Aptima Mycoplasma genitalium-analyse

Transkript

1 Aptima Mycoplasma genitalium-analyse Til in vitro-diagnostisk bruk. Generell informasjon Tiltenkt bruk Oppsummering og forklaring av testen Prosedyrens prinsipper Advarsler og forholdsregler Oppbevaring av reagenser og håndteringskrav Prøvetaking og oppbevaring Panther-systemet Reagenser og materialer Nødvendige materialer som er tilgjengelige separat Alternative materialer Panther-systemets testprosedyre Prosedyrenotater Kvalitetskontroll Tolkning av resultater Begrensninger Ytelsen ved Panther System-analysen Ytelsen i kliniske prøver og konstruerte positive prøver Reproduserbarhet til analysen Analytisk sensitivitet Kryssreaktivitet i nærvær av mikroorganismer Interferens Bibliografi Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 1 AW rev. 002

2 Generell informasjon Tiltenkt bruk Aptima Mycoplasma genitalium-analysen er en in vitro nukleinsyre-amplifikasjonstest (NAAT) til kvalitativ deteksjon av ribosomal RNA (rrna) fra Mycoplasma genitalium på det fullt automatiserte Panther-systemet. Den er beregnet brukt som en hjelp ved diagnostisering av M. genitalium urogenitale infeksjoner hos mannlige og kvinnelige pasienter. Analysen kan brukes som en test: tatt på en klinikk eller tatt på egen hånd med vaginale vattpinneprøver, tatt på en klinikk med endocervikale vattpinneprøver, tatt på en klinikk med cervikale prøver i PreservCyt -løsning, tatt på egen hånd med den første urinen med prøve fra mann og kvinne, tatt på en klinikk med uretrale vattpinneprøver fra menn og tatt på egen hånd med vattpinneprøver for urinveisåpningen. Oppsummering og forklaring av testen M. genitalium et seksuelt overført gram-negativt bakterie som tilhører klassen Mollicutes. M. genitalium, har cellemembran, men ikke cellevegg og lever på eller i epitelialcellene i urinveiene og kjønnsveiene hos menn og kvinner. I populasjoner med mindre risiko er det rapportert en forekomsten av M. genitalium på omtrent 1 % til 3 % hos både menn og kvinner (1, 2, 3, 4). I populasjoner med større risiko er det rapportert en forekomst på 10 % til 41 % hos menn og 7,3 % til 14 % hos kvinner (3, 5, 6, 7). Forekomsten av M. genitalium i populasjoner med større risiko overstiger ofte Neisseria gonorrhoeae og ligner på forekomsten av Chlamydia trachomatis (8, 9, 10, 11, 12). I en gjennomgang av offentliggjorte studier viste infeksjon med M. genitalium seg å være sterkt forbundet med ikke-gonococcal urinrørsbetennelse (NGU) hos menn (13). Hos forsøkspersonen som ble evaluert, ble M. genitalium påvist hos 15 % til 25 % av menn med symptomatisk NGU og hos > 30 % av menn med ikke-klamydia NGU. Hos kvinner har flere studier rapportert at M. genitalium er forbundet med cervicitt (P,03; 8, 12, 14). En fresk metaanalyse viste også at infeksjon med M. genitalium var forbundet med en omtrent dobbel øking i faren for cervicitt, bekkeninfeksjon (PID), prematur fødsel, spontanabort og sterilitet (15). De fleste M. genitalium-infeksjoner oppdages ikke, og infiserte personer er enten asymptomatiske eller har symptomer som ligner på dem som forbindes med andre bakterielle infeksjoner i urinveiene. En evaluering av menn som deltok ved en STI-klinikk i Sverge, viste at 61 % (17/28) av mennene med M. genitalium-infeksjoner var symptomatiske og 93 % (26/28) hadde tegn til urinveisbetennelse (14). Hos kvinner er en M. genitalium-infeksjon ofte asymptomatisk. En evaluering av kvinner som deltok ved en STI-klinikk i Sverge, viste at 77 % (17/22) av kvinnene med M. genitalium-infeksjoner var asymptomatiske selv om mange hadde kliniske tegn på infeksjon; 50 % (11/22) hadde tegn til urinveisbetennelse og/eller cervicitt: 2 hadde tegn til kun urinveisbetennelse, 6 hadde tegn til kun cervicitt og 3 hadde tegn til urinveisbetennelse og cervicitt (16). Hos pasienter med relevante tegn eller symptomer, fokuserer de nåværende behandlingsanbefalingene på klamydia-, gonoré- eller trikhomoninfeksjoner. Optimal antimikrobiell behandling av bakterieassosiert urinveisbetennelse og cervicitit er imidlertid organismespesifikk, behandlingsmetoder som er effektive mot disse organismene er ikke effektive i å kurere M. genitalium-infeksjoner. Fordi M. genitalium er fastidiøs og vanskelig å dyrke anbefaler United States Centers for Disease Control and Prevention at NAAT-er brukes til å påvise M. genitalium (17). Aptima Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 2 AW rev. 002

3 Mycoplasma genitalium-analysen er en NAAT som benytter målinnfanging-, transkripsjonsmediert amplifikasjon (TMA)- og hybridiseringsbeskyttelsesanalyse (HPA)- teknologier til å påvise 16s rrna til M. genitalium. Prosedyrens prinsipper Aptima Mycoplasma genitalium-analysen har tre hovedtrinn som alle skjer i et enkelt rør på Panther-systemet: målinnfanging, transkripsjonsformidlet amplifikasjon (TMA) og hybridiseringsbeskyttelsesanalyse (HPA). Analysen inkluderer en intern kontroll til å kontrollere nukleinsyreinnfanging, -amplifikasjon og -deteksjon, i tillegg til operatør- eller instrumentfeil. Det tas en prøve som overføres til et egnet prøvetransportrør. Transportløsningen i transportrøret frigir rrna og beskytter det mot nedbrytning under oppbevaring. Når Aptima Mycoplasma genitalium-analysen utføres på et laboratorium, isoleres eventuell mål-rrna ved bruk av et spesifikt innfangingsoligomer og magnetiske mikropartikler i en metode som kalles målinnfanging. Innfangingsoligomeret inneholder et sekvens som er komplementær med et bestemt område til målmolekylet samt en streng med deoksyadenosinrester. Under hybridiseringstrinnet bindes det sekvensspesifikke området til innfangingsoligomeret til et bestemt område til målmolekylet. Innfangingsoligomer-målkomplekset fanges deretter ut av løsningen ved å redusere temperaturen til reaksjonen til romtemperatur. Denne temperaturreduksjonen gjør at det skjer en hybridisering mellom deoksyadenosinområdet på innfangingsoligomeret og poly-deoksytymidinmolekyene som er kovalent festet til de magnetiske partiklene. Mikropartiklene, inkludert det fangede målmolekylet som er bundet til dem, trekkes til siden av reaksjonskaret ved bruk av magneter, supernatantet aspireres. Partiklene vaskes for å fjerne rester av prøvematriks som kan inneholder amplifikasjonsinhibitorer. rrna er klar til amplifikasjon etter at målinnfangingstrinnene er fullført. Målamplifikasjonsanalyser er basert på evnen til de komplementære oligonukleotidprimere og spesifikt kunne hybridisere og muliggjøre enzymamplifikasjon av mål-nukleinsyretråder. Hologic TMA-reaksjonen amplifiserer et bestemt området av den lille ribosomale underenheten fra M. genitalium via DNA- og RNA-intermediater og genererer RNAamplikonmolekyler. Deteksjon av rrna-amplifikasjonssekvenser oppnås ved bruk av nukleinsyrehybridisering. En enkelttrådet kjemiluminescent DNA-probe som er komplementær med området til et målamplikon, merkes med et akridiniumester-molekyl. Den merkede DNAproben kombineres med amplikon for å danne stabile RNA:DNA-hybrider. Utvalgsreagensen differensierer hybridisert fra ikke-hybridisert probe som eliminerer signalgenerasjonen fra den ikke-hybridiserte proben. Under deteksjonstrinnet måles det emitterte lyset fra de merkede RNA:DNA-hybridene som fotonsignaler i et luminometer og rapporteres som relative lysenheter (RLU). Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 3 AW rev. 002

