Nøyaktighet og presisjon Praktiske råd AFA-kurs november 2013 Anita Løvås Brekken Stavanger
Hvorfor kvalitetskontroll? Ønsker god nøyaktighet og presisjon i den daglige rutinen Ønsker å kunne påvise viktige resistensmekanismer Målet er god kvalitet på svarene vi sender ut til rekvirentene 2
Norsk akkreditering NS-EN ISO 15189:2007 5.6.1:«Laboratoriet skal utforme interne kvalitetskontrollsystemer som bekrefter at den ønskede kvaliteten på resultatene er oppnådd» 5.6.2: «Laboratoriet skal bestemme usikkerheten ved resultater når dette er relevant og mulig» NA 48B 3.5.2 «Systemet for intern kvalitetskontroll utformes av laboratoriet selv».»viktig at arbeidet inngår som en integrert del av analysevirksomheten, det vil si en del av daglig rutine»»laboratoriet skal etablere hensiktsmessige kontrollrutiner som fører til kontinuerlig forbedring av laboratoriets tjenester.» 3
EUCAST EUCAST "Manual" kvalitetskontroll» Use specified control strains». EUCAST "Slide Show" kvalitetskontroll Use rou2ne quality control strains to assess general performance EUCAST "Reading Guide" Zone edges should be read at the point of complete inhibi2on 4
NordicAST NordicAST kvalitetskontroll 5
AFA «KK-dokumentet» versjon 3.2 oktober 2012 6
Hvem skal utføre kontrollen? Må omfatte alle trinn i resistensbestemmelsen: medieproduksjon utførelse av selve resistensbestemmelsen tolking av resultater 7
God kvalitetskontroll er avhengig av: God og systematisk opplæring av alle på avdelingen Deltakelse i ekstern kvalitetskontroll Samarbeid med andre mikrobiologiske fagmiljøer 8
Kontroll av nøyaktighet og presisjon Nøyaktighet: Evnen til å treffe den sanne verdien Presisjon: Evnen til å få samme verdi ved ulike oppsett 9
Regelmessige kontroller Bruker referansestammer Sjekker resultater opp mot referanseverdier Bra resultater tyder på liten sjanse for avvik i både reagenser, utførelse og tolkning Kvalitetskontrollene skal behandles på samme måte som rutineprøvene 10
Regelmessige kontroller forts. Bruker stammer anbefalt av EUCAST E.coli ATCC 25922 P.aeruginosa ATCC 27853 S.aureus ATCC 29213 E.faecalis ATCC 29212 S.pneumoniae ATCC 49619 H.influenzae CCUG 23946 C.jejuni ATCC 33560 11
Regelmessige kontroller forts. Må ha skjema /tabell til registrering Resultatene i form av soner/mic-verdier føres inn i tabellen/skjemaet internt på lab Kan overføres til dataprogram egnet for grafisk fremstilling og bearbeidelse 12
Eksempel på skjema til bruk i den daglige rutinen (Stavanger) E.coli : ATCC 25922 Satt opp Sett opp A-res Antibiotikum Kontrollgrenser avlest Ampicillin AM-10 16-22 Trimetoprim TMP-5 21-28 Nitrofurantoin FM-100 17-23 Trim-sulfa SXT-25 23-29 Ciprofloxacin CIP-5 30-40 13
Dersom gjennomsnitt av målingene ligger innenfor +/- 3 av gjennomsnitt av sonegrensene får feltet verdi OK, ellers verdi NB 14 Varslingsreglene for enkeltmålinger slår inn når: Avvik fra gjennomsnittet overskrider +/- 2 sd, NB og avvik fra gjennomsnittet overskrider +/- 3 sd, AV
Gjennomsnittet og SD(angir spredningen omkring gjennomsnittet) sier noe om nøyaktighet; evnen til å treffe nøyaktig verdi NB/AV sier noe om presisjon; evnen til å treffe samme verdi ved ulike oppsett 15
