Aminoglykosidresistens hos Enterobacteriaceae NordicAST workshop 2012 Bjørg Haldorsen K-res Universitetssykehuset Nord-Norge
Antibakteriell virkningsmekanisme Yttermembranen Erstatter Mg 2+ and Ca 2+ som kryssbinder lipopolysakkarid molekylene i yttermembranen økt permeabilitet Proteinsyntesen Binder til ribosomet under translasjon av mrna feil i avlesning av mrna feil i proteinsyntesen
Resistensmekanismer 2. 2. 1. 3. S. Garneau-Tsodikova et al. ChemBioChem 2010, 11, 880 902
Aminoglykosidmodifiserende enzymer (AME) 3 AME familier AAC aminoglykosid N- acetyltransferaser APH aminoglykosid O- fosfotransferaser ANT aminoglykosid O- nukleotidtransferaser Assosiert med mobile genetiske elementer (plasmider,transposoner) Ramirez et al. 2010. Drug. Resist. Updat. 13:151-171.
16S rrna metylaser 7 ulike 16S rrna metylaser er beskrevet rmta, rmtb, rmtc, rmtd, rmte, arma og npma Høygradig og bredspektret aminoglykosidresistens Assosiert med mobile genetiske elementer (plasmider,transposoner) Doi et al. 2007. Clin. Infect. Dis. 45:88-94.
% Epidemiologi E. coli Gentamicin*-resistens E. coli blod 7 6 5 4 3 2 Norge Sverige Danmark 1 0 2008 2009 2010 2011 År Kilde: NORM, SWEDRES, DANMAP Kilde: EARS-NET, 2010 E. coli
% Epidemiologi K. pneumoniae Gentamicin*-resistens Klebsiella pneumoniae blod 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 2008 2009 2010 2011 År Norge Sverige Danmark Kilde: NORM, SWEDRES, DANMAP Kilde: EARS-NET, 2010 K. pneumoniae
Materiale 1. NORM 2009 (n = 137) E. coli (n = 105) Blodkulturisolater n= 61 Urinveisisolater n= 44 Klebsiella spp. (n = 32) Blodkulturisolater n= 17 Urinveisisolater n= 15 med nedsatt følsomhet for gentamicin og/eller tobramycin
Materiale 2. NORM 2007-08 (n = 68) ESBL A positive E. coli (blodkulturisolater n = 32 og urinveisisolater n = 28) CTX-M gr. 1 (n = 30) CTX-M gr. 9 (n = 26) SHV (n = 4) Klebsiella spp. (blodkulturisolater n = 8) CTX-M gr. 1 (n = 3) SHV (n = 5)
Fenotypiske metoder Etest Aminoglykosid-Etester: amikacin, gentamicin, tobramycin, kanamycin, netilmicin og streptomycin EUCAST diskdiffusjon Aminoglykosid-lapper: amikacin, gentamicin, tobramycin, kanamycin, netilmicin, streptomycin, arbekacin og isepamicin VITEK2 Identifisering: IDGN-kort Resistens: AST029 gentamicin og tobramycin betalaktamer, kinoloner, trimetoprim, trim-sulfa
% isolates with reduced susceptibility Resistensdata Materiale 1 5 4 3 E. coli (blood) E. coli (urine) Klebsiella spp. (blood) Klebsiella spp. (urine) 2 1 0 Tobramycin Gentamicin Amikacin
Co-resistens til andre antibiotikagrupper: Materiale 1 (NORM 2009) 34% ESBL A / ESBL M-C profil 54% resistent mot ciprofloxacin 80% resistent mot trim/sulfa 20% ESBL A / ESBL M-C profil + ciprofloxacin og trim/sulfa resistens
% isolates with reduced susceptibility Resistensdata Materiale 2 60 50 E. coli Klebsiella spp. 40 30 20 10 0 Tobramycin Gentamicin Amikacin
% Bredspektret aminoglykosidresistens Bredspektret aminoglykosidresistens 60 50 40 30 20 10 0 Susceptible G T A G + T G + A T+ A G + T + A
PCR-positive isolates (%) PCR-positive isolates (%) Forekomst av aminoglykosidmodifiserende enzymer 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 AAC(6')-Ib AAC(3)-II ANT(2")-Ia AAC(6')-Ib + AAC(3)-II E. coli NORM 2009 E. coli NORM ESBL 2007-08 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 AAC(6')-Ib AAC(3)-II ANT(2")-Ia AAC(6')-Ib + AAC(3)-II Klebsiella spp. NORM 2009 Klebsiella spp. NORM ESBL 2007-08 E. coli Klebsiella spp.
Norsk suksess-klon?
Metodesammenligning Klassifisering av feil: Meget alvorlig feil (R S) Alvorlig feil (S R) Mindre feil (S I, I R) Ved funn av meget alvorlige feil, ble metodene repetert
No of isolates Gentamicin Enterobacteriaceae Etest vs diskdiffusjon Etest vs disk diffusion Gentamicin NORM 2009 S < 2 R > 4 Mindre feil: 3 Antall av Gentamicin 40 35 30 25 20 15 10 5 0 6 7 8 9 10 11 13 15 16 17 19 20 21 22 23 24 25 26 mm-zones R < 14 S > 17 Disk Genta Etest Genta 768 256 192 128 96 64 48 32 24 16 8 6 2 1,5 1 0,75 0,5 0,38 0,25 0,064
No of isolates Tobramycin Enterobacteriaceae Etest vs diskdiffusjon Etest vs disk-diffusion Tobramycin NORM 2009 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 S < 2 R > 4 384 96 64 48 32 24 16 12 8 6 4 3 1,5 1 0,75 0,5 0,38 0,094 0 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 20 21 22 23 25 27 R < 13 R < 12 mm S 15 S 16 1 (1) 24 Meget alvorlig feil: 5 Mindre feil: 46
No of isolates Amikacin Enterobacteriaceae Etest vs diskdiffusjon Etest vs disk-diffusion Amikacin ESBL NORM 2007-08 20 Antall av Amikacin 18 16 14 12 10 8 6 4 S < 8 R > 16 Etest Amikacin 32 16 12 8 6 4 3 2 1,5 1 2 0 13 17 18 19 20 21 22 23 24 25 R < 13 S > 16 mm-zones Disk Amikacin Mindre feil: 5
Oppsummering Forekomsten av aminoglykosidresistente E. coli og Klebsiella spp. i Norge er lav, men har økt de siste årene Koplet resistens 34% av Materiale 1 (AMG R) var ESBL positive 60% av ESBLA-positive AMG R aac(3)-ii er dominerende AME Ingen dominerende AMG-R klon i Norge Bør brytningspunktene for disk-diffusjon for tobramycin i Enterobacteriaceae justeres ytterligere?
TAKK til Ørjan Samuelsen Bettina Aasnæs Arnfinn Sundsjord Gunnar Skov Simonsen Erika Matuchek Alle norske mikrobiologiske lab
- Veneriske sykdommer - Virologi i tiden - Arktisk mikrobiologi - Samhandling over yrkesgrensene - Resistens & smittevern - Helseundersøkelser i nord 20. 21. september www.unn.no/hostkonferansen2012