4 Advarsler og forholdsregler A. Til in vitro-diagnostisk bruk. B. For å redusere risikoen for ugyldige resultater må du lese hele pakningsvedlegget og Håndbok for Panther-systemet før du utfører denne analysen. C. Bare personell med tilstrekkelig opplæring i bruken av Aptima Mycoplasma genitaliumanalyse og håndtering av potensielt infeksiøst materiale, skal utføre denne prosedyren. Hvis det forekommer søl, skal det desinfiseres umiddelbart i samsvar med egnede prosedyrer for stedet. D. Advarsel: Irriterende stoffer og korrosive stoffer: Unngå at huden, øynene og slimhinnene kommer i kontakt med Auto Detect 1 og Auto Detect 2. Vask med vann hvis disse væskene kommer i kontakt med huden eller øynene. Hvis du søler væske, må du tynne ut væsken med vann før du tørker opp sølet. Se det aktuelle sikkerhetsdatabladet for å finne ytterligere informasjon. E. Se Håndbok for Panther-systemet for å finne flere spesifikke advarsler og forholdsregler. Laboratorierelatert F. Bruk bare medfølgende eller spesifiserte engangs laboratorievarer. G. Bruk rutinemessige laboratorieforholdsregler. Ikke pipetter med munnen. Ikke spis, drikk eller røyk i anviste arbeidsområder. Bruk engangshansker uten pulver, øynevern og laboratoriefrakker når du håndterer prøver og kitreagenser. Vask hendene grundig når du har håndtert prøver og kitreagenser. Merk: Som ved alle reagenssystemer, kan for mye pulver på noen hansker føre til kontaminasjon av åpnede rør. Pulverfrie hansker anbefales. H. Arbeidsflater, pipetter og annet utstyr skal jevnlig dekontamineres med 2,5 % til 3,5 % (0,35 M til 0,5 M) natriumhypoklorittløsning. Rengjør og desinfiser alle arbeidsflatene grundig. I. Kast alle materialene som har vært i kontakt med prøvene og reagensene, iht. de aktuelle nasjonale, internasjonale og regionale forskrifter. J. God standard praksis for molekylærlaboratorier inkluderer miljøovervåkning. Laboratoriemiljøet overvåkes med følgende anbefalte prosedyre: a. Bruk et Aptima Unisex-prøvetakingskit med vattpinne som brukes ved endocervikale vattpinneprøver og uretrale vattpinneprøver hos menn for hver område som skal testes. b. Merk hvert rør godt. c. Ta vattpinnen som skal brukes til prøvetaking (blå vattpinne med grønn skrift), ut av emballasjen. d. Overflateprøver samles ved å fukte prøvetakingspinnen lett med nukleasefritt deionisert vann. e. Før pinnen over overflaten med en opp-ned-bevegelse. Roter pinnen omtrent en halv omdreining mens du fører den over stedet. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 4 AW rev. 002

5 Prøverelatert f. Plasser vattpinneprøven i transportrøret omgående. g. Vær nøye med å knekke vattpinnen på stedet som er merket med en strek; Vær forsiktig slik at innholdet ikke skvetter. h. Påse at korken til vattpinne-transportrøret settes godt på. i. Gjenta trinnene for de andre pinneprøvene. j. Test pinnen(e) med molekylær analyse. K. Utløpsdatoene til prøveoverføringskitene gjelder prøvetaking/overføring av prøver og ikke prøvetesting. Prøver som tas/overføres når som helst før disse utløpsdatoene er gyldige og kan testes hvis de er blitt transportert og oppbevart iht. pakningsvedlegget, selv om dette er etter utløpsdatoen på overføringsrøret. L. Prøvene kan være infeksiøse. Bruk globale forholdsregler når du utfører denne analysen. Riktig håndterings- og avhendingsmetoder skal etableres iht. de gjeldende nasjonale, internasjonale og regionale forskrifter. M. Sørg for tilfredsstillende oppbevaringsforhold under prøveforsendelsen for å sikre prøvens kvalitet. Prøvestabiliteten under prøveforsendelsene, annet enn anbefalt, har ikke blitt evaluert. N. Unngå krysskontaminasjon under håndteringen av prøven. Prøver kan inneholde ekstremt høy konsentrasjon av organismer. Sørg for at prøvebeholderne ikke kommer i kontakt med hverandre, og kast brukte materialer uten å føre dem over åpne beholdere. Bytt hansker hvis de kommer i kontakt med en prøve. O. Når det lages et hull, kan det komme noen væske fra korkene på Aptima-overføringsrørene under visse forhold. Se Panther-systemets testprosedyre for å finne mer informasjon. P. Etter at urintransportrøret er tilført urin, må væskenivået være mellom de to svart indikatorstrekene på røretiketten. Hvis ikke, må prøven avvises. Q. Hvis laboratoriet mottar et transportrør til en vattpinneprøve som ikke har en vattpinne, har to vattpinner, en vattpinne til rengjøring eller en vattpinne som ikke er levert av Hologic, må prøven avvises. Analyserelatert R. Ikke bruk reagenskitet eller kalibratorkitet etter utløpsdatoen. S. Sett på korken, og oppbevar reagensene ved bestemte temperaturer. Analysens ytelse kan påvirkes av bruk av feil oppbevarte analysereagenser. Se Oppbevaring av reagenser og håndteringskrav og Panther-systemets testprosedyre for å finne mer informasjon. T. Ikke kombiner analysereagenser eller væsker uten spesifikk instruksjon. Ikke fyll reagenser eller væsker helt opp. Panther-systemet angir reagensnivåene. U. Unngå mikrobiell og ribonukleasekontaminasjon av reagenser. V. Unngå å utveksle, blande eller kombinere analysereagenser fra kit med ulike lotnumre. Kalibratorene er ikke lotspesifikke, og analysevæskene kan være fra forskjellige lotnumre. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 5 AW rev. 002

