ASSISTERT BEFRUKTNING

Transkript

1 ASSISTERT BEFRUKTNING(ART) ASSISTERT BEFRUKTNING Shabana Sayed Senior Embryolog &IVF lab ansvarlig Klinikk Hausken Assisted reproductive Technologies/techniques AIH/IUI(Intra uterine insemination/artificial insemination with husband sperm) IVF( In vitro fertilization) ICSI(Intra cytoplasmic sperm injection) TESA/TESE/PESA/MicroTESE/MESA(Sperm retrieval techniques) Kryopreservering av oocytter, zygotter, embryo, ovarialvev, sperm, testikkelvev PGD(preimplatantion genetic diagnosis) LOV OM HUMANMEDISINSK BRUK AV BIOTEKNOLOGI HISTORIE OM ART Bioteknologiloven(1987) LOV nr European Tissue and cell Directive (Directive 2004/23/EC)

2 ART-MILEPÆLER Først test tube baby eller prøverørsbarn (1978)- Louise Brown Første fødsel etter frysing/tining av embryo(1983) Første norske prøverørsbarn (1984) Surrogati barn (1985) Første barn etter ICSI (1992) Første donor barn (donorsædcelle og donoregg)(1995) Første norske ICSI barn(1996) Første fødsel etter frysing/tining av egg(1997) Første barn født etter ovarialvev frysing(2004) OVULASJON FERTILISERING - IMPLANTASJON Nobel pris i medisin tildelt Sir Robert Edward(2010) 6 Intrauterin inseminasjon (AIH/IUI/AID) IVF hovedprinsipper Uforklarlig infertilitet Endometriose-assosiert infertilitet Kvinnen må ha normale tuber Mannen må ha normal sædprøve Naturlig syklus eller behandling med gonadotropinhormoner (klomifen (Pergotime) &/eller FSH for å stimulere modning av 1-2 follikler Hormonstimulering Kontrollert ovarial hyperstimulering med hormoner (COH) Ultralyd monitorering Av follikkelutviklingen & ovulasjonsinduksjon Egguthenting & Sædprøvepreparering Monitorering av follikkelutviklingen med ultralyd: 1 moden follikkel >1 follikkel NB!! Risiko for flerlinger IVF eller ICSI Embryo dyrking Embryo transfer Ovulasjonsinduksjon med hcg Intrauterin inseminasjon på ovulasjonsdagen med preparert sæd Avbryte forsøket? IVF? Evnt. Frysing av overtallige embryo (AIH el. AID) Van Voorhis BJ. N Engl J Med 2007;356:

3 KONTROLLERT OVARIELL HYPERSTIMULERING(COH) OG MONITORERING MED UL Hensikt: Øke kohort av modne oocytter Kontrollere ovarial syklusen og forhindre for tidlig modning av oocyttene. Nedregulering (2-3 uker) Menstruasjon FSH Dag 1 2 FOLLIKKELUTVIKLING OG OOCYTT MODENHET Medikamentell behandling: GnRH analog Agonist el. antagonist Hensikt: neutralisere effekt av endogen FSH og LH Gonadotropin hormoner FSH hcg hcg OPU Transfer av embryo OPU (OOCYTE PICKUP) Follikkelvæske Modent oocytt ø~100 m Metafase II oocytt Zona pellucida (ZP) Perivitelline området Pollegemet Cellemembran Cytoplasma

4 OOCYTT MODENHET SÆDPREPARERING A. Germinal vesicle(gv) B. Metaphase I(MI) C. Metaphase II(MII) Post mature oocytes Atretic oocytes Sædanalyse Makler counting chamber Computer assisted sperm analysis(casa) SPERM COLLECTION METHODS SÆD PREPARERING TIL ART ejakulasjon Retrograd ejakulasjon - fra urin elektroejakulasjon Kirurgisk metoder Azoospermia- obstructive og non obstructive PESA (percutaneous epididymal sperm aspiration) MESA(microsurgical epididymal sperm aspiration) TESA (testicular sperm aspiration) TESE (testicular sperm extraction) Micro TESE (testicular microdissection)- focal spermatogenesis points. Donor sæd

5 Inseminasjon av egget med sædceller: IVF (in vitro fertilisering) Ca sædceller tilsettes hvert egg + Fertilisering av egget Sædcellen svømmer gjennom cumulus Sædcellen binder seg til og går gjennom ZP Sædcellen binder seg til eggets cellemembran og gjennomgår akrosom reaksjonen Sædcellen absorberes inn i egget Egget aktiveres andre pollegeme frigjøres Cortical granules frigjøres / Zona reaksjon Pronuklei dannes oocytt Zygote Inseminasjon av oocytten ved ICSI (Intra Cytoplasmatic Sperm Injection) den mannlige partneren har svært lav sædkvalitet dårlig morfologi (unormalt formet) og / eller dårlig motilitet (dårlige svømmere) ved tidligere forsøk på in vitro fertilisering (IVF) var det enten feil for befruktning eller en uventet lav befruktningsresultat den mannlige partneren har hatt vasektomi og sperm har blitt samlet inn fra testiklene eller bitestikkel (sperm reservoar) andre situasjoner hvor sædkvalitet er null og donor inseminasjon ikke er ønsket den mannlige partneren ikke ejakulerer ikke noe sperm men sperm har blitt samlet fra testiklene den mannlige partner har hatt problemer med åfåereksjon og utløsningen. Dette inkluderer menn med ryggmargsskader, diabetes og andre lidelser. ICSI VIDEO