Grafisk fremstilling av data Stavanger/P.Jenum 45 40 Escherichia coli ATCC 25922 Ampicillin Trimetoprim Nitrofurantoin Trim-sulfa Ciprofloxacin 35 30 Sone - mm 25 20 15 10 5 Kjøring nr. i invers rekkefølge 16
Skjema som kan brukes Arbeidsskjema for kvalitetskontroll. Kryss av for målt sonediameter for hver dag. S. aureus Stamme: ATCC 29213 Erytromycin Antibiotikum: 15 µg Måned/År: Okt 2013 m m 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 28 30 31 19 20 21 22 23 X 24 X X 25 X X X 26 X X X X X X 27 X X X X X X X X X X X X 28 X X 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 17
Regelmessige kontroller forts. En variasjon på +/-2,5 SD er akseptabel Får avdekket tilfeldige avvik eller systematiske feil Kan bruke dataene til å oppdage endringer over tid Kontrollene bør gjøres daglig av de som setter opp resistensbestemmelser Resultatene bør leses av før pasientprøvene 18
Harmonisering Soner og MIC-verdier bør leses av mest mulig likt Kan testes ved at alle på lab leser av de samme skålene Kan velge ut antibiotika/mikrobe-kombinasjoner som man vet kan være vanskelige Resultat gjennomgås etterpå Kontinuerlig opplæring Avvik/feilkilder diskuteres 19
Avviksbehandling Noen ganger vil sonediameter/mic-verdi avvike fra det som er oppgitt for aktuelle referansestamme Innlysende feil for eksempel : feil stamme ---- for tykt/tynt inokulat forurensing ---- feil inkubering feil lapp/mic --- feil agartykkelse lapp «på skrå»=>test om igjen Dersom feilen ikke er åpenbar må man gå grundigere til verks for å finne årsaken Se feilsøkingsskjema bakerst i «KK-dokumentet» til AFA 20
Hvor ofte kontroll? AFA anbefaler daglig kontroll for lapper Kan da akseptere to avvik for et antibiotikum før man starter stor feilsøking Dersom man velger ukentlig kontroll aksepteres ikke avvik Ukentlig kontroll gjør at en feil kan vedvare over lenger tid før tiltak settes i verk NordicAST anbefaler å teste gradienttester når «ny lot åpnes» og senere en gang pr måned 21
Antibiotikadepoter Forutsetter at lappene og stripsene er kvalitetssikret av leverandør Ved avvik må man sjekke at man har rett stamme, rett lapp/strips og har brukt anbefalt metode Ved mistanke om feil med lapper/strips, sjekk om igjen. Sjekk også lapper/strips med ulike produksjonsnummer. Konferer evt med leverandør 22
Utfordringer: Lage et opplegg for kvalitetskontroll som lar seg lett gjennomføre i praksis Må ha nok kontroll til at eventuelle feil oppdages raskt nok Feil/avvik må tas tak i fortløpende slik at det ikke går utover pasientprøvene 23
Nyttige lenker AFA metoder EUCAST resistensbestemmelse NordicAST metoder Norsk Akkreditering 24
Takk for oppmerksomheten! 25
Demonstrasjoner og øvelser 1A-D + 2 Læringsmål: Få erfaring med hvordan variasjoner i ulike faktorer kan påvirke resultatet av resistensbestemmelse med agardiffusjon Tema 1A ph- demonstrasjon Tema 1B agardybde- demonstrasjon Tema 1 C inokulat-tetthet- øvelse Tema 1 D medium, depot og inkubasjonsatmosfære demonstrasjon Tema 2 nøyaktighet og presisjon i utførelse av resistensbestemmelse med agardiffusjon- øvelse 26
Demonstrasjoner og øvelser bygger på metodedokumentet kortversjon av metoden utdelt på ark i forrige foredrag: Kvalitetskontroll av resistensbestemmelse» v. Olav B Natås ble det informert om avlesning 27