6 Oppbevaring av reagenser og håndteringskrav Merk: For informasjon om eventuelle fare- og forholdsregelerklæringer som kan være forbundet med reagenser, se sikkerhetsdatabladbiblioteket på A. Følgende tabell viser oppbevaringsforholdene og stabiliteten for reagenser og kalibratorer. Reagens Uåpnet oppbevaring Åpent kit (rekonstituert) Lagring Stabilitet Amplifikasjonsreagens 2 C til 8 C Enzymreagens 2 C til 8 C Probereagens 2 C til 8 C Intern kontrollreagens 2 C til 8 C Amplifikasjonsrekonstitusjonsløsning 15 C til 30 C 2 C til 8 C 30 dager Enzymrekonstitusjonsløsning 15 C til 30 C 2 C til 8 C 30 dager Proberekonstitusjonsløsning 15 C til 30 C 2 C til 8 C 30 dager Målinnfangingsreagens 15 C til 30 C 15 C til 30 C 30 dager Utvalgsreagens 2 C til 30 C 2 C til 30 C 30 dager Negativ kalibrator 2 C til 8 C Hetteglass til engangsbruk Positiv kalibrator 2 C til 8 C Hetteglass til engangsbruk B. Hvis utvalgsreagensen lagres i kjøleskap, skal den nå romtemperatur før den plasseres på Panther-systemet. C. Kast eventuelle ubrukte rekonstituerte reagenser og arbeidende målinnfangingsreagens (wtcr) som brukes, etter 30 dager, eller etter masterlotets utløpsdato, det som kommer først gjelder. D. Uåpnede kalibratorer er stabile frem til datoen som står på hetteglassene. E. Rekonstituterte reagenser lagret på Panther-systemet har 156 timers stabilitet ombord. Panther-systemet logges hver gang reagensene lastes inn. F. Unngå krysskontaminasjon under håndtering og oppbevaring av reagenser. Sett nye korker på alle rekonsituerte reagenser før de settes til oppbevaring. G. Probereagens og rekonstituert probereagens er fotosensitiv. Beskytt disse reagensene mot lys under oppbevaring. H. Ikke frys reagensene. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 6 AW rev. 002

7 Prøvetaking og oppbevaring Merk: Håndter alle prøver som om de inneholder potensielt infeksiøse stoffer. Bruk globale forholdsregler. Merk: Påse at du unngår krysskontaminasjon under prøvehåndteringstrinnene. Brukt materiale skal for eksempel avhendes uten å føre dem over åpne rør. Hvis tatt på en klinikk og tatt på egen hånd med vaginale vattpinneprøver, tatt på en klinikk med endocervikale vattpinneprøver, tatt på en klinikk med cervikal prøver i PreservCyt - løsning, tatt på egen hånd med den første urinen med prøve fra mann og kvinne, tatt på en klinikk med uretrale vattpinneprøver fra menn og vattpinneprøver fra urinveisåpningen tatt på egen hånd, kan disse testes med Aptima Mycoplasma genitalium-analysen. Analyseytelsen er ikke evaluert med andre prøver enn prøvene som ble tatt med følgende prøvetakingskit: Aptima Unisex-prøvetakingskit med vattpinne som brukes ved endocervikale vattpinneprøver og uretrale vattpinneprøver hos menn Aptima Urine-prøvetakingskit til urinprøver hos menn og kvinner Aptima Vaginal-prøvetakingskit med vattpinne Aptima Multitest-prøvetakingskit med vattpinne til vaginale vattpinneprøver og vattpinneprøver fra urinveisåpningen tatt på egen hånd Aptima-prøveoverføringskit (brukes ved gynekologiske prøver som er tatt i PreservCytløsning) A. Prøvetaking Se pakningsvedlegget til det aktuelle prøvetakingskitet for å finne spesifikke prøvetakingsinstruksjoner. B. Transport og oppbevaring av prøver før testing: 1. Vattpinneprøver Etter prøvetaking kan vattpinneprøver lagres i transportrør ved 2 C til 30 C i inntil 60 dager. 2. Urinprøver a. Før urinprøver kan testes, må urinen overføres til et Aptima-urintransportrør iht. instruksjonene i pakningsvedlegget som følger med urinprøvetakingskitet. b. Etter prøvetaking kan den primære prøvetakingsbeholderen oppbevares ved 2 C til 30 C i inntil 24 timer før urinen overføres til transportrøret. c. Behandlet urin i transportrør lagres i transportrør ved 2 C til 30 C i inntil 30 dager (etter overføring). 3. Prøver tatt i PreservCyt-løsning a. Før gynekologiske prøver i PreservCyt-løsning kan testes, må volumet overføres til et Aptima-prøveoverføingsrør iht. instruksjonene i pakningsvedlegget som følger med urinprøvetakingskitet. b. Etter prøvetakingen kan gynekologiske prøver i hetteglass med PreservCyt-løsning, oppbevares ved 2 C til 30 C i inntil 30 dager før volumet overføres til Aptima prøveoverføringsrøret. c. Behandlede gynekologiske prøver i overføringsrør lagres i transportrør ved 2 C til 30 C i inntil 60 dager (etter overføring). Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 7 AW rev. 002

8 C. Oppbevaring av prøver etter testing: 1. Prøver som er analysert, må oppbevares vertikalt i et stativ. 2. Prøvetransportrørene skal dekkes med ny, ren plastfilm eller foliesperre. 3. Hvis de analyserte prøvene må sendes, skal den penetrerbare korken fjernes og nye ikke-penetrerbare korker plasseres på prøvetransportrørene. Hvis prøvene må sendes til et annet anlegg for å testes, anbefales det at temperaturene opprettholdes. Før korkene fjernes, må prøvetransportrørene sentrifugeres i 5 minutter ved 420 RCF (relativ sentrifugalkraft) slik at all væske havner i bunnen av røret. Unngå skvetting eller krysskontaminasjon. Prøvetransport Sørg for prøveoppbevaringsforholdene som beskrevet i avsnittet Prøvetaking og oppbevaring. Merk: Prøvene skal sendes i henhold til gjeldende statlige, internasjonale og regionale transportregler. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 8 AW rev. 002