6 HIGH TECH IVF UNITS PREIMPLANTASJONSUTVIKLINGEN BEFRUKTET EGG (ZYGOTE) timer etter inseminering Normal befruktning med 2PN(pronuclei) Unormale befruktning med 1PN eller > 2PN ( 3PN, 4PN.) Preimplantasjonsutviklingen Syngamy: Membranen til pronuklei desintegrerer noen timer etter befruktningen slik at det genetiske materialet fra oocytt & sædcelle blandes før den første celledelingen. Første deling: Proteinsyntese og metabolisme kontrolleres av eggets genetisk informasjon (frem til 4-8-celle stadiet) og celledelingen i embryoet starter.

7 CLEAVAGE STAGE EMBRYO MORPHOKINETIC VIDEO Cell number Symmetry of the cells Type and percentage of fragmentation Presence or absence of multinucleation(mnb) Type of multinucleation Degree of compaction Precise timings of cell divisions: the kinetics of divisions Abnormal cleavages- direct and irregular cleavages Embryo rolling Plane of embryo division MNB VIDEO EMBRYOTRANSFER Embryotransfer av 1 eller 2 embryo kan utføres fra dag1-5 etter egguthenting Valg av embryo baseres på embryoets : morfologi & morfokinetics Embryo (-ene) transfereres til uterus. DET dobbelt embryo transfer(flerling-risiko) eset elektive single embryo transfer Progesteron (lutealfasestøtte) *Lawlor & Nelson vol 379, 2012, 521 *Romundstad, vol 379, 2012, 497-8

8 Frysing og lagring av overtallige embryo Nedkjøling (0,3 o C/min) eller slow freezing Vitrifisering eller rapid freezing Lagring i flytende nitrogen (- 196 o C) 5 år (Bioteknologiloven) Tining Frozen Embryotransfer (FER) Klinikk Hausken & Oslo universitetssykehus Nedfrysing kan brukes til sperm, zygote, cleavage stage embryoer, blastocyst samt testikkel og eggstokk vev. Det gir muligheten til å bruke overtallige embryoene i fremtidige IVF eller ICSI sykluser Dersom behandlingen må avbrytes etter egguttak(for eksempel OHSS(ovarian hyperstimulering syndrome) å donere ubrukte embryo for behandling av andre kvinner eller til forskning.(ikke tillat i Norge) medisinsk behandling, for eksempel for kreft, som kan påvirke fruktbarheten, (embryo frysing er for tiden den mest effektive måten for kvinner å bevare sin fruktbarhet). THIRD PARTY REPRODUCTION Før en vasektomi har en lav sperm count eller produserer sperm som er forverret i kvalitet over tid har problemer med å produsere en prøve ved fertilitetsbehandling sperm kommer til å bli brukt til donasjon, i hvilket tilfelle frysing gjør at sædcellene å være i karantene i seks måneder. har en medisinsk tilstand som kan føre til infertilitet for eksempel, Klinefelter syndrom medisinsk behandling som kan påvirke fruktbarheten, for eksempel, noen former for kreftbehandling. Spermdonasjon -tillat Eggdonasjon- ikke tillat Embryodonasjon- ikke tillat Surrogati- ikke tillat

9 DE NYE FAMILIENE Faktorer som påvirker resultatet av behandling med ART Kvinnens alder er DEN viktigste faktoren i kvinnelig infertilitet Varigheten på infertiliteten Tidligere fødsler Infertilitetsdiagnose Antall tidligere IVF-behandlinger Antall/kvalitet av/på aspirerte oocytter Antall/kvalitet av/på de overførte embryoer Endometrial receptivity 50% 30% Effekten av kvinnens alder på fødselsraten per Embryo Transfer. 50% 55% 70% 86% ESHRE Campus symposium Greece, 2012 (Maria Jose Santos, IVI,Valencia) HFEA statistics

10 OOCYTT ANEUPLOIDIER SOM FUNKSJON AV KVINNENS ALDER Andelen barn som er født etter assistert befruktning Kilde: Medisinsk fødselsregister. Resultater etter IVF-behandlingen Graviditetsrate Take home baby rate flerlingrate (løses ved eset) risiko for: Lav fødselsvekt For tidlig fødsel SGA (Small for gestational age) Medfødte misdannelser (Davies et al., NEJM, April 2012) epigenetikk Lik utvikling for IVF- og barn født etter naturlig befruktning Van VoorhisBJ. N Endl J Med 2007;356: OPPSUMMERING regulering av ART gi informasjon til paret og få deres informerte samtykke journalføring og dokumentstyring Strategier for å redusere flere fødsler og risiko forbundet med det vitne kliniske og lab prosedyrer for å unngå feil konfidensialitet og respektere personvern til paret en effektiv QMS, oppfølging, evaluering og forbedring velferd for barnet