspirate and nasopharyngeal swab specimens for respiratory syncytial virus diagnosis by cell culture, indirect immunofluorescence assay, and enzyme-linked immunosorbent assay. J. Clin. Microbiol. 25: Waner, J.L., N. J. Whitehurst, S. J. Todd, H. Shalaby and L. V. Wall Comparison of Directigen RSV with viral isolation and direct immunofluorescence for the identification of respiratory syncytial virus. J. Clin. Microbiol. 25: Kehl, S.C., K. J. Henrickson, W. Hua and F. Jiang Evaluation of the hexaplex assay for detection of respiratory viruses in children. J. Clin. Microbiol. 39: Barenfanger, J., C. Drake, N. Leon, T. Mueller and T. Troutt Clinical and financial benefits of rapid detection of respiratory viruses: an outcomes study. J. Clin. Microbiol. 38: Heikkinen, T., J. Marttila, A. Salmi, and O. Ruuskanen Nasal Swab versus Nasopharyngeal Aspirate for Isolation of Respiratory Viruses. J. Clin. Microbiol. 40: Clinical and Laboratory Standards Institute Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections. CLSI, Wayne, PA. 12. Garner, J. S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U. S. Department of Health and Human Services, Center for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 5th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 14. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Data on file, BD Diagnostics. 16 Smith, T.F Specimen requirements; selection, collection, transport, and processing In S. Spector, R.L. Hodinka, and S.A. Young (eds.), Clinical virology manual, 3rd ed., ASM Press, Washington, D.C. 17. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS) Approved guideline: EP12-A. User protocol for evaluation of qualitative test performance, CLSI, Wayne, PA. 18. Federal Register Quality control for tests of moderate complexity (including the subcategory), high complexity, or any combination of these tests. Code of Federal Regulations 42(3):

9 9

10 m Becton, Dickinson and Company A BENEX Limited 7 Loveton Circle Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Sparks, Maryland USA Shannon, County Clare, Ireland Tel: Fax: ViraTrans is a trademark of Trinity Biotech, PLC. Multitrans is a trademark of Starplex Scientific, Inc. BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company BD Made in China by BD.