9 Panther-systemet Reagenser for Aptima -analyse er oppført nedenfor for Panther-systemet. Reagensidentifikasjons-symbolene er også oppført ved siden av reagensnavnet. Reagenser og materialer Merk: For informasjon om eventuelle fare- og forholdsregelerklæringer som kan være forbundet med reagenser, se sikkerhetsdatabladbiblioteket på Aptima Mycoplasma genitalium-analysekit 100 tester (2 esker) (Kat. nr. PRD-03374) Kalibratorkit selges separat. Se de enkelte katalogeskenumrene nedenfor. Aptima Mycoplasma genitalium-kit i kjøleskap (oppbevares ved 2 C til 8 C ved mottak) Symbol Komponent Mengde A E P IC Aptima Mycoplasma genitaliumamplifikasjonsreagens Ikke-infeksiøse nukleinsyrer tørket i bufret løsning som inneholder < 5 % fyllmiddel. Aptima Mycoplasma genitalium-enzymreagens Revers transkriptase og RNA polymerase tørket i HEPES bufret løsning som inneholder < 10 % fyllreagens. Aptima Mycoplasma genitalium-probereagens Kjemiluminescent DNA-prober tørket i suksinatbufret løsning som inneholder < 5 % detergent. Aptima Mycoplasma genitalium intern kontroll Ikke-infeksiøs RNA-transkript i bufret løsning som inneholder < 5 % detergent. 1 hetteglass 1 hetteglass 1 hetteglass 1 hetteglass Aptima Mycoplasma genitalium-romtemperatureske (oppbevares ved 15 C til 30 C ved mottak) Symbol Komponent Mengde AR ER PR Aptima Mycoplasma genitaliumamplifikasjonsrekonstitusjons-løsning Vannholdig løsning som inneholder konserveringsmidler. Aptima Mycoplasma genitaliumenzymrekonstitusjonsløsning HEPES bufret løsning som inneholder surfaktant og glyserol. Aptima Mycoplasma genitaliumproberekonstitusjonsløsning Suksinatbufret løsning som inneholder < 5 % detergent. 1 flaske 1 flaske 1 flaske Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 9 AW rev. 002

10 Aptima Mycoplasma genitalium-romtemperatureske (oppbevares ved 15 C til 30 C ved mottak) (fortsatt) Symbol Komponent Mengde S TCR Aptima Mycoplasma genitalium-utvalgsreagens 600 mm boratbufret løsning som inneholder surfaktant. Aptima Mycoplasma genitaliummålinnfangingsreagens Bufret løsning som inneholder innfangingsoligomerer og magnetiske partikler. 1 flaske 1 flaske Rekonstitusjonskrager 3 Strekkodeark for masterlot 1 ark Aptima Mycoplasma genitalium-kalibratorkit (PRD-03393) (oppbevares ved 2 C til 8 C ved mottak) Symbol Komponent Mengde NCAL PCAL Aptima Mycoplasma genitalium negativ kalibrator Bufret løsning som inneholder < 5 % detergent. Aptima Mycoplasma genitalium positiv kalibrator Ikke-infeksiøs Mycoplasma genitalium in vitro RNAtranskript i bufret løsning som inneholder < 5 % detergent. 5 hetteglass 5 hetteglass Nødvendige materialer som er tilgjengelige separat Merk: Materialer tilgjengelig fra Hologic har oppførte katalognumre, med mindre annet er angitt. Kat. nr. Panther-systemet Aptima-analysevæskekit inneholder Aptima vaskeoppløsning, Aptima buffer for deaktiveringsvæske og Aptima oljereagens Aptima automatisk detektorkit (1000 tester) (1000 tester) Multirørenheter (MTU-er) Panther avfallsposekit Panther avfallsbeholder, deksel Eller Panther-systemets kjøringskit inneholder multirørenheter, avfallsposer, avfallsbeholderdeksler, analysevæsker og autosøk Spisser, 1000 µl ledende, væskeføling Aptima-prøveoverføringskit som brukes med prøver i PreservCyt -løsning (5000 tester) (Tecan) C Aptima Vaginal-prøvetakingskit med vattpinne Aptima Multitest-prøvetakingskit med vattpinne PRD Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 10 AW rev. 002

11 Aptima Unisex-prøvetakingskit med vattpinne som brukes ved endocervikale vattpinneprøver og uretrale vattpinneprøver hos menn Aptima Urine-prøvetakingskit med vattpinne Eller transportrør til Aptima Urine-prøver Klorin, 5 % til 7 % (0,7 M til 1,0 M) natriumhypoklorittløsning Pulverfrie engangshansker Aptima penetrerbare korker Reservereagenskorker til 100-test-kitene Rekonstitusjonsflasker for amplifikasjons- enzym- og probereagenser TCR og utvalgsreagens CL0041 (100 korker) (100 korker) Plastbelagte overtrekk for laboratoriebenker Sentrifuge Alternative materialer Kat. nr. Hologic-klorinforsterker til rengjøring til runtinemessig rengjøring av overflater og utstyr Ekstra ikke-penetrerbare korker A Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 11 AW rev. 002

12 Panther-systemets testprosedyre Merk: Se Håndbok for Panther-systemet for mer informasjon om Panthersystemprosedyren. A. Klargjøre arbeidsområdet 1. Rengjør arbeidsflatene der reagenser skal tilberedes. Tørk av arbeidsflatene med 2,5 % til 3,5 % (0,35 M til 0,5 M) natriumhypoklorittløsning. La natriumhypoklorittløsningen være i kontakt med overflatene i minst 1 minutt, og følg deretter opp med deionisert (DI) vann. Ikke la natriumhypoklorittløsningen tørke inn. Dekk til benkeflatene med rene, plastbelagte, absorberende laboratoriebenktrekk. 2. Rengjør separate arbeidsflatene der reagenser skal prepareres. Bruk prosedyren som beskrives ovenfor (trinn A.1). B. Reagensrekonstitusjon/preparering av et nytt kit Merk: Rekonstitusjon av reagenser skal utføres før du starter arbeidet på Panthersystemet. 1. Kombiner den lyofiliserte reagensen med den egnede rekonstitusjonsløsningen for å rekonstituere amplifikasjons-, enzym- og probereagenser. Hvis de har vært oppbevart nedkjølt, skal rekonstituerte løsninger nå romtemperatur før de brukes. a. Hent frem de lyofiliserte reagensene (2 C til 8 C) og tilsvarende rekonstitusjonsløsningene (15 C til 30 C) fra oppbevaring. b. Før rekonstitusjonskragen festes, skal du kontrollere at rekonstitusjonsløsningen og den lyofiliserte reagensen har samsvarende etikettfarger. c. Kontroller lot numrene på strekkodearket for masterlotet for å sikre at riktige reagenser blir sammenkoblet. d. Åpne det lyofiliserte reagensglasset ved å fjerne metallforseglingen og gummistopperen. Sett enden med hakk inn i rekonstitusjonskragen (svart) på hetteglasset (Figur 1, trinn 1). e. Åpne den samsvarende rekonstitusjonsflasken, og legg korken på en ren, tildekket arbeidsflate. f. Sett flasken med rekonstitusjonsløsning på en stabil flate (for eksempel en benk). Deretter snus den frysetørkede reagensflasken over flasken med rekonstitusjonsløsning, og sett kragen fast på flasken med rekonstitusjonsløsning (Figur 1, trinn 2). g. Snu de monterte flaskene langsomt (hetteglasset festet til flasken med løsning) for å la løsningen tømmes inn i hetteglasset (Figur 1, trinn 3). h. Plukk opp flaskene som er satt sammen, og virvle dem forsiktig. Unngå å danne skum mens flasken virvles (Figur 1, trinn 4). i. Vent på at den lyofiliserte reagensen går inn i løsningen. Etter at den lyofiliserte reagensen er i løsningen, skal blandingen virvles forsiktig. Deretter snus de samlede flaskene på nytt med en helling på 45º for i minimere skumdannelse (Figur 1, trinn 5). Vipp de monterte flaskene langsomt på nytt for å la all løsning tømmes tilbake inn i rekonstitusjonsløsningsflasken. j. Fjern rekonstitusjonskragen og hetteglasset forsiktig (Figur 1, trinn 6). Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 12 AW rev. 002

13 k. Sett korken på flasken. Noter ned initialene til operatøren og rekonstitusjonsdatoen på etiketten (Figur 1, trinn 7). l. Kast rekonstitusjonskragen og glassflasken forsiktig (Figur 1, trinn 8). Advarsel: Unngå å lage skum når reagensene rekonstitueres. Skum vil ødelegge Panther-systemets nivåføling. Figur 1. Reagensrekonstitusjonsprosess 2. Gjør følgende for å preparere wtcr: a. Hent frem de aktuelle flaskene med TCR (15 C til 30 C) og tilsvarende intern kontrollreagens (2 C til 8 C) fra oppbevaring. b. Kontroller lot nummeret på TCR-flasken og den interne kontrollreagensflasken for å påse at det samsvarer med lot nummeret på strekkodearket for masterlot. c. Åpne flasken med TCR, og sett korken på en ren, tildekket arbeidsflate. d. Åpne flasken med intern kontrollreagens, og tøm hele innholdet i flasken med TCR. Forvent at det blir litt igjen i den interne kontrollflasken. e. Sett korken på flasken med TCR, og virvle den forsiktig for å blande innholdet. Unngå at det dannes skum under dette trinnet. f. Noter ned initialene til operatøren og den gjeldende datoen på etiketten. g. Kast den interne kontrollreagensflasken og korken. 3. Preparere utvalgsreagens a. Ta utvalgsreagensen ut fra oppbevaring (2 C til 30 C). Kontroller lot nummeret på utvalgsreagensflasken for å påse at det samsvarer med lot nummeret på strekkodearket for masterlot. b. Hvis utvalgsreagensen lagres i kjøleskap, skal den nå romtemperatur før den plasseres på Panther-systemet. c. Noter ned initialene til operatøren og den gjeldende datoen på etiketten. Merk: Bland den grundig ved å snu den forsiktig før den settes inn i systemet. Unngå å lage skum når reagensene snus. C. Preparere reagens for tidligere preparerte reagenser 1. Ta ut de tidligere tilberedte reagensene fra oppbevaringen (2 C til 8 C). Amplifikasjons-, enzym- og probereagensene som er rekonstituert tidligere, må nå romtemperatur (15 C til 30 C) før analysen startes. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 13 AW rev. 002

14 2. Hvis den rekonstituerte probereagensen inneholder bunnfall ved romtemperatur (15 C to 30 C), skal flasken med kork, varmes opp til en temperatur som ikke overstiger 62 C i 1 til 2 minutter. Etter oppvarmingstrinnet kan probereagensen brukes selv om det finnes rester av bunnfall. Bland probereagensens ved å snu opp ned. Unngå å lage skum når reagensene snus. 3. Snu amplifikasjons-, enzym- og probereagensene for å blande grundig før de lastes på systemet. Unngå å lage mye skum når reagensene snus. 4. Ikke fyll reagenser helt opp. Panther-systemet vil gjenkjenne og avvise flasker som har blitt overfylt. D. Preparere kalibrator Ta kalibratorene ut av oppbevaring (2 C til 8 C), og la kalibratorene nå 15 C til 30 C før prosessering. E. Prøvehåndtering 1. La prøvene nå 15 C til 30 C før prosessering. 2. Ikke virvelblande prøvene. 3. Se for å bekrefte at hvert prøverør tilfredsstiller ett av følgende kriterier: a. Tilstedeværelse av en enkel blå Aptima-prøvetakingsvattpinne i et Unisexprøvetransportrør. b. Tilstedeværelse av en enkel rosa Aptima-prøvetakingsvattpinne i et prøvetransportrør med Multitest- eller Vaginal-vattpinne. c. At den endelige mengden urin ligger mellom de svarte påfyllingsstrekene på transportrøret med urinprøve. d. At det mangler en vattpinne eller prøvetakingenhet i Aptima-prøvetransportrøret ved PreservCyt -løsningsprøvene. e. Hvis prøven ikke tilfredsstiller kriteriet, må prøven avvises. 4. Inspiser prøverørene før de settes inn på prøvestativet: a. Hvis et prøverør har bobler mellom væsken og korken, skal røret sentrifugeres i 5 minutter 420 RCF for å eliminere bobler. b. Hvis det finnes et mindre volum i prøverøret enn det som vanligvis observeres når prøvetakingsinstruksjonene følges, skal røret sentrifugeres i 5 minutter ved 420 RCF for å sikre at det ikke finnes væske i korken. c. Hvis det finnes bunnfall i urinprøverøret, skal prøven varmes opp til 37 C i inntil 5 minutter. Merk: Hvis ikke trinnene 4a-4c følges, kan det føre til at det strømmer væske fra prøverørskorken. Merk: Inntil 3 separate alikvoter kan testes for hvert prøverør. Forsøk på at pipettere flere enn 3 alikvoter fra prøverøret kan føre til prosesseringsfeil. F. Preparere systemet 1. Sett opp systemet i henhold til instruksjonene i Håndbok for Panther-systemet og Prosedyrenotater. 2. Last prøvene inn på prøvestativet. 3. Når alle prøvene er lastet inn, festes prøveholderen til prøvestativet, og prøvene lastes inn i prøvebrønnen. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 14 AW rev. 002

15 4. Gjenta trinn 2 til 3 for neste prøvestativ. Prosedyrenotater A. Kalibratorer 1. Aptima positiv kalibrator til Mycoplasma genitalium og Aptima negativ kalibrator til Mycoplasma genitalium-rør kan settes inn i en hvilken som helst stativposisjon eller en hvilken som helst prøvebrønnsbane på Panther-systemet. Prøvepipetteringen vil begynne når ett av følgende to forhold er oppfylt: a. Et par kalibratorer er i ferd med å prosesseres på systemet. b. Gyldige resultater for kalibratorene er registrert på systemet. 2. Når kalibratorrørene har blitt pipettert og prosesseres for Aptima Mycoplasma genitalium-analysereagenskitet, kan prøvene testes med det tilknyttede, rekonstituerte kitet i inntil 48 timer med mindre: a. Kalibratorresultatene er ugyldige. b. Det tilknyttede analysereagenskitet er fjernet fra systemet. c. Det tilknyttede analysereagenskitet har overskredet stabilitetsgrensene. 3. Hvert kalibratorrør kan brukes én gang. Forsøk på å bruke røret mer enn én gang kan føre til prosesseringsfeil. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 15 AW rev. 002

16 Kvalitetskontroll En kjøring eller et prøveresultat kan ugyldiggjøres av en operatør hvis tekniske, operatørbaserte eller instrumentbaserte vanskeligheter observeres ved utførelsen av analysen og er dokumentert. Alle resultater som ugyldiggjøres av instrumentet eller operatøren, må testes på nytt. Analysekalibrering En analysekalibrering må fullføres for å generere gyldige resultater. En positiv og negativ kalibrator kjøres to ganger hver gang et reagenskit settes inn i Panther-systemet. Pantherhåndboken oppgir 24-timers kalibratorstabilitet, men Aptima Mycoplasma genitalium-analysen er imidlertid gyldig i inntil 48 timer. Programvaren til Panther-systemet varsler operatøren når et nytt kalibratorsett er nødvendig. Under prosessering blir kriteriene for godkjenning av kalibratoren automatisk verifisert av programvaren til Panther-systemet. Hvis to replikater er ugyldige ved enten den positive eller negative kalibratoren, ugyldiggjøres kjøringen automatisk av programvaren. Prøver i en ugyldiggjort kjøring må testes på nytt med en nytt tilberedt kalibratorsett. Merk: Kontakt Hologic teknisk support for å få hjelp med kalibratorer med feilflagg utenfor området. Intern kontroll Hver prøve inneholder en intern kontroll (IC). Under prosesseringen blir akseptkriteriene for den interne kontrollen automatisk verifisert av programvaren til Panther-systemet. Hvis et intern kontroll-resultat er ugyldig, blir prøveresultatet ugyldiggjort. Hver prøve med et ugyldig intern kontroll-resultat må testes på nytt. Programvaren til Panther-systemet er utarbeidet for å verifisere prosesser på en nøyaktig måte når prosedyrene utføres i henhold til instruksjonene i dette pakningsvedlegget og Håndbok for Panther-systemet. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 16 AW rev. 002

17 Tolkning av resultater Panther-systemet bestemmer testresultatene automatisk. Testresultatet kan være negativt, positivt eller ugyldig. Tolkning av resultatene finnes i Tabell 1. Prøver med et ugyldige testresultater må testes på nytt. Tabell 1: Resultattolkning Resultater Tolkning Negativ Positiv Ugyldig M. genitalium rrna ble ikke påvist. M. genitalium rrna ble påvist. Det var en feil i genereringen av resultatet. Tre prøver må testes på nytt. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 17 AW rev. 002

18 Begrensninger A. Bruk av denne analysen er begrenset til personell som har opplæring i prosedyren. Hvis man unnlater å følge instruksjonene i dette pakningsvedlegget, kan dette føre til feil resultater. B. Påvirkningen som bruken av tampong, utskylling og prøvetakingsvariabler har, er ikke evaluert i forbindelse med deres påvirkning ved deteksjon av M. genitalium. C. Prøvetaking av urin, vaginal vattpinne og PreservCyt -løsning er ikke beregnet på å erstatte cervikale undersøkelser og endocervikale prøver for å diagnostisere urogentiale infeksjoner hos kvinner. Pasienter kan ha cervicitt, uretritt, urinveisbetennelser eller vaginale infeksjoner som har andre årsaker eller infeksjoner samtidig med andre agenser. D. Denne analysen er testet kun ved bruk av prøvetypene som indikeres. Ytelsen med andre prøvetyper er ikke evaluert. E. Pålitelige resultater er avhengig av tilfredsstillende prøvetaking, transport, oppbevaring og prosessering. Fordi transportsystemet som brukes ved denne analysen, ikke tillater mikroskopisk vurdering av prøvens tilstrekkelighet, må klinikerene har riktig opplæring i prøvetakingsteknikker. Se Prøvetaking og oppbevaring for å finne instruksjoner. Se den aktuelle bruksanvisningen for å finne detaljert informasjon. F. Mislykket eller vellykket behandling kan ikke avgjøres med Aptima Mycoplasma genitalium-analysen fordi nukleinsyre kan vedbli etter egnet antimikrobiell behandling. G. Resultatene fra Aptima Mycoplasma genitalium-analysen må også tolkes sammen med andre kliniske data som klinikeren har tilgjengelig. H. Et negativt resultat utelukker ikke muligheten for infeksjon fordi resultatene er avhengig av tilstrekkelig prøvetaking. Testresultatene kan påvirkes av feil prøvetaking, teknisk feil, rot med prøvene eller målnivåer som ligger under deteksjonsgrensen til analysen. I. Aptima Mycoplasma genitalium-analysen gir kvalitative resultater. Derfor kan det ikke trekkes en korrelasjon mellom styrken på det positive analysesignalet og antall organismer i en prøve. J. Ytelsen ved bruk av kvinnelige prøvetyper er ikke fastslått hos gravide kvinner. K. Ytelsen til analysen er ikke evaluert hos kvinner på under 19 år. L. Hvis en prøve har et lite antall M. genitalium-organismer, kan det skje en ujevn fordeling av disse organismene, noe som kan påvirke muligheten til å påvise M. genitalium rrna i materialet som er tatt. Hvis negative resultater fra prøven ikke passer inn i det kliniske inntrykket, kan det bli nødvendig med ny prøve. M. Kunder må foreta en uavhengig validering av en LIS-overføringsprosess. N. Ytelsen til gynekologiske prøver tatt i hetteglass med PreservCyt-løsning og prosessert med ThinPrep -systemene, er ikke fastslått for Aptima Mycoplasma genitalium-analysen. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 18 AW rev. 002

19 Ytelsen ved Panther System-analysen Ytelsen i kliniske prøver og konstruerte positive prøver Ytelsen til Aptima Mycoplasma genitalium-analysen ble sammenlignet med en annen alternativ mål-m. genitalium TMA-analyse. Det ble tatt tilsammen 1422 prøve fra forsøkspersoner i Europa, Canada og USA ved bruk av Aptima-prøvetakingskit. Kliniske prøver og prøver som ble tatt på egen hånd med vaginale vattpinner (n=173), endocervikale vattpinner (n=177), PreservCyt -væskebaserte cytologiprøver (n=352), urinprøver fra kvinner (n=302), urinprøver fra kvinner (n=133), uretrale vattpinner fra menn (n=136), vattpinneprøver fra urinveisåpningen tatt på egen hånd (n=149), ble testet med begge analysene på stedet. I tillegg ble konstruerte kliniske prøver av hver prøvetype, unntatt urin fra menn, tilsatt M. genitalium-helcelle-lysat tatt med i studien. M. genitalium-konsentrasjonen til de tilsatte prøvene var 0,1 CFU/ml (0,025 CFU per reaksjon), som representerer en halv logg under den minste mulig konsentrasjon av M. genitalium i en klinisk prøve. De positive og negative samsvarene ble regnet for hver type der de kliniske og konstruerte prøvene ble kombinert som vist i Tabell 2. Tabell 2: Positiv og negativ samsvar til Aptima Mycoplasma genitalium-analysen (AMG) ble sammenlignet med en annen alternativ mål-m. genitalium TMA-analyse (ALT TMA) Prøvetype Vattpinner for prøver fra urinveisåpningen N AMG + AMG + AMG - AMG - Positivt samsvar Negativt samsvar Generelt samsvar ALT TMA + ALT TMA - ALT TMA + ALT TMA - (95 % KI) (95 % KI) (95 % KI) 149* Urin fra mann Uretral-vattpinne fra mann 136* Urin fra kvinne 302* PreservCyt-væskebasert cytologiprøve 352* Vaginal vattpinne 173* ,0 % 97,6 % 98,7 % (94,3-100 %) (91,4-99,4 %) (95,2-99,6 %) 100,0 % 98,9 % 99,2 % (92,1-100 %) (93,8-99,8 %) (95,9-99,9 %) 100,0 % 100 % 100 % (91,0-100 %) (96,2-100 %) (97,3-100 %) 100,0 % 100,0 % 100 % (93,9-100 %) (98,4-100 %) (98,7-100 %) 100,0 % 99,7 % 99,7 % (93,9-100 %) (98,1-99,9 %) (98,4-100 %) 100,0 % 98,1 % 98,8 % (94,7-100 %) (93,3-99,5 %) (95,9-99,7 %) 100 % 100 % 100 % Endocervikal vattpinne 177* (94,3-100 %) (96,7-100 %) (97,9-100 %) * Antall tilsatte prøver: Vattpinner for urinveisåpningen = 49; Uretrale vattpinner = 25; Urinprøver fra kvinner = 49; PreservCyt-prøver = 52; Vaginale vattpinner = 46; Endocervikale vattpinner = 50. Reproduserbarhet til analysen Reproduserbarheten til Aptima Mycoplasma genitalium-analysen ble evaluert ved bruk av Panther-systemet. Testing ble utført i løpet av tre dager ved bruk av to loter med analysereagenser og tre operatører på tre Panther-systemer. Reproduserbarhetspaneler ble opprettet ved å tilsette prøvetransportmidlet (STM) en passende mengde M. genitalium RNAtranskript. De endelige M. genitalium RNA-konsentrasjonene var 0 og 100 kopier/ml. Tabell 3 viser for hvert panelmedlem, S/CO-data som middelverdi, standardavvik (SD) og variasjonskoeffisient (CV) mellom operatører, mellom instrumenter, mellom dager, mellom loter, mellom kjøringer og generelt (samlet). Tabell 4 viser positiviteten og prosentvis samsvar Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 19 AW rev. 002

20 til panelene. Det fantes ingen falske negative resultater og ett falskt positivt resultat i studien. Prøver med gyldige resultater ble tatt med i analysene. Tabell 3: Reproduserbarhetsstudie: Reproduserbarheten til Aptima Mycoplasma genitalium-analysen etter panel Panel N S/CO middelverdi Mellom operatører Mellom instrumenter Mellom dager Mellom loter Mellom kjøringer CV CV CV CV SD (%) SD (%) SD (%) SD (%) SD CV (%) SD Innen kjøringer CV (%) SD Samlet Negativt panel , ,00 31, , , Positivt panel ,73 0,22 0,85 0,30 1, ,12 0,45 0,80 3,11 1,23 4,79 1,52 5,90 N = antall; SD = standardavvik; CV = variasjonskoeffisient; S/CO = forhold mellom signal og grenseverdi. Merk: Variabilitet fra noen faktorer kan være numerisk negative, noe som kan forekomme hvis variabiliteten som er forårsaket av disse faktorene, er svært liten. Når dette skjer, SD = 0 og CV = 0 %. CV (%) Tabell 4: Aptima Mycoplasma genitalium-analyse Panel Beskrivelse Prosent Samsvar Beskrivelse Gyldig N % Positiv % Samsvar Negativt panel ,07 % (0,01-0,39) 99,93 % (99,61-99,99) Positivt panel % (99,73-100) 100 % (99,73-100) Analytisk sensitivitet Sensitivitetspanelene som inneholder 0,01 CFU/ml i STM, ble preparert med M. genitalium-lysat. Testing viser 100 % positivitet ved 0,01 CFU/ml. Kryssreaktivitet i nærvær av mikroorganismer Spesifisitet Spesifisiteten til Aptima Mycoplasma genitalium-analysen ble evaluert ved å teste forskjellige mikroorganismer, inkludert vanlig flora i urogenitalsystemet, opportunistiske organismer og nær beslektede organismer. Testing ble utført i STM med 20 replikater i hvert isolat. Tabell 5 inneholder en liste med organismer og konsentrasjonene som ble testet. Ingen kryssreaktivitet ble observert i Aptima Mycoplasma genitalium-analysen ved noen av organismene som ble testet. Sensitivitet Sensitiviteten til Aptima Mycoplasma genitalium-analysen ble evaluert ved å teste de samme organismene (Tabell 5) i STM som ble tilsatt M. genitalium-lysat der den endelige konsentrasjonen var 0,25 CFU/ml (20 replikater av hvert isolat). Ingen interferens ble observert i nærvær av mikroorganismene som ble testet. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 20 AW rev. 002

21 Tabell 5: Mikroorganismer testet i Aptima Mycoplasma genitalium-analysen på Panther-systemet Mikroorganisme Konsentrasjon Mikroorganisme Konsentrasjon Acinetobacter lwoffii 1x10 6 CFU/ml Humant papillomavirus type 16 (SiHa-celler) 1x10 4 celler/ml Actinomyces israelii 1x10 6 CFU/ml Klebsiella pneumoniae 1x10 6 CFU/ml Alcaligenes faecalis 1x10 6 CFU/ml Lactobacillus acidophilus 1x10 6 CFU/ml Atopobium vaginae 1x10 6 CFU/ml Lactobacillus crispatus 1x10 6 CFU/ml Bacteroides fragilis 1x10 6 CFU/ml Leptotrichia buccalis 1x10 6 CFU/ml Bifidobacterium adolescentis 1x10 6 CFU/ml Listeria monocytogenes 1x10 6 CFU/ml Campylobacter jejuni 1x10 6 CFU/ml Mobiluncus curtisii 1x10 6 CFU/ml Candida albicans 1x10 6 CFU/ml Mycoplasma hominis 1x10 6 CFU/ml Chlamydia trachomatis 1x10 6 CFU/ml Mycoplasma pneumoniae 250 CFU/ml Clostridium difficile 1x10 6 CFU/ml Neisseria gonorrhoeae 1x10 6 CFU/ml Corynebacterium genitalium 1x10 6 CFU/ml Peptostreptococcus magnus 1x10 6 CFU/ml Cryptococcus neoformans 1x10 6 CFU/ml Prevotella bivia 1x10 6 CFU/ml Cytomegalovirus 1x10 5 TCID 50/ml Propionibacterium acnes 1x10 6 celler/ml Enterobacter cloacae 1x10 6 CFU/ml Proteus vulgaris 1x10 6 CFU/ml Enterococcus faecalis 1x10 6 CFU/ml Pseudomonas aeruginosa 1x10 6 CFU/ml Escherichia coli 1x10 6 CFU/ml Staphylococcus aureus 1x10 6 CFU/ml Fusobacterium nucleatum 1x10 6 CFU/ml Staphylococcus epidermidis 1x10 6 CFU/ml Gardnerella vaginalis 1x10 6 CFU/ml Streptococcus agalactiae 1x10 6 CFU/ml Haemophilus ducreyi 1x10 6 CFU/ml Streptococcus pyogenes 1x10 6 CFU/ml Herpes simplex virus type 1 2,5x10 6 TCID 50/ml Trichomonas vaginalis 1x10 6 CFU/ml Herpes simplex virus type 2 2,5x10 6 TCID 50/ml Ureaplasma parvum 1x10 6 CFU/ml HIV-1 1x10 6 kopier/ml Ureaplasma urealyticum 1x10 6 celler/ml Interferens STM ble tilsatt endogene og eksogene stoffer enkeltvis der den endelige konsentrasjonen var 1 % (vol/vol eller vekt/vol) for personlige glidemidler, personlige deodoranter, sæddrepende midler og soppdrepende midler, 0,3 % for mageslimhinne fra gris og 5 % for helblod. Urinanalysekontroll ble fortynnet i urintransportmidlet (UTM) istedenfor urin for å teste virkningen av urinmetabolittene KOVA-Trol I High Abnormal med urobilinogen. Dette humant urinbaserte urinanalysekontrollmaterialet inneholder mulige interferenter som protein (albumin), bilirubin, glukose, ketoner, røde blodceller, nitritt, urobilinogen og leukocytter. Ren eddiksyre ble testet ved å tilsette den til PreservCyt -STM (1 % sluttkonsentrasjon). Ingen interferens ble observert ved noen av stoffene som ble tilsatt M. genitalium-helcellelysat med en endelig konsentrasjon på 0,25 CFU/ml og testet i Aptima Mycoplasma genitaliumanalysen. Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 21 AW rev. 002

22 Bibliografi 1. Andersen, B., I. Sokolowski, L. Østergaard, J. K., Møller, F. Olesen, and J. S. Jensen Mycoplasma genitalium: prevalence and behavioural risk factors in the general population. Sex. Transm. Infect. 83: doi: /sti: Manhart, L. E., K. K. Holmes, J. P. Hughes, L. S. Houston, and P. A. Totten Mycoplasma genitalium among young adults in the United States: an emerging sexually transmitted infection. Am. J. Public Health. 97: McGowin, C. L., and C. Anderson-Smits Mycoplasma genitalium: an emerging cause of sexually transmitted disease in women. PLoS Pathogens. 7:e doi: /journal.ppat Oakeshott, P., A. Aghaizu, P. Hay, F. Reid, S. Kerry, H. Atherton, I. Simms, D. Taylor-Robinson, B. Dohn, and J. S. Jensen Is Mycoplasma genitalium in women the new chlamydia? A community-based prospective cohort study. Clin. Infect. Dis. 51: doi: / Hilton, J., S. Azariah, and M. Reid A case-control study of men with non-gonococcal urethritis at Aukland Sexual Health Service: rates of detection of Mycoplasma genitalium. Sex Health. 7: doi: /sh Wikstrøm, A., and J. S. Jensen Mycoplasma genitalium: a common cause of persistent urethritis among men treated with doxycycline. Sex. Transm. Infect. 82: doi: /sti Wroblewski, J. K. H., L. E. Manhart, K. A. Dickey, M. K. Hudspeth, and P. A. Totten Comparison of transcription-mediated amplification and PCR assay results for various genital specimen types for detection of Mycoplasma genitalium. J. Clin. Microbiol. 44: doi: /jcm Gaydos, C., N. E. Maldeis, A. Hardick, J. Hardick, and T. C. Quinn. 2009a. Mycoplasma genitalium as a contributor to the multiple etiologies of cervicitis in women attending sexually transmitted disease clinics. Sex. Transm. Dis. 36: doi: / OLQ.0b013e3181b Gaydos, C., N. E. Maldeis, A. Hardick, J. Hardick, and T. C. Quinn. 2009b. Mycoplasma genitalium compared to chlamydia, gonorrhoea and trichomonas as an aetiological agent of urethritis in men attending STD clinics. Sex. Transm. Infect. 85: doi: /sti: Hancock, E. B., L. E. Manhart, S. J. Nelson, R. Kerani, J. K. H. Wrobleski, and P. A. Totten Comprehensive assessment of sociodemographic and behavioral risk factors for Mycoplasma genitalium infection in women. Sex. Transm. Dis. 37: doi: /olq.0b013e3181e8087e. 11. Huppert, J. S., J. E. Mortensen, J. L. Reed, J. A. Kahn, K. D. Rich, and M. M. Hobbs Mycoplasma genitalium detected by transcription-mediated amplification is associated with Chlamydia trachomatis in adolescent women. Sex Transm Dis. 35: doi: /olq.0b013e31815abac Mobley, V. L., M. M. Hobbs, K. Lau, B. S. Weinbaum, D. K. Getman, and A. C. Seña Mycoplasma genitalium infection in women attending a sexually transmitted infection clinic: diagnostic specimen type, coinfections, and predictors. Sex. Transm. Dis. 39: doi: /olq.0b013e318255de Taylor-Robinson, D., and J. S. Jensen Mycoplasma genitalium: from chrysalis to multicolored butterfly. Clin. Microbiol. Rev. 24: Anagrius, C., B. Loré, and J. S. Jensen Mycoplasma genitalium: prevalence, clinical significance, and transmission. Sex. Transm. Infect. 81: doi: /sti: Lis, R., A. Rowhani-Rahbar, and L. E. Manhart Mycoplasma genitalium infection and female reproductive tract disease: a meta-analysis. Clin. Infect. Dis. 61: doi: /cid/civ Falk, L., H. Fredlund, and J. S. Jensen Signs and symptoms of urethritis and cervicitis among women with or without Mycoplasma genitalium or Chlamydia trachomatis infection. Sex. Transm. Infect. 81: doi: /sti: CDC Sexually transmitted diseases treatment guidelines, Issued 20 August Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 22 AW rev. 002

23 Hologic, Inc Genetic Center Drive San Diego, CA 92121, USA Kundestøtte: Hologic ( ) EMERGO EUROPE Molenstraat BH, Haag Nederland Teknisk støtte: Gå til for å finne mer kontaktinformasjon. Hologic, Aptima, Panther, PreservCyt, ThinPrep og tilknyttede logoer er varemerker og/eller registrerte varemerker for Hologic, Inc. og/eller dattereselskaper i USA og/eller andre land. Alle andre varemerker, registrerte varemerker og produktnavn som kan forekomme i dette pakningsvedlegget tilhører de respektive eierne. KOVA-TROL er et varemerke for Hycor Biomedical, Inc Hologic, Inc. Med enerett. AW rev Aptima Mycoplasma genitalium-analyse 23 AW rev. 002